急性心肌梗死患者miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表達(dá)及臨床意義

蔣亞萍 葉麗君 喻長法

急性心肌梗死(acute myocardial infarction,AMI)指在冠狀動脈病變的基礎(chǔ)上，患者發(fā)生冠狀動脈血液供應(yīng)急劇減少或中斷，使相應(yīng)的心肌嚴(yán)重、持久的缺血壞死，可導(dǎo)致心律失常、休克或心力衰竭等嚴(yán)重并發(fā)癥。隨著全球人口老齡化進(jìn)程的加劇，AMI的發(fā)生率及病死率呈逐年增長的趨勢，嚴(yán)重威脅著人們的生命安全，降低患者生活質(zhì)量[1]。及時診斷和治療并恢復(fù)血液供應(yīng)是降低AMI病死率的關(guān)鍵。微小RNA(miRNA)是由約18～25個核苷酸組成的內(nèi)源性非編碼RNA，它與靶基因mRNA特異性結(jié)合，然后影響靶蛋白的表達(dá)水平，在蛋白質(zhì)參與信號通路中發(fā)揮作用[2]。近年來隨著對miRNA研究的深入，有研究認(rèn)為微小核糖核酸RNA-208a(miR-208a)在AMI患者血液中表達(dá)異常，對AMI的早期診斷有一定價(jià)值[3]。本研究旨在探討miR-208a、超敏肌鈣蛋白I(hs-cTnI)和單核細(xì)胞趨化蛋白-1(MCP-1)在AMI患者中的表達(dá)變化來指導(dǎo)AMI的診斷和療效觀察。

對象與方法

1.研究對象:選取2017年3月～2019年2月在臺州市第一人民醫(yī)院就診的96例經(jīng)皮冠狀動脈介入(PCI)治療的AMI患者作為AMI組。納入標(biāo)準(zhǔn)：①胸痛時間≥30min；②心電圖檢查可見相鄰兩個及以上導(dǎo)聯(lián)ST段抬高；③經(jīng)冠脈造影結(jié)果證實(shí)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并嚴(yán)重感染；②自身免疫性疾病、血液系統(tǒng)疾病、惡性腫瘤等；③肝腎功能不全。AMI組中男性49例，女性47例，患者年齡 48～84歲，平均年齡為65.0±15.5歲。另選同期于筆者醫(yī)院體檢的健康體檢者45例設(shè)為對照組，其中男性24 例，女性21例，年齡47～82 歲，平均年齡為64.5±14.5歲。兩組研究對象性別、年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

2.研究方法：測量患者靜息狀態(tài)下血壓、身高、體重，計(jì)算體重指數(shù)(BMI)。抽取空腹8h后靜脈血，用日立Labospect 008AS全自動生化儀檢測血糖、血脂；用貝克曼DXI 800全自動化學(xué)免疫分析儀測hs-cTnI；用ELISA法檢測MCP-1(上海西唐生物科技有限公司)；miR-208a檢測用7500 型實(shí)時熒光定量 PCR儀 (美國ABI公司)，RNA提取液(美國Qiagen公司)提取總miRNA，用反轉(zhuǎn)錄試劑盒(美國Qiagen公司)反轉(zhuǎn)錄成cDNA，引物及PCR擴(kuò)增試劑(日本 TaKaRa 公司)，以 2-ΔΔCt法計(jì)算各組間 miR-208a 的相對表達(dá)量，反應(yīng)條件為 95 ℃預(yù)變性 10min，95℃變性15s，退火60℃ 15s，40個循環(huán)。miR-208a、hs-cTnI和MCP-1的變化與可能合并的危險(xiǎn)因素的關(guān)系按中位數(shù)分為高表達(dá)組和低表達(dá)組。

結(jié) 果

1.兩組血清miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表達(dá)：AMI組患者miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表達(dá)水平均顯著高于對照組(P<0.05)，詳見表1。

表1 兩組血清miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表達(dá)水平比較

2.AMI組患者PCI治療前、后miR-208a、hs-cTnI、MCP-1變化：經(jīng)PCI有效治療后，AMI組患者miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表達(dá)水平顯著低于治療前(P<0.05)，詳見表2。

表2 AMI組患者PCI治療前、后miR-208a、hs-cTnI、MCP-1變化比較

3.miR-208a、hs-cTnI和MCP-1的變化與可能合并的危險(xiǎn)因素的關(guān)系：miR-208a的表達(dá)水平與高血壓、高血脂有關(guān)，hs-cTnI的表達(dá)水平與糖尿病、高血壓有關(guān)，MCP-1的表達(dá)水平與糖尿病有關(guān)(P<0.05)，詳見表3。

表3 miR-208a、hs-cTnI和MCP-1的變化與可能合并的危險(xiǎn)因素的關(guān)系

4.miR-208a、hs-cTnI和MCP-1對AMI的診斷效能評價(jià)：miR-208a、hs-cTnI和MCP-1對AMI的曲線下面積(AUC)分別為0.912、0.904和0.831，均具有較高的診斷效能(圖1)。

圖1 miR-208a、hs-cTnI和MCP-1對AMI的診斷效能

討 論

AMI是急性冠狀動脈綜合征中最嚴(yán)重疾病，主要臨床表現(xiàn)為持續(xù)性心前區(qū)壓榨性疼痛。急診科每年因胸痛就診的患者約占就診人數(shù)的5%～10%，漏診的可疑AMI患者比診斷為AMl入院的患者30天死亡的風(fēng)險(xiǎn)高兩倍[4]。歐美等國家是 AMI高發(fā)地區(qū)，中國近年來發(fā)生率呈現(xiàn)上升趨勢。有研究發(fā)現(xiàn)，血管阻塞后約30min心肌開始壞死，6～8h 可完全壞死，越早恢復(fù)血液供應(yīng)，存活的心肌就越多[5,6]。因此，AMI的早期診斷顯得極為重要。

miR-208a在心肌細(xì)胞中特異性表達(dá)，其在心臟發(fā)生、心臟功能和病理學(xué)中起著重要作用。miR-208a位于重鏈肌球蛋白基因的內(nèi)含子中，其功能為調(diào)節(jié)收縮蛋白的表達(dá)，miR-208a的表達(dá)上調(diào)，導(dǎo)致心律失常、加速細(xì)胞凋亡、纖維化、肥大和組織重塑[7]。TnI是心肌組織中特有的肌鈣蛋白，hs-cTnI并不是一類新的心肌生物學(xué)標(biāo)志物，因其檢測下限遠(yuǎn)低于傳統(tǒng)的肌鈣蛋白而得名[8]。MCP-1是由76個氨基酸殘基組成的堿性蛋白質(zhì)，對單核-吞噬細(xì)胞可起到特異性的趨化激活作用，導(dǎo)致炎性反應(yīng)的發(fā)生和發(fā)展。MCP-1可促進(jìn)動脈粥樣硬化斑塊的不穩(wěn)定和破裂，在AMI發(fā)生后心室重塑起著重要的作用[9]。本研究結(jié)果顯示，AMI組miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表達(dá)水平顯著高于對照組；經(jīng)PCI有效治療后，AMI組患者miR-208a、hs-cTnI和MCP-1表達(dá)水平顯著降低(P<0.05)；miR-208a的表達(dá)水平與高血壓、高血脂有關(guān)，hs-cTnI的表達(dá)水平與糖尿病、高血壓有關(guān)，MCP-1的表達(dá)水平與糖尿病有關(guān)(P<0.05)；miR-208a、hs-cTnI和MCP-1對AMI的曲線下面積(AUC)分別為0.912、0.904和0.831，均具有較高的診斷效能，與研究報(bào)道一致[10,11]。

AMI患者miR-208a在胸痛發(fā)作1h就開始明顯升高，3h達(dá)到高峰，與CK-MB和cTnI呈正相關(guān)[12]。AMI組miR-208a表達(dá)量顯著升高，與Gensini 評分顯著正相關(guān)，可作為早期診斷AMI的標(biāo)志物，并有評價(jià)冠狀動脈粥樣硬化嚴(yán)重程度和進(jìn)行危險(xiǎn)分層的潛力[13]。miR-208a作為早期診斷ST段抬高心肌梗死和心肌梗死疾病監(jiān)測的生物學(xué)標(biāo)志物，不僅可用于AMI的診斷，還能用于梗死后的預(yù)后[14]。國外有研究報(bào)道，對于hs-cTnI 25%的急性冠狀動脈綜合征，由于其在低濃度下的高準(zhǔn)確度，對于臨床應(yīng)用具有重要的價(jià)值。AMI患者M(jìn)CP-1表達(dá)顯著上調(diào)，MCP-1加強(qiáng)了中性粒細(xì)胞和單核-吞噬細(xì)胞的趨化、黏附和吞噬功能，加速了AMI的發(fā)生和發(fā)展[17，18]。血清 MCP-1表達(dá)水平與AMI患者PCI術(shù)后再狹窄有密切關(guān)系，監(jiān)測其變化可在早期更加有效地預(yù)防AMI患者PCI術(shù)后發(fā)生再狹窄的風(fēng)險(xiǎn)[19]。

綜上所述，miR-208a、hs-cTnI和MCP-1在AMI組患者早期顯著升高，對AMI有較高的診斷效能，其動態(tài)變化對AMI的診斷有重要的臨床意義。