(蘭州資源環(huán)境職業(yè)技術(shù)學(xué)院,甘肅 蘭州 730021)
對(duì)于生態(tài)系統(tǒng)而言,土壤微生物作為主要構(gòu)成部分,其群落多樣性成為生態(tài)特征研究的主要標(biāo)準(zhǔn),也成為近幾年生態(tài)研究中的突出問題。有相關(guān)研究發(fā)現(xiàn),在干旱地區(qū),植物群落類型也會(huì)對(duì)土壤微生物群落的結(jié)構(gòu)、功能等產(chǎn)生影響。同時(shí),土壤微生物群落結(jié)構(gòu)、功能差異也會(huì)對(duì)植物凋謝物的分解造成影響,包括物質(zhì)能量的轉(zhuǎn)換方式、碳循環(huán)、氮循環(huán)等。在干旱區(qū),鹽生植物所處的鹽堿環(huán)境具有生物學(xué)意義,這種低滲透性高、鹽堿含量高的地區(qū),成為干旱地區(qū)影響傳統(tǒng)農(nóng)業(yè)發(fā)展的關(guān)鍵因素,不僅影響農(nóng)作物生長(zhǎng),還會(huì)對(duì)建筑產(chǎn)生溶陷性、鹽漲性、腐蝕性。因此,對(duì)干旱區(qū)典型鹽生植物群落下的土壤微生物群落特征進(jìn)行研究,了解土壤環(huán)境情況,探究鹽生之物與土壤微生物群落之間的關(guān)系具有重要的科學(xué)價(jià)值,能夠?yàn)楦珊蝶}漬化土壤生物修復(fù)、保護(hù)等提供技術(shù)支撐。
研究區(qū)域位于甘肅省河西走廊干旱區(qū)域,處于青藏高原、黃土高原、內(nèi)蒙古高原三大高原交匯地帶,含有黑河、石羊河、疏勒河三大水系,形成了具有特殊性的地形地貌、氣候類型。在該區(qū)域,熱月為7 月,最高溫度為24℃;冷月為1 月,最低溫度為-11.8℃;5~9 月中旬為雨季,年降雨量低于150mm。
選擇甘肅河西走廊鹽堿荒地作為本研究的地點(diǎn),結(jié)合研究點(diǎn)植物群落中存在的不同,綜合結(jié)構(gòu)、物種,最終確定選擇具有一致性的梭梭、白刺、絹蒿、花花柴、檉柳、霧冰藜等典型植物群落。于2019 年4 月25 日,采用梭梭群落典型樣地取樣,選取3 個(gè)樣地,每個(gè)樣地有3 個(gè)樣方,面積為20m×20m,采用“S”型土鉆方法,挖取直徑為7.5mm 的土壤,并裝入密封口袋中,帶回研究室進(jìn)行研究。經(jīng)過2mm 篩選之后,將土樣分為2 份,一份放在4℃環(huán)境環(huán)境中,分析其中微生物群落功能多樣性;一份實(shí)施風(fēng)干操作,分析土壤理化性質(zhì)。其中,理化性質(zhì)包括含水率、容重、pH 值、電導(dǎo)率、有機(jī)質(zhì)、全氮、堿解氮、速效磷、速效鉀等。
2.2.1 土壤理化性質(zhì)試驗(yàn)。采用電極電位法檢測(cè)土壤pH 值,土壤中含有的有機(jī)質(zhì)、全氮、堿解氮等分別應(yīng)用重鉻酸鉀氧化外加熱法、半微量開式法、擴(kuò)散吸收法進(jìn)行檢測(cè);速效磷用碳酸氫鈉提取——鉬銻抗顯色——紫外分光光度法進(jìn)行檢測(cè);速效鉀用NH4Ac 浸提——原子吸收法進(jìn)行檢測(cè)。
2.2.2 土壤微生物功能多樣性檢測(cè)。土壤微生物碳源多樣性應(yīng)用Biolog 的生態(tài)測(cè)試板進(jìn)行檢測(cè),選擇與10g烘干土壤重量相同的新鮮土樣,添加到加入100mL 的無菌緩沖液三角瓶中。在瓶口處塞入無菌棉花,在轉(zhuǎn)速為200r/min 機(jī)器下進(jìn)行30min 震蕩,然后根據(jù)比例為1∶100 稀釋液進(jìn)行操作,在Biolog 板上進(jìn)行接種,接種量為150μL。然后將該板放在黑暗環(huán)境下28℃恒溫培養(yǎng),每間隔12h,該板就會(huì)自動(dòng)進(jìn)行讀數(shù)。
借助碳源利用能夠分析土壤中微生物群落功能的多樣性,平均顏色變化率反應(yīng)微生物總體活性,計(jì)算方式如下:
AWCD=∑(C-R)/n
在上述計(jì)算方式中,C 代表了每個(gè)孔底中檢測(cè)物吸收的光密度值,R 代表了每個(gè)對(duì)照孔中檢測(cè)物吸收的光密度值,單位均為OD。當(dāng)出現(xiàn)C-R 為0 時(shí),表明對(duì)應(yīng)孔中檢測(cè)物沒有利用碳源。土壤微生物豐富度(S)主要是被利用碳源總數(shù)目,光密度0.25 是顏色變化的最低值。
豐富度應(yīng)用Margalef 指數(shù)(M)
多樣性指數(shù)應(yīng)用Shannon-Weinner 指數(shù)(H)
優(yōu)勢(shì)度指數(shù)用Simpson 指數(shù)(D)
均勻度指數(shù)用Pielou 指數(shù)(E)
在上述式子中,其中主要是第i 個(gè)孔底與對(duì)照孔被檢測(cè)物吸收的光密度值的差/微平板所有檢測(cè)物吸收光密度值的總差,也就是Pi=(C-R)/∑(C-R);從多樣性角度快來看,其中N 是采樣區(qū)域總重要值和,代表采樣區(qū)域中第i 種植物的重要值,代表重要值之比,S 為采樣區(qū)域群落的種類數(shù)量。
在研究過程中,針對(duì)96h Biolog 板中微生物代謝類型利用AWCD 值進(jìn)行計(jì)算。
對(duì)于微生物整體活動(dòng),平均顏色變化率(AWCD)為判斷標(biāo)準(zhǔn),這一數(shù)值能將土壤中微生物應(yīng)用某一碳源物質(zhì)能力呈現(xiàn)出來。通過研究發(fā)現(xiàn),植物群落下的土壤中AWCD 值在時(shí)間推移的情況會(huì)出現(xiàn)升高情況,并在后期發(fā)展到一定數(shù)值之后逐漸平緩發(fā)展。從宏觀角度來看,這種變化趨勢(shì)凸顯的排列順序?yàn)樗笏?、花花柴、白刺、絹蒿、檉柳、霧冰藜。經(jīng)過96hAWCD 值分析發(fā)現(xiàn),梭梭群落明顯高于其他植物群落,花花柴次之,其余群落差異并不顯著,最低為霧冰藜。從這可以看出,土壤碳源的利用能力在不同群落下會(huì)有不同的區(qū)別,最強(qiáng)為梭梭,次之為花花柴,霧冰藜最弱。
對(duì)多樣性指數(shù)、優(yōu)勢(shì)度指數(shù)上,梭梭為0.91±0.01a、花花柴為0.86±0.02a、白刺為0.85±0.07a、絹蒿為0.89±0.03a、檉柳為0.92±0.01a、霧冰藜為0.58±0.26b。從這些數(shù)據(jù)中可以發(fā)現(xiàn),霧冰藜顯著低于其他群落(P<0.05),而其他群落之間數(shù)據(jù)相近(P>0.05),這表明除了霧冰藜之外,其他群落并不會(huì)對(duì)常見菌種造成影響。
在均勻度指數(shù)上,梭梭為0.95±0.01b、花花柴為1.11±0.16b、白刺為1.27±0.17b、絹蒿為1.79±0.29a、檉柳為0.82±0.42b、霧冰藜為0.83±0.31b。可以看出,絹蒿與其他群落對(duì)比較高(P<0.05),而其他群落之間數(shù)據(jù)相近(P>0.05)。這表明,出了絹蒿外,其他群落菌群具有均勻性。
通過本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn),檉柳、梭梭、絹蒿等植物群落的豐富度質(zhì)素高于其他群落,P<0.05。從多樣性和優(yōu)勢(shì)度方面來看,梭梭、絹蒿、檉柳、白刺等植物群落之間不存在差異,但高于其他群落(P<0.05);白刺均度明顯高于其他群落(P<0.05),可以看出,梭梭、絹蒿、檉柳等群落具有一定優(yōu)勢(shì),多樣性豐富。通過對(duì)鹽生植物多樣性、土壤微生物平多樣性相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn),植物的豐富度、多樣性、優(yōu)勢(shì)度與土壤微生物多樣性呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系(P<0.01),分別為0.85、0.87、0.75,與土壤生物優(yōu)勢(shì)度也呈現(xiàn)正相關(guān)關(guān)系,為0.78。這表明,土壤微生物多樣性和鹽生植物的多樣性之間存在關(guān)系,且為正比例關(guān)系。
對(duì)于土壤微生物的生存,植物群落能為其提供必要的生命物質(zhì)。在此次研究中發(fā)現(xiàn),盡管通過數(shù)據(jù)證實(shí)梭梭群落多樣性與花花柴群落多樣性對(duì)比較高,但二者之間土壤微生物群落并不存在差異。同時(shí),植物多樣性和土壤微生物顏色變化率之間不存在相關(guān)性關(guān)系,從這可以得出,土壤中微生物的活性與植物多樣性無關(guān),該值也在一定程度上呈現(xiàn)出土壤微生物群落的活性及探員利用率,不涉及到微生物數(shù)量。
對(duì)土壤微生物群落進(jìn)行優(yōu)勢(shì)度和多樣性等指數(shù)分析發(fā)現(xiàn),除霧冰藜之外的其他植物,在微生物多樣性方面都不存在差異。對(duì)均勻度進(jìn)行分析發(fā)現(xiàn),除了絹蒿之外的其他植物,土壤微生物群落的分布都較為均勻。同時(shí),植物群落的多樣性、優(yōu)勢(shì)度、豐富度等指數(shù)變化趨勢(shì)一致,梭梭、絹蒿、檉柳植物群落呈現(xiàn)出優(yōu)勢(shì)。根據(jù)相關(guān)分析發(fā)現(xiàn),鹽生植物的豐富度、優(yōu)勢(shì)度、多樣性指數(shù)方面,與土壤微生物的多樣性、優(yōu)勢(shì)度等指示呈現(xiàn)出明顯正相關(guān)關(guān)系,這表明,植物多樣性越豐富,土壤微生物的多樣性就越豐富。
針對(duì)甘肅省干旱區(qū)域鹽生植物群落下的土壤微生物群落多樣性特征,采用Biolog 法征進(jìn)行研究和分析,取得了一定的成果。在碳源利用方面,不同植物群落下土壤微生物對(duì)碳源的利用優(yōu)勢(shì)、利用程度等也僅僅反映出土壤中的生物活動(dòng)性,并不能反映其微生物的活性特征,而且也無法通過這些數(shù)據(jù)構(gòu)建微生物群落系統(tǒng)。本研究中并沒有對(duì)土團(tuán)聚體進(jìn)行微生物研究,還需要進(jìn)一步對(duì)其開展試驗(yàn)探究,研究其中微生物群落的分布特征,探究不同鹽生植物群落下土壤團(tuán)聚微生物多樣性特征,并解釋干旱區(qū)鹽生植物與土壤微生物之間相互作用的關(guān)系。