日糧添加絞股藍(lán)提取物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、血液生化、免疫力及抗氧化功能的影響

邸 靜，魏彥明，安泓霏，李知新，尹 才，劉 巖，趙 源

（1.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，甘肅蘭州 730070；2.寧夏回族自治區(qū)動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心，寧夏銀川 750011；3.賀蘭縣農(nóng)業(yè)農(nóng)村局，寧夏銀川 750200）

2020 年，飼料端嚴(yán)格實(shí)施“禁抗”以來(lái)，開(kāi)發(fā)新型安全、綠色、無(wú)殘留、高效的飼料添加劑已成為飼料行業(yè)的研究重點(diǎn)（崔志娟等，2019）。植物提取物因其具有促生長(zhǎng)、提高免疫力、增強(qiáng)抗氧化功能而成為研究熱點(diǎn)（Anvari 等，2018）。絞股藍(lán)（Gynostemma pentaphyllum）屬于葫蘆科絞股藍(lán)屬攀援草本植物，主要分布在我國(guó)秦嶺及長(zhǎng)江以南的地區(qū)，其主要含有皂苷、多糖、黃酮類(lèi)化合物等多種有效生物活性成分，具有抗炎、抗氧化、增強(qiáng)免疫、調(diào)節(jié)血糖等多種生物學(xué)功能（謝謙等2020；袁志鷹 等，2018；Shen 等，2018；Wang 等，2018）。目前，對(duì)絞股藍(lán)的研究多集中在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，在動(dòng)物養(yǎng)殖生產(chǎn)中的開(kāi)發(fā)應(yīng)用較少。研究表明，人參絞股藍(lán)混合發(fā)酵粉可以通過(guò)改善母豬的乳品質(zhì)來(lái)提高新生仔豬的體質(zhì)量（高遵波等，2018）。絞股藍(lán)多糖可以改善仔豬的腸道形態(tài)，提高其對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的消化吸收，進(jìn)而提高生長(zhǎng)性能（方磊涵等，2017）；絞股藍(lán)微粉發(fā)酵物可以通過(guò)提高斷奶仔豬血清中免疫球蛋白含量來(lái)提高仔豬的免疫功能（段雪磊等，2016）。因此，本試驗(yàn)以斷奶仔豬為研究對(duì)象，探討在日糧中添加不同水平的絞股藍(lán)提取物對(duì)其生長(zhǎng)性能、血液生化、免疫力及抗氧化功能的影響，以期為絞股藍(lán)科學(xué)、合理地應(yīng)用于斷奶仔豬的養(yǎng)殖生產(chǎn)中提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 本試驗(yàn)所用絞股藍(lán)提取物購(gòu)自北京同仁堂醫(yī)藥有限公司，其純度≥90%。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及試驗(yàn)日糧 試驗(yàn)選取21 日齡體重相近[（7.15±0.30）kg]的“杜×長(zhǎng)×大”仔豬250頭，隨機(jī)分為5 個(gè)處理組，每組5 個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)10 頭仔豬。對(duì)照組飼喂玉米-豆粕型基礎(chǔ)日糧，其余4 組在基礎(chǔ)日糧中分別添加0.5%、1.0%、1.5%、2.0%的絞股藍(lán)提取物。預(yù)飼期7 d，正式試驗(yàn)期28 d。試驗(yàn)基礎(chǔ)日糧參考中華人民共和國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)NY/T 65—2004 配制，基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平（風(fēng)干基礎(chǔ)）

1.3 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)開(kāi)始前將試驗(yàn)豬舍進(jìn)行全方位清洗消毒，通風(fēng)晾干后再進(jìn)行飼養(yǎng)試驗(yàn)。試驗(yàn)仔豬自由采食和飲水，免疫程序按照豬場(chǎng)日常管理進(jìn)行。

1.4 指標(biāo)測(cè)定及方法

1.4.1 生長(zhǎng)性能測(cè)定 對(duì)試驗(yàn)仔豬在試驗(yàn)開(kāi)始第一天和最后一天早晨8：00 進(jìn)行空腹稱(chēng)重，稱(chēng)重前禁食12 h，用于計(jì)算平均日增重。試驗(yàn)期間準(zhǔn)確記錄各組試驗(yàn)仔豬的采食量，用于計(jì)算平均日采食量和料重比。并觀察腹瀉仔豬情況，用于計(jì)算腹瀉率。

1.4.2 血液生化指標(biāo)測(cè)定 試驗(yàn)28 d 結(jié)束時(shí)，仔豬禁食12 h 后使用真空采血管前腔靜脈采血15 mL。室溫靜置2 h，3500 r/min 離心10 min，使用移液槍將上層血清吸收于離心管中，置于-20 ℃保存，備用。測(cè)定的血液生化指標(biāo)包括：總蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、總膽固醇（CHO）、甘油三酯（TG）、尿素氮（BUN）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、高密度膽固醇（HDL）和低密度膽固醇（LDL）等指標(biāo)。測(cè)定使用儀器為日立7170 型全自動(dòng)生化分析儀。檢測(cè)試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所，檢測(cè)方法嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4.3 免疫指標(biāo)測(cè)定 使用1.4.2 中采集的血清樣品測(cè)定仔豬的免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白G（IgG）、白細(xì)胞介素-6（IL-6）、白細(xì)胞介素-10（IL-10）及腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的水平。檢測(cè)試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所，檢測(cè)方法嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.4.4 抗氧化指標(biāo)測(cè)定 使用1.4.2 中采集的血清樣品測(cè)定仔豬的總抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）、過(guò)氧化氫酶（CAT）活性與丙二醛（MDA）含量。檢測(cè)試劑盒購(gòu)自南京建成生物工程研究所，檢測(cè)方法嚴(yán)格按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.5 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)采集的所有數(shù)據(jù)先進(jìn)行Excel 2015 統(tǒng)計(jì)整理后，再采用SPPS 20 進(jìn)行單因素分析，并用鄧肯氏法進(jìn)行組間的多重比較，數(shù)據(jù)結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)誤”表示，P ＜0.05 代表組間數(shù)據(jù)差異顯著，P ＜0.01 代表組間數(shù)據(jù)差異極顯著。

2 結(jié)果

2.1 絞股藍(lán)提取物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響在斷奶仔豬日糧中添加絞股藍(lán)提取物對(duì)其體重、料重比和腹瀉率產(chǎn)生顯著影響（表2）。與對(duì)照組相比，1.0%和1.5%絞股藍(lán)提取物組的仔豬試驗(yàn)?zāi)┲睾推骄赵鲋仫@著提高8.80%、8.16%和17.65%、17.23%（P ＜0.05）；絞股藍(lán)提取物組斷奶仔豬的料重比分別顯著降低8.12%、13.20%、13.20%、7.61%（P ＜0.05）；絞股藍(lán)提取物組斷奶仔豬的腹瀉率分別顯著降低23.52%、48.52%、59.96%、44.92%（P ＜0.05）。從結(jié)果可知，在斷奶仔豬日糧添加1.0%和1.5%的絞股藍(lán)提取物對(duì)其生長(zhǎng)性能的效果較好。

表2 絞股藍(lán)提取物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響

2.2 絞股藍(lán)提取物對(duì)斷奶仔豬血液生化指標(biāo)的影響 在斷奶仔豬日糧中添加絞股藍(lán)提取物對(duì)其總膽固醇、甘油三酯和尿素氮產(chǎn)生顯著影響（表3）。與對(duì)照組相比，1.0%和1.5%絞股藍(lán)提取物組的仔豬總膽固顯著降低15.92%和13.49%（P ＜0.05）；1.0%、1.5%和2.0%絞股藍(lán)提取物組斷奶仔豬的甘油三酯分別顯著降低25.00%、30.36%、28.57%（P ＜0.05）；1.0%和1.5%絞股藍(lán)提取物組斷奶仔豬的尿素氮分別顯著降低24.91%和25.66%（P ＜0.05）；但絞股藍(lán)提取物對(duì)斷奶仔豬的總蛋白、白蛋白、血糖等其他血液生化指標(biāo)未產(chǎn)生顯著影響（P ＞0.05）。從結(jié)果可知，在斷奶仔豬日糧中添加一定量的絞股藍(lán)提取物可以改善其血液生化指標(biāo)。

表3 絞股藍(lán)提取物對(duì)斷奶仔豬血液生化指標(biāo)的影響

2.3 絞股藍(lán)提取物對(duì)斷奶仔豬免疫指標(biāo)的影響在斷奶仔豬日糧中添加絞股藍(lán)提取物對(duì)其IgA、IgG 含量產(chǎn)生顯著影響（表4）。與對(duì)照組相比，1.0%、1.5%、2.0%絞股藍(lán)提取物組的仔豬IgA 分別顯著提高25.66%、23.89% 和28.32%（P ＜0.05）；1.0%和1.5%絞股藍(lán)提取物組斷奶仔豬的IgG 分別顯著提高52.69%和53.08%（P ＜0.05）；但絞股藍(lán)提取物對(duì)斷奶仔豬IgM、IL-6、IL-10、TNF-α 的含量未產(chǎn)生顯著影響（P ＞0.05）。從結(jié)果可知，在斷奶仔豬日糧中添加一定量的絞股藍(lán)提取物可以提高其免疫功能。

表4 絞股藍(lán)提取物對(duì)斷奶仔豬免疫指標(biāo)的影響

2.4 絞股藍(lán)提取物對(duì)斷奶仔豬抗氧化能力的影響 在斷奶仔豬日糧中添加絞股藍(lán)提取物對(duì)其T-AOC、SOD、MDA 產(chǎn)生顯著影響（表5）。與對(duì)照組相比，絞股藍(lán)提取物組的仔豬T-AOC 分別顯著提高11.55%、29.35%、25.63%和12.22%（P ＜0.05）；1.0%和1.5%絞股藍(lán)提取物組斷奶仔豬的SOD 分別顯著提高32.76%和30.70%（P ＜0.05）；1.0%和1.5%絞股藍(lán)提取物組斷奶仔豬的MDA 分別顯著降低31.47%和31.20%（P ＜0.05）；但絞股藍(lán)提取物對(duì)斷奶仔豬的CAT 和GSH-Px 未產(chǎn)生顯著影響（P ＞0.05）。從結(jié)果可知，在斷奶仔豬日糧中添加一定量的絞股藍(lán)提取物可以提高其抗氧化功能。

表5 絞股藍(lán)提取物對(duì)斷奶仔豬抗氧化能力的影響

3 討論

3.1 絞股藍(lán)提取物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能的影響仔豬斷奶時(shí)會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的斷奶應(yīng)激，引起仔豬腹瀉，生長(zhǎng)發(fā)育緩慢，因此需要在斷奶日糧中添加一些功能性的飼料添加劑來(lái)緩解斷奶應(yīng)激。近年來(lái)，植物提取物成為替抗的研究熱點(diǎn)，取得了一定的效果。本試驗(yàn)結(jié)果表明，1.0%和1.5%絞股藍(lán)提取物組的仔豬試驗(yàn)?zāi)┲睾推骄赵鲋仫@著提高8.80%、8.16%和17.65%、17.23%（P ＜0.05）；絞股藍(lán)提取物組斷奶仔豬的料重比分別顯著降低8.12%、13.20%、13.20%、7.61%（P ＜0.05），仔豬的腹瀉率分別顯著降低23.52%、48.52%、59.96%、44.92%（P ＜0.05）。這與前人使用絞股藍(lán)對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能、血液生化、免疫力的研究（寧豫昌等，2104）；絞股藍(lán)提取物對(duì)生長(zhǎng)育肥豬生長(zhǎng)性能、免疫力及經(jīng)濟(jì)效益的研究（楊貴興等，2020）；絞股藍(lán)微粉發(fā)酵物對(duì)斷奶仔豬生長(zhǎng)性能及腹瀉率的研究（段雪磊等，2016b）的結(jié)果類(lèi)似，說(shuō)明在斷奶仔豬日糧中添加一定劑量的絞股藍(lán)提取物，對(duì)其生長(zhǎng)性能的效果較好，但添加劑量要控制在合理的范圍之內(nèi)。絞股藍(lán)能提高斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能，降低腹瀉率，可能與其抗菌功能、營(yíng)養(yǎng)豐富、適口性較好有關(guān)，仔豬腹瀉率降低，對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)消化吸收增強(qiáng)，進(jìn)而提高其生長(zhǎng)性能。

3.2 絞股藍(lán)提取物對(duì)斷奶仔豬血液生化指標(biāo)的影響 血液生化指標(biāo)可以間接反映動(dòng)物機(jī)體的健康狀況（劉啟燕等，2019）?？偟鞍住椎鞍?、尿素氮的含量代表著動(dòng)物機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)的吸收代謝情況，機(jī)體對(duì)蛋白質(zhì)代謝良好的情況下，血液中尿素氮含量會(huì)降低（Rosebrough 等，1983）。谷草轉(zhuǎn)氨酶和谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性代表著機(jī)體的肝功能，當(dāng)酶活性升高時(shí)，表示機(jī)體肝功能出現(xiàn)問(wèn)題（段銘等，2003）。本試驗(yàn)結(jié)果表明，1.0%和1.5%絞股藍(lán)提取物組的仔豬總膽固顯著降低15.92%和13.49%（P＜0.05）；1.0%、1.5%和2.0%絞股藍(lán)提取物組斷奶仔豬的甘油三酯分別顯著降低25.00%、30.36%、28.57%（P ＜0.05）；1.0%和1.5%絞股藍(lán)提取物組斷奶仔豬的尿素氮分別顯著降低24.91%和25.66%（P ＜0.05），說(shuō)明一定劑量的絞股藍(lán)提取物提高了斷奶仔豬對(duì)蛋白質(zhì)的吸收利用率，并有效地降低了膽固醇含量，對(duì)仔豬的健康起到積極作用，與周貞兵等（2013）、寧豫昌等（2014）的研究結(jié)果類(lèi)似。

3.3 絞股藍(lán)提取物對(duì)斷奶仔豬免疫功能的影響動(dòng)物體內(nèi)的IgA 可以阻止微生物在呼吸道上皮附著，抑制病毒增殖，是阻礙病原體入侵動(dòng)物機(jī)體的第一道防線(xiàn)（吳德峰等，2006）。IgG 具有激活補(bǔ)體、中和毒素的作用（張獻(xiàn)月等，2013）。IgM 在動(dòng)物機(jī)體抗感染初期起著非常重要的作用，是動(dòng)物感染初期就產(chǎn)生的免疫球蛋白，抗體效能比較高，在機(jī)體受病原感染后，能與機(jī)體的補(bǔ)體結(jié)合，進(jìn)而將病原體溶解消除（高鳳山等，2006）。本試驗(yàn)結(jié)果表明，1.0%、1.5%、2.0%絞股藍(lán)提取物組的仔豬IgA 分別顯著提高25.66%、23.89%和28.32%（P ＜0.05）；1.0%和1.5%絞股藍(lán)提取物組斷奶仔豬的IgG 分別顯著提高52.69%和53.08%（P ＜0.05），說(shuō)明添加適宜劑量的絞股藍(lán)提取物可以提高斷奶仔豬機(jī)體的體液免疫功能。寧豫昌等（2014）研究表明，絞股藍(lán)提高了血清IgA 和IgG 含量，并增加了外周血中CD4+／CD8+比值，增強(qiáng)了斷奶仔豬的體液免疫，又增強(qiáng)了細(xì)胞免疫功能。絞股藍(lán)提高斷奶仔豬的免疫力與其提高斷奶仔豬的特異性免疫和腸道非特異性免疫有關(guān)。

3.4 絞股藍(lán)提取物對(duì)斷奶仔豬抗氧化能力的影響 當(dāng)動(dòng)物機(jī)體受到外界環(huán)境應(yīng)激時(shí)，機(jī)體內(nèi)的氧化還原平衡會(huì)被打亂，使機(jī)體處于氧化應(yīng)激狀態(tài)，導(dǎo)致抗氧化能力降低，產(chǎn)生大量有害的自由基（李麗娟等，2007）。一些研究表明，多糖類(lèi)和黃酮類(lèi)物質(zhì)能提高動(dòng)物機(jī)體的抗氧化能力，有效清除自由基，降低脂質(zhì)代謝產(chǎn)物丙二醛的含量（薛凌峰等，2009）。本試驗(yàn)研究結(jié)果表明，一定量的絞股藍(lán)提取物提高了T-AOC、SOD 含量，降低了MDA 含量。謝紅兵等（2019）研究表明，絞股藍(lán)多糖提高了斷奶仔豬血清和空腸黏膜的SOD、CAT、GSH-Px活性，并降低了MDA 的含量，與本試驗(yàn)結(jié)果類(lèi)似。絞股藍(lán)提高斷奶仔豬的抗氧化功能可能與其含有多糖和黃酮等功能性有效成分有關(guān)。

4 結(jié)論

日糧中添加一定量的絞股藍(lán)可提高斷奶仔豬的生長(zhǎng)性能，增強(qiáng)免疫力，提高抗氧化能力，本試驗(yàn)條件下，添加1.0%～1.5%劑量的絞股藍(lán)提取物效果較好。