男男性行為HIV感染者發(fā)生病毒耐藥性變異相關(guān)危險(xiǎn)因素研究

馬艷麗，李 鴻，周 永，郭 磊，陳 鵬

（青島市第六人民醫(yī)院，山東 青島 266033）

HIV 也就是艾滋病，從相關(guān)數(shù)據(jù)信息來(lái)看，HIV 感染患者的數(shù)量在逐年增加，而性傳播是國(guó)內(nèi)HIV 患者的主要感染方式，尤其是男男性行為中的傳播率更高[1]。HIV 有著較高的病死率隨著HIV 感染者的治療時(shí)間增加，在一定程度上會(huì)使得病毒耐藥性變異，大大降低治療效果水平，增加了患者的死亡風(fēng)險(xiǎn)[2]。文中對(duì)男男性行為HIV 感染者發(fā)生病毒耐藥性變異相關(guān)危險(xiǎn)因素進(jìn)行了簡(jiǎn)要分析，希望可以為抗HIV 藥物研發(fā)提供一點(diǎn)幫助。

1 資料與方法

1.1 一般資料

按照感染途徑將選擇2018年12月到2019年12月期間青島市第六人民醫(yī)院感染科收治的100 例男男性行為HIV 感染者設(shè)置為觀察組，將100 例其他途徑HIV 感染者設(shè)置為對(duì)照組，觀察組：100 例，14-56 歲，平均年齡為（35.68±6.32）歲；對(duì)照組：100 例，15-57 歲，平均年齡為（35.41±6.21）歲。

1.2 方法

1.2.1 問(wèn)卷調(diào)查方面

運(yùn)用自制調(diào)查問(wèn)卷了解男男性行為感染者基本人口學(xué)特征情況（包括年齡、職業(yè)、婚姻狀況、文化程度、經(jīng)濟(jì)狀況、確診感染時(shí)間、感染途徑、治療費(fèi)用來(lái)源、家庭住址、聯(lián)系方式等信息）、行為狀況（包括感染前后性行為狀況、與同性/異性發(fā)生性行為情況、尋找性伴方式、固定/偶遇/商業(yè)性伴數(shù)量、性伴的感染和治療情況、物質(zhì)濫用情況、安全套使用情況等）；運(yùn)用CPCRA 問(wèn)卷了解患者服藥情況（包括服藥方式、服藥劑量、藥物不良反應(yīng)情況、依從性教育情況、影響服藥依從性的其他信息等）、抗病毒治療情況（包括治療方案及更換的治療方案、高效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒治療開(kāi)始及持續(xù)時(shí)間）；運(yùn)用SAS 問(wèn)卷、SDS 問(wèn)卷、BHSS 問(wèn)卷了解患者心理狀況（焦慮、抑郁、羞恥等程度）；運(yùn)用體質(zhì)指數(shù)(BMI)等了解患者體能狀況；運(yùn)用WHOQOL-HIV-Brief 生存質(zhì)量調(diào)查表了解患者生存質(zhì)量情況；運(yùn)用社會(huì)支持評(píng)定量表了解患者社會(huì)支持狀況。

1.2.2 實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)方面

外周血檢測(cè)：對(duì)外周血淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)、病毒載量、機(jī)會(huì)性感染情況（如：梅毒、肝炎、結(jié)核等）以及其他血液常規(guī)生化指標(biāo)（白細(xì)胞、血小板、血紅蛋白、血肌酐、血尿素氮等）進(jìn)行檢測(cè)分析；運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)淋巴細(xì)胞計(jì)數(shù)，使用HIV 病毒載量檢測(cè)試劑盒及讀數(shù)儀檢測(cè)HIV 病毒載量。HIV 基因型耐藥檢測(cè)：先將外周血淋巴細(xì)胞(PBMCs)及血漿進(jìn)行分離操作，將分離出來(lái)的PBMCs 及血漿貯存于-80℃冰箱備用；提取血漿中HIV 病毒RNA，巢式PCR 擴(kuò)增HIV pol 基因區(qū)約1300bp 的目的片段（包括蛋白酶基因全長(zhǎng)和逆轉(zhuǎn)錄酶基因前300 個(gè)氨基酸）；擴(kuò)增引物：第一輪PCR：外側(cè)上游引物：5'-TTGGAAATGTGGAAAGGAAGGAC-3' HXB2 2028-2050；外側(cè)下游引物：5' -CTGTATTTCTGCTATTAAGTCTTTTGATGGG-3'HXB2 3509-3539；第二輪PCR：內(nèi)側(cè)上游引物：5'-CAGAGCCAACAGCCCCACCA-3' HXB2 2147-2166；內(nèi)側(cè)下游引物：5'-CTGCCAGTTCTAGCTCTGCTTC-3' HXB2 3441-3462；PCR 產(chǎn)物與標(biāo)準(zhǔn)Marker 對(duì)照鑒定為目標(biāo)片段后進(jìn)行純化及基因測(cè)序。陽(yáng)性檢測(cè)：對(duì)病毒載量較低的感染者運(yùn)用超速離心富集濃縮樣本的方法進(jìn)行血漿中HIV 病毒RNA 的提取，取6ml 標(biāo)本分裝于3 支2ml 離心管中，每管2ml，在4℃、24600 g 條件下離心l 小時(shí)，移去離心管上清液，留底部濃縮液約150μl；充分振蕩混勻后，收集合并各管濃縮液；并用移去的上清液調(diào)整終體積至2ml，制備成3 倍超濃縮標(biāo)本，其他倍數(shù)的超濃縮操作依此步驟進(jìn)行。檢測(cè)分析：獲得的序列用Contig Express 拼接后用BioEdit 軟件整理，Blast 鑒定基因序列亞型，Mega 軟件構(gòu)建系統(tǒng)進(jìn)化樹(shù)；并將整理好的序列提交斯坦福HIV 耐藥變異數(shù)據(jù)庫(kù)(http://hivdb.stanford.edu/hiv/)進(jìn)行獲得性耐藥的檢測(cè)分析。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

所有問(wèn)卷調(diào)查信息用Epidata3.1 軟件雙人錄入，用SAS9.2 軟件建立數(shù)據(jù)集并進(jìn)行基本統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2.1 個(gè)人與社會(huì)影響因素

兩組患者社會(huì)支持評(píng)定量表、行為評(píng)分量表、合理用藥檢查評(píng)分表、心理評(píng)定量表、健康狀況評(píng)價(jià)量表、生活質(zhì)量評(píng)定量表的相關(guān)信息經(jīng)過(guò)分析后，社會(huì)支持：B 值為2.362、SE值為1.032、Wald 值為2.320、OR 值為1.240、P 值為0.082、95%CI 值為1.021-1.022；行為狀況：B 值為1.981、SE 值為1.114、Wald 值為2.023、OR 值為1.195、P 值為0.000、95%CI值為1.473-1.065；用藥情況：B 值為1.989、SE 值為1.033、Wald 值為1.998、OR 值為1.033、P 值為0.008、95%CI 值為1.652-1.147；心理狀況：B 值為2.541、SE 值為1.211、Wald 值為2.874、OR 值為1.356、P 值為0.014、95%CI 值為1.087-1.241；身體狀況：B 值為2.332、SE 值為1.322、Wald 值為1.985、OR 值 為1.365、P 值 為0.110、95%CI 值 為1.332-1.044；生存質(zhì)量：B 值為2.360、SE 值為1.354、Wald 值為2.748、OR 值 為1.369、P 值 為0.121、95%CI 值 為1.471-1.251?？梢钥闯鯤IV 患者會(huì)受到用藥情況、心理狀況、行為狀況的影響而使得耐藥性變異情況出現(xiàn)（P<0.05）。

2.2 細(xì)胞變化因素

兩組患者相關(guān)信息經(jīng)過(guò)分析后，淋巴細(xì)胞：B 值為2.974、SE 值為1.652、Wald 值為2.854、OR 值為1.414、P 值為0.216、95%CI 值為1.362-1.215；病毒載量：B 值為2.747、SE值為1.541、Wald 值為2.584、OR 值為1.154、P 值為0.127、95%CI 值為1.478-1.521；血常規(guī)檢測(cè)：B 值為2.362、SE 值為1.587、Wald 值為2.358、OR 值為1.841、P 值為0.301、95%CI值為1.542-1.652；機(jī)會(huì)性感染：B 值為2.361、SE 值為1.582、Wald 值為2.363、OR 值為1.254、P 值為0.132、95%CI 值為1.464-1.361；擴(kuò)增pol 基因：B 值為2.870、SE 值為1.473、Wald 值為2.314、OR 值為1.556、P 值為0.095、95%CI 值為1.365-1.854?？梢钥闯鯤IV 患者耐藥性變異與淋巴細(xì)胞、病毒載量、血常規(guī)檢測(cè)、機(jī)會(huì)性感染、擴(kuò)增pol 基因等因素?zé)o關(guān)（P>0.05）。

3 討論

由于國(guó)內(nèi)免費(fèi)抗病毒治療的推廣發(fā)展，HIV 感染患者逐漸接受抗病毒治療，但是很多患者在治療的過(guò)程中都發(fā)生了耐藥性情況，在很大程度上提升了患者發(fā)病幾率與死亡率，大大增加了艾滋病的治療難度[3]。

HIV 病毒進(jìn)入人體后，會(huì)對(duì)人體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生攻擊，嚴(yán)重的情況下還會(huì)引發(fā)惡性腫瘤，導(dǎo)致患者死亡。HIV 主要發(fā)生在青壯年群體中，隨著病情發(fā)展，患者還會(huì)出現(xiàn)皰疹、淤血斑、咳嗽、氣促、呼吸困難、持續(xù)性腹瀉等情況，大大降低患者生活質(zhì)量與生命質(zhì)量[4]。從國(guó)內(nèi)目前HIV 傳播情況來(lái)看，主要是以男男性行為進(jìn)行傳播的，而目前針對(duì)HIV 患者最有效的治療就是抗病毒治療，但是相關(guān)研究表明，很多HIV 患者在治療過(guò)程中經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)耐藥性變異，不能有效控制患者病情發(fā)展，尤其是男男性行為患者在治療過(guò)程中容易將耐藥毒株擴(kuò)散給他人，如果可以找出影響男男性行為感染者發(fā)生病毒耐藥性變異相關(guān)危險(xiǎn)因素，就可以在很大程度上促進(jìn)HIV 治療研究發(fā)展。

從文中研究活動(dòng)來(lái)看，男男性行為HIV 感染者發(fā)生病毒耐藥性變異情況，可能會(huì)受到藥情況、心理狀況、行為狀況等因素的影響。所以，相關(guān)研究人員在分析男男性行為感染者發(fā)生病毒耐藥性變異相關(guān)危險(xiǎn)因素時(shí)，可以從患者的受到藥情況、心理狀況、行為狀況等情況入手，進(jìn)而改進(jìn)相關(guān)的抗病毒治療方案，降低患者病死率，減少HIV 對(duì)我國(guó)社會(huì)公共安全的危害[5]。