雞滑液囊支原體病的診斷與防控技術(shù)

江 斌 福建省農(nóng)業(yè)科學(xué)院畜牧獸醫(yī)研究所 福州 350013

陳曉華 福州市華翔農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司 福州 350503

雞滑液囊支原體病，又稱(chēng)雞傳染性滑膜炎，是由雞滑液囊支原體（MS）引起雞和火雞的一種傳染病。該病廣泛分布于世界各地，并呈逐步上升趨勢(shì)，在我國(guó)各地養(yǎng)雞場(chǎng)中也存在不同程度感染，不僅造成雞只飼料利用率降低、生長(zhǎng)發(fā)育受阻、病死率和淘汰率增加，而且還會(huì)導(dǎo)致產(chǎn)蛋雞和種雞產(chǎn)蛋率下降、蛋殼質(zhì)量變差。目前該病已成為制約我國(guó)養(yǎng)雞業(yè)健康發(fā)展的一種重要疫病。該文就雞滑液囊支原體病的病原、流行特點(diǎn)、臨床癥狀、病理變化、診斷以及防治措施等進(jìn)行綜述，以期為該病防控提供參考。

1 病 原

雞滑液囊支原體隸屬于支原體科支原體屬，大小為250～500 nm，無(wú)細(xì)胞壁，常呈球狀或球桿狀等多種形態(tài)，革蘭氏染色陰性，只有一個(gè)血清型[1]，有學(xué)者采用VlhA 基因序列分析，將其分為A-I 共9 個(gè)基因型，其中引起呼吸道癥狀的基因型有C、E、F 和I 型，引起蛋殼異常和產(chǎn)蛋下降的基因型有E、F 和C 型，引起滑液囊炎癥的基因型主要是A 型[2]?；耗抑гw可發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣，不發(fā)酵乳糖、衛(wèi)茅醇、楊苷和蕈糖。培養(yǎng)滑液囊支原體的培養(yǎng)基以改良Frey 為主，同時(shí)需添加一定的脂肪酸和膽固醇，37 ℃溫箱中培養(yǎng)3～10 d 后在培養(yǎng)基上可鏡檢到煎蛋狀的菌落，該菌落表面光滑、圓形、邊緣整齊、細(xì)小而透明，直徑為0.2～0.3 mm。滑液囊支原體必需依賴宿主組織（如呼吸道、氣囊、滑膜囊）才能存活，對(duì)外界環(huán)境抵抗力較差，離開(kāi)雞體容易失去活力。該病原一般在pH 7.0～8.0 時(shí)生長(zhǎng)較好，低于6.5 時(shí)會(huì)被抑制或死亡；對(duì)紫外線、高溫敏感；不耐干燥；對(duì)常規(guī)消毒劑敏感。

2 流行特點(diǎn)

滑液囊支原體的自然宿主為雞、火雞和珍珠雞，而鴨、鵝、鴿子等禽類(lèi)也會(huì)感染，哺乳動(dòng)物不易感。各種日齡雞均可感染，日齡越小易感性越強(qiáng)，在臨床上急性感染的常見(jiàn)于4～16 周齡雞，表現(xiàn)消瘦、軟腳、關(guān)節(jié)腫大等。此外產(chǎn)蛋期的蛋雞和種雞還會(huì)持續(xù)慢性感染（隱性感染），主要表現(xiàn)產(chǎn)蛋率低下以及蛋殼質(zhì)量差。該病的傳染源是患雞、隱性帶菌雞以及污染的環(huán)境。傳播途徑有水平傳播和垂直傳播，其中以經(jīng)種蛋垂直傳播為主，水平傳播包括空氣氣溶膠傳播、密切接觸傳播以及經(jīng)飲水、飼料、雞籠等接觸傳播。目前，國(guó)外養(yǎng)禽業(yè)發(fā)達(dá)國(guó)家和地區(qū)主要采取種源凈化來(lái)控制該病，并取得較好的凈化效果。目前我國(guó)種雞場(chǎng)滑液囊支原體病感染狀況比較嚴(yán)重，也造成商品代肉雞、蛋雞群感染率居高不下，據(jù)Xue 等[3]（2017）調(diào)查表明，463 個(gè)雞場(chǎng)中有375 個(gè)場(chǎng)的MS 抗體陽(yáng)性，陽(yáng)性率達(dá)80.99%。

3 致病機(jī)理

3.1 侵害滑膜或漿膜系統(tǒng) 滑液囊支原體通過(guò)自身蛋白與雞滑膜或漿膜系統(tǒng)（如氣囊、胸骨膜、關(guān)節(jié)膜）細(xì)胞表面受體結(jié)合，破壞正常滑膜或漿膜系統(tǒng)的完整，干擾正常細(xì)胞功能，并產(chǎn)生有毒物質(zhì)侵入滑膜系統(tǒng)細(xì)胞內(nèi)，致使細(xì)胞出現(xiàn)炎癥病變，從而導(dǎo)致雞體出現(xiàn)相應(yīng)的關(guān)節(jié)腫大或胸骨囊腫等癥狀。

3.2 掠取宿主細(xì)胞營(yíng)養(yǎng) 滑液囊支原體在雞體持續(xù)感染中，不斷從雞體細(xì)胞掠取大量營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)作為其生長(zhǎng)繁殖的前體，如維生素、氨基酸、膽固醇、脂肪酸等，致使患雞出現(xiàn)消瘦、衰竭、發(fā)育不良等癥狀。

3.3 逃避免疫應(yīng)答 滑液囊支原體的可變脂蛋白和血凝素蛋白具有逃避宿主免疫應(yīng)答的特性?；耗抑гw感染雞體過(guò)程中會(huì)在轉(zhuǎn)錄水平上對(duì)血凝素蛋白的表達(dá)進(jìn)行調(diào)控，嚴(yán)重干擾了雞體正常的免疫應(yīng)答，從而達(dá)到免疫逃避?；耗抑гw在雞體的滑膜或漿膜中持續(xù)感染后，相應(yīng)的抗體無(wú)法進(jìn)入滑膜或漿膜中去中和病原體，結(jié)果導(dǎo)致雞感染后呈現(xiàn)病原和抗體并存現(xiàn)象，同時(shí)也可解釋疫苗免疫對(duì)已感染雞無(wú)免疫保護(hù)作用。

3.4 影響蛋雞和種雞鈣的代謝 在滑液囊支原體感染的蛋雞和種雞中，母雞輸卵管和子宮的鈣物質(zhì)代謝受影響，導(dǎo)致蛋殼強(qiáng)度顯著降低、蛋端變粗糙，對(duì)母雞產(chǎn)蛋性能也有較大影響[2]。

4 臨床癥狀

雞接觸感染后潛伏期為11～21 d，而對(duì)于經(jīng)種蛋傳播的潛伏期會(huì)短些。感染后的小雞或青年雞初期表現(xiàn)為雞冠蒼白、跛行、精神不振、生長(zhǎng)遲緩。隨著病情發(fā)展，患雞羽毛粗亂，排含大量尿酸鹽的黃綠色稀糞，體況進(jìn)一步消瘦，軟腳明顯，有的出現(xiàn)跗關(guān)節(jié)著地或癱瘓，跗關(guān)節(jié)和跖關(guān)節(jié)腫脹明顯，胸骨突出，皮下水腫，嚴(yán)重者出現(xiàn)衰竭死亡，發(fā)病率10%～50%，死淘率10%～20%。有的病例還出現(xiàn)啰音、張口呼吸等呼吸道癥狀。產(chǎn)蛋或種雞開(kāi)產(chǎn)后，相應(yīng)的軟腳、關(guān)節(jié)腫大、胸骨囊腫癥狀會(huì)逐漸減少，但產(chǎn)蛋率上升緩慢，總體產(chǎn)蛋率偏低，此外所產(chǎn)雞蛋中約有2%～8%會(huì)出現(xiàn)白殼蛋、薄殼蛋以及蛋端異常等，影響雞蛋品質(zhì)，時(shí)間會(huì)持續(xù)1～3 個(gè)月。

5 病理變化

發(fā)病初期無(wú)明顯病變。中后期可見(jiàn)病死雞的跗關(guān)節(jié)、趾關(guān)節(jié)及腳墊腫脹明顯，切開(kāi)腫脹部位會(huì)流出較多淡黃色膠凍樣黏液，胸部皮下水腫，胸骨滑液囊腫大。隨著病情加重，關(guān)節(jié)腫大更明顯，胸骨突出，關(guān)節(jié)和胸骨囊內(nèi)出現(xiàn)干酪樣滲出物，有時(shí)在關(guān)節(jié)周?chē)碾烨逝c肌肉間也出現(xiàn)干酪樣物質(zhì)。氣囊渾濁，嚴(yán)重時(shí)氣囊表面出現(xiàn)干酪樣滲出物。腎臟腫大且有大量尿酸鹽沉積。病死雞胴體消瘦。

6 診 斷

6.1 病原分離 采集病死雞的咽喉拭子、氣管拭子、爪墊和關(guān)節(jié)滲出液、胸骨囊滲出液等采用改良的Frey 氏培養(yǎng)基加10%滅活血清及0.01%NAD 進(jìn)行培養(yǎng)。一般來(lái)說(shuō)，在發(fā)病早中期易于分離，而在發(fā)病中后期或持續(xù)帶菌期較難分離。所采集樣本需用干冰保存，并要求在24 h 內(nèi)入實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行培養(yǎng)。樣本要先在液體培養(yǎng)基中盲傳3～6 代后再轉(zhuǎn)接到固體培養(yǎng)基，培養(yǎng)5～7 d 后可在顯微鏡下觀察到煎蛋樣典型菌落。該方法分離周期長(zhǎng)、培養(yǎng)條件要求高、分離難度大，一般適用于科學(xué)研究及疫苗生產(chǎn)，在疾病診斷中應(yīng)用較少。

6.2 聚合酶鏈反應(yīng)試驗(yàn)（PCR）針對(duì)滑液囊支原體的16sRNA 建立的PCR 檢測(cè)方法以及針對(duì)滑液囊支原體血凝素基因建立的PCR 檢測(cè)技術(shù)具有敏感、特異、準(zhǔn)確以及快速特點(diǎn)，在臨床上廣泛應(yīng)用于滑液囊支原體病的診斷。

6.3 血清學(xué)診斷 常見(jiàn)的血清學(xué)診斷方法有平板凝集法（SPA）、酶聯(lián)吸附試驗(yàn)（ELISA）以及血凝抑制試驗(yàn)（HI）。SPA 法由于操作簡(jiǎn)單、不需要專(zhuān)用儀器設(shè)備，在生產(chǎn)實(shí)踐中得到廣泛應(yīng)用，但也易出現(xiàn)交叉反應(yīng)、非特異性問(wèn)題導(dǎo)致出現(xiàn)假陽(yáng)性現(xiàn)象以及人為判斷誤差等缺點(diǎn)[5]。ELISA 法較為準(zhǔn)確，目前應(yīng)用較廣泛，但需要酶標(biāo)儀設(shè)備。HI 法具有特異性和準(zhǔn)確性優(yōu)點(diǎn)，主要用于檢測(cè)血樣中IgG 抗體，但不適合早期診斷，同時(shí)目前市場(chǎng)上缺乏相應(yīng)商業(yè)化抗原。針對(duì)血清學(xué)診斷，在生產(chǎn)實(shí)踐中需采集發(fā)病時(shí)及發(fā)病后（間隔15 d 以上）雙份血樣，并進(jìn)行對(duì)比檢測(cè)。在發(fā)病后抗體滴度上升明顯或感染比例增加時(shí)，方能診斷該病。此外，血清學(xué)診斷所采集的血液樣本要求比較多（一般要求30 份以上）。

6.4 直接染色檢驗(yàn) 無(wú)菌取病死雞關(guān)節(jié)腔滲出物涂片，姬姆薩氏染色后在油鏡下鏡檢，若檢出大量球形或球桿形紫色菌體及少量鏈狀排列的菌體也可診斷。此外，在顯微鏡下還可檢出大量白細(xì)胞及一些粉紅色網(wǎng)狀物質(zhì)[5]。

7 防治措施

7.1 種雞凈化 雞滑液囊支原體病的主要傳播途徑是經(jīng)種蛋傳播。種雞場(chǎng)的疫病凈化是防控該病的首要措施。要做好凈化，確保所孵出的雞苗不帶菌，就必須從曾祖代種雞場(chǎng)開(kāi)始，再到祖代和父母代種雞場(chǎng)，每個(gè)世代的種雞場(chǎng)都要做好種雞凈化工作。在種雞場(chǎng)凈化過(guò)程中，不允許種雞使用滑液囊支原體活疫苗或滅活疫苗，否則會(huì)干擾和影響種雞場(chǎng)的凈化檢測(cè)。一般來(lái)說(shuō)，種雞場(chǎng)在開(kāi)產(chǎn)前要抽取10%比例雞群的血樣進(jìn)行SPA 法血清學(xué)檢測(cè)，要求所測(cè)樣本均為陰性，若有陽(yáng)性樣本，則需全群逐只抽血檢測(cè)，并淘汰所有陽(yáng)性雞和可疑雞只，之后每隔3 個(gè)月重復(fù)檢測(cè)，最終才可以確定為無(wú)MS 感染雞群。種雞凈化是一項(xiàng)費(fèi)時(shí)費(fèi)力費(fèi)財(cái)?shù)拈L(zhǎng)遠(yuǎn)工程，必需持之以恒。

7.2 生物安全措施 首先要加強(qiáng)雞群的飼養(yǎng)管理，降低飼養(yǎng)密度，加強(qiáng)舍內(nèi)衛(wèi)生消毒工作，特別強(qiáng)調(diào)雞舍、雞籠、用具的徹底消毒和干燥。其次，要采用"全進(jìn)全出"飼養(yǎng)模式，避免不同日齡雞群混養(yǎng)，防止病原交叉感染。第三，雞群所采用的各類(lèi)活疫苗均須是用SPF 雞胚研制的，防止雞場(chǎng)因疫苗污染MS 病原而造成雞群感染。

7.3 藥物防治 治療滑液囊支原體病的藥物很多，包括延胡索酸泰妙菌素、鹽酸沃尼妙林、酒石酸泰萬(wàn)菌素、泰樂(lè)菌素、替米考星、鹽酸多西環(huán)素、土霉素、鹽酸大觀霉素、鹽酸四環(huán)素、恩諾沙星、硫酸卡那霉素、硫酸鏈霉素、氟苯尼考等，不同的雞場(chǎng)由于存在耐藥性不同呈現(xiàn)出對(duì)各種藥物的敏感性也有差異。目前在臨床上常見(jiàn)的治療方案有延胡索酸泰妙菌素+鹽酸多西環(huán)素、酒石酸泰萬(wàn)菌素+鹽酸多西環(huán)素、恩諾沙星+替米考星等，治療5～7 d 為一個(gè)療程。盡管上述藥物對(duì)滑液囊支原體都有不同程度的殺滅效果，但這些藥物均不易通過(guò)血液循環(huán)到達(dá)氣囊、關(guān)節(jié)囊等靶器官，造成不能根除體內(nèi)的滑液囊支原體。所以臨床上在該病高發(fā)期間每間隔20 d 需反復(fù)使用治療藥物3～4 個(gè)療程。對(duì)已出現(xiàn)明顯病癥的患雞（如軟腳、關(guān)節(jié)腫大）還需采用肌肉注射相應(yīng)的治療藥物，如選用硫酸卡那霉素+轉(zhuǎn)移因子、鹽酸林可霉素+鹽酸大觀霉素、青霉素鈉+硫酸鏈霉素，每天注射1 針，連續(xù)注射2～3 d。隨著MS 耐藥性的不斷增加以及畜產(chǎn)品藥物殘留問(wèn)題持續(xù)受到人們的關(guān)注，藥物治療在防治雞滑液囊支原體病上的應(yīng)用越來(lái)越受到限制。

7.4 疫苗接種 疫苗接種是減少和預(yù)防雞滑液囊支原體病的有效方法。預(yù)防滑液囊支原體病的疫苗有2 類(lèi)。一類(lèi)是活疫苗，目前澳大利亞已研發(fā)出一種滑液囊支原體活疫苗，其安全性和有效性均得到證實(shí)，已在澳大利亞及我國(guó)部分場(chǎng)推廣應(yīng)用，該疫苗主要用于商品肉雞和蛋雞，且要求在育雛早期使用，對(duì)已感染滑液囊支原體病的雞群效果不佳。另一類(lèi)是滅活疫苗，目前國(guó)內(nèi)外已研發(fā)出MS 的油佐劑滅活疫苗，該苗可用于商品肉雞、蛋雞及父母代種雞（非凈化場(chǎng)），理想的免疫程序是先免疫活疫苗，之后再免疫滅活疫苗，父母代種雞場(chǎng)開(kāi)產(chǎn)前再用滅活疫苗加強(qiáng)免疫。對(duì)于已感染MS 雞只，免疫滅活疫苗的效果也不十分理想，但對(duì)阻止MS 的水平傳播以及改善產(chǎn)蛋雞生產(chǎn)性能和蛋殼質(zhì)量有所幫助[2]。

8 結(jié)語(yǔ)

目前，該病在我國(guó)廣大肉雞場(chǎng)和蛋雞場(chǎng)普遍存在，不僅會(huì)造成肉雞、后備蛋雞出現(xiàn)消瘦死亡，而且會(huì)導(dǎo)致蛋雞及種雞出現(xiàn)產(chǎn)蛋率低下、蛋殼質(zhì)量變差等，對(duì)養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展危害很大。防控雞滑液囊支原體病是一項(xiàng)長(zhǎng)期而系統(tǒng)的工作，其中種雞凈化是根本，良好的飼養(yǎng)管理及生物安全措施是基礎(chǔ)，藥物治療是當(dāng)下必不可少的措施，疫苗接種是重要的預(yù)防途徑。只有做好種源凈化、加強(qiáng)飼養(yǎng)管理、遵循科學(xué)的防治方法，才能有效地防控好雞滑液囊支原體病。