三葉青種質(zhì)資源及藥理作用的研究進(jìn)展

葛佳麗，馬 揚(yáng)，李慧琴，張 婷（通訊作者）

（浙江中醫(yī)藥大學(xué) 浙江 杭州 310000）

三葉青（Tetrastigma hemsleyanum Diels et Gilg）學(xué)名為三葉崖爬藤，葡萄科崖爬藤屬植物，別名石猴子、石抱子、破石珠等。通常以野生塊根或者全草入藥，鮮用或曬干用藥，藥用價(jià)值很高。然而，三葉青地下塊根生長緩慢，加上人為的過度開發(fā)，使野生三葉青瀕臨滅絕。因此，為了使具有優(yōu)質(zhì)藥效的三葉青可以實(shí)現(xiàn)規(guī)?；a(chǎn)，其藥性可以得到充分的開發(fā)利用，現(xiàn)對三葉青的種質(zhì)資源、有效成分、藥理作用及臨床應(yīng)用進(jìn)行綜述。

1.三葉青的種質(zhì)資源

目前，由于三葉青藥用價(jià)值日益提高，市場需求量逐漸擴(kuò)增，而三葉青藥用部位地下塊根生長緩慢，人工栽培技術(shù)體系還不夠完善，造成三葉青資源緊缺。充分保護(hù)利用現(xiàn)有野生資源，培養(yǎng)高質(zhì)量高產(chǎn)量的人工三葉青，是豐富三葉青種質(zhì)資源亟待解決的。

1.1 三葉青的資源分布

三葉青多分布在我國南部地區(qū)，主要分布于浙江、廣西、江西。其多生長在蔭蔽度較高的山谷、灌叢等腐殖質(zhì)處，生長情況與溫度、光照、蒸騰作用等多種因素密切相關(guān)。

1.2 三葉青的栽培技術(shù)

為了提高三葉青的產(chǎn)量，科研工作者根據(jù)三葉青的形態(tài)結(jié)構(gòu)、生長條件等方面提高人工快繁優(yōu)質(zhì)三葉青的栽培技術(shù)。王靜等[1]發(fā)現(xiàn)帶腋芽上端半木質(zhì)化莖段作為外植體建立的三葉青高效繁殖體系，適合其規(guī)?；耘唷Ｊ非逵2]通過實(shí)驗(yàn)確定三葉青外植體組織培養(yǎng)的最佳條件。彭昕等[3]建立的三葉青愈傷組織顆粒狀懸浮培養(yǎng)體系，可以極大地縮短生產(chǎn)周期。陸飛彪等[4]發(fā)現(xiàn)在培養(yǎng)基中添加天然有機(jī)物培養(yǎng)三葉青愈傷組織可以提高培養(yǎng)物總黃酮的含量，證明了采用組織培養(yǎng)技術(shù)提高三葉青總黃酮產(chǎn)量的可行性。余樂等[5]通過測定12 批浙產(chǎn)三葉青，得出三葉青水分、總灰分、浸出物及活性成分的限度標(biāo)準(zhǔn)建議，崔偉亮等[6]得出70%乙醇是三葉青粉浸出物的最佳提取溶劑，為三葉青質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)控制提供建議。

2.三葉青提取物的藥理作用及機(jī)制

2.1 抗腫瘤作用及機(jī)制

三葉青提取物抗腫瘤效果好，機(jī)制各不相同，主要通過抑制腫瘤細(xì)胞增殖，促進(jìn)其凋亡或通過提高機(jī)體的免疫力，增強(qiáng)藥物敏感性來降低腫瘤細(xì)胞的存活率，達(dá)到抗腫瘤作用。

2.1.1 乙酸乙酯提取物抗腫瘤 三葉青乙酸乙酯提取物（ethyl acetateextract, EAE）可以誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，抑制肺癌、腸癌、肝癌等多種腫瘤的生長。李華美等[7]的研究發(fā)現(xiàn)三葉青EAE 可能是通過上調(diào)凋亡蛋白bax、caspaseˉ3 的表達(dá)對荷瘤小鼠Lewis 肺癌細(xì)胞生長起抑制作用，高劑量處理組抑瘤效果更好。林霜等[8]的研究也證實(shí)三葉青EAE 可以通過激活caspaseˉ3 表達(dá)，誘導(dǎo)結(jié)腸癌HT29 細(xì)胞凋亡。WANG 等[9]發(fā)現(xiàn)三葉青EAE 可以通過線粒體途徑介導(dǎo)的Caspase 依賴性誘導(dǎo)HepG2 細(xì)胞凋亡。

2.1.2 水提取物抗腫瘤 三葉青的水提物也有較好的抗腫瘤作用。丁麗等[10]發(fā)現(xiàn)三葉青水提物對人宮頸癌Hela229 細(xì)胞和人惡性黑色素瘤A375 細(xì)胞有增殖抑制作用，與濃度相關(guān)。袁雨等[11]通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)三葉青水提取物能通過促進(jìn)NK 細(xì)胞增殖，增強(qiáng)其殺傷胃癌BGCˉ823 細(xì)胞活性，并猜測此現(xiàn)象可能與三葉青水提取物使NK 細(xì)胞PFP、GraB 和CD107a 表達(dá)上調(diào)相關(guān)。

2.1.3 石油醚提取物抗腫瘤 丁麗等[12]篩選三葉青不同溶劑萃取部分對不同腫瘤細(xì)胞進(jìn)行體外抑制作用，發(fā)現(xiàn)石油醚部位提取物對AGS 細(xì)胞和5637 細(xì)胞均有較強(qiáng)的體外抑制作用，且有一定的濃度依賴，確定其為三葉青發(fā)揮抗腫瘤作用主要活性部位。同樣的，熊艷等[13]研究了三葉青石油醚萃取物對Hela 細(xì)胞的作用，石油醚萃取物通過阻滯hela細(xì)胞周期在G2/M期，影響酶活性變化，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，且與時(shí)間和劑量相關(guān)。

3.其他藥理作用及機(jī)制

三葉青同時(shí)還還具有明顯的抗炎解熱、保肝、抗病毒、抑菌等作用。如邢倩等[14]發(fā)現(xiàn)三葉青中牡荊苷可通過激活Nrf2 轉(zhuǎn)錄因子發(fā)揮抗炎作用；楊雄志等[15]發(fā)現(xiàn)三葉青提取物可以明顯下調(diào)下丘腦5ˉ羥色胺（5ˉHT）、去甲腎上腺素（NE）、多巴胺（DA）含量進(jìn)行體溫調(diào)節(jié)的機(jī)制，也研究[16]證明了三葉青多糖能降低肝損傷小鼠血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）、丙二醛（MDA）水平以及提高超氧化物歧化酶（SOD）水平而起到保肝作用；董宜旋[17]、周武[18]、許海順[19]、熊艷等分別研究發(fā)現(xiàn)三葉青抗病毒、化感自毒，抗氧化、抑菌作用。何文等[21]試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)三葉青乙酸乙酯提取物抗氧化能力最強(qiáng)。

4.總結(jié)與展望

三葉青雖為中國傳統(tǒng)中藥，早在治療小兒發(fā)熱、肺炎等方面有應(yīng)用，但遺憾的是三葉青至今未被《中國藥典》收錄，關(guān)于其植物基原也未有官方定性，將三葉青收錄，納入行政管理范疇，更有利于三葉青藥性的規(guī)范開發(fā)和臨床的治療應(yīng)用[21]。三葉青不同部位提取物的成分尚未完全鑒定，其活性成分和抗腫瘤作用機(jī)制仍不明確，限制了其在臨床的使用。三葉青作為天然植物，本身基本無毒，盡管不能完全根治腫瘤，但能有效緩解腫瘤帶來的疼痛，調(diào)節(jié)免疫力，降低化療所產(chǎn)生的副作用，被譽(yù)為“植物抗生素”。因此，對于三葉青藥性及機(jī)制的繼續(xù)研究非常具有臨床意義。