Th9細(xì)胞分化及與炎癥性腸病關(guān)系的研究進(jìn)展

趙院霞,申慧琴

【提要】 炎癥性腸病(IBD)是一組病因復(fù)雜、機(jī)制未明的慢性非特異性自身免疫性疾病，發(fā)病與基因易感、腸道微生態(tài)失衡、腸黏膜屏障功能受損、腸道固有性和獲得性免疫調(diào)節(jié)紊亂等有關(guān)。Th9細(xì)胞作為新發(fā)現(xiàn)的免疫細(xì)胞，被證實(shí)與多種自身免疫性疾病相關(guān)，白細(xì)胞介素-9(IL-9)是其分泌的細(xì)胞因子，針對(duì)IL-9抗體的研究可能是IBD治療的新靶點(diǎn)。本文就近年來(lái)關(guān)于Th9細(xì)胞分化和表達(dá)IL-9的研究及他們與炎癥性腸病之間的關(guān)系作一綜述，以闡明其在炎癥性腸病發(fā)病中的作用。

炎癥性腸病(inflammatory bowel disease，IBD)是一組病因?qū)W未明的慢性非特異性腸道炎性疾病，目前大部分研究者將其歸為自身免疫性疾病，主要包括潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)和克羅恩病(Crohn′s disease，CD)。既往在西方國(guó)家發(fā)病率較高，近年來(lái)流行病學(xué)數(shù)據(jù)顯示我國(guó)發(fā)病率呈上升趨勢(shì)[1]。炎癥性腸病的病因比較復(fù)雜，容易復(fù)發(fā)，發(fā)病可能為遺傳、環(huán)境或腸道微生態(tài)、免疫等相互作用。發(fā)病機(jī)制的研究有利于闡明炎癥性腸病的疾病過(guò)程，尋找新的診治靶點(diǎn)，為患者制定更有利的治療方案，減輕社會(huì)負(fù)擔(dān)。

免疫系統(tǒng)在IBD發(fā)病中起到重要作用，外界環(huán)境的刺激導(dǎo)致腸黏膜屏障功能受損，腸道內(nèi)的免疫細(xì)胞接受到外來(lái)抗原刺激，激發(fā)固有免疫和獲得性免疫。其中巨噬細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞和固有淋巴細(xì)胞作為識(shí)別抗原的免疫細(xì)胞發(fā)揮作用，向T細(xì)胞和B細(xì)胞呈遞抗原信息，完成免疫反應(yīng)過(guò)程清除抗原。原始的T細(xì)胞在不同的細(xì)胞因子作用下可分化為不同的T細(xì)胞亞群，包括Th1、Th2、Th17、Th22、Th9細(xì)胞以及Treg細(xì)胞等[2]。不同的T細(xì)胞亞群通過(guò)其特有的途徑發(fā)揮免疫功能。大量研究證實(shí)IBD與Th1、Th2、Th17參與的免疫調(diào)節(jié)有關(guān)，Th9細(xì)胞作為新近發(fā)現(xiàn)的CD4+T細(xì)胞亞群之一，研究表明與IBD發(fā)病有關(guān)[3]，本文就Th9細(xì)胞相關(guān)的分化影響因子及其在IBD發(fā)病中的作用進(jìn)行綜述。

1 Th9細(xì)胞的產(chǎn)生

初始Th0細(xì)胞在不同環(huán)境信號(hào)的刺激下可分化為具有不同功能和特征的亞群，正如Th1分泌干擾素γ(interferon-γ， IFN-γ)、Th2分泌白細(xì)胞介素-4(interleukin-4，IL-4)、Th17分泌IL-17，Th9分化也不例外。研究表明，Th0細(xì)胞在IL-4和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(transforming growth factor-β，TGF-β)聯(lián)合誘導(dǎo)下出現(xiàn)一種分泌IL-9的不同于現(xiàn)有T淋巴細(xì)胞亞群作用的細(xì)胞，根據(jù)其分泌IL-9的特性，命名為T(mén)h9細(xì)胞[4]，IL-9是其標(biāo)志性的細(xì)胞因子。也有文獻(xiàn)報(bào)道在IL-4存在的條件下，Th9細(xì)胞也可由TGF-β作用于Th2細(xì)胞，由Th2細(xì)胞分化而來(lái)[5]。

2 Th9細(xì)胞分化

自從Th9細(xì)胞被報(bào)道以來(lái)，研究證實(shí)影響Th9細(xì)胞分化的主要轉(zhuǎn)錄因子有富含嘌呤盒1(purine-rich box1, PU.1)、干擾素調(diào)節(jié)因子4(interferon regulatory factor 4, IRF4)和轉(zhuǎn)錄因子GATA結(jié)合蛋白3(GATA-binding protein-3, GATA3)[6]，但這些轉(zhuǎn)錄因子并不是Th9所特有的。大量的細(xì)胞因子被證實(shí)與Th9分化有關(guān)，如腫瘤壞死因子家族OX40配體(OX40 ligand, OX40L)、糖皮質(zhì)激素誘導(dǎo)的腫瘤壞死因子受體配體(glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor ligand，GITRL)、腫瘤壞死因子樣配體1A(tumor necrosis factor ligand-related molecule-1A，TL1A)[7]、白介素相關(guān)因子(IL-25、IL-33、IL-1、IL-6、IL-10、IL-21)[8]、一氧化氮(NO)[9]、降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)[8]等。這表明了Th9細(xì)胞分化的復(fù)雜性及多調(diào)節(jié)性。一些細(xì)胞因子可以直接作用于IL-9基因的啟動(dòng)子部位發(fā)揮其促進(jìn)或者抑制IL-9產(chǎn)生的作用，如初始T細(xì)胞經(jīng)Toll樣受體2(Toll-like receptors 2，TLR2)共刺激分子刺激活化后能顯著調(diào)節(jié)IL-9基因，上調(diào)PU.1和B細(xì)胞激活轉(zhuǎn)錄因子(B-cell-activating transcription factor, BATF)表達(dá)從而增強(qiáng)Th9的分化和功能[10]；另一些細(xì)胞因子則需通過(guò)IL-4及TGF-β的下游通路[轉(zhuǎn)錄因子STAT(signal transducer and activator of transcription, STAT)通路及SMAD蛋白通路]發(fā)揮作用。

2.1 TLIA與Th9細(xì)胞分化

TL1A作為腫瘤壞死因子超家族的一員，被多項(xiàng)研究證實(shí)與Th9的分化密切相關(guān)[11-13]。TL1A及其受體DR3死亡受體(death receptor3，DR3)傳導(dǎo)通過(guò)IL-2相關(guān)的STAT5通路發(fā)揮增強(qiáng)Th9的分化及其在過(guò)敏性肺疾病和眼部炎癥中的致病性的作用；其中TL1A可以間接增強(qiáng)STAT5的活性[13]。TL1A-DR3還作為共刺激因子通過(guò)自分泌IL-2和STAT5誘導(dǎo)了不同于IL-4和TGF-β的Th9分化途徑[12，13]；除此之外，在Th9條件下，TL1A還通過(guò)增強(qiáng)BATF、BATF3和IFR4與IL-9基因啟動(dòng)子的結(jié)合，從而誘導(dǎo)IL-9基因表達(dá)[14]。將Th9-TL1A細(xì)胞轉(zhuǎn)移至Rag1小鼠的實(shí)驗(yàn)證實(shí)，與單獨(dú)轉(zhuǎn)移Th9細(xì)胞的相比，觀察到嚴(yán)重的腸道及肺部炎癥，使用抗IL-9抗體后炎癥減輕[14]。提示Th9-TL1A細(xì)胞在體內(nèi)具有高致病性，并且這種致病性可能依賴(lài)于IL-9的表達(dá)。以上結(jié)果表明TL1A有多種信號(hào)通路來(lái)促進(jìn)Th9分化和分泌，IL-9則是發(fā)揮其導(dǎo)致炎癥作用的關(guān)鍵細(xì)胞因子。除TL1A外OX40L、GITRL、Fas作為腫瘤壞死因子家族成員也對(duì)Th9分化具有促進(jìn)作用。其中Fas信號(hào)通過(guò)鈣離子活化蛋白激酶C(protein kinaseCβ，PKCβ)，而PKCβ進(jìn)一步激活核轉(zhuǎn)錄因子κB(nuclear factor kappa-B，NF-κB)通路來(lái)促進(jìn)產(chǎn)生IL-9的T細(xì)胞的表達(dá)[15]。

2.2 IL與Th9細(xì)胞分化

IL-25、IL-33、IL-1以NF-κB依賴(lài)的方式增強(qiáng)Th9細(xì)胞分化產(chǎn)生IL-9。同時(shí)Th9分化過(guò)程也產(chǎn)生IL-10、IL-13。另一項(xiàng)新近研究報(bào)道了IL-36γ激活髓樣分化因子(myeloiddifferentiationfactor88，MyD88)和NF-κB p50，誘導(dǎo)產(chǎn)生IL-9的CD4+T細(xì)胞，同時(shí)有效抑制了表達(dá)叉頭框蛋白P3(forkhead box P3，F(xiàn)oxp3)的調(diào)節(jié)性T細(xì)胞(Treg)的發(fā)育[16]，這表明了IL-36γ可能對(duì)Th9細(xì)胞和Treg細(xì)胞之間的轉(zhuǎn)化有調(diào)節(jié)作用，對(duì)其進(jìn)行控制可能影響相關(guān)疾病的嚴(yán)重程度；IL-36γ也可以依賴(lài)于IL-2-STAT5和IL-4-STAT6途徑促進(jìn)Th9的分化，其中STAT5被認(rèn)為是不可或缺的。實(shí)驗(yàn)表明IL-2不僅可以通過(guò)IL-2-JAK3-STAT5直接調(diào)節(jié)IL-9的表達(dá)，還可以通過(guò)降低B細(xì)胞淋巴瘤6(BCL6)表達(dá)來(lái)間接促進(jìn)IL-9產(chǎn)生，而IL-21可以誘導(dǎo)BCL6的表達(dá)，借助BCL6發(fā)揮抑制Th9分化的作用[17]。這些結(jié)果表明，IL-2和IL-21這兩種γc家族細(xì)胞因子在Th9分化中起著平衡作用，而且這種平衡作用的機(jī)制可能與BCL6和STAT5/STAT6位點(diǎn)的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合有關(guān)[15]。IL-2/IL-21對(duì)Th17細(xì)胞調(diào)節(jié)與Th9不同，IL-2抑制Th17細(xì)胞分化，而IL-21促進(jìn)其分化[15]，這進(jìn)一步提示輔助性T細(xì)胞亞群之間存在互相調(diào)節(jié)的機(jī)制。

2.3 NO與Th9細(xì)胞分化

NO作為一種自由基，其水平升高與胃腸道炎癥有關(guān)[18]。Niedbala等[9]進(jìn)行PCR分析證實(shí)NO加強(qiáng)IL-9基因的表達(dá)，減弱IL-17a的表達(dá)；進(jìn)一步體外研究表明NO以抗原特異性和多克隆水平有效地促進(jìn)了鼠和人Th9細(xì)胞的發(fā)育，使用抗體中和IL-2后這種促進(jìn)作用被完全阻斷，提示NO對(duì)Th9的作用機(jī)制。而NO對(duì)IL-2合成的機(jī)制研究表明NO通過(guò)亞硝基化Mdm2的半胱氨酸和阻斷Mdm2-p53的結(jié)合來(lái)增強(qiáng)p53的表達(dá)，進(jìn)而增強(qiáng)IL-2的表達(dá)，發(fā)揮其促進(jìn)Th9分化的作用。細(xì)胞外三磷酸腺苷(eATP)通過(guò)誘導(dǎo)NO產(chǎn)生增強(qiáng)缺氧誘導(dǎo)因子1α(hypoxia-Inducible Factor 1-Alpha，HIF-1α)介導(dǎo)的代謝途徑，達(dá)到誘導(dǎo)Th9細(xì)胞的分化的作用[19]。此外，NO對(duì)IL-2、STAT5及IRF4表達(dá)的調(diào)節(jié)提示關(guān)于Th9分化的影響因子之間互相具有調(diào)節(jié)作用，更說(shuō)明各因子對(duì)Th9分化的調(diào)節(jié)具有既獨(dú)立又交叉的特點(diǎn)。目前大多數(shù)的研究都是基于IL-4和TGF-β為條件所誘導(dǎo)產(chǎn)生的Th9細(xì)胞，Xue等[20]首次證實(shí)了TGF-β信號(hào)是可被取代的，IL-1β可以替代其與IL-4聯(lián)合促進(jìn)Th9細(xì)胞的分化，其中NF-κB途徑對(duì)其產(chǎn)生IL-9至關(guān)重要，同時(shí)發(fā)現(xiàn)一種新的Th9細(xì)胞Th9IL-4+IL-1β cells。與經(jīng)典的TGF-β誘導(dǎo)的Th9細(xì)胞不同，但作用相同，對(duì)于Th9細(xì)胞的分化提供新的方向，同時(shí)因其優(yōu)于經(jīng)典的Th9細(xì)胞抗腫瘤活性，為腫瘤治療提供潛在的新方向。

IL-4為T(mén)h2細(xì)胞的標(biāo)志細(xì)胞因子，同時(shí)也是誘導(dǎo)Th9細(xì)胞產(chǎn)生的必備因子，而且Th9細(xì)胞的主要轉(zhuǎn)錄因子同時(shí)表達(dá)于Th2細(xì)胞，提示Th2細(xì)胞與Th9細(xì)胞之間存在關(guān)聯(lián)。然而，自從Th9細(xì)胞被單獨(dú)命名以來(lái)，各項(xiàng)研究并未發(fā)現(xiàn)其獨(dú)特的譜系轉(zhuǎn)錄因子，而是由多個(gè)轉(zhuǎn)錄因子共同作用的。因此關(guān)于Th9細(xì)胞是否為獨(dú)立的亞群還是作為中間細(xì)胞的爭(zhēng)論一直存在。最新的研究，Abdelazi MH等[5]進(jìn)行了一項(xiàng)關(guān)于Th2和Th9細(xì)胞關(guān)聯(lián)的研究證實(shí)，體外誘導(dǎo)培養(yǎng)Th9細(xì)胞時(shí)，在IL-4 30 ng/mL和TGF-β 5ng/mL濃度下，Th9細(xì)胞在第5天達(dá)到峰值，并觀察到第3天出現(xiàn)Th2細(xì)胞，隨后在TGF-β和IL-4共同作用下分化為T(mén)h9細(xì)胞。表明Th2細(xì)胞作為中間體在Th9細(xì)胞分化過(guò)程中起重要作用。在這個(gè)過(guò)程中伴有轉(zhuǎn)錄因子IRF4表達(dá)增加。該研究從另一方面闡釋了Th9細(xì)胞的產(chǎn)生機(jī)制及其與Th2細(xì)胞之間的相互關(guān)系，并對(duì)推測(cè)可能的機(jī)制與IRF4增加有關(guān)，為研究Th9細(xì)胞的歸屬提供了新思路。

細(xì)胞因子之間的作用既共同又獨(dú)立。大多數(shù)的細(xì)胞因子對(duì)Th9細(xì)胞分化的影響均與IL-2介導(dǎo)STAT5磷酸化及IL-4介導(dǎo)的STAT6磷酸化機(jī)制有關(guān)，而且很多因子可以同時(shí)通過(guò)這兩條通路發(fā)揮其作用，這提示我們細(xì)胞因子環(huán)境信號(hào)的一致性，他們發(fā)揮作用不是孤立的，互相之間存在共同通路。但是也有特例，一項(xiàng)研究表明Fas誘導(dǎo)的Th9細(xì)胞分化與IL-2無(wú)關(guān)[15]，這提示我們細(xì)胞分化調(diào)節(jié)的差異性。

3 IL-9的表達(dá)

IL-9作為一種細(xì)胞因子早在1988年被發(fā)現(xiàn)，早期研究多考慮其作為T(mén)h2型細(xì)胞因子參與免疫反應(yīng)，與過(guò)敏性疾病、自身免疫性疾病和腫瘤相關(guān)。2008年以后被證實(shí)主要由Th9細(xì)胞產(chǎn)生[4]。IL-9通過(guò)與受體結(jié)合發(fā)揮作用，IL-9受體(IL-9 receptor, IL-9R)在肥大細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、氣道上皮細(xì)胞、自然殺傷細(xì)胞等細(xì)胞廣泛表達(dá)。IL-9是一種相對(duì)分子質(zhì)量14 kD的糖蛋白，其基因分別在人類(lèi)和鼠的第5號(hào)、第13號(hào)染色體上。IL-9與其受體結(jié)合后激活JAK1、JAK3，促進(jìn)下游的STAT1、STAT5、STAT3磷酸化，形成二聚體進(jìn)入細(xì)胞啟動(dòng)相關(guān)基因的轉(zhuǎn)錄來(lái)發(fā)揮其免疫調(diào)節(jié)作用[21]。

4 Th9細(xì)胞/IL-9與炎癥性腸病

人體免疫細(xì)胞面對(duì)疾病抗原時(shí)具有進(jìn)行抗原的識(shí)別和清除功能，同時(shí)免疫系統(tǒng)存在自我調(diào)節(jié)機(jī)制，當(dāng)機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)機(jī)制被打破后就出現(xiàn)免疫失衡，免疫細(xì)胞不能再識(shí)別自己，不被控制的免疫反應(yīng)持續(xù)存在進(jìn)而導(dǎo)致了一種關(guān)于免疫的疾病，稱(chēng)為自身免疫性疾病，涉及到人體的各個(gè)器官。IBD作為自身免疫性疾病的一種，主要分為UC和CD兩種，特征為慢性反復(fù)的腸道炎癥。目前，慢性腸道炎癥已經(jīng)在世界范圍內(nèi)得到重視，但是UC和CD臨床癥狀是有區(qū)別的，其中UC的常見(jiàn)癥狀為持續(xù)或反復(fù)發(fā)作的腹瀉、黏液膿血便伴腹痛，主要累及直腸和結(jié)腸，病變多連續(xù)性，彌漫分布；組織病理學(xué)除炎性細(xì)胞浸潤(rùn)外，以形成隱窩膿腫為典型表現(xiàn)；CD的常見(jiàn)癥狀為腹瀉、腹痛、體重減輕，病變可累及小腸，組織病理學(xué)以局灶性的慢性炎癥、局灶性隱窩結(jié)構(gòu)異常和非干酪樣肉芽腫為主要表現(xiàn)[22]。

炎癥性腸病病因復(fù)雜，既往研究表明該病與腸黏膜免疫細(xì)胞密切相關(guān)，過(guò)去已被證實(shí)的Th1和Th17亞群與CD有關(guān)，Th2和UC有關(guān)。Th9細(xì)胞作為一種新的T細(xì)胞亞群，以產(chǎn)生高水平的IL-9為特征，IL-9信號(hào)是黏膜免疫的關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)因子[23-24]。一方面與多種自身免疫性疾病的發(fā)病相關(guān)，包括實(shí)驗(yàn)性自身免疫性腦脊髓炎、過(guò)敏性炎癥和IBD有關(guān)[25]；另一方面它最近被報(bào)道了抗腫瘤的特性及在寄生蟲(chóng)感染的保護(hù)作用[26]。Th9細(xì)胞在不同環(huán)境中可以發(fā)揮致病和保護(hù)的兩種作用，這些作用的具體機(jī)制及同一環(huán)境中T細(xì)胞亞群之間相互作用不明，進(jìn)一步明確這些作用機(jī)制有利于一系列相關(guān)疾病的控制。基于Th9細(xì)胞所表現(xiàn)出的促炎和抗炎兩種相反作用，Stanko等[27]人研究發(fā)現(xiàn)CD96可以控制細(xì)胞因子和Th9細(xì)胞誘導(dǎo)結(jié)腸炎的潛能，CD96表達(dá)高低不同的Th9細(xì)胞可發(fā)揮不同的功能，他們認(rèn)為T(mén)h9細(xì)胞包含有不同的子集，每個(gè)獨(dú)立的子集發(fā)揮出Th9細(xì)胞的一部分作用，其中確定了CD96高Th9細(xì)胞和CD96低Th9細(xì)胞，CD96低的Th9細(xì)胞產(chǎn)生更高水平的IL-9，促進(jìn)嗜酸性粒細(xì)胞聚集導(dǎo)致腸道炎癥?，F(xiàn)有多項(xiàng)研究已經(jīng)證實(shí)IL-9在IBD患者和結(jié)腸炎模型中生物學(xué)作用[28-30]。

4.1 炎癥性腸病患者中Th9/IL-9的表達(dá)

對(duì)IBD患者的研究顯示，與對(duì)照組相比，UC患者活動(dòng)期腸黏膜活檢組織中IL-9 mRNA的表達(dá)水平增高，并且炎癥越嚴(yán)重水平越高[30]。免疫組化分析顯示相比于對(duì)照組，活動(dòng)期UC患者腸黏膜表達(dá)更多的產(chǎn)生IL-9的T細(xì)胞[31]。同時(shí)觀察到CD患者腸黏膜和對(duì)照組比較后表達(dá)IL-9的細(xì)胞被誘導(dǎo)表達(dá)，盡管其差異無(wú)明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)意義?；顒?dòng)期CD患者血清分析顯示高水平的IL-9表達(dá)，IL-9表達(dá)水平與疾病的嚴(yán)重程度明顯相關(guān)[32]。以上這些證明了IL-9在IBD的起病及發(fā)展過(guò)程起著重要作用。

不僅如此，UC患者腸黏膜固有層中存在表達(dá)IL-9和PU.1的CD4+T細(xì)胞。轉(zhuǎn)錄因子IRF4和PU.1對(duì)于Th9細(xì)胞分化表達(dá)IL-9至關(guān)重要，研究表明這兩種轉(zhuǎn)錄因子隨著UC炎癥的嚴(yán)重程度的增加而表達(dá)增強(qiáng)[31]。進(jìn)一步研究IL-9在IBD患者中的作用靶點(diǎn)顯示IL-9R在IBD患者腸上皮細(xì)胞中表達(dá)升高[29]，IL-9R過(guò)度表達(dá)在功能上與UC中的抗凋亡信號(hào)相關(guān)[24]，而且傷口愈合實(shí)驗(yàn)顯示高表達(dá)的IL-9抑制黏膜的愈合[33]。IL-9和其受體結(jié)合后可以誘導(dǎo)UC患者腸上皮細(xì)胞STAT5磷酸化，這與STAT5磷酸化對(duì)Th9細(xì)胞分化誘導(dǎo)的研究結(jié)果一致[13]。Tian等[34]證明IL-9可以增強(qiáng)腸屏障claudin2表達(dá)，通過(guò)STAT3/細(xì)胞因子信號(hào)傳導(dǎo)3(SOCS3)促進(jìn)UC的發(fā)病。這些研究表明IL-9可能通過(guò)對(duì)腸黏膜屏障功能的影響促進(jìn)IBD的發(fā)生、發(fā)展。另一項(xiàng)報(bào)道稱(chēng)UC患者腸活檢標(biāo)本中IL-9蛋白過(guò)度表達(dá)，并且與IRF4和Smad3呈正相關(guān)[35]。

4.2 實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎模型中Th9/IL-9的表達(dá)

Th9細(xì)胞和IL-9在各種實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎小鼠的腸道中被發(fā)現(xiàn)表達(dá)。三硝基苯磺酸結(jié)腸炎(TNBS)誘導(dǎo)的結(jié)腸炎模型(模擬CD)中IL-9缺陷型小鼠的炎癥較輕，對(duì)其轉(zhuǎn)錄因子PU.1的研究表明在IL-9缺陷型小鼠中表達(dá)較少，與噁唑酮誘導(dǎo)的結(jié)腸炎中IL-9基因缺陷小鼠的結(jié)果一致[29，31]。兩種結(jié)腸炎模型中均證實(shí)存在Th9細(xì)胞及IL-9的受體。對(duì)TNBS小鼠的緊密連接分子進(jìn)行基因分析顯示缺乏IL-9刺激時(shí)Claudin1表達(dá)下調(diào)，Occludin上調(diào)而Claudin2表達(dá)無(wú)差異[36]，這與UC患者和噁唑酮誘導(dǎo)的結(jié)腸炎中緊密連接蛋白的表達(dá)不同，這種屏障蛋白的差異性選擇表達(dá)可能是IL-9在IBD疾病過(guò)程的致病作用。使用TL1A過(guò)表達(dá)小鼠構(gòu)建葡聚糖硫酸鈉(DSS)誘導(dǎo)的結(jié)腸炎模型，與對(duì)照組相比，TL1A過(guò)表達(dá)導(dǎo)致Occludin和Claudin1表達(dá)水平下降，證實(shí)了TL1A對(duì)腸黏膜屏障蛋白的抑制作用，伴有Th9細(xì)胞分化增多，IL-9表達(dá)增加，與之前的研究相符[11]。

其他研究強(qiáng)調(diào)了腸道黏膜中Th9和IL-9的表達(dá)，DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎模型取得了和TNBS噁唑酮模型相同的結(jié)果，中和IL-9信號(hào)使得結(jié)腸炎小鼠的炎癥減輕。另外，與野生型相比，IL-9缺陷型的小鼠體重減輕較少，炎癥相對(duì)較輕[29，36]。據(jù)報(bào)道小鼠實(shí)驗(yàn)證明CD96表達(dá)可以抑制IL-9的產(chǎn)生，阻斷CD96可能加重小鼠結(jié)腸炎，但是需要進(jìn)一步研究其通路[27]。最新的一項(xiàng)過(guò)繼轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)表明轉(zhuǎn)移IL-9過(guò)表達(dá)幼稚T細(xì)胞后加重了小鼠的結(jié)腸炎并伴有炎癥標(biāo)記物表達(dá)的增加[37]，進(jìn)一步證實(shí)了IL-9在腸道炎癥中的不利方面。不表達(dá)IL9受體的CD4+CD45Rb高(原始)T淋巴細(xì)胞過(guò)繼后炎癥被IL-9加劇，證明了IL-9可以直接作用于T細(xì)胞，不發(fā)生與受體的結(jié)合而起作用，但需在體內(nèi)經(jīng)抗原刺激后獲得對(duì)CD44和IL-9的反應(yīng)性[37]，這一結(jié)果為IL-9在炎癥中調(diào)節(jié)T細(xì)胞的機(jī)制提供新的方向。

4.3 IL-9抗體的應(yīng)用

Th9細(xì)胞及IL-9在IBD患者及多個(gè)實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎模型表達(dá)增多，其表達(dá)的增加與炎癥嚴(yán)重程度正相關(guān)，在DSS結(jié)腸炎小鼠中應(yīng)用IL-9抗體的實(shí)驗(yàn)證實(shí)與注射鹽水作為對(duì)照的小鼠相比2周后注射IL-9抗體的小鼠結(jié)腸炎癥減輕[38]，因此我們推斷阻斷IL-9的表達(dá)有助于減輕炎癥的嚴(yán)重程度。雖然目前關(guān)于IL-9抗體應(yīng)用的研究多集中在動(dòng)物模型上，但是通過(guò)拮抗IL-12/IL-23發(fā)揮作用的新型生物制劑優(yōu)特克單抗(ustekinumab)已經(jīng)應(yīng)用于炎癥性腸病患者。因此IL-9抗體有望成為另一種結(jié)腸炎癥治療的新療法，這需要進(jìn)一步從基礎(chǔ)到臨床的研究。

5 結(jié)語(yǔ)

IL-9作為一種細(xì)胞因子早在20年前已被發(fā)現(xiàn)，而Th9細(xì)胞則在10年前被正式認(rèn)知，在過(guò)去的數(shù)十年里，大量研究證實(shí)其與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)，導(dǎo)致多種自身免疫性疾病涉及到腦、肺、腸道等組織。Th9細(xì)胞和IL-9已經(jīng)確定對(duì)炎癥性腸病的致病作用，而多種細(xì)胞因子可以調(diào)節(jié)Th9細(xì)胞分化，這些細(xì)胞因子調(diào)節(jié)Th9細(xì)胞分化或表達(dá)的同時(shí)也影響Th9細(xì)胞作用于炎癥性腸病的致病過(guò)程，針對(duì)性的抑制或者促進(jìn)這些細(xì)胞因子的功能可以影響炎癥性腸病的炎癥水平。IL-9作為一種調(diào)節(jié)因子，其致病過(guò)程可能為抗原刺激各級(jí)免疫細(xì)胞分泌各種細(xì)胞因子通過(guò)影響Th9細(xì)胞分化和促進(jìn)或者抑制IL-9的表達(dá)，作用于炎癥性腸病患者和實(shí)驗(yàn)性結(jié)腸炎模型導(dǎo)致腸黏膜連接蛋白表達(dá)異常，通透性增加，進(jìn)而使得腸屏障受損，細(xì)菌移位導(dǎo)致疾病的發(fā)生。

近年來(lái)，關(guān)于炎癥性腸病治療的新型生物制劑開(kāi)發(fā)及應(yīng)用備受關(guān)注。我們已經(jīng)認(rèn)識(shí)Th9細(xì)胞和IL-9可能作為IBD的潛在新靶點(diǎn)，但是關(guān)于IL-9如何對(duì)腸上皮連接蛋白發(fā)揮作用的機(jī)制尚不明確以及體內(nèi)抗IL-9治療的不確定等一些問(wèn)題還有待進(jìn)一步研究。通過(guò)對(duì)Th9細(xì)胞及IL-9對(duì)IBD作用機(jī)制的深入研究，尋找新的作用靶點(diǎn)，有望為臨床患者制定新的治療方案，減輕病情，改善預(yù)后。