基于Wnt/β-catenin信號(hào)通路的中藥單體治療結(jié)直腸癌的作用機(jī)制研究進(jìn)展

徐曉華，吳煜

(中國(guó)中醫(yī)科學(xué)院西苑醫(yī)院腫瘤科，北京 100091)

結(jié)直腸癌是常見的消化系統(tǒng)惡性腫瘤。國(guó)際癌癥研究機(jī)構(gòu)的GLOBOCAN數(shù)據(jù)顯示，2020年預(yù)計(jì)全球腫瘤新發(fā)病例約1 930萬例，死亡病例約1 000萬例，其中結(jié)直腸癌占所有新發(fā)病例的10.0%，僅次于乳腺癌和肺癌，占所有死亡病例的9.4%，僅次于肺癌[1]。據(jù)國(guó)家癌癥中心數(shù)據(jù)顯示，2015年我國(guó)結(jié)直腸癌新發(fā)病例38.8萬例，死亡病例18.7萬例，其發(fā)病率和死亡率分別居惡性腫瘤的第3位和第5位[2]。目前，對(duì)于結(jié)直腸癌的治療，除了手術(shù)、化療、放療、靶向治療、免疫治療外，中醫(yī)藥治療也是重要的治療方式之一，其臨床應(yīng)用廣泛，既對(duì)癌前病變和復(fù)發(fā)轉(zhuǎn)移具有一定的預(yù)防作用，又能協(xié)同化療，提高化療完成率，減輕化療不良反應(yīng)，同時(shí)在腫瘤患者身體、心理、功能等方面的康復(fù)治療中也發(fā)揮核心作用[3]，但中藥化學(xué)成分復(fù)雜，作用機(jī)制多樣，缺乏一定的精準(zhǔn)性。

與傳統(tǒng)中草藥相比，中藥單體化學(xué)成分單一，用藥劑量小，作用機(jī)制明確，在基礎(chǔ)研究和新藥研發(fā)中具有一定優(yōu)勢(shì)。隨著醫(yī)學(xué)研究的深入，越來越多的中藥單體被發(fā)現(xiàn)對(duì)結(jié)直腸癌具有明確的作用，如白藜蘆醇[4]、粉防己堿[5]、姜黃素[6]等。Wnt/β聯(lián)蛋白(β-catenin)信號(hào)通路是腫瘤經(jīng)典的信號(hào)通路，Wnt家族通過轉(zhuǎn)錄輔激活因子β-catenin的信號(hào)通路調(diào)控胚胎發(fā)育和成人穩(wěn)態(tài)，并與先天畸形、癌癥、骨質(zhì)疏松等疾病相關(guān)[7]。根據(jù)是否存在β-catenin依賴性，Wnt信號(hào)通路可分為經(jīng)典和非經(jīng)典信號(hào)通路[8]，在已知的Wnt信號(hào)級(jí)聯(lián)反應(yīng)中，約90%的結(jié)直腸癌Wnt/β-catenin信號(hào)通路(經(jīng)典Wnt信號(hào)通路)發(fā)生突變[9]?，F(xiàn)就基于Wnt/β-catenin信號(hào)通路的中藥單體治療結(jié)直腸癌的作用機(jī)制研究進(jìn)展予以綜述，以期為中藥單體在結(jié)直腸癌的研究和應(yīng)用提供參考。

1 Wnt/β-catenin信號(hào)通路

Wnt蛋白是富含半胱氨酸的分泌糖蛋白，分子量約為40 000，可以調(diào)節(jié)Wnt/β-catenin信號(hào)通路核心介質(zhì)β-catenin的轉(zhuǎn)錄活性，是穩(wěn)定β-catenin的關(guān)鍵細(xì)胞外調(diào)節(jié)因子[10]。正常情況下，軸抑制蛋白(axis inhibition protein，AXIN)、結(jié)腸腺瘤性息肉病(adenomatous polyposis coli，APC)蛋白、酪蛋白激酶1α和糖原合成酶激酶-3β(glycogen synthase kinase-3β，GSK-3β)形成的破壞復(fù)合物(AXIN復(fù)合物)可以介導(dǎo)β-catenin磷酸化，進(jìn)而被蛋白酶體26S降解，而Wnt糖蛋白配體與Fzd(Frizzled)受體和低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5/6(low-density lipoprotein receptor-related protein 5/6，LRP5/6)形成的Wnt-Fzd-LRP5/6復(fù)合物可以將蓬亂蛋白轉(zhuǎn)移到質(zhì)膜，募集破壞復(fù)合物與受體結(jié)合進(jìn)而介導(dǎo)LRP5/6磷酸化，該過程抑制了β-catenin磷酸化，導(dǎo)致β-catenin發(fā)生胞質(zhì)積累和核轉(zhuǎn)運(yùn)，β-catenin在細(xì)胞核中取代輔阻遏物Groucho，與T細(xì)胞因子(T cell factor，TCF)/淋巴增強(qiáng)因子(lymphoid enhancer factor，LEF)結(jié)合從而激活Wnt依賴的基因表達(dá)[11]。

2 中藥單體抗結(jié)直腸癌的作用機(jī)制

2.1抑制腫瘤細(xì)胞增殖 白藜蘆醇是來源于葡萄、虎杖、桑葚等植物的多酚類物質(zhì)。王靜宇等[4]用100 ng/mL的白藜蘆醇處理結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞48 h，結(jié)果顯示細(xì)胞增殖被明顯抑制，其機(jī)制可能與抑制β-catenin及Wnt/β-catenin信號(hào)通路靶基因c-Myc和細(xì)胞周期蛋白D1(cyclinD1)的表達(dá)有關(guān)。袁霜雪等[12]發(fā)現(xiàn)，采用不同劑量(20、40、60、80、100 μmol/L)的白藜蘆醇干預(yù)結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞可以劑量依賴性地抑制其增殖；進(jìn)一步分析顯示，白藜蘆醇可以抑制TCF4/LEF報(bào)告質(zhì)粒的轉(zhuǎn)錄活性，減少β-catenin蛋白和信使RNA(messenger RNA，mRNA)的表達(dá)。劉映孜[13]發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇可以抑制結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞增殖，使細(xì)胞阻滯在G1期，其機(jī)制可能與白藜蘆醇降低磷酸化GSK-3β蛋白水平、β-catenin mRNA表達(dá)水平和β-catenin/TCF4轉(zhuǎn)錄活性，抑制Wnt/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)有關(guān)；此外，白藜蘆醇也可促進(jìn)細(xì)胞凋亡。

人參皂苷Rg3是從五加科植物人參中提取的一種四環(huán)三萜皂苷類物質(zhì)，在紅參中含量豐富，也可由人參皂苷Rb1、Rb2和Rd在一定條件下轉(zhuǎn)化而成[14]。車章洪和何百成[15]分別用40、60、100、150 μmol/L的人參皂苷Rg3作用于結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞72 h，發(fā)現(xiàn)藥物濃度在60 μmol/L時(shí)，細(xì)胞增殖被明顯抑制，且藥物濃度越高，抑制作用越強(qiáng)；熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒檢測(cè)和免疫熒光結(jié)果顯示，人參皂苷Rg3可能通過阻止β-catenin的核轉(zhuǎn)移而抑制β-catenin/TCF4轉(zhuǎn)錄活性和下游c-Myc蛋白的表達(dá)。何運(yùn)元等[16]發(fā)現(xiàn)，人參皂苷Rg3可以抑制結(jié)腸癌HCT116和SW480細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，降低β-catenin磷酸化程度及減少β-catenin、c-Myc蛋白的表達(dá)，表明人參皂苷Rg3通過調(diào)控Wnt/β-catenin信號(hào)通路發(fā)揮作用。

雷公藤紅素和雷公藤甲素是來自衛(wèi)矛科植物雷公藤的三萜類化合物和環(huán)氧二萜內(nèi)酯類化合物，兩者均可抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞生長(zhǎng)。王術(shù)人[17]發(fā)現(xiàn)，雷公藤紅素對(duì)結(jié)腸癌HCT116和SW480細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制具有時(shí)間和劑量依賴性，同時(shí)還可抑制腫瘤細(xì)胞克隆形成，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，且在C57BL/6J-ApcMin/+小鼠和氧化偶氮甲烷/葡聚糖硫酸鈉小鼠兩種結(jié)腸癌動(dòng)物模型中具有同樣的效果；機(jī)制研究顯示，雷公藤紅素通過增強(qiáng)熱激因子1的表達(dá)上調(diào)肝激酶B1的轉(zhuǎn)錄活性，肝激酶B1激活下游分子AMP活化蛋白激酶α，使Yes相關(guān)蛋白發(fā)生磷酸化，磷酸化的Yes相關(guān)蛋白進(jìn)一步促進(jìn)泛素化-蛋白酶體途徑對(duì)β-catenin的降解，從而抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路。劉娟娟[18]發(fā)現(xiàn)，雷公藤甲素可以使結(jié)腸癌HT29和SW480細(xì)胞發(fā)生G1期阻滯，抑制細(xì)胞增殖，且具有劑量和時(shí)間依賴性，其機(jī)制與雷公藤甲素抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路中β-catenin進(jìn)入細(xì)胞核，減少下游靶基因LEF/TCF表達(dá)，抑制細(xì)胞轉(zhuǎn)錄和翻譯有關(guān)。

粉防己堿又稱粉防己甲素，是提取自防己科植物粉防己的一種二芐基異喹啉類生物堿。王東旭等[5]和吳柯[19]發(fā)現(xiàn)，粉防己堿可以誘導(dǎo)結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞發(fā)生G1期阻滯，抑制細(xì)胞增殖，并通過過表達(dá)和沉默表達(dá)胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白5驗(yàn)證了粉防己堿對(duì)結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞的抑制與胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白5的下調(diào)有關(guān)；深入研究表明，粉防己堿可能通過促進(jìn)p53表達(dá)負(fù)性調(diào)控胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白5的表達(dá)，進(jìn)而干擾β-catenin/TCF轉(zhuǎn)錄活性和c-Myc的表達(dá)，抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路。劉映孜等[20]發(fā)現(xiàn)，粉防己堿可以抑制結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞增殖，其機(jī)制可能與粉防己堿抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路中LEF/TCF4和c-Myc/Max轉(zhuǎn)錄活性及β-catenin蛋白的表達(dá)有關(guān)。此外，粉防己堿還可誘導(dǎo)結(jié)腸癌細(xì)胞凋亡。

姜黃素是從姜科植物姜黃中提取的一種多酚化合物。Jiang等[6]發(fā)現(xiàn)，姜黃素可以劑量依賴性地抑制結(jié)腸癌SW620細(xì)胞的增殖，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，并通過沉默表達(dá)尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2，驗(yàn)證了姜黃素通過上調(diào)尾型同源盒轉(zhuǎn)錄因子2的表達(dá)而抑制β-catenin的核轉(zhuǎn)運(yùn)及Wnt3a和Wnt下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)基因[c-Myc、生存素(survivin)、cyclinD1]的表達(dá)。劉英等[21]證實(shí)，姜黃素可以通過降低磷酸化β-catenin和Wnt3a的蛋白水平抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路中cyclinD1、survivin、c-Myc的表達(dá)，使結(jié)腸癌HT29細(xì)胞發(fā)生G0/G1期阻滯，從而抑制細(xì)胞增殖。

Falcarindiol為五加科刺人參屬植物東北刺人參中的高含量炔醇化合物，其可以通過抑制Wnt/β-catenin通路中β-catenin、cyclinD1和c-Myc的表達(dá)，將結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞阻滯在G2/M期而抑制其細(xì)胞增殖[22]。另有研究顯示，馬錢子中分離出來的馬錢子堿亦可以通過上述途徑抑制結(jié)腸癌SW480細(xì)胞的增殖[23]。

熊果酸是存在于人參、夏枯草、冬凌草等多種植物中的五環(huán)三萜類化合物，也可見于水果和蔬菜中[24]。邵英等[25]發(fā)現(xiàn)，熊果酸可以呈劑量和時(shí)間依賴性地抑制結(jié)腸癌HCT116細(xì)胞的增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞發(fā)生G1期阻滯和細(xì)胞凋亡，并進(jìn)一步通過過表達(dá)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β3(transforming growth factor-β3，TGF-β3)和特異性抑制TGF-β3證實(shí)了熊果酸是通過下調(diào)TGF-β3表達(dá)，降低Wnt/β-catenin轉(zhuǎn)錄活性來發(fā)揮作用。

吳茱萸堿是源自蕓香科植物吳茱萸的一種生物堿。王元惠和周振華[26]研究發(fā)現(xiàn)，吳茱萸堿可以劑量依賴性地抑制結(jié)腸癌HT29細(xì)胞的增殖，將細(xì)胞阻滯在G0/G1期，其機(jī)制與吳茱萸堿減少Wnt和β-catenin mRNA的表達(dá)，進(jìn)而抑制Wnt/β-catenin下游血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)(VEGFA、VEGFB、VEGFC)和基質(zhì)金屬蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)(MMP-3、MMP-14)的表達(dá)有關(guān)。

和厚樸酚是木蘭科植物厚樸中的一種新木脂素類化合物。吳柯等[27]用不同劑量(10、12.5、15、17.5、20 μmol/L)的和厚樸酚作用于結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)隨著藥物劑量的升高，細(xì)胞增殖率明顯下降，同時(shí)和厚樸酚可以增強(qiáng)胱天蛋白酶(caspase)3蛋白的表達(dá)，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，且進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)和厚樸酚是通過抑制β-catenin/TCF4轉(zhuǎn)錄活性發(fā)揮作用。

漢黃芩素是從黃芩、半枝蓮等植物中提取的一種黃酮類化合物。李彥萍等[28]研究表明，漢黃芩素對(duì)結(jié)腸癌SW480細(xì)胞增殖的抑制具有劑量依賴性，可將細(xì)胞阻滯在G1期，借助網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)發(fā)現(xiàn)其機(jī)制與漢黃芩素調(diào)控Wnt/β-catenin信號(hào)通路相關(guān)蛋白β-catenin、survivin、GSK-3β和Bcl-2相關(guān)X蛋白的表達(dá)有關(guān)。

此外，二氫丹參酮[29]、青蒿琥酯[30]、冬凌草甲素[31]、小檗堿[32]均可以通過下調(diào)β-catenin和(或)c-Myc的表達(dá)抑制Wnt/β-catenin信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)來抑制結(jié)腸癌細(xì)胞的增殖。

2.2誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡 異補(bǔ)骨脂查爾酮是從豆科植物補(bǔ)骨脂中分離出的一種類黃酮類物質(zhì)。Li等[33]發(fā)現(xiàn)，異補(bǔ)骨脂查爾酮可以通過調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)蛋白(上調(diào)活化的caspase-3 、活化的多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶，下調(diào)Bcl-2/Bcl-2相關(guān)X蛋白、X連鎖凋亡抑制蛋白、survivin)的表達(dá)誘導(dǎo)結(jié)腸癌HCT116和SW480細(xì)胞細(xì)胞核形態(tài)改變，發(fā)生細(xì)胞凋亡，進(jìn)而抑制細(xì)胞生長(zhǎng)；進(jìn)一步研究表明，異補(bǔ)骨脂查爾酮是通過抑制蛋白激酶B/GSK-3β信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)促進(jìn)β-catenin降解，從而調(diào)控Wnt/β-catenin信號(hào)通路。

重樓皂苷Ⅶ是從百合科植物重樓中提取出的甾體皂苷類成分。陳鳴旺等[34]對(duì)結(jié)直腸癌小鼠腹腔注射重樓皂苷Ⅶ，通過對(duì)腫瘤組織進(jìn)行病理學(xué)檢查發(fā)現(xiàn)，重樓皂苷Ⅶ可以通過上調(diào)凋亡相關(guān)蛋白(活化的caspase-3、caspase-8、caspase-9和Bcl-2相關(guān)X蛋白)表達(dá)，下調(diào)Bcl-2表達(dá)來誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡；此外，重樓皂苷Ⅶ還可以干預(yù)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的表達(dá)，并抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路中β-catenin蛋白和八聚體結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子4、性別決定區(qū)Y框蛋白2、c-Myc、TCF4基因的表達(dá)。

藤黃酸是藤黃科植物藤黃的主要活性成分。戴維等[35]采用不同劑量(0、1.5、3、6 mg/L)的藤黃酸干預(yù)結(jié)直腸癌Caco2細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，細(xì)胞凋亡率隨藥物劑量的增加而升高，且細(xì)胞中活化的caspase-3、活化的caspase-9、Beclin 1、微管相關(guān)蛋白1輕鏈3-Ⅱ/微管相關(guān)蛋白1輕鏈3-Ⅰ水平升高，β-catenin、c-Myc水平降低，Wnt/β-catenin激活劑氯化鋰可以逆轉(zhuǎn)上述作用，表明藤黃酸是通過Wnt/β-catenin信號(hào)通路誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

青蒿琥酯是菊科植物青蒿中青蒿素的一種衍生物。郭穎等[36]發(fā)現(xiàn)，青蒿琥酯可以通過抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路中TCF4/LEF的轉(zhuǎn)錄活性，上調(diào)GSK-3β，下調(diào)β-catenin和c-Myc的表達(dá)促進(jìn)結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞早期凋亡。

2.3抑制腫瘤細(xì)胞遷移和侵襲 菝葜皂苷是一種來源于中藥知母中的皂苷元[37]。孫書凱等[38]分別用低、中、高劑量菝葜皂苷處理結(jié)腸癌HCT116和HT29細(xì)胞，并用劃痕實(shí)驗(yàn)和Transwell小室法觀察其對(duì)細(xì)胞遷移和侵襲的影響，結(jié)果顯示菝葜皂苷干預(yù)后兩種細(xì)胞的相對(duì)遷移距離減小，侵襲細(xì)胞個(gè)數(shù)降低，且具有劑量依賴性，同時(shí)細(xì)胞中β-catenin、c-Myc和TCF4蛋白的相對(duì)表達(dá)量降低，上皮鈣黏素蛋白的相對(duì)表達(dá)量升高，表明菝葜皂苷通過抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路發(fā)揮抗遷移和侵襲的作用；此外，菝葜皂苷還可通過此途徑抑制細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。

木犀草素是存在于金銀花、馬齒莧、紫蘇等多種植物和辣椒、胡蘿卜、油橄欖等蔬果中的一種天然黃酮類化合物[39]。陳志成等[40]用10、20、40 μmol/L的木犀草素作用于LoVo細(xì)胞來源的結(jié)直腸癌干細(xì)胞樣細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)20和40 μmol/L的木犀草素可以明顯抑制細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移，且具有劑量依賴性；進(jìn)一步對(duì)Wnt/β-catenin/TCF4信號(hào)通路相關(guān)蛋白進(jìn)行免疫印跡檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，木犀草素可以增強(qiáng)上皮鈣黏素表達(dá)，抑制Twist、β-catenin、TCF4和MMP-2的表達(dá)。

芹菜素是存在于芹菜、葡萄、蘋果等蔬果中的一種黃酮類化合物。張竹易[41]用30 μmol/L的芹菜素干預(yù)結(jié)腸癌SW480細(xì)胞24 h，發(fā)現(xiàn)其可以減少穿膜細(xì)胞，抑制40%的細(xì)胞發(fā)生遷移，對(duì)細(xì)胞侵襲的有效率達(dá)65%；進(jìn)一步研究表明，芹菜素可以降低β-catenin mRNA和蛋白水平，促進(jìn)β-catenin磷酸化，抑制β-catenin核轉(zhuǎn)位，進(jìn)而減少Wnt/β-catenin下游轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白環(huán)加氧酶2、人類細(xì)絲蛋白形成增強(qiáng)子1、MMP-2的表達(dá)，并通過SW480異體移植瘤和肺轉(zhuǎn)移瘤裸鼠驗(yàn)證了芹菜素抑制腫瘤生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的作用。

此外，Ji等[42]研究發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇可以劑量依賴性地抑制結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞侵襲和遷移，通過肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄本1敲低和過表達(dá)發(fā)現(xiàn)，其機(jī)制與白藜蘆醇下調(diào)肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄本1進(jìn)而抑制β-catenin的核轉(zhuǎn)運(yùn)及其下游靶基因c-Myc和MMP-7的表達(dá)有關(guān)。

2.4抑制腫瘤血管生成 大黃素是存在于大黃、虎杖、何首烏等多種植物中的一種單蒽核類二羥基蒽醌衍生物[43]。金劍和趙慶[44]分別用10、20、40 mmol/L的大黃素對(duì)結(jié)腸癌SW480細(xì)胞移植瘤裸鼠灌胃，發(fā)現(xiàn)大黃素可以降低小鼠血清促血管生成因子(VEGF、血管生成素2、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子)水平；免疫組織化學(xué)顯示，腫瘤組織微血管密度和β-catenin表達(dá)水平亦下降，表明大黃素可能通過下調(diào)Wnt/β-catenin信號(hào)通路中的促血管生成因子表達(dá)來抑制移植瘤生長(zhǎng)和微血管形成。

丹參酮ⅡA是唇形科植物丹參中的一種脂溶性化合物。劉宣[45]發(fā)現(xiàn)，環(huán)加氧酶2可以促進(jìn)β-catenin核轉(zhuǎn)運(yùn)，激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路并上調(diào)VEGF的表達(dá)，而丹參酮ⅡA可通過減少環(huán)加氧酶2的表達(dá)抑制腸癌細(xì)胞和移植瘤裸鼠腫瘤的生長(zhǎng)及腫瘤微血管的形成。

2.5增強(qiáng)化療敏感性 耐藥包括內(nèi)在性耐藥和獲得性耐藥，其是導(dǎo)致化療失敗的常見原因，因此如何逆轉(zhuǎn)化療耐藥、增強(qiáng)化療敏感性是腫瘤臨床治療亟待解決的問題。王秋爽[46]用姜黃素聯(lián)合5-氟尿嘧啶及順鉑共培養(yǎng)結(jié)腸癌SW480和SW620細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)其對(duì)細(xì)胞增殖、凋亡、遷移及侵襲的影響均優(yōu)于單獨(dú)化療，表明姜黃素具有協(xié)同化療的作用；且機(jī)制研究顯示，與單獨(dú)化療相比，聯(lián)合用藥可以增加Wnt/β-catenin信號(hào)通路中AXIN的表達(dá)，減少β-catenin、上皮細(xì)胞黏附分子、端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶和微管相關(guān)蛋白-1表達(dá)。魏培等[47]分別用青蒿琥酯、順鉑及聯(lián)合用藥處理結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞，結(jié)果發(fā)現(xiàn)青蒿琥酯可以增強(qiáng)順鉑對(duì)腫瘤細(xì)胞的增殖抑制和凋亡誘導(dǎo)，逆轉(zhuǎn)順鉑引起的β-catenin表達(dá)、β-catenin入核和TCF-1轉(zhuǎn)錄活性升高，表明青蒿琥酯可通過抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路發(fā)揮對(duì)順鉑的增敏作用。

2.6抑制上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化 上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化與腫瘤的干細(xì)胞特性、侵襲遷移能力、化療藥物耐藥等行為相關(guān)[48]。龍景培等[49]用不同濃度的冬凌草甲素干預(yù)結(jié)腸癌LoVo細(xì)胞發(fā)現(xiàn)，冬凌草甲素可以抑制細(xì)胞增殖和上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化，增加上皮標(biāo)志物上皮鈣黏素基因表達(dá)，抑制間充質(zhì)標(biāo)志物波形蛋白基因表達(dá)，上調(diào)Wnt/β-catenin信號(hào)通路中磷酸化GSK-3β(酪氨酸216)蛋白的表達(dá)，下調(diào)磷酸化GSK-3β(絲氨酸9)和β-catenin蛋白的表達(dá)，而加入GSK-3β抑制劑可以逆轉(zhuǎn)冬凌草甲素對(duì)β-catenin、上皮鈣黏素、波形蛋白的干預(yù)，表明冬凌草甲素可能通過影響GSK-3β活性來負(fù)性調(diào)控Wnt/β-catenin信號(hào)通路實(shí)現(xiàn)對(duì)腫瘤細(xì)胞增殖和上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化的抑制。

3 小 結(jié)

APC基因是家族性腺瘤性息肉病的主要原因，其在散發(fā)性結(jié)直腸癌中也有較高的突變頻率，由于APC和β-catenin突變，導(dǎo)致大腸癌中與Wnt/β-catenin信號(hào)通路相關(guān)的經(jīng)典基因突變超過90%[50]。因此，與其他腫瘤相比，Wnt/β-catenin信號(hào)通路在結(jié)直腸癌中的作用更為突出。中藥單體可以通過Wnt/β-catenin信號(hào)通路干預(yù)腫瘤細(xì)胞增殖、凋亡、遷移和侵襲、腫瘤血管生成、化療敏感性和上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化，進(jìn)而在結(jié)直腸癌中發(fā)揮作用，但目前關(guān)于中藥單體的研究仍需結(jié)合新的檢測(cè)方法，不斷深入探索機(jī)制，以為結(jié)直腸癌的新藥研發(fā)提供基礎(chǔ)。