白癜風(fēng)的細(xì)胞移植治療進(jìn)展★1

王 涌，童學(xué)婭，常心通，馬 晶，魏茂英，段 琛，賈 浩，林昭春

（成都博潤白癜風(fēng)醫(yī)院，四川 成都 610047）

白癜風(fēng)作為一種常見的損容性皮膚病，其在世界范圍內(nèi)普遍存在，總患病率約為1%。其可以發(fā)生在任何年齡段，但以青少年的發(fā)病率最高[1]。當(dāng)前，白癜風(fēng)多采用綜合治療的原則，其中白癜風(fēng)外科移植療法適用于對(duì)光療和藥物治療無效的穩(wěn)定期患者。現(xiàn)將對(duì)白癜風(fēng)外科移植療法中的細(xì)胞移植治療進(jìn)展進(jìn)行綜述。

1 細(xì)胞移植在白癜風(fēng)中的應(yīng)用

細(xì)胞移植是從皮膚組織中分離出角質(zhì)形成細(xì)胞（KC）和黑素細(xì)胞（MC），然后將KC和/或MC移植到皮損區(qū)。根據(jù)其是否需要傳代培養(yǎng)分為自體培養(yǎng)移植（自體培養(yǎng)MC移植）、自體非培養(yǎng)移植（KC/MC混懸液移植、自體表皮活性細(xì)胞移植再生技術(shù)（Recell?技術(shù)）、毛囊外根鞘細(xì)胞懸液（NCORSHFS）移植）。

1.1 自體培養(yǎng)MC混懸液移植 自體培養(yǎng)MC混懸液移植一般通過傳代培養(yǎng)的方式獲取足量黑素細(xì)胞移植到皮損區(qū)。制備自體培養(yǎng)MC混懸液的具體方法：取患者正常部位皮片，胰酶消化皮片，終止胰酶消化后，將其懸浮于Hank's液中，離心棄上清。獲取的細(xì)胞重懸于培養(yǎng)基中，培養(yǎng)、傳代，根據(jù)皮損面積計(jì)算所需MC數(shù)量，將其制成細(xì)胞懸液涂抹在磨削后的皮損區(qū)，由紗布覆蓋移植后的創(chuàng)面，無菌紗布包扎。

自1987年Lerner等[2]首次使用培養(yǎng)的自體MC移植治療1例斑駁病獲得成功后，該技術(shù)便不斷獲得發(fā)展。安彩霞等[3]對(duì)78例白癜風(fēng)患者進(jìn)行體外培養(yǎng)自體MC移植治療結(jié)果表明，納入78例患者總計(jì)189處皮損，98處皮損獲得了90%以上的復(fù)色，53處皮損獲得了50%～90%的復(fù)色，總有效率達(dá)到79.89%。呂靜等[4]觀察自體培養(yǎng)MC單獨(dú)移植與MC和KC共培養(yǎng)混合移植治療節(jié)段型白癜風(fēng)的臨床療效發(fā)現(xiàn)，MC單獨(dú)移植治療16個(gè)皮損區(qū)，其有效率為68.75%；MC和KC共培養(yǎng)混合移植治療的有效率為81.25%。兩組間有效率比較具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。以上研究說明采用自體MC培養(yǎng)移植治療穩(wěn)定期白癜風(fēng)患者具有療效肯定、治療面積大等優(yōu)點(diǎn)。MC/KC共培養(yǎng)混合移植治療效果優(yōu)于MC單獨(dú)移植。

應(yīng)用體外培養(yǎng)的MC移植治療白癜風(fēng)，較傳統(tǒng)組織移植的方法具有應(yīng)用面積明顯增大，供皮區(qū)皮膚創(chuàng)傷小等特點(diǎn)。但是自體培養(yǎng)MC移植的要求條件高，需有專業(yè)的細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室及相應(yīng)的人力、物力、技術(shù)等各方面的條件，難以普及。

1.2 自體非培養(yǎng)黑素細(xì)胞移植

1.2.1 KC/MC混懸液移植 KC/MC混懸液移植使用負(fù)壓吸皰等方式獲取皮片，胰酶消化、終止胰酶消化，而后離心、棄上清，向沉淀物中加入懸浮液，制成KC/MC混懸液。將混懸液涂于磨削后的皮損處，進(jìn)行加壓包扎。

1992年Gauthier Y等[5]通過液氮冷凍方法在白癜風(fēng)患者皮損部位發(fā)皰，并在每個(gè)水皰中注入制備好的表皮細(xì)胞混懸液并包扎，拆除敷料后，對(duì)皮損區(qū)進(jìn)行UVA的照射，取得了良好的著色效果。Parambath N等[6]使用富血小板血漿（PRP）作為自體非培養(yǎng)KC/MC的懸浮液與使用PBS作為自體非培養(yǎng)KC/MC的懸浮液進(jìn)行的自身對(duì)照研究結(jié)果表明，PRP組顯示出更好的色素沉著效果（P＜0.001），表明了PRP在白癜風(fēng)治療方面所具有的潛力。王力等[7]采用負(fù)壓吸皰方法獲取皮片，處理后制備得到KC/MC混懸液，然后將混懸液施于磨削后的皮損處，取得了良好的復(fù)色效果；同時(shí)發(fā)現(xiàn)：其移植治療顯效率與部位及分型無關(guān)，而與病程有關(guān)。Thakur V等[8]應(yīng)用非培養(yǎng)真皮和表皮細(xì)胞懸液對(duì)臨床穩(wěn)定期為（3～6）個(gè)月的白癜風(fēng)患者進(jìn)行細(xì)胞移植術(shù)治療，發(fā)現(xiàn)其可以成功用于病情穩(wěn)定時(shí)間較短（3～6個(gè)月）的白癜風(fēng)患者，并且效果優(yōu)于單獨(dú)應(yīng)用表皮細(xì)胞懸液治療。

當(dāng)前KC/MC混懸液已被不斷應(yīng)用于白癜風(fēng)的治療，效果令人滿意，被認(rèn)為是有效、安全的技術(shù)。同時(shí)Verma R等[9]比較了培養(yǎng)和非培養(yǎng)的黑色素細(xì)胞移植治療在穩(wěn)定期白癜風(fēng)患者中療效研究的結(jié)果提示：兩者在治療白癜風(fēng)方面無顯著的差異。這些均為KC/MC混懸液在白癜風(fēng)中的應(yīng)用展現(xiàn)出的良好前景。

1.2.2 Recell?技術(shù) ReCell?技術(shù)于1992年用于臨床，現(xiàn)已被廣泛應(yīng)用于皮膚創(chuàng)傷、燒傷、色素異常等皮膚病變的臨床治療[10]。

2014年，童學(xué)婭等[11]應(yīng)用ReCell?技術(shù)治療大面積白癜風(fēng)療效觀察結(jié)果顯示，納入的34例白癜風(fēng)患者，平均隨訪6個(gè)月。其中33例患者出現(xiàn)黑素再生，23例患者白斑部位恢復(fù)正常膚色，5例患者黑色素生長緩慢，臨床顯效率為82.35%，治愈率為67.65%。這也是國內(nèi)較早期報(bào)道的ReCell?技術(shù)在白癜風(fēng)治療方面的應(yīng)用。隨著其應(yīng)用技術(shù)的不斷成熟[12]，ReCell?技術(shù)已成為穩(wěn)定期大面積白癜風(fēng)患者重要的外科治療手段之一。

當(dāng)前ReCell?技術(shù)廣泛應(yīng)用于治療大面積穩(wěn)定期的白癜風(fēng)患者，與自體培養(yǎng)黑素細(xì)胞混懸液相比具有以下優(yōu)點(diǎn)：操作簡單，臨床醫(yī)師在手術(shù)室內(nèi)即可完成所有操作，僅需30 min左右即可完成黑素細(xì)胞的分離；所分離出的黑素細(xì)胞為原代細(xì)胞，功能上較傳代細(xì)胞更為理想。但是高昂的價(jià)格限制了其在臨床中的應(yīng)用。

1.2.3 NCORSHFS移 植 1959年，Staricco[13]提 出了在毛囊外毛根鞘（ORS）中存在無活性的黑素細(xì)胞（AMMC）。1980年，Ortonne等[14]發(fā) 現(xiàn) 在ORS及其隆突區(qū)存在多巴染色陰性的AMMC，這些細(xì)胞激活后，可移行到基底層變成有活性的黑素細(xì)胞。白癜風(fēng)的復(fù)色開始于AMMC的增殖，然后向上移行至表皮形成毛囊周圍色素島，最后到達(dá)色素脫失區(qū)。

2009年，Vanscheidt等[15]使用從毛囊制備的NCORSHFS結(jié)合NB-UVB光療對(duì)白癜風(fēng)患者進(jìn)行治療，5例患者中有3例出現(xiàn)90%的復(fù)色，證實(shí)了ORS細(xì)胞懸液在白癜風(fēng)方面的潛在療效。Shi H X等[16]應(yīng)用自體毛囊細(xì)胞移植治療穩(wěn)定白癜風(fēng)的研究結(jié)果提示，在納入的26例白癜風(fēng)患者中，有9例達(dá)到了完全的復(fù)色效果，13例表現(xiàn)良好。同時(shí)Ashraf Hamza等[17]通過比較NCORSHFS與自體非培養(yǎng)表皮細(xì)胞懸浮液（NCES）治療穩(wěn)定白癜風(fēng)的效果發(fā)現(xiàn)，兩者間的治療效果對(duì)比無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。Muhammed Razmi T等[18]對(duì)比了NCES和NCORSHFS聯(lián)合移植在治療穩(wěn)定期白癜風(fēng)患者中的療效，發(fā)現(xiàn)聯(lián)合移植可以達(dá)到90%及以上的復(fù)色率，其療效優(yōu)于單獨(dú)使用NCES或NCORSHFS的方法。

當(dāng)前的研究結(jié)果表明，NCORSHFS移植治療穩(wěn)定期白癜風(fēng)具有提取部位創(chuàng)傷小，創(chuàng)面恢復(fù)快的優(yōu)點(diǎn)。但是NCORSHFS作為一種應(yīng)用時(shí)間較短的治療方式，仍然存在樣本量小，隨訪時(shí)間短等問題。

2 小結(jié)

手術(shù)治療白癜風(fēng)安全有效，大面積皮損患者可采用細(xì)胞移植手段提高其復(fù)色水平，同時(shí)手術(shù)治療聯(lián)合光療及其他治療措施可進(jìn)一步提高手術(shù)治療的效果。

3 展望

當(dāng)前，應(yīng)用體外培養(yǎng)的黑素細(xì)胞移植治療白癜風(fēng)，較傳統(tǒng)組織移植的方法具有明顯優(yōu)勢。但是自體培養(yǎng)黑素細(xì)胞移植的方法要求條件高、培養(yǎng)周期長，這些均限制了其應(yīng)用。而自體非培養(yǎng)的KC/MC移植不需要傳代和培養(yǎng)，相較體外培養(yǎng)的MC移植在療效上也無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，具有良好的應(yīng)用前景。同時(shí)，KC/MC混懸液結(jié)合PRP在白癜風(fēng)方面應(yīng)用，為白癜風(fēng)的治療提供了新思路。ReCell?技術(shù)在白癜風(fēng)方面的治療作用是確切的，但是其價(jià)格高昂，限制了其普及。NCORSHFS作為較新的移植技術(shù)，其在白癜風(fēng)方面的應(yīng)用也顯示出良好應(yīng)用和推廣前景。當(dāng)前，本院已開展毛囊外根鞘細(xì)胞混懸液在穩(wěn)定期白癜風(fēng)患者中的研究，取得了一定效果，其可以作為未來治療穩(wěn)定期白癜風(fēng)患者的一種方法，具有潛在的應(yīng)用前景。