Flap核酸內(nèi)切酶1與惡性腫瘤相關(guān)性研究

劉彥權(quán)(綜述)，陳亞春，沈建箴(審校)

(1.贛南醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院科研中心，江西 贛州 341000；2.福建醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院血液病研究所，福建 福州 350001)

眾所周知，惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展是一個(gè)漫長(zhǎng)且多階段的復(fù)雜過程，其間伴隨了眾多的分子事件。通常，在DNA復(fù)制與修復(fù)過程中，會(huì)產(chǎn)生一種含有5′分支結(jié)構(gòu)的特殊DNA中間體，即5′-Flap，對(duì)于DNA復(fù)制與修復(fù)、基因組完整性和穩(wěn)定性的維持等而言，此類Flap結(jié)構(gòu)的切除顯得尤為必要[1]，而Flap核酸內(nèi)切酶1(flap endonuclease 1，F(xiàn)EN1)是識(shí)別這種特殊結(jié)構(gòu)的關(guān)鍵酶。近年來，諸多研究證實(shí)FEN1參與多種疾病，尤其是對(duì)腫瘤的發(fā)生、發(fā)展以及腫瘤生物學(xué)行為等密切相關(guān)?，F(xiàn)就國(guó)內(nèi)外有關(guān)FEN1與腫瘤相關(guān)性研究最新進(jìn)展予以論述，為相關(guān)領(lǐng)域科研工作提供借鑒與參考。

1 FEN1的分子結(jié)構(gòu)

FEN1是一種兼?zhèn)?′→3′Flap核酸內(nèi)切酶(flap endonuclease，F(xiàn)EN)、內(nèi)切核酸酶(gap-dependent endonuclease，GEN)以及外切核酸酶(exonuclease，EXO)三大酶切活性的特異性結(jié)構(gòu)的核酸酶，作為Rad2核酸酶家族原型成員的FEN1，其定位在人類染色體11q12上，含有2個(gè)外顯子、1個(gè)內(nèi)含子[2]。FEN1的外顯子l很短，只編碼mRNA部分的5′-UTR區(qū)；但FEN1的外顯子2卻較長(zhǎng)，編碼全部的氨基酸編碼區(qū)、3′-UTR區(qū)以及部分5′-UTR區(qū)。人FEN1蛋白包含由螺旋門、疏水楔形區(qū)域、活性中心、帽子結(jié)構(gòu)、β-pin、H2TH以及酸性阻滯等構(gòu)成，其可通過鹽橋或“電荷-電荷”等相互作用與底物DNA結(jié)合，螺旋門、疏水楔形區(qū)域、帽子結(jié)構(gòu)以及H2TH共同參與并構(gòu)成FEN1蛋白活性中心，其中5′-flap DNA在穿過螺旋門后被切割[3]。

2 FEN1的功能

2.1參與岡崎片段成熟 DNA復(fù)制過程中，通常會(huì)產(chǎn)生一條正向連續(xù)的前導(dǎo)鏈與一條反向非連續(xù)的滯后鏈，而滯后鏈合成中，產(chǎn)生一系列短的岡崎片段。岡崎片段的成熟，對(duì)于DNA復(fù)制、細(xì)胞增殖等尤為關(guān)鍵。通常，DNA的復(fù)制過程先是由DNA pol α/引發(fā)酶復(fù)合體合成長(zhǎng)約為12 nt的RNA引物，之后再繼續(xù)合成長(zhǎng)約為20 nt的DNA。由于DNA pol α缺乏3′核酸酶的校正功能，導(dǎo)致起始引物的保真度一般較低。此外，DNA polε、DNA polδ分別負(fù)責(zé)了前導(dǎo)鏈、滯后鏈的合成[4]，通過依賴ATP復(fù)制因子C(repication factor C，RFC)加以協(xié)調(diào)聚合酶的轉(zhuǎn)換，RFC作為加載器將增殖細(xì)胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen，PCNA)、DNA polε或DNA polδ加載到復(fù)制位點(diǎn)。當(dāng)在下游遇到岡崎片段時(shí)，DNA polδ形成一個(gè)5′-flap，F(xiàn)EN1識(shí)別并與該結(jié)構(gòu)底部結(jié)合，并通過精確切割、產(chǎn)生一個(gè)切口，后借助DNA連接酶Ⅰ(DNA LigaseⅠ)連接該切口，進(jìn)而完成岡崎片段成熟[5]。

2.2參與DNA損傷修復(fù) 由于其持續(xù)暴露在各種內(nèi)、外源因素中，DNA損傷無時(shí)無刻都在發(fā)生，DNA損傷若無法在第一時(shí)間得到修復(fù)，將導(dǎo)致基因突變、基因組不穩(wěn)定性的發(fā)生，進(jìn)而引起機(jī)體細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化[6]。人類DNA在面對(duì)各類損傷因素，其自身具備一套較為完善的修復(fù)途徑，包括堿基切除修復(fù)(base-excision repair，BER)、錯(cuò)配修復(fù)(mis-match repair，MMR)、核苷酸切除(nucleotide excision repair，NER)、同源重組(homologous recombination，HR)、SOS應(yīng)激等修復(fù)，而FEN1參與了上述多種DNA修復(fù)途徑。一般而言，堿基的單個(gè)損傷僅需DNA的BER途徑即可完成，依據(jù)BER延伸片段的不同長(zhǎng)度，可區(qū)分成長(zhǎng)片段BER(long-patch base excision repair，LP-BER)與短片段BER(short-patchbase excision repair，SP-BER)[7]。在LP-BER中，DNA polβ以切口上游3′-OH引物為延伸，將下游的5′-DNA 鏈予以置換，形成5′-flap結(jié)構(gòu)，由FEN1切除，而切除后殘留的切口則由DNA LigaseⅠ連接[8]，人體修復(fù)體系中若缺少FEN1，LP-BER將難以完成。此外，在人細(xì)胞的線粒體中，對(duì)于2-DL(某無堿基氧化位點(diǎn))損傷修復(fù)有賴于FEN1的LP-BER途徑完成的，證明FEN1在氧化損傷修復(fù)過程中同樣起到重要作用[9]。

2.3端粒穩(wěn)定性維持與細(xì)胞凋亡DNA片段化 相關(guān)學(xué)者研究表明，通過分析敲除FEN1后人類腫瘤細(xì)胞的端粒，發(fā)現(xiàn)FEN1在維持端粒穩(wěn)定性中不可缺少[10]。與此同時(shí)，F(xiàn)EN活性作為FEN1最經(jīng)典的活力之一，但對(duì)其另外EXO和GEN活性而言，對(duì)其他生物學(xué)功能或代謝途徑同樣重要，如凋亡細(xì)胞DNA片段處理等。FEN1通過促使端粒融合失調(diào)、染色體“breakage-fusion-bridge”周期等，影響端粒穩(wěn)定性與基因組保真度，F(xiàn)EN1亦能與端粒酶形成復(fù)合體，調(diào)控其端粒酶活性，并促進(jìn)與端粒染色質(zhì)的結(jié)合。同樣，F(xiàn)EN1參與凋亡細(xì)胞DNA片段化：通過RNA干擾技術(shù)下調(diào)FEN1同源基因CRN1蛋白的活性，可導(dǎo)致細(xì)胞死亡。此外，E160D作為FEN1點(diǎn)突變體，由于EXO、GEN活性的缺失，阻礙了FEN1對(duì)凋亡細(xì)胞DNA的處理。為此，F(xiàn)EN1若出現(xiàn)調(diào)控異?；蚬δ苋笔r(shí)，將引起端粒與基因組的穩(wěn)定性的破壞，進(jìn)而誘導(dǎo)正常細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化為腫瘤細(xì)胞。

3 FEN1在腫瘤中的作用與機(jī)制

腫瘤的發(fā)生、發(fā)展，可視作生物體進(jìn)化過程里的一段縮影，從正常細(xì)胞到腫瘤惡性細(xì)胞的演化進(jìn)程中，基因突變、染色體異常、微衛(wèi)星不穩(wěn)定等因素不斷增加，促使腫瘤不斷生長(zhǎng)，并在雜交腫瘤細(xì)胞群體中連續(xù)性累積，從而進(jìn)一步加重基因的損傷與基因組不穩(wěn)定性。如前已述，F(xiàn)EN1在細(xì)胞內(nèi)的各種DNA代謝途徑中發(fā)揮至關(guān)重要的作用，為此，F(xiàn)EN1在細(xì)胞代謝與生化過程必須得到十分精細(xì)嚴(yán)格的調(diào)控，若在任一環(huán)節(jié)中出現(xiàn)異常狀態(tài)或功能失調(diào)，將對(duì)細(xì)胞甚至機(jī)體產(chǎn)生不可逆的惡性損害。

3.1FEN1與惡性腫瘤的臨床關(guān)聯(lián)性 Ren等[11]的一項(xiàng)薈萃分析證實(shí)，F(xiàn)EN1作為一種多功能因子，其突變會(huì)導(dǎo)致基因組不穩(wěn)定和癌癥易感性，到目前為止已鑒定出超過30種與FEN1相互作用的蛋白，但除了凋亡DNA片段化途徑外，在這些FEN1相互作用的蛋白中，最初被鑒定為復(fù)制輔助蛋白的PCNA與FEN1一起參與了所有FEN1涉及的DNA代謝途徑，表明FEN1 / PCNA相互作用調(diào)節(jié)LP-BER，且該學(xué)者所在的團(tuán)隊(duì)已證實(shí)FEN1的抑癌功能，表明FEN1是維持基因組穩(wěn)定性和防止癌變的關(guān)鍵因素。與此同時(shí)，F(xiàn)EN1的純合子敲除對(duì)于轉(zhuǎn)基因小鼠胚胎是致死性的，盡管部分的FEN1雜合子敲除鼠能夠存活，但其本身極易誘發(fā)惡性腫瘤疾病，表明FEN1是一個(gè)抑癌基因[12]。同樣，有學(xué)者研究證實(shí)FEN1是兒童急性淋巴細(xì)胞白血病的保護(hù)性因素，且是與預(yù)后相關(guān)聯(lián)的分子標(biāo)記物[13]。

然而，Zhao等[14]研究顯示，F(xiàn)EN1在胃癌組織中的表達(dá)水平高于正常胃組織，且FEN1的高表達(dá)與年齡相關(guān)(P<0.05)，F(xiàn)EN1過表達(dá)的患者與低FEN1表達(dá)的患者相比有良好的預(yù)后，此外，F(xiàn)EN1的表達(dá)與DNA復(fù)制、細(xì)胞周期、胞質(zhì)傳感途徑、卵母細(xì)胞減數(shù)分裂以及P53信號(hào)通路密切相關(guān)，是胃癌診斷和預(yù)后生物標(biāo)志物。

雌激素受體α(estrogen receptor α，ERα)是大多數(shù)乳腺癌中的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子，ERα陽性的乳腺癌患者在接受他莫昔芬治療時(shí)發(fā)生耐藥很常見。近期，F(xiàn)lach等[15]研究表明，F(xiàn)EN1通過促進(jìn)共激活因子募集到ERα轉(zhuǎn)錄復(fù)合體影響ERα的轉(zhuǎn)錄活性，F(xiàn)EN1通過阻斷誘導(dǎo)蛋白酶體介導(dǎo)的活化ERα降解，進(jìn)而導(dǎo)致ERα驅(qū)動(dòng)基因表決表達(dá)，并促使腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡。與此同時(shí)，F(xiàn)EN1抑制劑可有效阻斷ERα功能并抑制他莫昔芬耐藥細(xì)胞系以及離體培養(yǎng)的ERα陽性乳腺腫瘤的增殖。Li等[16]研究證實(shí)，F(xiàn)EN1抑制劑SC13在體內(nèi)、外均可增加宮頸癌細(xì)胞對(duì)放射治療敏感，促使腫瘤細(xì)胞DNA損傷修復(fù)機(jī)制受損，進(jìn)而誘發(fā)癌細(xì)胞凋亡。此外，有學(xué)者通過生物信息學(xué)技術(shù)分析了肝癌組織中表達(dá)異常的9個(gè)核心基因，研究顯示在肝癌組織中FEN1的表達(dá)與其中的MCM2、RFC4以及RFC4三個(gè)核心基因的表達(dá)呈正相關(guān)，尤其值得注意的是，F(xiàn)EN1表達(dá)水平也與肝癌腫瘤體積、血管浸潤(rùn)以及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等同樣呈正相關(guān)，表明FEN1異常升高可能是肝癌診療、預(yù)后評(píng)估的潛在生物標(biāo)志物[17]。Becker等[18]學(xué)者通過構(gòu)建FEN1同源物模型RAD27，顯示FEN1的過表達(dá)會(huì)阻礙復(fù)制叉的進(jìn)行，使細(xì)胞停滯于S期中期，并伴隨著檢查點(diǎn)激酶Rad53和組蛋白H2A-S129的磷酸化增加，更重要的是，在多種人類腫瘤細(xì)胞中均可發(fā)現(xiàn)FEN1過表達(dá)，可導(dǎo)致CHK1、CHK2、RPA32和組蛋白H2AX的磷酸化，使基因組不穩(wěn)定，是預(yù)后不良的標(biāo)志。Zhang等[19]通過實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)和免疫組織化學(xué)分析技術(shù)研究了FEN1在非小細(xì)胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)中的表達(dá)及其臨床意義，研究證實(shí)FEN1在136個(gè)癌組織中約有36%高度過表達(dá)，而癌旁組織通常無法檢測(cè)到FEN1，其研究進(jìn)一步證實(shí)FEN1過表達(dá)的腫瘤傾向分化不良和預(yù)后不良，表明過表達(dá)FEN1是治療NSCLC的預(yù)后生物標(biāo)志物和潛在治療靶點(diǎn)。由此可見，F(xiàn)EN1在監(jiān)護(hù)并維持基因組完整性、避免因失調(diào)或發(fā)生突變導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生有著重要的調(diào)控作用。

3.2FEN1在腫瘤中的作用機(jī)制

3.2.1細(xì)胞定位區(qū)室化 FEN1的C端，包含2個(gè)核定位序列，將FEN1引導(dǎo)進(jìn)入細(xì)胞核內(nèi)，且在核仁中大量聚積，F(xiàn)EN1只有分布在細(xì)胞核內(nèi)才能發(fā)揮功能，在一定程度上規(guī)避了FEN1所致基因組錯(cuò)誤剪切的發(fā)生。此外，F(xiàn)EN1在核仁中聚集，參與到停滯DNA復(fù)制叉分解、核糖體DNA穩(wěn)定性的維持[20]。當(dāng)發(fā)生核內(nèi)DNA損傷或處于細(xì)胞周期S期時(shí)，F(xiàn)EN1將從核仁釋放，在磷酸化驅(qū)動(dòng)模式下，轉(zhuǎn)移到損傷位點(diǎn)進(jìn)行修復(fù)。在紫外損傷處理后，F(xiàn)EN1發(fā)生磷酸化，從核仁轉(zhuǎn)移至核漿，并依靠EXO、GEN活性參與DNA UV交聯(lián)的修復(fù)，說明FEN1的核定位，是受到DNA損傷、細(xì)胞周期所調(diào)節(jié)的。盡管FEN1主要定位于細(xì)胞核，但活性氧卻在線粒體產(chǎn)生，當(dāng)線粒體mtDNA發(fā)生氧化損傷時(shí)，線粒體BER同樣需要FEN1修復(fù)，亦表明FEN1可在線粒體中存在[21]。

3.2.2蛋白-蛋白相互作用 FEN1通過與蛋白-蛋白相互作用借以參與不同代謝途徑，繼而發(fā)揮其多種生物學(xué)功能。Zheng等[1]對(duì) FEN1所參與的蛋白-蛋白相互作用進(jìn)行廣而深入的研究，其證實(shí)FEN1與34種蛋白伴侶相互作用并經(jīng)歷翻譯后修飾。根據(jù)對(duì)FEN1功能的調(diào)控作用，此類伴侶蛋白可大致將其分為4個(gè)功能類別，其包括了促進(jìn)岡崎片段成熟的互作蛋白、DNA損傷修復(fù)蛋白、凋亡蛋白以及參與FEN1翻譯后修飾的蛋白。

3.2.3翻譯后修飾 FEN1活性的發(fā)揮受到許多翻譯后修飾(post-translational modification，PTM)調(diào)節(jié)，其中包括了磷酸化(phosphorylation)、甲基化(methylation)、乙酰化(acetylation)、泛素化(ubiquitination)、SUMO化修飾等等，F(xiàn)EN1通過上述各式PTM途徑的調(diào)控并發(fā)揮相應(yīng)的生物學(xué)功能。PCNA作為FEN1功能調(diào)控的橋梁之一，F(xiàn)EN1借助與PCNA結(jié)合，到達(dá)損傷修復(fù)或復(fù)制的相應(yīng)位點(diǎn)，進(jìn)而發(fā)揮相關(guān)生化功能，完成后經(jīng)解離再進(jìn)行下一循環(huán)。DNA復(fù)制過程中，當(dāng)細(xì)胞剛進(jìn)入S期時(shí)FEN1即被甲基化，F(xiàn)EN1受甲基化后結(jié)合PCNA，再轉(zhuǎn)移至DNA復(fù)制叉位點(diǎn)，當(dāng)調(diào)控作用完成，F(xiàn)EN1將被磷酸化，F(xiàn)EN1磷酸化后將喪失與PCNA結(jié)合的能力，從DNA復(fù)制叉脫離，為連接酶進(jìn)入提供空間。當(dāng)磷酸化FEN1從DNA解離后，會(huì)刺激其發(fā)生SUMO化，繼而引發(fā)泛素化修飾，并最終憑借蛋白酶體途徑發(fā)生降解。此外，UV損傷處理后的細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)FEN1乙酰化水平升高，F(xiàn)EN1亦可被乙?；揎?，進(jìn)而避免了FEN1過早處理岡崎片段。應(yīng)注意的是，上述幾種PTM方式通常是互不干擾、相互交叉進(jìn)行的：FEN1憑借PTM中的磷酸化修飾所驅(qū)動(dòng)，由核仁轉(zhuǎn)移到核質(zhì)，同時(shí)，磷酸化又間接影響FEN1與PCNA蛋白互作；另一角度，F(xiàn)EN1-PCNA的結(jié)合又間接調(diào)控FEN1進(jìn)入DNA損傷位點(diǎn)或復(fù)制的區(qū)室化定位。

4 FEN1與腫瘤的表觀遺傳調(diào)控

自20世紀(jì)中葉“表觀遺傳學(xué)”概念提出以來，經(jīng)半個(gè)多世紀(jì)的發(fā)展，表觀遺傳學(xué)已從單一學(xué)科逐漸演變成基因表達(dá)調(diào)控、基因組功能與蛋白組學(xué)以及腫瘤機(jī)制等研究的關(guān)鍵領(lǐng)域之一。表觀遺傳調(diào)控，是在未涉及DNA序列改變的前提下，通過影響基因表達(dá)的一類調(diào)控修飾機(jī)制，包括甲基化修飾、組蛋白修飾、非編碼RNA調(diào)控以及染色質(zhì)重塑等[22]，由于表觀遺傳調(diào)控具有可逆性的特點(diǎn)，目前，表觀遺傳學(xué)異常改變與調(diào)控機(jī)制依舊是在腫瘤基礎(chǔ)與臨床研究中較新穎的方向。作為表觀遺傳學(xué)領(lǐng)域中經(jīng)典PTM的DNA甲基化，是指DNA中CG二核苷酸序列的胞嘧啶核苷酸5′端在DNA甲基轉(zhuǎn)移酶催化下，通過添加甲基形成呈簇的“CpG島”以及散在的CpG。CpG島區(qū)域常處于低甲基化狀態(tài)，而正常組織內(nèi)散在CpG則是高甲基化狀態(tài)。FEN1在多種惡性腫瘤中異常顯著上調(diào)，這與腫瘤細(xì)胞中FEN1啟動(dòng)子區(qū)CpG島低甲基化有關(guān)。與此同時(shí)，SET7能以細(xì)胞周期依賴式使FEN1的Lys377發(fā)生單甲基化修飾[23]，而在S期，K377me1則以SET7依賴式上調(diào)，當(dāng)S期結(jié)束時(shí)下調(diào)表達(dá)。作為表觀遺傳學(xué)另一重要的重要調(diào)控機(jī)制，目前學(xué)術(shù)界對(duì)于組蛋白修飾中的“乙酰化”研究最為深入。轉(zhuǎn)錄共激活因子p300的HAT可將FEN1的Lys354、Lys375、Lys377以及Lys380在內(nèi)的4個(gè)賴氨酸殘基乙酰化。此外，亦有學(xué)者研究鑒定了FEN1的Lys125、Lys252、Lys254以及Lys314乙?；揎椢稽c(diǎn)[24]，證實(shí)上述諸位點(diǎn)突變后，將影響其與DNA底物結(jié)合的能力和DNA酶切活性。

5 FEN1靶向抑制劑研究進(jìn)展

FEN1與腫瘤細(xì)胞之間有著雙重關(guān)系：FEN1表達(dá)上調(diào)將有益于維持某些類型腫瘤的克隆、增殖，而在另一角度，F(xiàn)EN1突變或表達(dá)下調(diào)亦導(dǎo)致基因組不穩(wěn)定，進(jìn)而促發(fā)新的腫瘤。為此，機(jī)體細(xì)胞中的FEN1表達(dá)水平必須受到嚴(yán)格的調(diào)控?，F(xiàn)如今，臨床上對(duì)于腫瘤疾病常采用標(biāo)準(zhǔn)化療、放療、靶向治療以及生物免疫療法等在內(nèi)的多種治療手段。值得一提的是，在腫瘤所采用的化療手段中，各類化療藥物一般通過誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞DNA發(fā)生損傷，進(jìn)而引發(fā)腫瘤細(xì)胞凋亡來實(shí)現(xiàn)抗癌藥性。然而腫瘤細(xì)胞DNA修復(fù)能力提高會(huì)導(dǎo)致耐藥性，故抗癌療效多由DNA損傷、修復(fù)之間的平衡所決定的。鑒于FEN1在DNA損傷修復(fù)中所發(fā)揮的作用，改變FEN1在腫瘤細(xì)胞的表達(dá)水平，繼而改變腫瘤細(xì)胞對(duì)DNA損傷藥物的敏感性是基于FEN1為靶點(diǎn)的抗腫瘤藥物的研發(fā)策略。值得關(guān)注的是，F(xiàn)EN1高表達(dá)的腫瘤細(xì)胞對(duì)于替莫唑胺、5-FU、順鉑等DNA損傷藥物具備較強(qiáng)的耐藥性，而FEN1低表達(dá)卻使腫瘤細(xì)胞對(duì)于DNA損傷藥物更為敏感。此外，在細(xì)胞水平和動(dòng)物模型上應(yīng)用FEN1抑制劑SC13能夠有效抑制DNA復(fù)制，誘導(dǎo)其損傷和細(xì)胞凋亡，同時(shí)增加了抗癌藥物的細(xì)胞毒性，有效地抑制了腫瘤的生長(zhǎng)，并與其他化療藥物聯(lián)用時(shí)，可極大增加其化療敏感性，進(jìn)而產(chǎn)生較好的抗癌療效[16, 25]。然而仍需面對(duì)現(xiàn)實(shí)的是，盡管FEN1突變已在人類多種腫瘤標(biāo)本中檢測(cè)到，并被視作引起基因組不穩(wěn)定和腫瘤易感性，但目前對(duì)于FEN1缺乏與癌癥易感性之間的確切關(guān)系、FEN1基因是否變異以及導(dǎo)致腫瘤的發(fā)生和發(fā)展的具體作用機(jī)制尚不夠明確，F(xiàn)EN1或?qū)⒊蔀槟[瘤耐藥與靶向治療研究的新靶點(diǎn)，有待往后更為深入的研究證實(shí)。

6 總結(jié)與展望

隨著分子生物學(xué)、免疫學(xué)以及生物信息學(xué)等領(lǐng)域研究的不斷深入與發(fā)展，近來陸續(xù)有學(xué)者報(bào)道并證實(shí)FEN1功能失調(diào)與腫瘤疾病的關(guān)聯(lián)性及其功能調(diào)控異常普遍存在于人類多種惡性腫瘤中，F(xiàn)EN1在腫瘤發(fā)生、發(fā)展以及臨床診治與預(yù)后中的意義也逐漸被闡釋。然而，F(xiàn)EN1在腫瘤細(xì)胞中的具體作用機(jī)制與生物學(xué)功能仍不夠明確：FEN1功能調(diào)控靶點(diǎn)與途徑是什么？FEN1在表觀遺傳調(diào)控中的機(jī)制如何？FEN1在調(diào)控網(wǎng)絡(luò)中的地位如何呢？目前，已知FEN1的兩個(gè)功能性種系rs174538和rs4246215是與腫瘤易感性相關(guān)[26]，實(shí)際上大多數(shù)對(duì)FEN1基因組變異的研究都集中在等位基因頻率大于5%的兩個(gè)常見的單核苷酸多態(tài)性上，即啟動(dòng)子-69G>A(rs174538)和3′UTR 4150G>T(rs4246215)，這兩種基因多態(tài)性均能有效影響FEN1基因組變異[27]，并已證實(shí)與機(jī)體各器官系統(tǒng)多種腫瘤風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)，例如消化道惡性腫瘤[28]、肺癌[29]、乳腺癌[30-31]、神經(jīng)膠質(zhì)瘤[32]、肝細(xì)胞癌[33]、白血病[13, 34]、淋巴瘤[35]以及卵巢癌[36]等。對(duì)于上述不同腫瘤疾病，F(xiàn)EN1的作用機(jī)制是否相似？FEN1是否介導(dǎo)了某些癌基因及抑癌基因參與表觀遺傳調(diào)控，能否將其應(yīng)用到腫瘤的防治及新型藥物的研發(fā)？在不同腫瘤中的FEN1與其他類型癌基因或抑癌基因的關(guān)系如何？FEN1是否參與相關(guān)通路進(jìn)而調(diào)控發(fā)揮作用呢？這些問題都值得關(guān)注，相信隨著FEN1在多學(xué)科領(lǐng)域基礎(chǔ)與臨床的深入研究將有助于用全新的視角去了解腫瘤疾病，進(jìn)而真正意義上為腫瘤防治與預(yù)后評(píng)估開拓新的思路。