毒品免疫層析檢測(cè)技術(shù)概述

王在竹

（廣東省知識(shí)產(chǎn)權(quán)保護(hù)中心，廣東廣州 510000）

0.引言

毒品是危害人類健康的重大社會(huì)問(wèn)題之一，常見(jiàn)的毒品類型包括嗎啡、海洛因、苯丙胺類、大麻類、氯胺酮、安非他明、甲基安非他明、可卡因等。毒品的分析檢驗(yàn)技術(shù)為吸毒者的快速認(rèn)定、打擊毒品違法犯罪行為提供了重要的保障。目前毒品的主要檢測(cè)方法包括化學(xué)分析法、光譜法、色譜法、色譜—質(zhì)譜聯(lián)用法、毛細(xì)管電泳法、免疫學(xué)方法等[1]。免疫學(xué)分析法包括放射性免疫分析、酶聯(lián)免疫分析、熒光免疫分析和免疫層析檢測(cè)法等[2]。其中免疫層析檢測(cè)法是一種即時(shí)高效的檢測(cè)方法，適用于毒品的現(xiàn)場(chǎng)快速檢驗(yàn)。本文對(duì)不同生物檢材中毒品的免疫層析檢測(cè)技術(shù)進(jìn)行綜述。

1.毒品檢測(cè)的生物檢材

毒品檢測(cè)常用的生物檢材包括尿液、唾液、血液、汗液和毛發(fā)等。其中尿液樣品采集方便，采用尿檢試紙或尿檢板進(jìn)行檢測(cè)，操作簡(jiǎn)單、速度快、成本低，是目前應(yīng)用最廣泛的一種毒品檢測(cè)方法。但是該方法的檢測(cè)結(jié)果易受外界環(huán)境的影響，樣本采集過(guò)程中需避免漂白劑、清潔劑等化學(xué)物質(zhì)的影響，并控制采集時(shí)間。

唾液樣本的采集方便無(wú)創(chuàng)，易于現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)督防止樣本摻假，但是相比于血液和尿液樣本，唾液的采集量低，毒品及其代謝物質(zhì)在唾液中的含量少，需要更靈敏的檢測(cè)分析方法[3]。毒品血液檢測(cè)的時(shí)間范圍比較長(zhǎng)，3年或5年內(nèi)均可檢測(cè)出來(lái)，但是血液樣品的采集具有一定的風(fēng)險(xiǎn)，且檢測(cè)需要專門(mén)的設(shè)備，在現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)中應(yīng)用較少。汗液作為檢測(cè)樣本的優(yōu)點(diǎn)是不容易摻假，但是汗液的產(chǎn)生過(guò)程中的其他物質(zhì)會(huì)干擾檢測(cè)結(jié)果。毛發(fā)檢材具有易取材、易保存、不易作假、檢測(cè)時(shí)限長(zhǎng)等優(yōu)點(diǎn)，可通過(guò)毛發(fā)分析大致推測(cè)過(guò)去一段時(shí)間內(nèi)吸食毒品的情況[4]。

2.不同生物檢材中毒品的免疫層析檢測(cè)

免疫層析檢測(cè)法是根據(jù)抗原抗體的免疫反應(yīng)及標(biāo)記物的顯色反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)的方法，通常采用試紙條或檢測(cè)卡的形式，具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、簡(jiǎn)便、快速、穩(wěn)定等特點(diǎn)，特別適合在現(xiàn)場(chǎng)應(yīng)用。

2.1 尿液樣本

姜燕等[5]研制出了嗎啡—甲基安非他明二合一膠體金檢測(cè)卡，用于尿液中毒品的檢測(cè)和可疑人群的篩查。檢測(cè)尿中嗎啡最低濃度為300ng/ml，甲基安非他明最低濃度為1000ng/ml。曾立波等[6]建立了一種檢測(cè)尿液中苯丙胺的膠體金免疫層析技術(shù)，其檢測(cè)閾值為1000ng/ml，特異性為99.17%，準(zhǔn)確性為99.54%。張戰(zhàn)平等[7]對(duì)尿吸毒（MOR/M-AMP）膠體金檢測(cè)法中的干擾因素進(jìn)行了分析。萬(wàn)林鈴[8]設(shè)計(jì)了一套對(duì)吸毒人員尿液進(jìn)行檢測(cè)的快速毒品檢測(cè)儀，與免疫層析試紙條配合使用，可實(shí)現(xiàn)毒品的快速、準(zhǔn)確檢測(cè)。

2.2 唾液樣本

郭暢等[9]創(chuàng)建了毒品檢測(cè)的背景熒光猝滅—免疫層析法，其基于競(jìng)爭(zhēng)法的膠體金免疫層析原理制備檢測(cè)安非他明（AMP）的金標(biāo)試紙條，結(jié)合全自動(dòng)干式熒光免疫分析儀進(jìn)行檢測(cè)。采用該方法定量檢測(cè)唾液中的AMP，在0ng·ml-1～400ng·ml-1范圍內(nèi)與熒光猝滅信號(hào)呈良好的相關(guān)性，檢出限為0.9ng·ml-1，且與UPLC-MS/MS法檢測(cè)結(jié)果相關(guān)性良好。趙海鋒[10]應(yīng)用膠體金免疫層析技術(shù)進(jìn)行嗎啡（MOR）藥物濫用的尿液及唾液檢測(cè)研究，成功建立了尿液和唾液聯(lián)檢嗎啡的膠體金免疫層析方法。能在5min內(nèi)完成對(duì)嗎啡的檢測(cè)，尿樣和唾液的最小檢測(cè)限分別為300ng/ml、20ng/ml，適用于對(duì)嗎啡進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)。專利申請(qǐng)CN104634967A公開(kāi)了采用膠體金免疫層析法快速檢測(cè)唾液中冰毒、可卡因、嗎啡、K粉四項(xiàng)毒品。靈敏度分別可達(dá)到1000ng/ml、300ng/ml、300ng/ml、1000ng/ml。CN208092059U、CN206892112U、CN-208092068U、CN208092064U分別公開(kāi)了對(duì)唾液中甲基苯丙胺、嗎啡、氯胺酮和四氫大麻酚酸濃度進(jìn)行定量檢測(cè)的上轉(zhuǎn)發(fā)光免疫層析試紙。

2.3 毛發(fā)樣本

在進(jìn)行免疫層析檢測(cè)之前，采集的毛發(fā)樣本需要進(jìn)行前處理，前處理的一種方式是采用裂解液進(jìn)行裂解，以析出毛發(fā)中所含的毒品及其代謝物。如專利申請(qǐng)CN110-987548A公開(kāi)了一種檢測(cè)毛發(fā)中毒品用樣品前處理試劑，包括含有羥基的化合物，通過(guò)將毛發(fā)微粒中的二硫鍵打開(kāi)，提高毛發(fā)中毒品分子釋放量，從而降低檢測(cè)限。CN110-208072A公開(kāi)了一種用于痕量毒品檢測(cè)的人體毛發(fā)快速裂解液，通過(guò)裂解液的特定組成，充分快速地裂解角蛋白。

前處理的另一種方式是通過(guò)機(jī)械研磨的方式破碎毛發(fā)，使其中的待測(cè)毒品釋放出來(lái)進(jìn)行檢測(cè)。如CN108535-466A和CN109794327A公開(kāi)了一種毛發(fā)中毒品現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)儀，其中采用研磨珠的高頻往復(fù)運(yùn)動(dòng)對(duì)角質(zhì)物進(jìn)行研磨，然后采用膠體金板對(duì)研磨物進(jìn)行檢測(cè)。CN112058411A公開(kāi)了用于毒品檢測(cè)的人體毛發(fā)研磨裝置。

對(duì)于具體的檢測(cè)方法和產(chǎn)品，唐曉歡等[11]以液質(zhì)聯(lián)用法為標(biāo)準(zhǔn)，進(jìn)行膠體金試紙法檢測(cè)頭發(fā)樣本中嗎啡（MOP）和甲基苯丙胺（MA）的準(zhǔn)確性及可靠性研究，結(jié)果膠體金試紙法檢測(cè)頭發(fā)樣本中MOP的靈敏度為88.24%，特異度為100%，檢測(cè)MA的靈敏度為60.61%，特異度為100%。CN109061204A公開(kāi)了一種熒光免疫檢測(cè)毛發(fā)痕量毒品的試劑盒，包括樣品裂解液和熒光免疫層析試紙條，其中試紙條采用量子點(diǎn)納米顆粒作為檢測(cè)標(biāo)記物，能夠快速、準(zhǔn)確、靈敏的對(duì)毛發(fā)中的毒品進(jìn)行檢測(cè)。CN109490538A公開(kāi)了一種熒光免疫痕量毛發(fā)毒品四合一檢測(cè)試劑盒，包括盒體和熒光免疫層析試紙條，可同時(shí)對(duì)四種毒品進(jìn)行檢測(cè)，極大地提高了檢測(cè)效率。

3.結(jié)語(yǔ)

免疫檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展為毒品的快速現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)提供了便利，特別是毛發(fā)樣品的檢測(cè)，免疫層析檢測(cè)試紙配合各種毛發(fā)前處理試劑和破碎儀器的應(yīng)用，能夠在無(wú)損傷的情況下，快速的檢測(cè)出毒品的含量，為公安機(jī)關(guān)打擊毒品違法犯罪行為提供了重要的保障。