臨床微生物檢測系統(tǒng)的性能驗(yàn)證及注意事項(xiàng)

文 馮佼 （四川省鄰水縣人民醫(yī)院）

本篇文章的主體中心在于分析并總結(jié)臨床微生物常用檢測系統(tǒng)的性能以及有關(guān)注意事項(xiàng)，并提出在臨床微生物檢驗(yàn)自動(dòng)化水平持續(xù)提升的基礎(chǔ)上，儀器的性能評(píng)價(jià)也是需要重視的。檢測系統(tǒng)的性能評(píng)估是提升臨床微生物檢驗(yàn)質(zhì)量的基本前提，以此推進(jìn)ISO15189醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可，并保障微生物實(shí)驗(yàn)室的服務(wù)與檢測水平得到不斷提升。

制訂科學(xué)的驗(yàn)證計(jì)算

可由醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室的主管人員對驗(yàn)證計(jì)劃進(jìn)行制訂，在此基礎(chǔ)上還要確定驗(yàn)證計(jì)劃的起始時(shí)間、共同參與的工作人員以及計(jì)劃花費(fèi)的時(shí)間等。比如，有醫(yī)藥行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)必須嚴(yán)格根據(jù)行業(yè)的有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)加以校對，若無參考標(biāo)準(zhǔn)，儀器即需根據(jù)我國規(guī)定的行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（YY/T0654-2008）文件來加以校對，一般情況下，儀器廠家均會(huì)授權(quán)相應(yīng)的工程師來加以校對，現(xiàn)場還需安排相關(guān)人員確認(rèn)監(jiān)督，若無校對，即可要求對應(yīng)的廠商進(jìn)行解決，直至與國家標(biāo)準(zhǔn)文件報(bào)告相符合即可。實(shí)驗(yàn)室的技術(shù)人員以及微生物檢測負(fù)責(zé)人要對系統(tǒng)分析性能加以評(píng)價(jià)，確保系統(tǒng)性能的正常工作。

依照計(jì)劃完成微生物檢測系統(tǒng)性能驗(yàn)證

精密度驗(yàn)證可參照CLSI（美國 臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化研究所）出具的EP15-A2文件，取出2個(gè)水平質(zhì)控品，并對其展開檢測工作。應(yīng)注意的問題的是相同批號(hào)質(zhì)控品必須完善準(zhǔn)備，批間批內(nèi)驗(yàn)證的過程中切不可產(chǎn)生質(zhì)控品不足引發(fā)的批號(hào)更換現(xiàn)象。重復(fù)性精密度也就是我們通常所說的批內(nèi)精密度，于室內(nèi)質(zhì)控需要確保在控的基礎(chǔ)上將呈現(xiàn)不同水平（濃度）質(zhì)控品于插入至患者樣本中，并在此基礎(chǔ)上實(shí)施檢測，對其標(biāo)準(zhǔn)差、均值、變異系數(shù)等加以計(jì)算，對項(xiàng)目的批內(nèi)精密度進(jìn)行驗(yàn)證（總誤差可＜1/4CLIA’88）。

中間精密度也就是臨床說的批間精密度，于室內(nèi)質(zhì)控（同樣保證在控）的基礎(chǔ)上，2個(gè)不同濃度質(zhì)控品插入標(biāo)本實(shí)施檢測，每一次均要測定兩遍，取兩個(gè)檢測數(shù)據(jù)的平均值，連續(xù)檢測20天，對其標(biāo)準(zhǔn)差、均值以及變異系數(shù)加以計(jì)算。驗(yàn)證的批間精密度，其評(píng)判可＜1/3CLIA’88。而在此需注意的問題是，對于一些允許總誤差相對小的項(xiàng)目檢測，若未嚴(yán)重控制其質(zhì)量，將無法準(zhǔn)確通過評(píng)語，這還需要從操作手、試驗(yàn)材料、環(huán)境、儀器以及方法等不同環(huán)節(jié)上加以控制。

對于準(zhǔn)確度的驗(yàn)證可依照CLSI EP9A2文件來實(shí)施，對檢測系統(tǒng)加以統(tǒng)計(jì)，并參與12個(gè)月的衛(wèi)生部間質(zhì)評(píng)成績，使用本實(shí)驗(yàn)室的檢測值，并在此檢測衛(wèi)生部門臨檢中心發(fā)入出的室間質(zhì)控品，對其檢測值以及靶值的相對偏倚加以計(jì)算，同時(shí)統(tǒng)計(jì)其平均值，偏倚值總誤差可＜1/2CLIA’88。值得注意的是，驗(yàn)證過程中最好能保證有12個(gè)月的室間質(zhì)控成績，并且還應(yīng)進(jìn)行間質(zhì)評(píng)，以優(yōu)良為最佳。

差異結(jié)果的解決措施：由CLSIM52文件來為差異性結(jié)果指導(dǎo)相關(guān)的解決方法，在鑒定驗(yàn)證的過程中，可由原來已經(jīng)過驗(yàn)證系統(tǒng)與新系統(tǒng)檢測相同的菌株，若2個(gè)系統(tǒng)檢測結(jié)果呈現(xiàn)出明顯差異，即可運(yùn)用第3種方式加以檢查仲裁。在情節(jié)藥敏實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證時(shí)，若2個(gè)系統(tǒng)的檢測結(jié)果呈現(xiàn)出顯著差異性，實(shí)驗(yàn)室即可對藥敏結(jié)果出現(xiàn)差異菌株進(jìn)行二次檢測，舊系統(tǒng)與新系統(tǒng)中用同一培養(yǎng)液一式三份或平行展開二次檢測。如果二次檢測的結(jié)果相一致，即表明驗(yàn)證已通過，若2個(gè)系統(tǒng)二次檢測結(jié)果還存在差異性，即可通過CLSI參考方法對檢測的差異問題進(jìn)行解決。

微生物檢測系統(tǒng)性能驗(yàn)證的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估與人員培訓(xùn)

（1）風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估。實(shí)驗(yàn)室在對系統(tǒng)性能展開驗(yàn)證之前，還需對其藥敏檢測系統(tǒng)以及商品化鑒定的有關(guān)風(fēng)險(xiǎn)進(jìn)行評(píng)估與思考，這類風(fēng)險(xiǎn)具體包含了系統(tǒng)變化相關(guān)風(fēng)險(xiǎn)、錯(cuò)誤結(jié)果風(fēng)險(xiǎn)等，可根據(jù)CLSI EP23文件來加以評(píng)定，同時(shí)，還應(yīng)與實(shí)際情況相結(jié)合來制定實(shí)驗(yàn)室的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估方案，將評(píng)估結(jié)果記錄下來，以供查驗(yàn)核對。

（2）人員培訓(xùn)。在實(shí)驗(yàn)室安裝藥敏檢測與微生物鑒定系統(tǒng)后，要注意由廠家的技術(shù)人員對醫(yī)院微生物實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)人員進(jìn)行培訓(xùn)教育，為了保證工作人員的學(xué)習(xí)質(zhì)量，還可配合考核來檢查，合格后即可進(jìn)行下一步的審核報(bào)告與儀器操作工作。廠家與工作人員在性能驗(yàn)證前要檢測并保障儀器系統(tǒng)的正常運(yùn)行。據(jù)實(shí)驗(yàn)室相關(guān)系統(tǒng)對工作人員的培訓(xùn)情況與考核成績記錄下來。實(shí)驗(yàn)室對藥敏系統(tǒng)與微生物鑒定性能驗(yàn)證方案即包含了工作人員在檢測中得到可重復(fù)且正確鑒定以及藥敏結(jié)果的工作能力。

結(jié)束語

臨床微生物檢驗(yàn)在臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中屬于一項(xiàng)重要的學(xué)科，但是因?yàn)槭止げ僮飨鄬^多，而自動(dòng)化程度低，所以無法與其他專業(yè)組產(chǎn)生對比性。隨著ISO15189醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室認(rèn)可對實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量以及能力要求的提升，臨床微生物檢驗(yàn)作為檢驗(yàn)科的基本組成部分，其檢驗(yàn)?zāi)芰εc質(zhì)量也要不斷提升。近些年以來，臨床醫(yī)生物檢驗(yàn)自動(dòng)化水平有所提升，它的檢驗(yàn)系統(tǒng)的性能評(píng)價(jià)也將十分重要。從上文可知，美國的CLSI文件體系藥敏與微生物鑒定系統(tǒng)性能驗(yàn)證上具有一定的參考性，此文件體系相對較嚴(yán)格，執(zhí)行大成本也不低，它可從正確度與精密度指標(biāo)來進(jìn)行驗(yàn)證，所出具的質(zhì)控要求相對明朗，值得臨床推廣使用。