免疫學檢驗聯(lián)合檢測診斷系統(tǒng)性紅斑狼瘡的價值

周婭麗，秦斌，季沈杰

江蘇省啟東市人民醫(yī)院檢驗科，江蘇南通 226200

系統(tǒng)性紅斑狼瘡 （systemic lupus erthematosus， SLE）是一種臨床上常見的自身免疫系統(tǒng)病癥，具有典型性，病情發(fā)展迅速等特點，會對機體多個器官產(chǎn)生不良影響，導致該疾病出現(xiàn)的原因主要為免疫功能發(fā)生異常，并且存在B、T淋巴系統(tǒng)以及不同抗體功能的非正常表現(xiàn)[1-2]。該疾病的早期臨床表現(xiàn)具有一定的隱匿性，難以發(fā)現(xiàn)，如果患者沒有接受及時有效地治療，將會對其中樞神經(jīng)系統(tǒng)造成嚴重影響，致使皮膚黏膜受損，對其生活質(zhì)量產(chǎn)生嚴重影響。該疾病的臨床癥狀表現(xiàn)具有一定的復(fù)雜性，誤診和漏診風險較大[3]。為了能夠提高臨床診斷準確率，改善患者病情，該研究將2018年4月—2020年10月在該院收治的50例系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者及25名健康受檢者作為研究對象，分析和研究免疫學檢驗聯(lián)合檢測診斷系統(tǒng)對紅斑狼瘡的應(yīng)用價值?，F(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究對象為在該院收治的50例系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者，根據(jù)患者是否在活動期進行分組，共分為活動組（25例）和非活動組（25例）。活動組男、女例數(shù)分別為16例和9例；年齡28～62歲，平均年齡（44.31±5.68）歲。非活動組男、女例數(shù)分別為15例和10例；年齡29～63歲，平均年齡（45.02±5.61）歲。對照組男、女人數(shù)分別為17名和8名；年齡29～63歲，平均年齡（45.38±5.75）歲。對比3組性別、年齡等基線資料，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），可進行對比分析。納入標準[4]：全部患者均和美國風濕病協(xié)會中關(guān)于系統(tǒng)性紅斑狼瘡的診斷標準相符；全部患者及家屬均為知情自愿參加該次研究，且簽署知情同意書；該次研究經(jīng)該院倫理委員會審核批準；臨床資料具有完整性。排除標準：合并其他嚴重臟器受損疾病；合并原發(fā)性高血壓、糖尿病及高血脂；存在重癥風濕病癥；治療依從性不佳。

1.2 方法

對全部受檢者進行免疫學檢驗聯(lián)合檢測，檢測前使受檢者保持空腹狀態(tài)，將靜脈血液作為檢驗標準，收集5 mL，之后進行離心處理，速度為3 000 r/min，用時為10 min，將高脂血樣本和溶血樣本排除，之后留取血清，確保其劑量＞150μl，保存處理，放于-20℃的環(huán)境下進行保存，待檢測。使用貝克曼塔中蛋白全自動分析儀以及相應(yīng)試劑對IgM、IgA、IgG、C3、C4進行檢測，使用散射速率免疫比濁法對IgM、IgA、IgG、C3、C4進行檢測，在相同膜片上固化對應(yīng)的特異性抗原，使用微孔濾膜的滲透、濃縮、凝集，得到特異性IgG抗體，固相膜中的抗原抗體會產(chǎn)生復(fù)合物，復(fù)合物和標記抗人IgG免疫金試劑產(chǎn)生反應(yīng)，在固相膜出現(xiàn)紅色斑點。使用間接免疫熒光法進行ANAS檢測，使用免疫印跡法進行ENA檢測，使用膠體金斑點滲濾法進行抗ds-DNA抗體檢測。使用線性免疫檢測法檢測抗核抗體譜（IgG）14項。判斷標準：顯色結(jié)果灰度值進行判斷，陽性為灰度值≥11，弱陽性灰度值為6～10，陰性灰度值≤5。

1.3 觀察指標

將活動期組、非活動期組和對照組受監(jiān)測的IgA、IgM、IgG以及補體C3、C4水平差異進行對比。記錄系統(tǒng)紅斑狼瘡檢出情況。

1.4 統(tǒng)計方法

采用SPSS 22.0統(tǒng)計學軟件對數(shù)據(jù)進行分析，計量資料采用（±s）表示，進行t檢驗；計數(shù)資料采用[n(%)]表示，進行χ2檢驗。P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 3組指標檢測結(jié)果比較

在IgG、IgA、IgM指標方面，活動組明顯高于對照組，在C3、C4指標方面，活動組明顯低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。在IgG、IgA指標水平方面，非活動組明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），兩組C3、C4指標對比差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。見表1。

表1 3組受檢者各項指標檢測結(jié)果對比[（±s）,mg/L]

表1 3組受檢者各項指標檢測結(jié)果對比[（±s）,mg/L]

注：#表示同對照組比較，P＜0.05

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2.2 系統(tǒng)性紅斑狼瘡陽性檢出情況

全部患者中10例患者為ANAS陽性，比例為20.00%；8例患者為抗ds-DNA抗體陽性，比例為16.00%；3例患者為ENA多肽抗體Sm陽性，比例為6.00%；5例患者抗核糖核酸抗體u1RNP陽性，比例為10.00%；3例患者Sm、ulRNP均為陽性，比例為6.00%；5例患者為抗SS-A陽性，比例為10.00%；1例患者為SS-B陽性，比例為2.00%；2例患者SS-A、SS-B均為陽性，比例為4.00%。

3 討論

系統(tǒng)性紅斑狼瘡隨著病情的不斷發(fā)展，會對患者多個器官和組織產(chǎn)生不良影響，除此之外患者還可能發(fā)生明顯的免疫學異常，具有諸多對于正常細胞成分不同的自身抗體。如果患者沒有接受及時有效的治療，則會導致其病情更加嚴重[5-6]?，F(xiàn)如今現(xiàn)代免疫學發(fā)展迅速，免疫檢測的方法變得愈加豐富，臨床上對系統(tǒng)性紅斑狼瘡的研究和認知也在不斷深入，治療經(jīng)驗愈發(fā)豐富，有效提高了系統(tǒng)性紅斑狼瘡生存率[7]。

我國系統(tǒng)性紅斑狼瘡的發(fā)病率約為1.00%，相關(guān)研究顯示系統(tǒng)性紅斑狼瘡病癥具有性別上的差異，主要原因在于雌激素對胸腺素的形成具有一定影響，并能抑制TS細胞活性，產(chǎn)生免疫復(fù)合物，對器官和組織造成損傷[8]。對于系統(tǒng)性紅斑狼瘡實施單一免疫學檢驗的診斷準確率較低，但是免疫學檢驗聯(lián)合檢測能夠有效評估患者的病情及活動性，減少漏診、誤診風險事件。所以對系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者實施免疫學檢驗聯(lián)合檢測作用明顯[8]。

系統(tǒng)性紅斑狼瘡如果受到病毒感染，體液免疫檢測能有效評估免疫功能，實現(xiàn)對免疫的觀察，其中IgA、IgM和IgG為常見指標。IgA對局部黏膜有一定的保護免疫作用，如果出現(xiàn)系統(tǒng)性紅斑狼瘡，患者機體IgA水平明顯下降，進而導致機體屏障功能不佳，導致病毒感染風險增加。IgG屬于抗感染抗體的一種，很多抗病毒抗體都屬于IgG類型，如果其水平下降，也會直接導致機體免疫功能衰退，加速病毒發(fā)展，引發(fā)炎性反應(yīng)，侵害中樞神經(jīng)系統(tǒng)。IgM屬于免疫球蛋白，對于早期感染作用明顯，其水平提升表示機體對病毒發(fā)生應(yīng)答反應(yīng)，在系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者體內(nèi)水平較高，具有一定的免疫應(yīng)答反應(yīng)[9]。

系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者血清存在較多ANA等自身抗體譜，屬于免疫學異常的一種表現(xiàn)。ANA的靶抗原為細胞核成分，主要指抗體細胞內(nèi)所有成分和自身抗體的和，主要包括抗核仁抗體、抗DNA抗體以及抗組蛋白抗體等[10]。系統(tǒng)性紅斑狼瘡中抗SS-A、SS-B陽性者以及亞急性皮膚型紅斑狼瘡、新生兒紅斑狼瘡關(guān)系度較高，所以臨床對該疾病的額診斷、分型以及預(yù)后分析都可以通過抗SS-A、抗SS-B檢測，效果明顯。對于未接受治療的患者，ANAS陽性率較高，很多健康者存在弱陽性反應(yīng)，如果ANA滴度超過1∶20，臨床可進行疾病診斷。其中ANA的熒光圖型類型豐富，主要為質(zhì)型、核仁型、斑點型等。目前臨床對ANAS的主要診斷方式為間接免疫熒光法，通常情況下如果ENA或者ds-DNA抗體結(jié)果為陽性，則ANAS結(jié)果為陽性。但是也可能發(fā)生漏診風險[11]。

該次研究結(jié)果表明，在IgG、IgA、IgM指標方面，活動組[（22.03±3.71)、（3.93±0.97）、（2.51±1.63）mg/L]明顯高于對照組[（11.68±3.41）、（1.21±0.83）、（1.22±0.98）mg/L]，在C3、C4指標方面，活動組[（0.41±0.33）、（0.15±0.14）mg/L]明 顯 低 于 對 照 組 [（1.02±0.78）、（0.30±0.25）mg/L]（P＜0.05）。該結(jié)果表明系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的補體系統(tǒng)被激活，導致補體成分消耗，并且該結(jié)果表明系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的免疫球蛋白水平以及補體水平和患者活動度有一定的聯(lián)系。同時活動組的血清IgG、IgA、IgM指標高于對照組，補體C3、C4均低于對照組，主要原因在于患者在患病狀態(tài)下，補體和機體的免疫調(diào)節(jié)功能可能導致機體免疫反應(yīng)效應(yīng)放大。該次研究結(jié)果與董國躍[12]相關(guān)研究結(jié)果一致，其結(jié)果顯示。同時活動組的血清IgA、IgM、IgG指標[（3.82±0.43）、（2.30±0.46）、（22.35±3.65）mg/L]高于對照組[（1.01±0.30）、（1.02±0.13）、（12.23±2.06）mg/L]，活動組補體C3、C4[（0.26±0.03）、（0.19±0.01）mg/L]均低于對照組[（0.84±0.16）、（0.55±0.18）mg/L]（P＜0.05）。

根據(jù)相關(guān)臨床研究顯示，系統(tǒng)性紅斑狼瘡補體成分中的C4最先開始降低，并且C4水平的回升比其他成分更晚[13]。因此對C4水平進行測定有助于提高系統(tǒng)性紅斑狼瘡的診斷準確率，同時能為評估患者預(yù)后及治療效果提供重要途徑。目前臨床廣泛認可的系統(tǒng)性紅斑狼瘡標志抗體主要為抗ds-DNA、Sm抗體，該疾病患者的陽性率為60%～90%。其滴度和活動性存在密切聯(lián)系，對抗ds-DNA陽性率進行檢測有助于了解患者的病情情況，認識到病情變化情況和患者腎臟受損之間的聯(lián)系。除此之外，系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者的抗Sm抗體、u1RNP具有較高的特異度，病情活動以及治療會影響到特異度，導致陽性檢出率不佳，在30%左右。

綜上所述，對系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者進行單一血清學檢驗并不能有效了解患者病情，為了進一步提高診斷價值，對系統(tǒng)性紅斑狼瘡采取免疫學聯(lián)合檢測診斷系統(tǒng)進行診斷效果確切，有助于幫助臨床醫(yī)師了解疾病發(fā)展情況，進行準確評估，同時對患者預(yù)后具有輔助分析作用，有助于臨床醫(yī)師制定合理的治療方式，值得臨床采納。