乳化處理精油對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能、血液代謝物及腸道菌群的影響

李娟花

（陜西國(guó)際商貿(mào)學(xué)院 醫(yī)藥學(xué)院，陜西西安 712046）

犢牛通常一出生就吃初乳，進(jìn)而獲得被動(dòng)免疫。但環(huán)境和生產(chǎn)上受到應(yīng)激也可能導(dǎo)致被動(dòng)免疫失敗，從而使它們易患腸道和呼吸道疾病。為了預(yù)防或減少這些問(wèn)題，過(guò)去通常在飼料或飲水中添加抗生素。但由于目前大部分國(guó)家都禁止在飼料中使用抗生素，因此必須選擇抗生素替代品。從植物中提取的精油有可能取代抗生素在動(dòng)物中應(yīng)用，以改善禁抗后動(dòng)物較差的生長(zhǎng)表現(xiàn)。一些研究表明不同植物精油對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能和健康的積極影響（郭竟升，2018；Santos等，2015）。目前市面上常見(jiàn)的植物精油有香芹酚、百里香酚、樹(shù)桉精油等，它們均具有抗菌、抗炎和抗氧化特性（Bozin等，2007）。但大多數(shù)植物精油是疏水性或親油性化合物，不溶于母乳，造成犢牛出生后在母乳中添加精油可能導(dǎo)致混合不均勻、穩(wěn)定性差和低生物利用率等問(wèn)題（張晨等，2016）。McClements等（2007）報(bào)道了一種可行的解決方案是使用專(zhuān)門(mén)的乳化劑處理植物精油，因?yàn)槿榛瘎榛A(chǔ)的輸送系統(tǒng)已廣泛用于輸送親脂性化合物，如功能脂類(lèi)及食品、醫(yī)療和制藥工業(yè)中的植物化學(xué)物質(zhì)。此外，有報(bào)道表明，提供具有生物活性的親脂性化合物作為一種乳化劑可以增加適口性、分散、均勻混合和吸收，進(jìn)而提高生物活性（魏慧賢等，2007）。眾所周知，牛奶是油和其他物質(zhì)在水中的乳化營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，如蛋白質(zhì)、碳水化合物、維生素和礦物質(zhì)。有些關(guān)于乳化處理精油用于化妝品、食品和制藥行業(yè)的報(bào)道（Loeffler等，2014），但關(guān)于這種處理方法在動(dòng)物上的應(yīng)用研究報(bào)道較少。因此，本研究旨在探討日糧添加不同水平的乳化精油對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能、血液代謝物及腸道菌群的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 試驗(yàn)將出生3 d后，平均體重為（40.09±0.20）kg的72頭犢牛隨機(jī)分為3組，每組4個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)6頭。出生3 d后的各組犢牛在試驗(yàn)第1～14天每天提供4.5 kg母乳，15～28 d每天提供6 kg母乳。試驗(yàn)期間各組犢牛自由采食全混合日糧，對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，T1和T2組分別在基礎(chǔ)日糧中添加50和100 mg/kg乳化精油。試驗(yàn)原料購(gòu)自建明工業(yè)。

1.2 飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)期間（28 d）各組犢牛均飼養(yǎng)在相同環(huán)境中，每天補(bǔ)充的母乳分兩次飼喂，每天記錄飼料投喂量和剩余量，試驗(yàn)結(jié)束后對(duì)每頭犢牛進(jìn)行稱(chēng)重，數(shù)據(jù)用于計(jì)算日增重、日采食量和料重比。

1.3 樣品采集與測(cè)定 試驗(yàn)結(jié)束當(dāng)天犢牛禁食4 h后頸靜脈采血10 mL，血液在室溫下靜置15 min后采用冷凍離心機(jī)在3000 g條件下離心15 min，分離血清。血清樣品用南京建成生工所的商品試劑盒測(cè)定葡萄糖、總蛋白、白蛋白、甘油三酯、膽固醇、尿素氮濃度及谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST）和谷氨酰轉(zhuǎn)移酶活性。之后每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選擇1頭犢牛進(jìn)行屠宰，分離盲腸，用無(wú)菌EP管收集內(nèi)容物，參考陳娜娜等（2017）的方法測(cè)定乳酸桿菌和大腸桿菌數(shù)量。

1.4 數(shù)據(jù)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SAS軟件單因素方差分析模型進(jìn)行分析，采用Turkey法進(jìn)行多重比較，P＜0.05表示組間顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 乳化精油對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能的影響 由表2可知，對(duì)照組與處理組對(duì)犢牛末重和平均日采食量的影響均無(wú)顯著差異（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，50 mg/kg乳化精油組犢牛的日增重顯著提高13.02%（P＜0.05），料重比顯著降低12.96%（P＜0.05）。50和100 mg/kg乳化精油組犢牛的平均日增重和料重比無(wú)顯著差異（P＞0.05）。

表2 乳化處理精油對(duì)犢牛生長(zhǎng)性能的影響

2.2 乳化精油對(duì)犢牛血液代謝物的影響 由表3可知，對(duì)照組與處理組對(duì)犢牛血清葡萄糖、總蛋白、白蛋白和膽固醇濃度的影響無(wú)顯著差異（P＞0.05）。與對(duì)照組相比，50和100 mg/kg乳化精油組犢牛血清甘油三酯濃度較對(duì)照組分別顯著提高19.22%和19.71%（P＜0.05）。對(duì)照組犢牛血清尿素氮濃度及谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶活性均顯著高于50和100 mg/kg乳化精油組（P＜0.05）。50和100 mg/kg乳化精油組犢牛血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性無(wú)顯著差異（P＞0.05），但50 mg/kg乳化精油組犢牛血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性較對(duì)照組顯著降低25.93%（P＜0.05）。

表3 乳化處理精油對(duì)犢牛血液代謝物的影響

2.3 乳化精油對(duì)犢牛腸道菌群的影響 由表4可知，與對(duì)照組相比，50和100 mg/kg乳化精油組盲腸乳酸桿菌數(shù)量分別顯著提高8.51%和7.47%（P＜0.05），同時(shí)大腸桿菌數(shù)量分別顯著降低36.40%和34.73%（P＜0.05）。

表4 乳化處理精油對(duì)犢牛腸道菌群的影響 log10CFU/g

3 討論

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，50 mg/kg乳化精油組犢牛的日增重顯著高于對(duì)照組，但料重比顯著降低，但當(dāng)乳化精油濃度由50 mg/kg提升至100 mg/kg時(shí)，飼料效率并無(wú)進(jìn)一步改善，這與Jeshari等（2016）報(bào)道的結(jié)果一致，其研究認(rèn)為，在犢牛早期飼料中添加丹參和麥角提取物可以提高平均日增重。類(lèi)似地，Salazar等（2019）報(bào)告稱(chēng)，飼喂植物精油或益生菌的犢牛在整個(gè)試驗(yàn)期日增重均高于對(duì)照組。飼喂植物精油組犢牛的生長(zhǎng)性能好的原因可能與植物精油抗菌、抗氧化或抗炎作用有關(guān)（Oh等，2017）。

血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶及谷氨酰轉(zhuǎn)移酶活性是評(píng)估肝功能及組織完整性的重要指標(biāo)，其中血清中這些酶的水平表明肝細(xì)胞因外傷、炎癥或細(xì)胞壁脂質(zhì)氧化而受損（林鑫等，2015）。本研究結(jié)果顯示，對(duì)照組犢牛血清尿素氮濃度及谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷氨酰胺轉(zhuǎn)移酶活性均顯著高于50和100 mg/kg乳化精油組，同時(shí)50 mg/kg乳化精油組犢牛血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性顯著低于對(duì)照組。上述結(jié)果與從藥用植物中提取的植物精油可以作為外源性抗氧化劑，清除活性氧，預(yù)防氧化脂質(zhì)氧化，進(jìn)而保護(hù)肝臟功能（Amorati等，2013）。

抗菌作用是藥用植物源性精油最重要的特性，引起了研究者的廣泛關(guān)注。基于其潛力，植物精油也被認(rèn)為是抗生素的天然替代品，可作為生長(zhǎng)促進(jìn)劑。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，乳化處理后的植物精油可以提高犢牛盲腸內(nèi)容物乳酸桿菌數(shù)量，降低大腸桿菌數(shù)量，這與Yap等（2014）報(bào)道的結(jié)果一致。此外，Moghimi等（2015）報(bào)道了納米乳液處理植物精油對(duì)大腸桿菌具有較強(qiáng)的抑菌活性，其推斷乳化精油的作用方式可能是破壞細(xì)菌細(xì)胞壁或可能改變細(xì)菌細(xì)胞壁的完整性，或通過(guò)干擾蛋白質(zhì)的主動(dòng)運(yùn)輸嵌在細(xì)菌細(xì)胞壁中。

4 結(jié)論

日糧補(bǔ)充50～100 mg/kg乳化精油可以改善肝臟功能和盲腸乳酸桿菌數(shù)量，降低氮分解及盲腸大腸桿菌數(shù)量，綜合考慮生長(zhǎng)性能，犢牛日糧中乳化精油的適宜添加濃度為50 mg/kg。