動物性食品中氟喹諾酮類獸藥殘留檢測技術(shù)分析

摘要：氟喹諾酮類藥物有良好的殺菌、抗感染功效，近些年其在畜牧養(yǎng)殖領(lǐng)域有十分廣泛的應(yīng)用。為了能使用動物源食品安全得到更大保障，應(yīng)積極做好獸藥殘留檢測工作。文章在闡述氟喹諾酮類藥物殘留危害性的基礎(chǔ)上，較為詳細(xì)的探究檢測技術(shù)、方法，以供同行參考。

關(guān)鍵詞：動物性食品;氟喹諾酮類;獸藥殘留;檢測技術(shù)

引言

在供應(yīng)動物源性食品方面，獸藥發(fā)揮著重要的作用，但因部分飼養(yǎng)人員專業(yè)知識匱乏，實踐中容易出現(xiàn)過量投用藥物、不遵照休藥期，或者為追求更多的經(jīng)濟(jì)效益而將過量抗菌藥物用在養(yǎng)殖、加工、儲存等過程中，造成獸藥殘留超標(biāo)，通過食物鏈進(jìn)到人體而引起中毒、過敏等情況，對機體健康造成嚴(yán)重?fù)p害。故而，在動物源食品輸送到市場之前檢測藥物殘留情況具有很大實際意義。氟喹諾酮藥物有成本較低、抗菌廣泛等特點，在養(yǎng)殖與獸醫(yī)學(xué)中均有應(yīng)用，本文主要綜述分析本品藥物殘留的檢測技術(shù)。

1、氟喹諾酮類獸藥殘留的危害分析

本品藥物是一種常見的細(xì)菌DNA合成抑制劑，在牛、羊等牲畜養(yǎng)殖管理中氟喹諾酮類獸藥（FGs）均有應(yīng)用。伴隨本品藥物應(yīng)用范圍的拓展，其在動物性食品內(nèi)的殘留問題也得到人們的廣泛關(guān)注，其危害性主要表現(xiàn)在如下兩方面：一是直接危害，當(dāng)人們施用殘留一定量FGs的動物源食品后，藥物殘留劑量可以進(jìn)到機體消化系統(tǒng)，對局部器官功能造成損害;二是間接危害，如果人們長期食用含有FGs的動物源食品以后，殘留藥物成分可能誘發(fā)人體各種致病菌生成耐藥性，此時FGs阻礙著人體抗菌治療過程。

2、檢測技術(shù)

2.1微生物法

這是早期廣泛應(yīng)用的一種方法，利用其能迅速篩選檢測畜禽組織內(nèi)的抗菌藥物。其檢測原理可作出如下概述：依照抗生素對微生物生理機能、代謝過程等形成的抑制作用，通過定性或定量檢測形式確定試樣內(nèi)抗生素的殘留情況。實踐中，雖然這種方法能檢出高濃度的藥物殘留情況，操作流程較簡單，成本偏低，在海量樣品快速篩查領(lǐng)域表現(xiàn)出較高的適用性，但是多數(shù)情況下檢測限高于試樣所設(shè)定的最大殘留限量，且在靈敏度、特異性等方面不占優(yōu)勢。

既往國內(nèi)有人員在報道中指出，在磷酸鹽緩沖液、肌肉、肝臟與腎臟內(nèi)，環(huán)丙沙星的最低檢測限依次是0.025μg/ml、0.05μg/ml、0.075μg/ml，本方法靈敏度與回收率較高，操作過程簡單，實踐中無需配置特殊昂貴裝置、樣本用量相對較少，便于推廣，可以用于定量檢測環(huán)丙沙星的殘留情況[1]。也有人員采用微生物抑制法檢測時，將適量濃度已知的恩諾沙星添加至培養(yǎng)基內(nèi)，用于提升敏感菌的靈敏度，用紅四氮唑顯色，檢測恩諾沙星的殘留量，其檢測限由50μg/kg降到10μg/kg[2]。

2.2儀器分析法

2.2.1高效液相色譜法（HPLC）

經(jīng)典的液相色譜法是HPLC技術(shù)的基礎(chǔ)，通過引進(jìn)具有高分離效能的色譜柱與靈敏度較高的紫外線檢測器，發(fā)展出了氣相色譜的相關(guān)理論與基礎(chǔ)，其在分析高沸點、大分子、極性強與熱穩(wěn)定性極差的化合物方面表現(xiàn)出很很多優(yōu)勢，應(yīng)用效果也是十分理想的。當(dāng)下，檢驗檢疫機構(gòu)、科研院所及養(yǎng)殖加工企業(yè)均有應(yīng)用HPLC技術(shù)的身影，殘留檢測時通常會將這種方法作為國家標(biāo)準(zhǔn)（GB），其囊括了氣相層析的所有優(yōu)勢。強大的分離能力、極高的靈敏度、能在室溫條件下進(jìn)行、運用范疇十分廣泛。

過往有人員采用這種技術(shù)檢測畜禽肉蛋及水產(chǎn)內(nèi)4種FQs藥物的殘留情況，發(fā)現(xiàn)環(huán)丙沙星、恩諾沙星、沙拉沙星定量限都是10ng/g，達(dá)氟沙星是2ng/g，回收率范疇70%～93%。

（2）高效液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用法（LC—MS）

伴隨科研工作的深入推進(jìn)劑社會群體對食品安全問題重視度的提升，定性更加精準(zhǔn)、靈敏度更高的液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)被越來越多的人所接受，該種技術(shù)的優(yōu)勢不僅是能進(jìn)一步提升定量分析的精準(zhǔn)性，規(guī)避過往因檢測方法和國外要求存在出入而遇到的貿(mào)易壁壘，并且在定性分析方面也表現(xiàn)出高精準(zhǔn)性，明顯減少了液相色譜法內(nèi)形成的雜峰干擾現(xiàn)象，有資料記載，本法下的喹諾酮類藥物定量限能夠達(dá)到5ng/mL，檢測限約1ng/mL，靈敏度處于較高的層面上，為檢測微量獸藥殘留情況創(chuàng)造了很多便利條件，被認(rèn)定是當(dāng)下檢測食品內(nèi)FQNs殘留的一種最佳方法，但這種方法應(yīng)用階段配套設(shè)施相對較昂貴，這在很大程度上阻礙了其普及過程。

有人員在檢測魚肉內(nèi)4種氟喹諾酮藥物的殘留情況時，選用酸性乙腈、正己烷分別作為提取劑、脫脂劑，經(jīng)氮吹濃縮定容處理后，利用反相液相色譜進(jìn)行分離，LC—MS檢測，輔助外標(biāo)法定量，統(tǒng)計發(fā)現(xiàn)四種FQs藥物的線性范疇、檢出限、定量限分別是2～40μg/㎏、0.1～0.4μg/㎏、、0.3～1.0μg/㎏[3]。

（3）高效毛細(xì)管電泳法（HPCE）

這是近些年發(fā)展起來的一種新技術(shù)，和HPLC法做比較，其應(yīng)用中最大的不同石克服了行緩

沖液的酸、堿性與摻入的表面活性劑等形成的影響，有樣本投入量少、分析快速、分離高效、運行成本偏低、適用性強等諸多特點。有人員利用毛細(xì)管電泳建立了同時檢測雛雞、哺乳豬等養(yǎng)殖飼料內(nèi)五種氟喹諾酮藥物的檢測方法，在274nm位置，分離電壓、溫度分別是18kV、22℃，于80mmol/L檸檬酸一檸檬酸鈉pH=6.5的運行緩沖液內(nèi)，10min內(nèi)五種藥物均完全分離，方法的平均回收率是84.42%～107.5%，精密度1.36%～1.69%，不管是回收率還是精密度均符合對五種藥物設(shè)定的檢測要求[4]。

2.3免疫分析法

其是基于抗原一抗體的特異性、可逆性整合發(fā)展起來的一種全新分析技術(shù)。檢測原理是應(yīng)用特殊的抗體辨識目標(biāo)藥物，目標(biāo)藥物與標(biāo)識藥物兩者在結(jié)合特異性抗體方面存在著明確的競爭關(guān)系，出現(xiàn)了藥物抗體復(fù)合物，利用復(fù)合物和酶結(jié)合呈現(xiàn)出的色澤或標(biāo)底的顏色去做出相應(yīng)分析。因為免疫分析法有特異性高、精準(zhǔn)性好、操作方法簡單、靈敏度高、適用于大量樣品檢測領(lǐng)域等特征，故而其發(fā)展過程也是十分快速的，在國內(nèi)視頻安全檢測領(lǐng)域中的應(yīng)用、研究不斷增加。

3、結(jié)束語

總之，檢測動物源食品內(nèi)FQNS的殘留情況，要選擇特異性強、靈敏度高、效率高及快速的監(jiān)測技術(shù)，雖然我國在該方面的研究與應(yīng)用已取得一定成績，但不可否認(rèn)的事實是氟喹諾酮殘留的監(jiān)測主要集中在單物質(zhì)檢測方面，很少涉及多物質(zhì)殘留的檢測內(nèi)容，維持應(yīng)加大多殘留檢測技術(shù)，并言之相應(yīng)的檢測試劑盒，為人民身體健康提供更優(yōu)質(zhì)的服務(wù)。

參考文獻(xiàn)

[1]劉海生.水產(chǎn)品中喹諾酮類獸藥殘留檢測研究進(jìn)展[J].中國動物保健，2019，021（008）：59-61.

[2]辛麗娜，譚喜梅，梁飛燕，等.2018年廣西禽蛋中獸藥殘留風(fēng)險檢測結(jié)果分析[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2019，v.10（17）：55-61.

[3]李妍，閆蕊，王孝研，等.動物源性食品中氟喹諾酮類抗生素殘留檢測方法的研究進(jìn)展[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2019，45（10）：456-459.

[4]馬立利，劉聰，高麗娟，等.動物源性食品中獸藥殘留檢測標(biāo)準(zhǔn)解析與能力驗證工作探討[J].食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2019（11）：3236-3248.

作者簡介

毛玲，1995.6，女，揚州高郵，本科，助理工程師，從事食品檢驗檢測。