麩炒北蒼術(shù)飲片粉末的色度值與質(zhì)量指標(biāo)的相關(guān)性分析及其炮制時(shí)間研究

魯云　洪婉敏　姚曉璇　紀(jì)玉華　梁麗金　鐘文峰　劉燎原

中圖分類(lèi)號(hào) R283.1 文獻(xiàn)標(biāo)志碼 A 文章編號(hào) 1001-0408（2021）21-2605-08

DOI 10.6039/j.issn.1001-0408.2021.21.08

摘 要 目的：分析麩炒北蒼術(shù)飲片粉末的色度值與質(zhì)量指標(biāo)的相關(guān)性，并對(duì)其炮制時(shí)間進(jìn)行確定。方法：制備16批麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品（S0～S15，S0為北蒼術(shù)生品），并測(cè)定所有樣品粉末的色度值[明度值（L*）、黃藍(lán)色值（b*）、紅綠色值（a*）];分析樣品的超高效液相色譜（UPLC）指紋圖譜，并測(cè)定其浸出物、揮發(fā)油含量。對(duì)樣品粉末色度值與質(zhì)量指標(biāo)（UPLC指紋圖譜中各色譜峰的相對(duì)峰面積以及水溶性浸出物、醇溶性浸出物、揮發(fā)油含量）進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析，并以色度值和質(zhì)量指標(biāo)進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)分析（主成分分析、聚類(lèi)分析、偏最小二乘法判別分析），進(jìn)一步結(jié)合灰色關(guān)聯(lián)度法對(duì)麩炒北蒼術(shù)飲片的炮制時(shí)間進(jìn)行確定。結(jié)果：北蒼術(shù)飲片在麩炒過(guò)程中，隨著炮制時(shí)間的延長(zhǎng)，飲片粉末的L*、b*呈下降趨勢(shì)，a*呈先升高后下降的趨勢(shì);峰1、峰2的相對(duì)峰面積先增加后減少，峰3（5-羥甲基糠醛）的相對(duì)峰面積增加，其余色譜峰的相對(duì)峰面積均減少;浸出物含量變化不明顯，揮發(fā)油含量呈一定的下降趨勢(shì)。相關(guān)性分析結(jié)果顯示，峰2～27的相對(duì)峰面積、醇溶性浸出物含量以及揮發(fā)油含量與色度值呈一定相關(guān)性，峰1的相對(duì)峰面積和水溶性浸出物含量與色度值無(wú)線性相關(guān)關(guān)系。多元統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果顯示，樣品可聚為炮制輕度（S0～S5）、過(guò)度（S12～S15）、適度（S6～S11，即炮制時(shí)間為18～33 min）3類(lèi);灰色關(guān)聯(lián)度法結(jié)果顯示，麩炒北蒼術(shù)飲片的炮制時(shí)間應(yīng)控制在18～24 min范圍內(nèi)，且最優(yōu)炮制時(shí)間為18 min。結(jié)論：麩炒北蒼術(shù)飲片粉末的色度值與27個(gè)色譜峰的相對(duì)峰面積以及浸出物、揮發(fā)油的含量具有一定相關(guān)性。建議盡量控制炮制時(shí)間為18 min。

關(guān)鍵詞 麩炒北蒼術(shù)飲片;指紋圖譜;色度值;浸出物;揮發(fā)油;相關(guān)性;炮制

ABSTRACT? ?OBJECTIVE： To analysis the correlation between chromaticity value and quality index of Atractylodis chinensis decoction piece powder stir-fired with bran， and to determine its processing time. METHODS： The processed samples of 16 batches of A. chinensis decoction piece stir-fired with bran （S0-S15， S0 is the raw product of A. chinensis） were prepared， and chromaticity values of all samples were determined， such as lightness value （L*）， yellow blue value （b*）， red green value （a*）. UPLC fingerprint of sample were analyzed， and the contents of extract and volatile oil were also determined. Pearson correlation was used to analyze the correlation between the chromaticity value and quality index （relative peak area of each chromatographic peak in UPLC fingerprint， water-soluble extract content， alcohol-soluble extract content and volatile oil content）. Multivariate statistical analysis （principal component analysis， cluster analysis， partial least squares discriminant analysis） was carried out with chromaticity value and quality index， and the processing time of A. chinensis decoction piece stir-fired with bran was determined by grey correlation method. RESULTS： In the process of bran frying， with the extension of processing time， L* and b* of decoction pieces powder decreased， and a* increased first and then decreased; relative areas of peak 1 and peak 2 increased first and then decreased， while relative areas of peak 3 （5-hydroxymethyl furfural） increased， and the areas of the other peaks decreased. The content of the extract did not change significantly with time， and the content of the volatile oil decreased.? The results of correlation analysis showed that the relative peak area of peak 2-27， alcohol-soluble extract content and volatile oil content had a certain correlation with the chromaticity value， while the relative peak area of peak 1 and water-soluble extract content had no linear correlation with the chromaticity value. Results of multivariate statistical analysis showed that the samples were divided into? ? ? mild （S0-S5）， excessive （S12-S15）， moderate （S6-S11， processing time of 18-33 min）. The results of grey correlation method showed that the processing time of A. chinensis decoction piece stir-fired with bran should be controlled in the range of 18-24 min， and the optimal processing time was 18 min. CONCLUSIONS： There is a correlation between chromaticity value of A. chinensis decoction piece powder stir-fired with bran and the relative peak area of 27 chromatographic peaks， and content of extract and volatile oil. It is suggested that the processing time should be 18 min.

KEYWORDS? ?Atractylodis chinensis decoction piece stir-fired with bran; Fingerprint; Chromaticity value; Extract; Volatile oil; Correlation; Processing

蒼術(shù)為菊科植物茅蒼術(shù)Atractylodes lancea （Thunb.）DC.或北蒼術(shù)Atractylodes chinensis （DC.） Koidz.的干燥根莖[1]。蒼術(shù)的炮制方法較多，常用的有麩炒法、土炒法、酒制法、醋炒法、姜汁法等[2]。目前在2020年版《中國(guó)藥典》中主要收載麩炒蒼術(shù)這一種炮制品[1]。蒼術(shù)生品辛溫，具有燥濕、祛風(fēng)散寒的作用，用于治療濕阻中焦、脘腹脹滿(mǎn)、泄瀉、水腫等癥[2]。經(jīng)麩炒后，蒼術(shù)性味和化學(xué)成分均發(fā)生了相應(yīng)的變化，且其健脾養(yǎng)胃以及保肝作用均增強(qiáng)、燥濕作用減弱，可用于治療脾胃不和、腹痞滿(mǎn)等癥[3]。

蒼術(shù)的化學(xué)成分復(fù)雜，在麩炒過(guò)程中，其表觀顏色與內(nèi)在質(zhì)量均發(fā)生了一定程度的變化，而蒼術(shù)內(nèi)在質(zhì)量的變化可在一定程度上影響其臨床治療效果[4]。隨著現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)的不斷發(fā)展，色差分析儀在傳統(tǒng)中藥研究中的應(yīng)用越來(lái)越廣泛，可實(shí)現(xiàn)對(duì)中藥飲片及其粉末顏色的客觀量化[5-7]，為中藥飲片的炮制程度量化分析及質(zhì)量控制提供技術(shù)支持[8]?；诖?，本研究以北蒼術(shù)為研究對(duì)象（由于蒼術(shù)產(chǎn)地差異以及基原不同等原因[9-10]，蒼術(shù)中所含的成分也存在一定差異，故本研究明確所用蒼術(shù)藥材基原為北蒼術(shù)），對(duì)其炮制過(guò)程樣品粉末的色度值與質(zhì)量指標(biāo)[指紋圖譜（前期研究已建立[11]）中各色譜峰的相對(duì)峰面積、水溶性浸出物含量、醇溶性浸出物含量、揮發(fā)油含量]的相關(guān)性進(jìn)行研究，以期為北蒼術(shù)飲片麩炒過(guò)程的質(zhì)量控制及炮制時(shí)間的確定提供參考。

1 材料

1.1 主要儀器

本研究所用主要儀器有H-class型超高效液相色譜（UPLC）儀（美國(guó)Waters公司）、KQ-700DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）、Milli-Q Direct型超純水系統(tǒng)（美國(guó)Merck公司）、ME204E型萬(wàn)分之一天平（瑞士Mettler-Toledo公司）、DHG-9147A型電熱恒溫干燥箱（上海精宏實(shí)驗(yàn)設(shè)備有限公司）、ARB52B+型紅外測(cè)溫儀（東莞萬(wàn)創(chuàng)電子制品有限公司）、HP-C220型精密色差儀（深圳漢譜光彩科技有限公司）、HK-168型中藥切片機(jī)（廣州賽豪機(jī)械設(shè)備有限公司）、CZ40型超導(dǎo)電加熱炒藥機(jī)（北京霍氏機(jī)械制造有限公司）。

1.2 主要藥品與試劑

本研究所用5-羥甲基糠醛（5-HMF，批號(hào)111626- 201912，純度99.2%）、綠原酸（批號(hào)110753-201817，純度96.8%）、咖啡酸（批號(hào)110885-201703，純度99.9%）、阿魏酸（批號(hào)110771-201915，純度97.7%）、蒼術(shù)素（批號(hào)111924-201605，純度99.8%）的對(duì)照品均購(gòu)自中國(guó)食品藥品檢定研究院;甲醇為分析純，甲酸為色譜純，其余試劑為實(shí)驗(yàn)室常用規(guī)格，水為純凈水。

北蒼術(shù)藥材均購(gòu)自哈爾濱福順堂藥材有限公司，經(jīng)廣東一方制藥有限公司魏梅主任藥師鑒定為菊科植物北蒼術(shù)A. chinensis（DC.）Koidz.的干燥根莖。

2 方法與結(jié)果

2.1 麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品的制備

參考2020年版《中國(guó)藥典》[1]北蒼術(shù)【炮制】項(xiàng)下的規(guī)定制備北蒼術(shù)飲片，再按麩炒法制備不同炮制時(shí)間的麩炒北蒼術(shù)飲片。具體麩炒方法如下：設(shè)置炒藥機(jī)加熱溫度為250 ℃，待鍋內(nèi)溫度穩(wěn)定在200 ℃時(shí)，投入麥麩1.5 kg，炒至冒白煙時(shí)，投入北蒼術(shù)飲片10 kg進(jìn)行翻炒;從投入北蒼術(shù)飲片后開(kāi)始計(jì)時(shí)，每隔3 min取樣1次，共炮制45 min，并采用紅外測(cè)溫儀測(cè)定出鍋時(shí)該飲片表面的溫度。本研究在炒制過(guò)程中共取樣16次，各時(shí)間點(diǎn)樣品記為S0～S15（其中S0為北蒼術(shù)生品）。具體取樣信息見(jiàn)表1。

2.2 麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品的表觀性狀及顏色變化

2.2.1 表觀性狀觀察 取麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品（S0～S15）進(jìn)行表觀性狀觀察，結(jié)果見(jiàn)表2、圖1。

由表2和圖1可知，隨著炮制時(shí)間的延長(zhǎng)，麩炒北蒼術(shù)飲片斷面的整體顏色逐漸加深，由黃棕色變?yōu)樯铧S色再變?yōu)樽睾稚?飲片斷面的油室顏色逐漸加深，由黃棕色變?yōu)樽睾稚?，且斷面上焦斑的顏色也越?lái)越深。

2.2.2 色度值測(cè)定 取麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品（S0～S15）的粉末（過(guò)三號(hào)篩，下同）適量，壓制成厚度約1 mm的薄片（表觀變化見(jiàn)圖2），采用國(guó)際照明委員會(huì)認(rèn)可的D65光源進(jìn)行照射，經(jīng)白板校正后，平行拍照3次。觀察并記錄各樣品粉末的色度值[包括明度值（L*）、紅綠色值（a*）、黃藍(lán)色值（b*），其數(shù)值由大到小分別表示粉末顏色由明變暗、由紅變綠、由黃變藍(lán)]，計(jì)算總色值（E*ab）、總色差值（ΔE*a）[E*ab=（L*2+a*2+b*2）1/2，ΔE*ab=（ΔL*2+Δa*2+Δb*2）1/2，式中ΔL*=炮制品的L*-生品的L*，Δa*=炮制品的a*-生品的a*，Δb*=炮制品的b*-生品的b*]，結(jié)果見(jiàn)表3。由表3可知，隨著炮制時(shí)間的延長(zhǎng)，麩炒北蒼術(shù)飲片粉末的L*、b*呈下降趨勢(shì)，a*呈先升高后下降的趨勢(shì);? ? ?ΔE*ab逐漸增大，當(dāng)ΔE*ab>6時(shí)（即炮制9 min后），可與生品明顯區(qū)分[6]，詳見(jiàn)表3。

分別以色度值L*、a*、b*為縱坐標(biāo)（y），以炮制時(shí)間為橫坐標(biāo)（x，min）進(jìn)行回歸分析，結(jié)果見(jiàn)圖3。由圖3可知，L*、b*與炮制時(shí)間呈線性關(guān)系，a*與炮制時(shí)間呈二元回歸關(guān)系。

2.3 麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品的UPLC指紋圖譜分析

本課題組前期研究采用UPLC法建立了麩炒北蒼術(shù)飲片炮制前后的指紋圖譜[11]，詳見(jiàn)圖4。其中S0樣品（即北蒼術(shù)生品）檢測(cè)到26個(gè)色譜峰（峰2～峰27），S1～S15樣品共檢測(cè)到27個(gè)色譜峰（峰1～峰27，其中峰2、峰3僅部分樣品中檢測(cè)到）。基于此，本研究不再對(duì)方法學(xué)考察等內(nèi)容進(jìn)行贅述，而主要對(duì)麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品間的相似度進(jìn)行評(píng)價(jià)，并分析27個(gè)色譜峰的相對(duì)峰面積在炮制過(guò)程中的動(dòng)態(tài)變化情況（未檢測(cè)到的色譜峰的相對(duì)峰面積以0計(jì)算）。

2.3.1 相似度評(píng)價(jià) 以S0樣品的色譜圖為參照?qǐng)D譜，采用《中藥色譜指紋圖譜相似度評(píng)價(jià)系統(tǒng)（2012A版）》進(jìn)行相似度評(píng)價(jià)。結(jié)果顯示，S0～S15樣品的相似度分別為1.000、0.999、0.993、0.990、0.973、0.925、0.887、0.872、0.762、0.612、0.530、0.461、0.444、0.284、0.214、0.088。由此可知，麩炒北蒼術(shù)飲片隨著炮制時(shí)間的延長(zhǎng)，其樣品相似度呈逐漸降低的趨勢(shì)，這表明北蒼術(shù)飲片經(jīng)炮制后化學(xué)成分發(fā)生了明顯變化。

2.3.2 色譜峰的相對(duì)峰面積測(cè)定 結(jié)合本課題組前期研究可知，峰1為北蒼術(shù)麩炒后所產(chǎn)生的新成分[11]，基于此，峰1以S1樣品的色譜峰峰面積作為基準(zhǔn)“1”，其余色譜峰均以S0樣品的各色譜峰峰面積作為基準(zhǔn)“1”，采用相對(duì)峰面積進(jìn)行相對(duì)定量，測(cè)定麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品的27個(gè)色譜峰的相對(duì)峰面積，結(jié)果見(jiàn)表4。

由表4可知，隨著炮制時(shí)間的延長(zhǎng)，麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品的色譜峰相對(duì)峰面積呈一定動(dòng)態(tài)變化規(guī)律：峰1、峰2的相對(duì)峰面積先增加后減少;峰3（5-HMF）的相對(duì)峰面積增加;峰4～峰27的相對(duì)峰面積均減少，且炮制45 min后，峰15已無(wú)法檢出。

2.4 麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品的浸出物、揮發(fā)油含量的測(cè)定

2.4.1 水溶性浸出物和醇溶性浸出物的含量測(cè)定 （1）水溶性浸出物：取麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品（S0～S15）粉末約2 g，精密稱(chēng)定，置于150 mL的錐形瓶中，加水50 mL，參考2020年版《中國(guó)藥典》（四部）通則“2201浸出物測(cè)定法”項(xiàng)下的水溶性浸出物測(cè)定法中的熱浸法進(jìn)行測(cè)定[12]，結(jié)果見(jiàn)表5。（2）醇溶性浸出物：取麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品（S0～S15）粉末約2 g，精密稱(chēng)定，置于150 mL的錐形瓶中，加乙醇50 mL，參考2020年版《中國(guó)藥典》（四部）通則“2201浸出物測(cè)定法”項(xiàng)下的醇溶性浸出物測(cè)定法進(jìn)行測(cè)定[12]，結(jié)果見(jiàn)表5。

2.4.2 揮發(fā)油的含量測(cè)定 取麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品（S0～S15）粉末約60 g，精密稱(chēng)定，置于1 000 mL的圓底燒瓶中，加水360 mL，參考2020年版《中國(guó)藥典》（四部）通則“2204揮發(fā)油測(cè)定法”項(xiàng)下的甲法進(jìn)行測(cè)定[12]，結(jié)果見(jiàn)表5。

由表5可知，隨著炮制時(shí)間的延長(zhǎng)，麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品的浸出物含量變化不明顯，揮發(fā)油含量呈一定的下降趨勢(shì);當(dāng)炮制至45 min時(shí)，揮發(fā)油含量相較于炮制0 min時(shí)下降約52%。

2.5 麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品粉末的色度值與質(zhì)量指標(biāo)的相關(guān)性分析

將麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品粉末的色度值、UPLC指紋圖譜中27個(gè)色譜峰的相對(duì)峰面積（未檢出的色譜峰相對(duì)峰面積以0計(jì)算）以及水溶性浸出物、醇溶性浸出物、揮發(fā)油的含量，分別采用SPSS 25.0軟件進(jìn)行Pearson相關(guān)性分析，結(jié)果見(jiàn)表6。

由表6可知，峰4～峰6、峰11～峰13、峰15～峰27的相對(duì)峰面積以及揮發(fā)油含量與L*、b*均呈正相關(guān)，表明隨著L*、b*的減少，上述19個(gè)色譜峰的相對(duì)峰面積以及揮發(fā)油含量均隨之減少。峰2、峰7～10的相對(duì)峰面積以及醇溶性浸出物含量與L*、a*、b*均呈一定的相關(guān)性：當(dāng)L*、b*與質(zhì)量指標(biāo)均呈正相關(guān)時(shí)，a*與質(zhì)量指標(biāo)則呈負(fù)相關(guān)（例如峰7～峰10的相對(duì)峰面積隨著L*、b*的減少而減少，隨著a*的減少而增加）;當(dāng)L*、b*與質(zhì)量指標(biāo)呈負(fù)相關(guān)時(shí)，a*與質(zhì)量指標(biāo)則呈正相關(guān)（例如峰2的相對(duì)峰面積以及醇溶性浸出物含量隨著L*、b*的減少而增加，隨著a*的減少而減少）。峰14的相對(duì)峰面積與b*呈正相關(guān)，即隨著b*的減少，峰14的相對(duì)峰面積也隨之減少。峰1的相對(duì)峰面積以及水溶性浸出物含量與L*、a*、b*均無(wú)線性相關(guān)關(guān)系。

2.6 麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品的多元統(tǒng)計(jì)分析

本研究以麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品的色度值以及質(zhì)量指標(biāo)等33個(gè)變量為指標(biāo)，采用Simca 14.1軟件進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)分析[主成分分析（PCA）、聚類(lèi)分析（HCA）、偏最小二乘法判別分析（PLS-DA）][13]。

2.6.1 PCA和HCA 對(duì)麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品進(jìn)行PCA時(shí)，共提取了4個(gè)特征值>1的主成分因子，其特征值和方差貢獻(xiàn)率見(jiàn)表7，PCA得分圖見(jiàn)圖5。由表7和圖5可知，這4個(gè)主成分的作用顯著，可用于反映麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品90%以上的特征信息。

以平方歐氏距離為測(cè)度，進(jìn)行HCA，結(jié)果見(jiàn)圖6。由圖6可知，麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品可聚為3類(lèi)：S0～S5樣品聚為一類(lèi)，S6～S11樣品聚為一類(lèi)，S12～S15樣品聚為一類(lèi)。基于此，筆者將與生品（S0）接近的樣品擬定為炮制輕度樣品（S0～S5），與S15樣品（該樣品中峰15丟失，其原因可能為炮制過(guò)度）接近的樣品擬定為炮制過(guò)度樣品（S12～S15），其余為炮制適度樣品（S6～S11，炮制時(shí)間為18～33 min）。

2.6.2 PLS-DA 對(duì)麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品進(jìn)行PLS-DA后，其模型得分圖見(jiàn)圖7。由圖7可知，麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品可聚為3類(lèi)，聚類(lèi)結(jié)果與HCA結(jié)果一致。PLS-DA模型中R2Y=0.86，Q2=0.69，表明該模型擬合程度好、預(yù)測(cè)能力強(qiáng)[14]。進(jìn)一步對(duì)該模型中33個(gè)指標(biāo)的變量投影重要性（VIP）進(jìn)行分析，結(jié)果見(jiàn)圖8。選擇VIP值大于1的指標(biāo)作為麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程中的重要質(zhì)量指標(biāo)[15]，得到a*和峰2、19、9、7、8、10、13、1、4、21的相對(duì)峰面積是該飲片炮制過(guò)程中的重要質(zhì)量指標(biāo)。

2.7 麩炒北蒼術(shù)飲片的炮制時(shí)間研究

結(jié)合“2.6”項(xiàng)下結(jié)果可知，麩炒北蒼術(shù)飲片炮制適度的時(shí)間為18～33 min，但該時(shí)間范圍較寬，無(wú)法較好地確定麩炒北蒼術(shù)飲片的炮制時(shí)間?；诖耍狙芯繀⒖蓟疑P(guān)聯(lián)度法[15]，將“2.6”項(xiàng)下的重要質(zhì)量指標(biāo)a*和峰2、19、9、7、8、10、13、1、4、21的相對(duì)峰面積以及峰3（5-HMF，其具有一定毒性[16]）的相對(duì)峰面積作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，進(jìn)行麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程樣品的綜合質(zhì)量評(píng)價(jià)，以確定其炮制時(shí)間，具體步驟如下。

第一，確定分析序列。將麩炒北蒼術(shù)飲片炮制過(guò)程的16批樣品組成16個(gè)評(píng)價(jià)單元序列xi（k）（i=1，2，3……m;k=1，2，3……n。本研究中m=16，n=12），并以炮制18 min的S6樣品作為最優(yōu)參考序列xs（k）。

第二，變量的無(wú)量綱化。由于評(píng)價(jià)指標(biāo)之間的量綱不一致，故須對(duì)評(píng)價(jià)指標(biāo)進(jìn)行原始數(shù)據(jù)的均值化處理，即得無(wú)量綱化后的單元序列x′i′（k），見(jiàn)公式（1）。其中，i=0，1，2，3……m;k=0，1，2，3……n。

3 討論

3.1 麩炒北蒼術(shù)飲片炮制輔料用量的考察

本課題組前期對(duì)麩炒北蒼術(shù)飲片炮制輔料（麥麩）的用量（0、15%、30%）進(jìn)行了考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，輔料的用量對(duì)麩炒北蒼術(shù)飲片粉末的L*、a*、b*并無(wú)明顯影響。另外，隨著輔料用量的增加，一方面可以抑制峰1的相對(duì)峰面積增加，且當(dāng)麥麩用量為30%時(shí)，峰1的相對(duì)峰面積增加不明顯;另一方面可以促進(jìn)峰2、峰3的相對(duì)峰面積的增加，且當(dāng)麥麩用量為30%時(shí)，這2個(gè)峰的相對(duì)峰面積均增加不明顯。因此，本研究在炮制北蒼術(shù)飲片時(shí)，麥麩的用量選擇15%。

3.2 麩炒北蒼術(shù)飲片粉末的色度值與質(zhì)量指標(biāo)的相關(guān)性

本研究前期對(duì)麩炒北蒼術(shù)飲片進(jìn)行色度值測(cè)定時(shí)發(fā)現(xiàn)，該飲片由于存在油室、外皮及焦斑的性狀，導(dǎo)致所測(cè)色度值偏差較大。后續(xù)本課題組參考文獻(xiàn)[17]方法，選擇顏色特征更為均一的飲片粉末色度值與質(zhì)量指標(biāo)進(jìn)行相關(guān)性分析。本研究結(jié)果顯示，隨著炮制時(shí)間的延長(zhǎng)，麩炒北蒼術(shù)飲片粉末的L*、b*呈現(xiàn)下降趨勢(shì)，a*呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì)，表明樣品表觀亮度由明變暗、顏色逐漸變深。進(jìn)一步將麩炒北蒼術(shù)飲片粉末的色度值與指紋圖譜中27個(gè)色譜峰的相對(duì)峰面積以及水溶性浸出物、醇溶性浸出物、揮發(fā)油的含量進(jìn)行相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)，隨著L*、b*的降低，峰4～6、峰11～13、峰15～27的相對(duì)峰面積以及揮發(fā)油含量也隨之減少，峰7、8（咖啡酸）、9、10（阿魏酸）的相對(duì)峰面積也隨之減少，而峰2的相對(duì)峰面積、醇溶性浸出物含量卻隨之增加;隨著a*的降低，峰2的相對(duì)峰面積、醇溶性浸出物含量隨之減少，而峰7～10的相對(duì)峰面積卻隨之增加;隨著b*的降低，峰14的相對(duì)峰面積以及醇溶性浸出物含量也隨之減少;峰1的相對(duì)峰面積及水溶性浸出物含量與L*、a*、b*均無(wú)線性相關(guān)關(guān)系。由此表明，隨著麩炒北蒼術(shù)飲片色度值的變化，色譜峰（峰2～27）的相對(duì)峰面積、醇溶性浸出物含量以及揮發(fā)油含量也隨之呈規(guī)律性變化，實(shí)際炮制工藝中可結(jié)合該飲片炮制品粉末的色度值對(duì)其質(zhì)量指標(biāo)的變化進(jìn)行監(jiān)測(cè)。

3.3 麩炒北蒼術(shù)飲片炮制時(shí)間評(píng)價(jià)指標(biāo)的確定

經(jīng)HCA、PLS-DA發(fā)現(xiàn)，麩炒北蒼術(shù)飲片可聚為炮制輕度（S0～S5）、適度（S6～S11）、過(guò)度（S12～S15）3類(lèi);再根據(jù)VIP值大于1，篩選出重要質(zhì)量指標(biāo)為a*和峰2、19、9、7、8、10、13、1、4、21的相對(duì)峰面積。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，北蒼術(shù)飲片中含有大量的果糖和葡萄糖[18]，在炮制過(guò)程中可能發(fā)生降解，生成5-HMF（峰3），而該成分具有一定的副作用（如刺激性、腎毒性等）[19]?；诖?，本研究將峰3和上述重要質(zhì)量指標(biāo)共同作為麩炒北蒼術(shù)飲片炮制時(shí)間的評(píng)價(jià)指標(biāo)，進(jìn)一步經(jīng)灰色關(guān)聯(lián)度分析后發(fā)現(xiàn)，麩炒北蒼術(shù)飲片的炮制時(shí)間應(yīng)控制在18～24 min范圍內(nèi)。

綜上所述，麩炒北蒼術(shù)飲片粉末的色度值與27個(gè)色譜峰的相對(duì)峰面積以及浸出物、揮發(fā)油的含量具有一定相關(guān)性。建議麩炒北蒼術(shù)飲片的炮制時(shí)間范圍為18～24 min，且可盡量控制在18 min。由于藥材在生產(chǎn)炮制過(guò)程中，存在炮制規(guī)范、取樣量、炮制儀器等差異，因此在實(shí)際炮制過(guò)程中仍需結(jié)合具體的炮制參數(shù)來(lái)控制飲片質(zhì)量。

參考文獻(xiàn)

[ 1 ] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：一部[S]. 2020年版.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2020：168-169.

[ 2 ] 劉芬.基于炮制原理的麩炒蒼術(shù)藥效及作用機(jī)制研究[D].武漢：湖北中醫(yī)藥大學(xué)，2018.

[ 3 ] 于艷， 袁媛， 賈天柱，等.蒼術(shù)炮制前后化學(xué)成分及藥理作用研究近況[J].時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2016，27（1）：195-197.

[ 4 ] 鄧愛(ài)平，李穎，吳志濤，等.蒼術(shù)化學(xué)成分和藥理的研究進(jìn)展[J].中國(guó)中藥雜志，2016，41（21）：3904-3913.

[ 5 ] 梁志毅，黃貴發(fā)，崔婷，等.狗脊微波炮制過(guò)程中指標(biāo)成分與粉末顏色關(guān)聯(lián)性分析[J].中成藥，2020，42（6）：1548- 1552.

[ 6 ] 張雪，李曉慶，王云，等.焦梔子炒制過(guò)程中HPLC圖譜變化與外觀顏色的動(dòng)態(tài)關(guān)聯(lián)研究[J].中草藥，2018，49（17）：4029-4037.

[ 7 ] 石典花，戴衍朋，蘇本正，等.基于一測(cè)多評(píng)和色度識(shí)別的側(cè)柏炭?jī)?nèi)外在質(zhì)控方法研究[J].中國(guó)中藥雜志，2020，45（24）：5996-6002.

[ 8 ] 張?zhí)煲恚山?，郭寧，?藥效相關(guān)的中藥感官指標(biāo)測(cè)定方法的研究進(jìn)展[J].中草藥，2021，52（2）：594-602.

[ 9 ] 曾敏.蒼術(shù)飲片規(guī)格及其質(zhì)量評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)研究[D].武漢：湖北中醫(yī)藥大學(xué)，2013.

[10] 鄒小興.蒼術(shù)屬植物藥用親緣學(xué)研究[D].北京： 北京中醫(yī)藥大學(xué)，2010.

[11] 洪婉敏，陳丹燕，紀(jì)玉華，等.北蒼術(shù)麩炒前后指紋圖譜與色度值的差異研究[J/OL].中藥材，2021[2021-03-04].https：//doi.org/10.13863/j.issn1001-4454.2021.02.013.

[12] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典：四部[S]. 2020年版.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2020：232，252.

[13] 李晶峰，蘭夢(mèng)，邊學(xué)峰，等.基于聚類(lèi)分析與多元統(tǒng)計(jì)分析的東北林蛙油及其類(lèi)似品、偽品的聚丙烯酰胺凝膠電泳圖譜鑒別[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2019，25（24）：111- 117.

[14] 郭麗，楊忠杰，于曉濤，等.南、北五味子藥材的HPLC指紋圖譜建立及化學(xué)模式識(shí)別分析[J].中國(guó)藥房，2020，31（18）：2224-2229.

[15] 石海培，包貝華，黃勝良，等.川芎飲片的HPLC指紋圖譜建立、聚類(lèi)分析及偏最小二乘判別分析[J].中國(guó)藥房，2019，30（8）：1066-1071.

[16] 劉吉爽，段連政，徐文慧，等.灰色關(guān)聯(lián)度法優(yōu)化葵花盤(pán)“精準(zhǔn)炮制”飲片的加工炮制一體化工藝[J].中國(guó)藥房，2019，30（24）：3413-3418.

[17] 林琳，林鈮，凌亞豪 ，等. 5-羥甲基糠醛的急性毒性和細(xì)胞毒性研究[J].中國(guó)藥物警戒，2018，15（4）：205-209.

[18] 楊麗，龔燚婷，許銘珊，等.基于“表里關(guān)聯(lián)”的大黃炭炮制過(guò)程顏色和成分變化關(guān)系研究[J].中草藥，2020，51（22）：5705-5713.

[19] 劉苗苗，陳祥勝，陳琪瑤，等.蒼術(shù)麩炒過(guò)程中5-羥甲基糠醛的轉(zhuǎn)化機(jī)制研究[J].中草藥，2016，47（8）：1327-1331.

（收稿日期：2021-06-29 修回日期：2021-08-30）

（編輯：唐曉蓮）