復(fù)方硝酸甘油凝膠對(duì)大鼠皮膚潰瘍創(chuàng)面的調(diào)節(jié)作用

程靜，梅蕊，劉忠，劉萍，梅利平，宋紅萍

(1.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬普愛(ài)醫(yī)院藥劑科，武漢 430033；2.武漢市精神衛(wèi)生中心精神科，武漢 430023)

復(fù)方硝酸甘油凝膠對(duì)大鼠皮膚潰瘍創(chuàng)面的調(diào)節(jié)作用

程靜1，梅蕊2，劉忠1，劉萍1，梅利平1，宋紅萍1

(1.華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院附屬普愛(ài)醫(yī)院藥劑科，武漢 430033；2.武漢市精神衛(wèi)生中心精神科，武漢 430023)

目的研究復(fù)方硝酸甘油凝膠劑對(duì)大鼠皮膚潰瘍的保護(hù)作用及其機(jī)制。方法建立54只大鼠皮膚潰瘍模型，隨機(jī)分成3組，每組18只，即模型對(duì)照組、京萬(wàn)紅組、復(fù)方硝酸甘油凝膠劑組，觀察創(chuàng)面大體情況及愈合時(shí)間，計(jì)數(shù)造模后第7天、第14天創(chuàng)面的成纖維細(xì)胞數(shù)、新生毛細(xì)血管數(shù)。采用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法測(cè)定造模后第7天、第14天創(chuàng)面的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)、血管生成素-1(Ang-1)、低氧誘導(dǎo)因子(HIF-1α) mRNA表達(dá)。結(jié)果與模型對(duì)照組比較[(24.17±5.91) d]，復(fù)方硝酸甘油凝膠劑能明顯縮短皮膚愈合時(shí)間[(14.67±3.76) d，P<0.01]。與模型對(duì)照組比較，復(fù)方硝酸甘油凝膠組增加造模后第7天創(chuàng)面中成纖維細(xì)胞[(61.20±7.56)個(gè)]和新生毛細(xì)血管數(shù)量[(9.35±1.43)個(gè)，P<0.05]；上調(diào)VEGF(1.692±0.196)、HIF-1α(1.527±0.174)、Ang1(1.548±0.203)mRNA表達(dá)(P<0.05或P<0.01)；降低造模后第14天創(chuàng)面中成纖維細(xì)胞(28.00±5.96)個(gè)和新生毛細(xì)血管數(shù)量[(4.20±1.30)個(gè)，(P<0.01)]；下調(diào)VEGF(1.156±0.123)、HIF-1α(1.021±0.105)、Ang1(1.034±0.134) mRNA表達(dá)(P<0.05)。結(jié)論復(fù)方硝酸甘油凝膠劑通過(guò)調(diào)節(jié)成纖維細(xì)胞、新生毛細(xì)血管數(shù)量和VEGF/Ang1/HIF-1α信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路達(dá)到治療皮膚潰瘍的作用。

硝酸甘油凝膠劑，復(fù)方；潰瘍，皮膚；成纖維細(xì)胞；新生毛細(xì)血管；信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路

皮膚潰瘍是臨床上的常見(jiàn)病之一，分為急性和慢性兩類，是由于多種原因?qū)е麦w表皮膚缺損或潰爛而形成創(chuàng)面的一種疾病。此病可發(fā)生在身體各處，多易久治不愈，常給患者造成比較大的痛苦。治療藥物主要有前列腺素、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子等藥物，但是費(fèi)用昂貴，療程很長(zhǎng)，且療效不理想，尋找更有效治療藥物是一個(gè)重要的研究方向[1]。硝酸甘油臨床主要用于治療心腦血管疾病，如心絞痛、急性心肌梗死、慢性充血性心力衰竭等。近幾年，有研究報(bào)道將硝酸甘油軟膏局部用于治療肛裂，明顯促進(jìn)傷口愈合[2]。筆者查閱國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)，未見(jiàn)硝酸甘油凝膠劑的報(bào)道。為此本研究以新生毛細(xì)血管及成纖維細(xì)胞是潰瘍創(chuàng)面肉芽的主要構(gòu)成成分為對(duì)象，探討復(fù)方硝酸甘油凝膠劑治療皮膚潰瘍的作用及初步作用機(jī)制。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 無(wú)特定病原體(specific-pathogen free,SPF)級(jí)，雄性斯?jié)娎鄹瘛ざ嗬?Sprague Dawley，SD)大鼠54只，體質(zhì)量220～250 g，由湖北省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究中心提供，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物合格證號(hào)：SCXK(鄂)2008-0005；使用許可證號(hào)：SYXK(鄂)2008-0014。動(dòng)物自由進(jìn)食飲水，12 h明暗交替光照，環(huán)境溫度22～24 ℃，相對(duì)濕度45%～75%。

1.2 藥品與試劑 復(fù)方硝酸甘油凝膠劑(實(shí)驗(yàn)室自制，處方由硝酸甘油5%、醋酸氯己定0.3%等成分組成，批號(hào)：120708)；京萬(wàn)紅(天津達(dá)仁堂達(dá)二藥業(yè)有限公司，批號(hào)：211509)。提取總RNA試劑盒(美國(guó)OMEGA公司，批號(hào)：R6834-01)；反轉(zhuǎn)錄試劑盒(大連Takar公司，批號(hào)：RR420A)；實(shí)時(shí)熒光定量試劑盒(大連Takara公司，批號(hào)：RR036Q)。

1.3 儀器 ABI 9700普通PCR儀(美國(guó)ABI公司)；ABI 7500實(shí)時(shí)熒光定量PCR儀(美國(guó)ABI公司)；EPPENDORF Flus核酸蛋白測(cè)定儀(德國(guó)Eppendorf公司)。

1.4 動(dòng)物造模與分組 SD大鼠進(jìn)行皮膚潰瘍?cè)炷?，?shí)驗(yàn)前背部皮膚靠近頭部剪毛后涂抹8%硫化鈉脫毛，脫毛面積為3.5 cm×3.5 cm。用7%水合氯醛21 g·kg-1腹腔內(nèi)麻醉，俯臥固定于木板上，聚維酮碘消毒，將直徑為2 cm的圓形圖章在背部正中印出標(biāo)記，剪去全層皮膚及皮下結(jié)締組織，深至筋膜，用50%冰醋酸涂創(chuàng)面，1次·d-1，共1周。將造模后大鼠按體質(zhì)量隨機(jī)分為3組，每組18只。動(dòng)物皮膚給藥按照每平方厘米計(jì)算分別為復(fù)方硝酸甘油凝膠劑組(0.98 g·kg-1)、京萬(wàn)紅組(京萬(wàn)紅0.79 g·kg-1)、模型對(duì)照組(等量基質(zhì))。各組于造模次日開(kāi)始換藥，將藥膏直接涂布于創(chuàng)面上，京萬(wàn)紅組涂布京萬(wàn)紅，模型對(duì)照組涂布基質(zhì)。3組換藥后均在創(chuàng)面上加蓋一層薄膜，用醫(yī)用膠帶固定，換藥至創(chuàng)面愈合。3組分別在造模后第7天、第14天每組各處死大鼠6只，取創(chuàng)面中心肉芽組織蘇木精-伊紅(hematoxylin-eosin，HE)染色。剩下大鼠繼續(xù)給藥[3]。

1.5 標(biāo)本采集及指標(biāo)觀察 ①創(chuàng)面大體情況觀察：每日換藥時(shí)觀察創(chuàng)面愈合情況如創(chuàng)面水腫滲出程度、是否干燥、有無(wú)分泌物、創(chuàng)面紅腫變化等。②記錄各組創(chuàng)面完全愈合所需時(shí)間：以創(chuàng)面完全上皮化作為判斷愈合依據(jù)。③組織學(xué)檢查：造模后第7天、第14天取各組動(dòng)物創(chuàng)面組織進(jìn)行常規(guī)HE染色，由病理醫(yī)師采用光鏡進(jìn)行每個(gè)標(biāo)本隨機(jī)觀察視野5個(gè)(每張切片取長(zhǎng)方形四角及中心點(diǎn)視野5個(gè))，應(yīng)用Mias圖像分析系統(tǒng)3.0確保每個(gè)視野面積相等均為一幀圖像大小，圖像放大倍數(shù)為400倍，每個(gè)視野面積中避開(kāi)毛細(xì)血管光鏡下觀察并計(jì)數(shù)肉芽組織中成纖維細(xì)胞數(shù)，取5個(gè)視野的平均值作為其計(jì)數(shù)。每個(gè)標(biāo)本隨機(jī)觀察3個(gè)視野，同法計(jì)數(shù)新生毛細(xì)血管數(shù)，取3個(gè)視野的平均值作為其計(jì)數(shù)。④取造模后第7天、第14天的3組動(dòng)物創(chuàng)面100 mg加入1 mL Trizol進(jìn)行裂解，采用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcription-polymerase chain reaction，RT-PCR)測(cè)定血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、血管生成素-1(angiopoietin-1，Ang-1)、低氧誘導(dǎo)因子(hypoxia inducible factor-1-alpha，HIF-1α)mRNA表達(dá)。VEGF上游引物：5′GGTGAGAGGTCTAGTTCCCC3′，下游引物：5′CCATGAACTTTCTGCTCTTC3′。Ang1上游引物：5′TAAATCAAACATCCC3′，下游引物：5′AGGTGTC-CAGCTCTTCCT3′。HIF-1α上游引物：5′ACGTGT-TATCTGTCGCTTTG3′，下游引物：5′TAGGTTTCT-GCTGCCTTGTAT3′。內(nèi)參選擇β-actin。

2 結(jié)果

2.1 觀察創(chuàng)面結(jié)果 復(fù)方硝酸甘油凝膠劑組創(chuàng)面濕潤(rùn)潔凈，創(chuàng)面周邊及基底部可見(jiàn)鮮紅的肉芽組織，有少量炎性分泌物，淡黃色，稀薄，可見(jiàn)淡紅色新生上皮由四周向創(chuàng)面中心生長(zhǎng)。用藥15 d后，大部分創(chuàng)面已愈合，留下一道瘢痕，可見(jiàn)毛發(fā)覆蓋。京萬(wàn)紅組：創(chuàng)面干燥結(jié)痂，暗紅色，創(chuàng)面周圍新生上皮向中心生長(zhǎng)，生長(zhǎng)較快。模型對(duì)照組：有大量炎性分泌物，創(chuàng)面干燥結(jié)痂，將其痂取下，發(fā)現(xiàn)創(chuàng)面皮膚下均有小空洞，有部分皮膚發(fā)白發(fā)灰，僅見(jiàn)少量新生上皮生長(zhǎng)，而且愈合慢。傷口較復(fù)方硝酸甘油凝膠劑用藥組恢復(fù)慢，同期情況下傷口面積較其他兩組大。

2.2 創(chuàng)面愈合時(shí)間 模型對(duì)照組平均愈合時(shí)間為(24.17±5.91) d，復(fù)方硝酸甘油組平均愈合時(shí)間為(14.67±3.76) d，京萬(wàn)紅組平均愈合時(shí)間為(18.97±2.58) d。與模型對(duì)照組比較，復(fù)方硝酸甘油凝膠劑創(chuàng)面完全愈合所需時(shí)間明顯縮短(t=3.322，P<0.01)，具有促進(jìn)體表皮膚愈合的作用。

2.3 對(duì)創(chuàng)面成纖維細(xì)胞、新生毛細(xì)血管的影響 與模型對(duì)照組比較，京萬(wàn)紅組第7天成纖維細(xì)胞數(shù)量明顯增加(t=2.427，P<0.05)復(fù)方硝酸甘油凝膠劑組給藥后第7天成纖維細(xì)胞、新生毛細(xì)血管數(shù)量明顯增加(t=2.390，t=2.237，P<0.05)。見(jiàn)圖1。與模型對(duì)照組比較，京萬(wàn)紅組和復(fù)方硝酸甘油凝膠劑組給藥后第14天成纖維細(xì)胞、新生毛細(xì)血管數(shù)量均明顯減少(t=3.002，t=3.117，P<0.01)。見(jiàn)表1。表明復(fù)方硝酸甘油凝膠劑對(duì)潰瘍創(chuàng)面修復(fù)過(guò)程肉芽組織中成纖維細(xì)胞、新生毛細(xì)血管數(shù)量具有良好的調(diào)節(jié)作用。

A.模型對(duì)照組；B.京萬(wàn)紅組；C.復(fù)方硝酸甘油凝膠劑組

表1 3組大鼠創(chuàng)面成纖維細(xì)胞、新生毛細(xì)血管數(shù)量的比較

Tab.1 Comparison of the numbers of fibroblasts and new blood capillaries in skin ulcer wound among three groups of rats

個(gè)

與模型對(duì)照組同時(shí)間點(diǎn)比較，*1P<0.05，*2P<0.01

Compared with model control group at same time point，*1P<0.05，*2P<0.01

2.4 對(duì)創(chuàng)面VEGF、HIF-1α、Ang1 mRNA表達(dá)的影響 與模型對(duì)照組比較，復(fù)方硝酸甘油凝膠劑組給藥后第7天的VEGF、HIF-1α、Ang1 mRNA表達(dá)明顯增加(t=2.331，t=2.927，t=2.666，P<0.05或P<0.01)。與模型對(duì)照組比較，復(fù)方硝酸甘油凝膠劑組給藥后第14天的VEGF、HIF-1α、Ang1 mRNA表達(dá)明顯減少(t=2.253，t=2.368，t=2.325，P<0.05)。表明復(fù)方硝酸甘油凝膠劑對(duì)潰瘍創(chuàng)面修復(fù)過(guò)程肉芽組織中VEGF、HIF-1α、Ang1 mRNA表達(dá)具有良好的調(diào)節(jié)作用。見(jiàn)表2。

3 討論

表2 3組大鼠創(chuàng)面VEGF、HIF-1α、Ang1 mRNA表達(dá)的比較

Tab.2 Comparison of the mRNA expression of VEGF, HIF-1α and Ang1 mRNA among three groups of rats

組別與時(shí)間VEGFHIF?1αAng1模型對(duì)照組 第7天1．418±0．2111．254±0．1481．293±0．117 第14天1．324±0．1351．202±0．1551．244±0．176京萬(wàn)紅組 第7天1．639±0．136?11．436±0．133?11．461±0．141?1 第14天1．222±0．1241．103±0．1481．214±0．196復(fù)方硝酸甘油凝膠劑組 第7天1．692±0．196?11．527±0．174?21．548±0．203?2 第14天1．156±0．123?11．021±0．105?11．034±0．134?1

與模型對(duì)照組同時(shí)間點(diǎn)比較，*1P<0.05，*2P<0.01

Compared with model control group at same time point，*1P<0.05，*2P<0.01

由于凝膠具有良好的生物相容性，對(duì)藥物釋放具有緩釋和控釋作用，形狀美觀，易于涂布使用，局部給藥后易吸收，不污染衣物，穩(wěn)定性較好，近年來(lái)成為局部外用制劑的研發(fā)熱點(diǎn)[4]。2010年一項(xiàng)Meta分析顯示，與安慰藥組比較，連續(xù)3周給予硝酸甘油軟膏明顯促進(jìn)傷口愈合(P<0.01)，可能是硝酸甘油增加黏膜下血液流動(dòng)，舒張血管改善潰瘍的缺血狀態(tài)，同時(shí)緩解疼痛[5]。醋酸氯己定為消毒防腐劑，能夠殺滅創(chuàng)面感染的細(xì)菌，具有抗炎作用。筆者在本實(shí)驗(yàn)中研究將硝酸甘油與醋酸氯己定制成凝膠劑，在皮膚表面形成透明的薄膜，能保證創(chuàng)面濕潤(rùn)、能較長(zhǎng)時(shí)間與創(chuàng)面緊密粘附，滲透性好，易于吸收，避免換藥時(shí)對(duì)創(chuàng)面新生組織的損傷。

VEGF是血管新生的主要調(diào)控因子，作用最強(qiáng)的促血管內(nèi)皮細(xì)胞生成的調(diào)控因子，刺激血管內(nèi)皮細(xì)胞分裂增殖從而增加微血管新生，又可提高血管通透性，從而促進(jìn)創(chuàng)面的生長(zhǎng)愈合。ANN等[6]在研究中發(fā)現(xiàn)新生毛細(xì)血管能改善創(chuàng)面微循環(huán)，同時(shí)帶走不利于創(chuàng)面的代謝產(chǎn)物及毒物。有研究顯示如果創(chuàng)面中VEGF可保持持續(xù)性分泌狀態(tài)，對(duì)加速創(chuàng)面愈合具有重要意義[7]。Ang1能通過(guò)旁分泌途徑誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞遷移，被證明與血管新生密切相關(guān)。Ang1可刺激血管滲透率增加，或通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞釋放TGF-β和血小板衍生生長(zhǎng)因子B增加，作用于FGF-4激活VEGF表達(dá)，從而促進(jìn)血管生成[8]。HIF-1α作為必需的多樣血管生成因子在創(chuàng)面愈合中有非常重要的作用。研究表明由于HIF-1將各種血管形成因子作為靶基因，如VEGF、PLGF、Ang等，使用HIF-1α基因治療后，創(chuàng)面愈合速度明顯加快，血管新生數(shù)量也明顯增多[9]。因此，VEGF/ Ang1/HIF-1α信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路具有促進(jìn)創(chuàng)面愈合血管化的作用。

本研究結(jié)果顯示，復(fù)方硝酸甘油凝膠劑組給藥后第7天與血管新生相關(guān)的VEGF、HIF-1α、Ang1基因表達(dá)均較模型對(duì)照組增加，且3個(gè)基因表達(dá)水平高于京萬(wàn)紅組，而第14天的3個(gè)基因表達(dá)水平均較模型對(duì)照組降低，而京萬(wàn)紅組第14天對(duì)3個(gè)基因表達(dá)無(wú)影響，同時(shí)同一組3個(gè)基因表達(dá)水平第14天較第7天降低，呈現(xiàn)先促進(jìn)后抑制的作用方式。與病理學(xué)檢查相一致：給藥后第7天復(fù)方硝酸甘油凝膠劑組新生毛細(xì)血管數(shù)目較模型對(duì)照組增加，且同一組第14天較第7天毛細(xì)血管數(shù)目減少。同時(shí)也與創(chuàng)面愈合分期一致。炎癥期：一般從創(chuàng)傷即刻開(kāi)始維持3～5 d，以凝血及炎癥為特點(diǎn)；增殖期：又稱修復(fù)期，一般為傷后4～14 d，包括上皮形成、新生毛細(xì)血管形成、肉芽組織形成3個(gè)過(guò)程；重塑期：指?jìng)? d～1年。主要包括膠原纖維強(qiáng)度增高，降解多余的膠原纖維，過(guò)剩的毛細(xì)血管網(wǎng)消退等[10-11]。

綜上所述，復(fù)方硝酸甘油凝膠劑能明顯縮短潰瘍創(chuàng)面愈合時(shí)間，促進(jìn)創(chuàng)面愈合，其機(jī)制可能通過(guò)調(diào)節(jié)VEGF/Ang1/HIF-1α信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，早期前7 d通過(guò)上調(diào)VEGF、HIF-1α、Ang1 mRNA表達(dá)，增加新生毛細(xì)血管數(shù)量，改善潰瘍創(chuàng)面微循環(huán)；同時(shí)增加成纖維細(xì)胞數(shù)量，促進(jìn)潰瘍創(chuàng)面肉芽組織的形成。14 d后通過(guò)下調(diào)VEGF、HIF-1α、Ang1 mRNA表達(dá)，降低新生毛細(xì)血管數(shù)和成纖維細(xì)胞數(shù)量，利于創(chuàng)面重塑修復(fù)。

[1] STEINSTRASSER L，JACOBSEN F，HIRSCH T，et al.Imm-unodepletion of high-abundant proteins from acute and chronic wound fluids to elucidate low-abundant regulators in wound healing[J].BMC Res Notes，2010，3(1)：335-343.

[2] 彭慧，汪建平，楊新慶，等.硝酸甘油軟膏治療肛裂的多中心隨機(jī)對(duì)照研究[J].中華胃腸外科雜志，2013，16(7)：654-657.

[3] 龐來(lái)祥，鄭永軍，程靜，等.美樂(lè)涂膜劑對(duì)大鼠皮膚潰瘍及體外抑菌作用的研究[J].中國(guó)藥師，2010，13(2)：233-235.

[4] 王朝，黃蠅武.凝膠劑研究進(jìn)展[J].醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)，2010，29(2)：223-228.

[5] RANTNASINGHAM K，UZZAMAN M M，ANDREANI S M，et al.Meta-analysis of the use of glyceryl trinitrate ointment after haemorrhoidectomy as an analgesic and in promoting wound healing[J].Int J Surg，2010，8(8)：606-611.

[6] ANN H O，BART L A，MARTIN S，et a1.Vascular endot-helial growth factor and angiogenesis[J].Pharmacol Rev，2004，56(11)：549-580.

[7] SAARISTO A，TAMMELA T，F(xiàn)ARKKILA A，et a1.Vascular end-othelial growth factor-C accelerates diabetic wound healing[J].Am J Pathol，2006，169(3)：1080-1087.

[8] LAMALICE L，BOEUFF L， HUOT J.Endothelial cell migra-tion during angiogenesis[J].Circ Res，2007，100(6)：782-794.

[9] KIM K H，JUNG H J，KWON H J.A new anti-angiogenic small molecule，G0811，inhibits angiogenesis via targeting hypoxia inducible factor(HIF)-1 alpha signal transduction[J].Biochem Biophys Res Commun，2013，441(2)：399-404.

[10] 趙光明，董建勛，李媛，等.回陽(yáng)生肌方藥對(duì)糖尿病皮膚潰瘍大鼠創(chuàng)面愈合的影響[J].北京中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2014，37(7)：495-499.

[11] 張子茜.創(chuàng)愈生肌散在慢性創(chuàng)面中的作用[D].西安：第四軍醫(yī)大學(xué)，2011：13-14.

Effect of Compound Nitroglycerin Gel on Skin Ulcer Wound in Rats

CHENG Jing1, MEI Rui2, LIU Zhong1, LIU Ping1，MEI Liping1, SONG Hongping1

(1.DepartmentofPharmacy,PuaiHospital,TongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430033,China； 2.DepartmentofPsychiatry,WuhanMentalHealthCenter,Wuhan430023,China)

Objective To study the protective effect of compound nitroglycerin gel on rats with skin ulcer wound and its action mechanism. Methods Skin ulcer modle of 54 rats was established.Then the rats were randomly divided into three groups (n=18 each), including model control group,Jinwanhonggroup, and compound nitroglycerin gel group.Wound healing process and healing time were recorded.At the day 7 and 14 after the model was established, the number of fibroblasts and new blood capillaries of granulation tissue from center of the wound were measured,and RT-PCR was used to detect mRNA expression levels of VEGF, Ang1 andHIF-1α. Results As compared with model control group [(24.17±5.91) days], healing time of skin in the compound nitroglycerin gel group was significantly shorter [(14.67±3.76) days,P<0.01].The numbers of fibroblasts (61.20±7.56) and new blood capillaries (9.35±1.43) were increased, and mRNA expression levels of VEGF (1.692±0.196), HIF-1α (1.527±0.174) and Ang1 (1.548±0.203) were remarkably up-regulated on 7thday (P<0.05 orP<0.01).While on 14thday, the numbers of fibroblasts (28.00±5.96) and new blood capillaries (4.20±1.30) were decreased and the mRNA expression levels of VEGF (1.156±0.123), HIF-1α (1.021±0.105) and Ang1 (1.034±0.134) were significantly down-regulated (P<0.05 orP<0.01). Conclusion Compound nitroglycerin gel can treat skin ulcer wound via regulating the numbers of fibroblasts, new blood capillaries and VEGF/Ang1/HIF-1α signal transduction pathway.

Nitroglycerin gel, compound；Ulcer, skin； Fibroblast； New blood capillary； Signal transduction pathway

2014-09-24

2014-12-04

程靜(1983-)，女，湖北武漢人，主管藥師，碩士，研究方向：藥理學(xué)。電話：027-68834860，E-mail：chengjing-429521@163.com。

宋紅萍(1968-)，女，湖北隨州人，主任藥師，碩士，研究方向：藥劑學(xué)。電話：027-68835024，E-mail：Songhongping@126.com。

R965；R751

A

1004-0781(2015)12-1591-04

10.3870/j.issn.1004-0781.2015.12.011