魏薇，張繼婕，劉中藝，高思

摘? 要：采用中藥網(wǎng)絡(luò)藥理學方法探討絞股藍治療阿霉素心肌病的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和潛在作用機制.通過檢索TCMSP、SymMap、TCMID數(shù)據(jù)庫平臺獲取絞股藍的候選藥效成分，并借助Uniprot數(shù)據(jù)庫獲取候選藥效成分的潛在作用靶點;采用Cytoscape 3.8.1軟件構(gòu)建有效成分-靶點蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)圖;運用Genecards、OMIM數(shù)據(jù)庫篩選阿霉素心肌病的疾病相關(guān)靶點，結(jié)合String數(shù)據(jù)庫繪制藥物-疾病基因的蛋白互作網(wǎng)絡(luò);采用Metascape數(shù)據(jù)庫對交集靶標進行基因功能分析（GO）及KEGG通路富集分析，對絞股藍改善阿霉素心肌病的作用機制作出合理推測.共篩選出絞股藍有效活性成分26個，包括槲皮素、谷甾醇、絞股藍皂苷等，活性成分發(fā)揮作用的潛在靶標有89個，主要有TNF-α、TP53、AKT1、IL-6等;靶點參與的功能主要有氧化應(yīng)激、凋亡調(diào)控、炎癥因子刺激反應(yīng)、蛋白質(zhì)絲氨酸/蘇氨酸激酶活性調(diào)節(jié)等，主要富集通路有p53、TNF-α、PI3K-Akt、AMPK等信號通路，以及線粒體自噬和細胞鈣調(diào)控通路等.結(jié)果表明，絞股藍中槲皮素、谷甾醇、絞股藍皂苷等有效活性成分能夠通過調(diào)節(jié)p53、TNF-α、Akt、AMPK等信號分子，參與細胞程序性死亡、氧化應(yīng)激和線粒體穩(wěn)態(tài)調(diào)控，從而達到防治阿霉素心肌病的目的.

關(guān)鍵詞：絞股藍;網(wǎng)絡(luò)藥理學;阿霉素心肌病;藥效物質(zhì)基礎(chǔ);分子機制

中圖分類號：R282.710.5;R259.422? ? ? ? ? ?DOI：10.16375/j.cnki.cn45-1395/t.2021.04.017

0? ? 引言

阿霉素是一種廣譜抗腫瘤抗生素，常用于多種惡性腫瘤如乳腺癌、肺癌、惡性淋巴瘤等的臨床治療，但其在臨床應(yīng)用中具有產(chǎn)生嚴重心臟毒性的風險.自1973年Lefrak等[1]首次報道阿霉素可引起心肌損傷以來，相關(guān)學者深入研究了阿霉素心肌病的發(fā)生機制和防治策略.國內(nèi)外現(xiàn)有研究主要集中在毒性代謝產(chǎn)物、自由基爆發(fā)、線粒體損傷、心肌鈣超載等方面，目前對阿霉素引起的心臟毒副反應(yīng)尚無針對性的臨床防治藥物[2].近年來，國內(nèi)外學者開始關(guān)注傳統(tǒng)中藥[3]，以期從中尋找到有效防治阿霉素心肌病的藥物.已發(fā)現(xiàn)，薯蕷皂苷、楊梅苷、丹參酮IIA、黃連素等多種天然產(chǎn)物的活性成分可有效改善阿霉素誘導的心肌細胞死亡和線粒體損傷.

絞股藍系葫蘆科絞股藍屬草質(zhì)攀援植物，又名“七葉參”，其性寒，味甘，微苦，歸肺、脾、心、腎經(jīng)，有清熱解毒、止咳、清肺、化痰等功效，可用于降血壓、調(diào)血脂及治療多種惡性腫瘤[4].心血管藥理研究表明，絞股藍皂苷對治療高膽固醇血癥[5]和心肌缺血再灌注損傷[6]有較好療效，可有效改善血脂紊亂并對心臟有直接保護作用.此外，絞股藍皂苷具有抑制脂質(zhì)過氧化、阻止心室肌細胞Ca2+內(nèi)流等藥理學作用[7]，可通過提高心肌組織ATPase及SDH活性減輕阿霉素造成的心功能紊亂.

現(xiàn)代生物信息學快速發(fā)展，使中藥網(wǎng)絡(luò)藥理學逐漸成為揭示中藥復方分子機制的一種系統(tǒng)且高效的新方法.該方法可通過研究藥物、靶標及疾病之間的關(guān)系，從分子和整體2個不同角度探究藥物對疾病的影響，這與中藥多成分、多靶點、多通路的原理相符.本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學探討絞股藍防治阿霉素心肌病的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和潛在分子機制，為絞股藍的心血管實驗藥理學研究和臨床應(yīng)用提供參考.

1? ? 資料與方法

1.1? ?絞股藍候選藥效成分的搜集與篩選

以“絞股藍”或“gynostemma pentaphyllum”為關(guān)鍵詞分別檢索TCMSP、SymMap、TCMID數(shù)據(jù)庫，查詢并整理出絞股藍所含全部活性成分;設(shè)置標準口服利用度（oral bioavailability，OB）≥30%篩選藥物有效活性成分，并進一步以類藥性指數(shù)（drug like index，DL）≥0.18為篩選標準，最終確定絞股藍候選藥效成分.數(shù)據(jù)庫及分析平臺網(wǎng)址見表1.

1.2? ?絞股藍有效活性成分作用靶點的獲取及潛在靶蛋白的篩選

檢索TCMSP數(shù)據(jù)庫平臺，獲取絞股藍相關(guān)作用靶點;查詢Uniprot數(shù)據(jù)庫中全部已驗證的人類基因及對應(yīng)的基因名稱，并按照數(shù)據(jù)庫標準名稱對絞股藍作用靶點進行靶點基因注釋，得到絞股藍有效活性成分潛在作用靶標.運用Cytoscape3.8.1軟件，構(gòu)建有效活性成分-靶標網(wǎng)絡(luò)圖并進行可視化分析.

1.3? ?阿霉素心肌病作用靶點的獲取及相關(guān)靶蛋白的篩選

利用Genecards及OMIM數(shù)據(jù)庫，檢索關(guān)鍵詞“doxorubicin cardiomyopathy or adriamycin cardiomyopathy”，篩選并導出疾病相關(guān)靶標.整理在數(shù)據(jù)庫中搜集的疾病靶標，刪除重復靶標并進行標準化處理.

1.4? ?絞股藍活性成分與阿霉素心肌病共同靶標的篩選及PPI網(wǎng)絡(luò)圖的構(gòu)建

通過在線作圖網(wǎng)站微生信篩選出絞股藍活性成分與阿霉素心肌病的共同靶標（即交集基因），制作維恩圖，獲得絞股藍抗阿霉素心肌病的潛在作用靶點.應(yīng)用String 11.0數(shù)據(jù)庫，輸入藥物-疾病交集基因，物種選擇“人類”，設(shè)置隱藏游離靶點，將最低互作分數(shù)設(shè)為0.9，構(gòu)建蛋白質(zhì)互作網(wǎng)絡(luò)（protein-protein interaction networks，PPI）.

1.5? ?絞股藍作用于阿霉素心肌病的GO富集分析和KEGG通路富集分析

采用Metascape數(shù)據(jù)庫，限定物種為“Homo Sapiens”（人源），設(shè)定P值小于0.01，對藥物-疾病基因進行GO功能分析以研究絞股藍抗阿霉素心肌病的主要生物過程;進行KEGG通路富集分析以研究藥物抗疾病的相關(guān)信號通路.

2? ? 結(jié)果

2.1? ?絞股藍候選藥效成分及其靶蛋白

通過TCMSP等數(shù)據(jù)庫，搜集到絞股藍全部活性成分，參考藥代動力學ADME參數(shù)，共篩選出包括絞股藍皂苷、谷甾醇、槲皮素、鼠李素等26個有效活性成分（見表2），其中有10個（未自定義編號）并未參與網(wǎng)絡(luò)圖構(gòu)建，這表明絞股藍還有一些成分的功效未被挖掘.此外，膽固醇雖是絞股藍有效成分之一，但其主要來源于人體自身合成和日常飲食，因而不將其納入活性成分中研究.

絞股藍有效活性成分對應(yīng)靶點蛋白共245個，運用Uniprot數(shù)據(jù)庫進行靶點基因注釋，共獲得177個靶點基因.將靶點基因?qū)隒ytoscape3.8.1軟件，構(gòu)建絞股藍有效活性成分-靶點相互作用網(wǎng)絡(luò)圖，如圖1所示，顯示有194個節(jié)點和261條邊.有效成分-靶點網(wǎng)絡(luò)圖揭示了絞股藍有效活性成分與潛在靶點之間的相互作用關(guān)系，藥物的某一有效活性成分會與多個潛在靶點相互作用，不同的有效活性成分也會作用于同一個靶點，反映出中藥絞股藍多成分、多靶點的作用特點.

2.2? ? 絞股藍活性成分與阿霉素心肌病的交集作用靶標

以關(guān)鍵詞“doxorubicin cardiomyopathy or adriamycin cardiomyopathy”分別檢索Genecards及OMIM數(shù)據(jù)庫，篩選阿霉素心肌病的作用靶點;以相關(guān)性得分為標準，共篩選出586個疾病作用靶點.將所搜集的藥物靶點和疾病靶點取交集，并導入在線作圖平臺微生信，繪制維恩圖（圖2）.? ? ? ?結(jié)果得出藥物-疾病交集靶基因共89個，包括? TNF-α（tumor necrosis factor -α）、CASP3（caspase-3）、TP53（cellular tumor antigen p53）、NOS2（nitric oxide synthase， inducible）、MAPK1（mitogen-activated protein kinase 1）、AKT1（RAC-alpha serine/threonine-protein kinase）等.

注：圓圈為中藥絞股藍有效活性成分作用靶點，灰色方形為疾病

作用靶點，重疊部分為中藥絞股藍作用于疾病的靶點.

2.3? ? 構(gòu)建PPI網(wǎng)絡(luò)圖并篩選核心網(wǎng)絡(luò)

采用String數(shù)據(jù)庫，物種選擇“人類”，置信度為默認值0.900，繪制PPI網(wǎng)絡(luò)圖，分析藥物-疾病交集靶蛋白間的相互作用關(guān)系.PPI網(wǎng)絡(luò)圖共包含89個節(jié)點，365條邊，計算出平均節(jié)點度值為8.2，節(jié)點的度值表示藥物靶點與疾病靶點間的相連邊數(shù)，度值越大表明該節(jié)點在PPI網(wǎng)絡(luò)圖中可能起著關(guān)鍵性作用（見圖3）.本研究保留了大于平均節(jié)點度值的基因，疾病靶標有TP53、AKT1、CASP3、TNF、MAPK1及IL6（interleukin-6）等.

2.4? ?關(guān)鍵靶點功能注釋和通路富集分析

將藥物-疾病交集靶標導入Metascape數(shù)據(jù)庫，進行GO功能分析，篩選得到關(guān)鍵靶點的主要生物過程，涉及氧化應(yīng)激、細胞存活與死亡、細胞因子刺激反應(yīng)、蛋白質(zhì)絲氨酸/蘇氨酸激酶活性調(diào)節(jié)等.顯著性最強的前20條通路見圖4.

通過KEGG通路富集分析，獲得關(guān)鍵靶點的通路共182條，顯著性最強的前20條通路見圖5.包括p53、TNF-α、PI3K-Akt、AMPK、NF-κB等信號通路，以及細胞鈣調(diào)控、線粒體自噬和細胞凋亡信號通路等，提示絞股藍有效活性成分通過多通路以及多靶點發(fā)揮心肌保護作用.

3? ? ?討論

3.1? ? 絞股藍藥效物質(zhì)基礎(chǔ)

本研究通過網(wǎng)絡(luò)藥理學分析，共篩選出絞股藍皂苷、谷甾醇、槲皮素及豆甾醇等26種絞股藍有效活性成分和作用于阿霉素心肌病的89個有效靶點.通過有效成分-靶點網(wǎng)絡(luò)分析可知，槲皮素、豆甾醇、谷甾醇等成分的關(guān)聯(lián)靶點相對較多，與阿霉素心肌病聯(lián)系密切.實驗研究已表明，經(jīng)高速逆流色譜（HSCCC）[8]、D101樹脂和硅膠柱色譜法[9]及加熱回流法[10]等方法可從絞股藍中提取出槲皮素、蘆丁、絞股藍皂苷及人參皂苷等活性物質(zhì).經(jīng)提取并純化的槲皮素具有較強的抗氧化活性[8]，其可通過提高Nrf2的表達來增強機體的抗氧化能力并改善生化及組織學異常，進而減輕阿霉素引起的心肌損傷[11].谷甾醇和豆甾醇是常見的植物類甾醇成分，對于降低心血管疾病有很好的療效.其中，谷甾醇可減輕實驗動物心臟及離體培養(yǎng)心肌細胞的氧化應(yīng)激損傷，并通過抑制ERK1/2、上調(diào)Bcl-2/Bax來抑制心肌細胞的凋亡[12];而豆甾醇在這方面的研究相對較少，有待于進一步探討其對心血管的保護作用和機制.

此外，絞股藍皂苷為絞股藍的主要成分，截至2017年已分離出201種絞股藍皂苷單體[13]，且近幾年仍有新的單體成分被分離和鑒定.結(jié)合本研究結(jié)果，發(fā)現(xiàn)與阿霉素心肌病相關(guān)的絞股藍皂苷單體成分主要有絞股藍皂苷XL、LXXIV、LXXIX和A_qt等，在保護非酒精性脂肪性肝病[14]、預(yù)防帕金森病[15]和促進肌細胞增殖[16]等方面顯示出良好的活性.雖然上述單體成分在心血管疾病方面的治療作用還未見報道，但目前的實驗研究已證實絞股藍總皂苷具有抗炎和抗氧化能力，并可通過激活A(yù)MPK信號通路來抑制miR-143-3p的水平進而保護心肌細胞[17].經(jīng)絞股藍總皂苷預(yù)治療的實驗動物，心肌細胞的凋亡和心肌缺血再灌注（I/R）損傷程度降低[6];此外，絞股藍總皂苷也能夠通過增強SERCA2a mRNA的表達及抑制Ca2+超載來改善阿霉素對心功能的影響[18].這與本文研究結(jié)果相吻合，可進一步探索.

由此可見，絞股藍抗阿霉素心肌病的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)較廣，可通過多成分、多靶點機制保護心肌細胞.此外，有些化合物，如絞股藍黃酮等雖在網(wǎng)絡(luò)中并未出現(xiàn)，但其分子機制及藥理活性已被研究證實[19]，而其他有效活性成分有待于進一步挖掘.前述相關(guān)報道與本文研究結(jié)果也進一步證實了采用網(wǎng)絡(luò)藥理學探討絞股藍防治阿霉素心肌病的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及分子機制具有一定的科學性.

3.2? ?藥物防治疾病的潛在作用機制

為深入研究絞股藍防治阿霉素心肌病的潛在作用機制，本研究對藥物-疾病靶標進行PPI網(wǎng)絡(luò)分析、GO功能分析和KEGG通路富集分析，發(fā)現(xiàn)活性成分發(fā)揮作用的潛在靶標有AKT1、TP53、TNF-α、CAPS3、IL-6等89個;主要參與的生物學過程有氧化應(yīng)激、細胞凋亡調(diào)節(jié)、炎癥因子刺激反應(yīng)、蛋白質(zhì)絲氨酸/蘇氨酸激酶活性調(diào)節(jié)等;富集分析排名靠前的有PI3K-Akt、AMPK信號通路、細胞凋亡和線粒體自噬[20]等多條信號通路.

阿霉素心肌病的發(fā)生和發(fā)展具有“單因素”、“多機制”的特點.心肌細胞鈣超載、線粒體穩(wěn)態(tài)失調(diào)、免疫激活等反應(yīng)綜合介導了阿霉素引起的心肌細胞的損傷和死亡[21].阿霉素[22]可通過激活心肌線粒體自噬、引起自由基爆發(fā)、破壞細胞內(nèi)鈣離子平衡并觸發(fā)線粒體的滲透過度，導致線粒體外膜滲透性增強及凋亡啟動分子的釋放[23].在阿霉素心肌病實驗動物模型中，激活A(yù)MPK和PI3K-Akt信號通路有利于維持心肌細胞內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)，減輕細胞氧化應(yīng)激和炎癥反應(yīng)，并維持線粒體功能的穩(wěn)定，對于改善心臟結(jié)構(gòu)和功能損傷有顯著作用[23].有研究數(shù)據(jù)表明，絞股藍總皂苷能抑制脂質(zhì)過氧化和心室肌細胞Ca2+內(nèi)流來維持心肌細胞的鈣穩(wěn)態(tài)[18]，也可以通過激活A(yù)MPK信號通路[17]，發(fā)揮心肌保護作用.較多研究證實，PI3K-Akt是抑制心肌細胞凋亡的關(guān)鍵信號通路[24]，激活A(yù)kt依賴信號通路可有效防治心肌細胞損傷.槲皮素可通過上調(diào)PI3K/AKT/mTOR通路減輕膿毒癥實驗動物的心肌組織炎癥和氧化應(yīng)激反應(yīng)[25].此外，TP53通過端粒-線粒體軸維持mtDNA穩(wěn)態(tài)，下調(diào)TP53的表達可減輕阿霉素導致的心肌線粒體損傷和細胞凋亡[26].適當抑制TNF-α的表達可以提高心肌細胞的抗氧化能力及抑制阿霉素誘導的細胞程序性死亡[21]，而采用谷甾醇預(yù)處理可有效降低TNF-α和IL-6的水平，緩解心肌炎癥及氧化應(yīng)激反應(yīng)[27].本研究結(jié)果表明，絞股藍活性成分可通過TP53、AKT1、TNF-α、IL-6等靶標來調(diào)控多種信號通路，發(fā)揮防治疾病作用.

4? ? 結(jié)論

綜上所述，本研究采用網(wǎng)絡(luò)藥理學的方法預(yù)測了絞股藍防治阿霉素心肌病的復雜分子網(wǎng)絡(luò)，絞股藍中槲皮素、谷甾醇、絞股藍皂苷等有效活性成分通過調(diào)控p53、TNF-α、Akt、AMPK等信號分子，參與細胞程序性死亡、氧化應(yīng)激和線粒體穩(wěn)態(tài)調(diào)控，從而達到防治阿霉素心肌病的目的.確定絞股藍治療阿霉素心肌病的各種調(diào)控靶標，進而分析其潛在作用機制，可為后續(xù)分子機制研究和相關(guān)藥理學驗證分析提供針對性的參考[28].網(wǎng)絡(luò)藥理學也存在諸如無法解決藥物代謝動力學、一些常見的普通化合物頻繁上榜（槲皮素、谷甾醇）、動物/細胞/分子藥理與臨床藥理難以準確區(qū)分等問題，因此，文中部分預(yù)測結(jié)果及相關(guān)作用機制還需通過細胞、動物實驗和臨床研究進一步證實.

參考文獻

[1]? ? ?LEFRAK E A，PITHA J，ROSENHEIM S，et al. A clinicopathologic analysis of adriamycin cardiotoxicity[J].Cancer，1973，32（2）：302-314.

[2]? ? ?蘇毅馨，朱世杰，薛鵬，等.阿霉素心臟毒性的研究進展[J].臨床腫瘤學雜志，2020，25（11）：1048-1054.

[3]? ? ?唐婷范，朱家慶，李榮彬，等.葛葉多酚的提取工藝及其抗氧化性質(zhì)[J].廣西科技大學學報，2021，32（2）：100-106.

[4]? ? ?沈子琳，王振波，侯會芳，等.絞股藍的化學成分和藥理作用及應(yīng)用研究新進展[J].人參研究，2020，32（5）：59-64.

[5]? ? ?王云杉，王杰，王瀟楠，等.絞股藍總皂苷治療高膽固醇血癥及其對肝損傷的保護作用[J].中國藥科大學學報，2021，52（1）：84-91.

[6]? ? ?YU H J，ZHANG H S，ZHAO W H，et al.Gypenoside protects against myocardial ischemia-reperfusion injury by inhibiting cardiomyocytes apoptosis via inhibition of CHOP pathway and activation of PI3K/Akt pathway in vivo and in vitro[J].Cellular Physiology and Biochemistry，2016，39（1）：123-136.

[7]? ? ?趙穎，胡大一.絞股藍總皂甙對單個豚鼠心室肌細胞的鈣、鈉、鉀電流及動作電位的影響[J].中國藥理學通報，1998（1）：68-70.

[8]? ? ?PAN C L，L? H T.Preparative separation of quercetin，ombuin and kaempferide from gynostemma pentaphyllum by high-speed countercurrent chromatography[J].Journal of Chromatographic Science，2019，57（3）：265-271.

[9]? ? ?吳方評，金蘋，蒲艷春，等.絞股藍化學成分及對腎臟的保護作用研究[J].中國藥物化學雜志，2020，30（3）：153-158.

[10]? ?呂海濤，潘從蕾，單虎.絞股藍中槲皮素、商陸素和山奈素的提取工藝優(yōu)化[J].食品工業(yè)，2019，40（9）：40-44.

[11]? ?SHARMA A，PARIKH M，SHAH H，et al. Modulation of Nrf2 by quercetin in doxorubicin-treated rats[J].Heliyon，2020，6（4）：e03803.

[12]? ?嚴寧，楊春霞，馬娟，等.β-谷甾醇對大鼠心肌缺血再灌注損傷和ERK1/2信號通路的影響[J].心血管病學進展，2020，41（3）：321-325.

[13]? ?范冬冬，匡艷輝，向世勰，等.絞股藍化學成分及其藥理活性研究進展[J].中國藥學雜志，2017，52（5）：342-352.

[14]? ?HONG M，CAI Z，SONG L，et al.Gynostemma? ? ?pentaphyllum attenuates the progression of nonalcoholic fatty liver disease in mice：a biomedical investigation? integrated with in silico assay[J].Evidence-based Complementary and Alternative Medicine，2018，2018：1-13.

[15]? ?JOH E H，YANG J W，KIM D H.Gypenoside LXXIV ameliorates scopolamine-induced learning deficit in mice[J].Planta Medica，2011，76（8）：793-795.

[16]? ?HA T K Q，PHAM H T T，CHO H M，et al. 12，23-Dione dammarane triterpenes from Gynostemma longipes and their muscle cell proliferation activities via activation of the AMPK pathway[J].Scientific Reports，2019，9（1）：1186.

[17]? ?CHANG L P，SHI R，WANG X J，et al.Gypenoside a protects ischemia/reperfusion injuries by suppressing miR-143-3p level via the activation of AMPK/Foxo1 pathway[J].Biofactors，2019，46（3）：432-440.

[18]? ?葛敏，劉國平，關(guān)宿東.絞股藍總皂苷對阿霉素致心力衰竭大鼠心功能的影響[J].中國老年學雜志，2014，34（16）：4579-4582.

[19]? ?孫立峰，郭華，孟劍鋒，等.絞股藍總黃酮通過抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)抗心肌缺血保護作用的研究[J].中華中醫(yī)藥學刊，2018，36（10）：2513-2515.

[20]? ?CALVELLI H，KRIGMAN J，ONISHI M，et al.Detection of mitophagy in mammalian cells，mice，and yeast[J].Methods in Cell Biology，2020， 155：557-579.

[21]? ?RENU K，GOPALAKRISHNAN A V，PICHIAH P B T，et al.Molecular mechanism of doxorubicin-induced cardiomyopathy - an update[J].European Journal of Pharmacology，2018，818：241-253.

[22]? ?段明霞，李文明，唐其柱.線粒體自噬相關(guān)蛋白在阿霉素誘導的心臟毒性中的表達及意義[J].中華老年心腦血管病雜志，2019，21（2）：172-176.

[23]? ?MA H，KONG J，WANG Y L，et al.Angiotensin-converting enzyme 2 overexpression protects against doxorubicin-induced cardiomyopathy by multiple mechanisms in rats[J].Oncotarget，2017，8（15）：24548-24563.

[24]? ?甘家麗，曾妙，黃洋，等.中藥基于PI3K/Akt信號通路防治心肌缺血/再灌注損傷的研究進展[J].中華中醫(yī)藥雜志，2020，35（7）：3527-3529.

[25]? ?吳柳，蔣永艷，劉微，等.槲皮素通過PI3K/AKT/mTOR通路減輕膿毒癥小鼠心肌損傷[J].中國急救醫(yī)學，2021，41（3）：238-243.

[26]? ?LI J，WANG P Y，LONG N A，et al.p53 prevents doxorubicin cardiotoxicity independently of its prototypical tumor suppressor activities[J].Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America，2019，116（39）：19626-19634.

[27]? ?KOC K，GEYIKOGLU F，CAKMAK O，et al.The targets of β-sitosterol as a novel therapeutic against cardio-renal complications in acute renal ischemia/reperfusion damage[J].Naunyn-Schmiedeberg's archives of pharmacology，2020，394（3）：469-479.

[28]? ?丁華杰，葉云，高強，等.白藜蘆醇處理乳腺癌細胞基因表達通路分析[J].廣西科技大學學報，2019，30（2）：79-85，92.

Investigation of the pharmacodynamic material basis and molecular mechanism of gynostemma pentaphyllum in the treatment of adriamycin cardiomyopathy based on network pharmacology

WEI Weia， ZHANG Jijiea， LIU Zhongyia， GAO Si*b

（a. College of Science; b. Medical School， Guangxi University of Science and Technology，

Liuzhou 545006， China）

Abstract：? This study was to explore the pharmacodynamic basis and potential mechanism of? ? ? ? ? ? ?gynostemma pentaphyllum in the treatment of doxorubicin cardiomyopathy by using network? ? ? ? ? ?pharmacology of? Chinese medicine. The candidate pharmacological components of gynostemma? ? ?pentaphyllum were obtained by retrieving TCMSP， SYMMAP， TCMID data platforms， and the? ? ? ? ? ?potential action targets of candidate pharmacological components were obtained by Uniprot database. Cytoscape 3.8.1 software was used to construct the active component-target protein interaction network diagram. GeneCards and OMIM databases were used to screen out disease-related targets of? ? ? ? ? ? ?doxorubicin cardiomyopathy， and the protein interaction network of drug-disease genes was drawn by combining the String database. Metascape database was used for gene function analysis （GO） and KEGG pathway enrichment analysis of the intersection targets， so as to make a reasonable prediction on the mechanism of gynostemma pentaphylum improving doxorubicin cardiomyopathy. A total of 26 active components of gynostemma pentaphyllum related to adriamycin cardiomyopathy were screened out，? ?including quercetin， sitosterol， gynostemma pentaphyllum saponins， etc.， and 89 potential targets of? ? active components were identified， mainly including TNF-α， TP53， ATK1， IL-6， etc. The main? ? ? ? functions involved in the target included oxidative stress， apoptosis signal， inflammatory cytokine? ? stimulation response， regulation of protein serine/threonine kinase activity， etc. The main enrichment pathways included p53， TNF-α， PI3K-Akt， AMPK and other signaling pathways， as well as? mitochondrial autophagy and cellular calcium signal transduction pathways. The results showed that quercetin，? ? ? sitosterol， gypenoside and other active components of gynostemma pentaphyllum could regulate p53， TNF-α， Akt， AMPK and other signaling molecules to participate in the regulation of programmed cell death， oxidative stress and mitochondrial homeostasis， so as to achieve the purpose of prevention and treatment of doxorubicin cardiomyopathy.

Key words： gynostemma pentaphyllum; network pharmacology; doxorubicin cardiomyopathy;? ? ? ?pharmacodynamic material basis; molecular mechanisms

（責任編輯：黎? ?婭）