黃河裸裂尻卵黃囊期仔魚形態(tài)發(fā)育研究

陳彥伶，楊煥超，李青芝，劉 釗，涂全宇，趙華一，李 華

(四川省農(nóng)業(yè)科學院水產(chǎn)研究所/水生態(tài)工程技術研究中心，四川 成都 611731)

黃河裸裂尻(Schizopygopsispylzovi)，隸屬鯉科、裂腹魚亞科、裸裂尻魚屬，俗名為魚景魚，小嘴湟魚和小嘴巴魚，天然分布于我國蘭州以上黃河水系的干流、支流以及附屬水系，為黃河上游主要的經(jīng)濟魚類，是我國特有物種，同時也是我國重要的水產(chǎn)后備種質(zhì)基因庫的重要組成部分[1-3]。國內(nèi)學者對黃河裸裂尻的相關研究主要在其人工繁殖[4]、遺傳生物學[5-8]、胚胎發(fā)育[9]等方面，對于黃河裸裂尻仔魚早期形態(tài)發(fā)育方面未見文獻報道。

本研究對黃河裸裂尻卵黃囊期仔魚的發(fā)育特點進行了較為系統(tǒng)的研究，以期豐富黃河裸裂尻仔魚發(fā)育期的基礎研究，為黃河裸裂尻苗種培育提供基礎資料。

1 材料與方法

1.1 實驗用仔魚來源與飼養(yǎng)管理

實驗用仔魚來自崇州雞冠山基地養(yǎng)殖的黃河裸裂尻親魚人工催產(chǎn)所得的受精卵，運送到四川省農(nóng)業(yè)科學院水產(chǎn)研究所成都基地孵化獲得。養(yǎng)殖用水為曝氣后的地下井水，溶解氧為8.3～11.8mg/L(平均10.1mg)，pH值為6.52～7.89。

實驗期間用孵化框60cm(長)×40cm(寬)×30cm(高)放置在平列槽內(nèi)，水深保持在15cm左右。仔魚8日齡開始投喂，開口餌料采用蛋黃用紗布過濾的濾液，每天投喂4次。實驗過程中采用底排換水,每天排污1次,養(yǎng)殖期間水溫保持在(18.0±1.0)℃。

1.2 研究方法與數(shù)據(jù)處理

仔魚出膜當日記為0日齡，每天隨機抽取10尾，用Leica DM2500體視顯微鏡觀察10尾樣本的外部形態(tài)變化，用zen軟件采集圖像，測量全長、體高和頭長、肛后長的各形態(tài)學指標，精確到0.01mm。

實驗數(shù)據(jù)均表示為平均值±標準差。采用spaa 22軟件和EXCEL 2010分析處理數(shù)據(jù)，使用Photoshop 2015進行圖片處理。

2 結(jié)果與分析

2.1 黃河裸裂尻卵黃囊期仔魚發(fā)育的形態(tài)特征

初孵仔魚，全長10.19±0.32mm，頭長1.58±0.05mm，魚體透明，身體纖細，鰭褶較窄，頭部與卵黃囊尚未分離,與身體縱軸成90°，勾向卵黃囊彎曲，呈弧形，卵黃囊前段為圓球狀，后部呈棒狀，囊內(nèi)隱約可見血管；眼無黑色素沉積，耳囊清晰，位于眼后方。初孵仔魚側(cè)臥于水底，尚無游泳能力。

出膜后第1d，全長10.70±0.49mm，頭部稍微離開卵黃囊。胸鰭原基出現(xiàn)，半月形。心臟在卵黃囊前下方，心房、心室清晰，心臟收縮舒張有力頭部與卵黃囊分離，卵黃囊前段呈圓形，內(nèi)血管明顯增多，有血液流動，口凹開始形成，向兩邊凸顯呈三角形，眼囊輪廓清晰，視網(wǎng)膜有黑色素沉積，眼囊前方有橢圓形嗅囊。魚苗多靜息在水底，側(cè)臥，偶有掙扎性游動。

出膜后第2d，全長11.92±0.63mm，仔魚頭部前端上抬與身體保持平直,肉眼觀眼睛為淡灰色,肌節(jié)之間的血液循環(huán)明顯，卵黃囊整體成長條形，仔魚能靠尾部擺動以螺旋軌跡迅速游串。

出膜后第3d，全長12.70±0.62mm，下頜開始閉合,眼黑色,頭背部出現(xiàn)少量黑色素,鰓蓋開始張合。眼球虹膜上的“銀光層”出現(xiàn)并迅速增多，胸鰭進一步增大呈扇形,運動能力進一步增強；卵黃囊前段仍為球狀,后部呈棒狀，仔魚活力加強，受驚后在水底快速亂竄。

出膜后第4d,全長13.29±0.43mm，仔魚口張合次數(shù)約40次/min左右,4對鰓弓的鰓絲均進一步發(fā)育,卵黃囊進一縮小，尾鰭鰭條開始出現(xiàn)，頭部、軀體上部以及肌節(jié)和卵黃囊之間大量分布點狀黑色素斑。

出膜后第6d，仔魚全長14.55±0.49mm。鰓蓋開始節(jié)律性的張閉，魚鰾出現(xiàn)，鰾清晰可見，體積較小、單腔，尾鰭角質(zhì)化。鰾室上以及肌節(jié)和卵黃囊之間黑色素斑濃密,鰓蓋張合次數(shù)約90次/min。

出膜后第8d，全長15.20±0.41mm。鰾一室,略圓,解剖鏡下呈黑色亮斑。仔魚平游并分散于各個水層，腸管黃色，沿著卵黃囊上的體腔向尾部延伸，開始攝食，此后進入混合營養(yǎng)期，尾鰭下葉呈圓弧狀。

出膜后第10d，全長15.54±0.40mm。尾椎明顯上翹,尾柄骨初步形成。卵黃囊在鰾室下方的前半部分呈前大后小的錐形，后半部分呈細線狀。

出膜后第11d，全長16.11±0.49mm，卵黃基本吸收殆盡,消化道內(nèi)普遍有食物出現(xiàn),仔魚主要依靠外源性營養(yǎng)，仔魚開始平游攝食。

出膜后第12d，全長17.06±0.42mm，消化道內(nèi)有大量食物出現(xiàn),仔魚完全依靠外源性營養(yǎng)。尾鰭開始分葉，鰭條20枚并開始第一次分節(jié)。

2.2 黃河裸裂尻卵黃囊期仔魚生長發(fā)育變化

黃河裸裂尻卵黃囊期仔魚日齡與體長、全長、體高、肛后長進行回歸分析，其生長變化趨勢呈現(xiàn)函數(shù)關系(圖2)。早期仔魚的全長(LT)與日齡(D)呈二項式關系，生長方程為LT=10.195+0.851D-0.027D2(R2=0.941,n=100),其中：LT表示仔魚全長，D表示出膜時間，n表示樣本數(shù)；早期仔魚體長(ST)與日齡(D)呈立方關系，關系式為ST=9.551+1.130D-0.101D2+0.004D3(R2=0.953,n=100)，ST表示仔魚體長；早期仔魚的頭長(HT)與日齡(D)呈立方關系，生長方程為HL=1.550+0.227D-0.027D2+0.001D3(R2=0.953,n=100)；早期仔魚的肛后長(PT)與日齡(D)呈二項式關系，生長方程為PT=2.724+0.378D-0.016D2(R2=0.982,n=100)。

圖1 黃河裸裂尻卵黃囊期仔魚日齡與全長、體長、頭長和肛后長的回歸曲線圖

表1 黃河裸裂尻與其他裂腹魚亞科早期仔魚發(fā)育特點的比較

3 討論

3.1 黃河裸裂尻與其他裂腹魚亞科魚類的仔魚發(fā)育差異分析

將黃河裸裂尻仔魚分別與其它裂腹魚亞科的卵黃囊仔魚時期發(fā)育的特點進行比較，見表1[10-20]。黃河裸裂尻初孵仔魚出膜后全長與裂腹魚亞科中的其他種類對比，大于厚唇裂腹魚、光唇裂腹魚和伊犁裂腹魚，與長絲裂腹魚、重口裂腹魚和拉薩裂腹魚相近，小于軟刺裸裂尻、短須裂腹魚，推測黃河裸裂尻初孵仔魚在裂腹魚亞科中屬于中等類型，裂腹魚亞科仔魚早期各器官組織差異較小、發(fā)育過程相似。黃河裸裂尻仔魚出膜后11d后卵黃囊消耗殆盡，與軟刺裸裂尻時間接近，短于拉薩裂腹魚、厚唇裂腹魚和重口裂腹魚。

3.2 黃河裸裂尻早期發(fā)育與環(huán)境適應性

本研究發(fā)現(xiàn)黃河裸裂尻魚卵黃囊在5日齡前被快速吸收，卵黃囊形態(tài)由圓球狀變?yōu)榘魻?，吸收趨勢與大渡軟刺裸裂尻魚[10]；仔魚的口、眼、鰓、尾鰭等功能性器官在孵化后前5日進行快速分化發(fā)育，卵黃物質(zhì)同步的快速利用于仔魚胚后發(fā)育。孵化后第8d腸道貫通，進入混合營養(yǎng)階段，開始攝取少量人工餌料，在孵化后第11d卵黃吸收完全，仔魚活動水平和攝食強度增加，生長迅速，頻次增多。及時投喂開口餌料，讓仔魚從內(nèi)源性向外源性轉(zhuǎn)換的過渡時期，可避免仔魚“不可逆點”的出現(xiàn)，減少仔魚早期死亡[21]。黃河裸裂尻魚生活的環(huán)境一般分布海拔較高，喜愛生活在清澈的冷水環(huán)境之中，以植物為主要食物，如藻類和一些生活在水中的植物碎屑為食物，同時也以一些生活在水中的昆蟲為食[8]。黃河裸裂尻仔魚為了適應水溫和其他環(huán)境條件,黃河裸裂尻魚通過長期進化，為了更好地適應餌料生物匱乏的環(huán)境，降低仔魚在短時間內(nèi)攝食不到外源營養(yǎng)而死亡的風險，從而提高仔魚的成活率，形成了自己特有的早期發(fā)育生物學特點。但關于黃河裸裂尻仔魚卵黃囊確切機制有待于進一步研究，根據(jù)本次實驗觀察，進入混合營養(yǎng)期的仔魚，卵黃囊未完全吸收，卵黃囊被大量吸收，呈細條狀此時段，仔魚生長緩慢；隨著仔魚攝取外源性營養(yǎng)能力增強，生長速度加快。根據(jù)黃河裸裂尻仔魚早期發(fā)育特點，選擇在開口初期投喂充足的開口餌料,使其能順利渡過開口期，過渡到外源營養(yǎng)期，提高魚苗的成活率。出膜后黃河裸裂尻仔魚為了更好地適應貧營養(yǎng)型水體，卵黃囊存在時間較長，降低了仔魚因攝取不到外源營養(yǎng)而死亡的風險。因此，黃河裸裂尻早期仔魚發(fā)育過程有較長的混合營養(yǎng)期，以適應性其生境。