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    廣州市黃埔地區(qū)6 181例女性宮頸細(xì)胞人乳頭瘤病毒基因分型分析

    2021-11-19 08:12:14肖亮博陳光煉吳振勇朱海勇
    現(xiàn)代醫(yī)院 2021年9期
    關(guān)鍵詞:危型亞型感染率

    肖亮博 陳光煉 吳振勇 朱海勇

    廣州開發(fā)區(qū)醫(yī)院 廣東廣州 510730

    人乳頭瘤病毒(human papillomavirus, HPV)是一種屬于乳多空病毒科的乳頭瘤病毒屬,是球形DNA病毒,能引起人體皮膚的多重乳頭瘤狀瘤或疣及粘膜生殖道上皮增生性損傷。生殖道的HPV感染不僅可導(dǎo)致生殖道尖銳濕疣,高危型的感染更是與宮頸癌密切相關(guān)。據(jù)研究報(bào)道,我國(guó)每年約有10萬(wàn)宮頸癌新發(fā)病例而其中死亡數(shù)約為3萬(wàn)[1]。HPV至今已鑒定出100多種亞型,其中約33%的亞型與生殖道感染相關(guān),常見(jiàn)可分為高危型和低危型,可通過(guò)直接或間接傳染的方式感染,而高危型的持續(xù)感染已證實(shí)具有潛在的致癌性,與宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展有密切相關(guān)[2]。各城市地區(qū)之間HPV的感染率、分型及年齡相關(guān)性均有差別(佛山南海13.5%[3]、 云浮24.13%[4]、中山市37.0%[5]、深圳29.12%[6])。本次研究分析采用凱普公司HPV 21分型雜交試劑對(duì)6 181份標(biāo)本進(jìn)行基因型分析,目的是找出地區(qū)性感染的特點(diǎn),給臨床診治提供科學(xué)依據(jù)。

    1 資料與方法

    1.1 研究對(duì)象

    收集2020年6月—2021年3月廣州開發(fā)區(qū)醫(yī)院西院區(qū)門診、住院和體檢一共6 181例女性人乳頭瘤病毒基因分型標(biāo)本,年齡在18~87歲,平均年齡(39.64±8.34)歲。

    1.2 方法

    1.2.1 樣本要求 檢驗(yàn)前準(zhǔn)備:① 3天內(nèi)不使用陰道內(nèi)藥物或?qū)﹃幍肋M(jìn)行沖洗;②24小時(shí)內(nèi)不應(yīng)有性行為;③檢查應(yīng)在非月經(jīng)期內(nèi)進(jìn)行;④檢查前陰道不進(jìn)行醋酸或碘液涂抹。標(biāo)本采集步驟:由醫(yī)生以窺陰器暴露宮頸,用棉拭子將宮頸過(guò)多的分泌物擦去。將宮頸刷置于宮頸口,輕輕搓動(dòng)宮頸刷使其順時(shí)針旋轉(zhuǎn)3~5圈。慢慢取出宮頸刷,將其放入裝有細(xì)胞保存液的樣本管中。在管口處將多余的刷柄折斷,將刷頭留在樣本管中,旋緊管蓋,做好樣本標(biāo)示并保持樣本管直立放置,送檢驗(yàn)室檢測(cè)。如不能馬上送檢樣本,可置于4 ℃保存,并于2個(gè)星期之內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。

    1.2.2 試劑與儀器 ①試劑:潮州凱普生物化學(xué)有限公司生產(chǎn)的核酸提取試劑盒(DNA-L型磁珠法)、人乳頭瘤病毒(HPV)分型檢測(cè)試劑盒(PCR+膜雜交法);②儀器:凱普公司生產(chǎn)的HBNP-480A核酸提取儀、杭州博日生產(chǎn)的TC-96/G/H(b)擴(kuò)增儀及凱普公司生產(chǎn)的HHM-3、HB2012A、HBHM-3000S雜交儀。

    1.3 實(shí)驗(yàn)方法

    將標(biāo)本經(jīng)過(guò)DNA提取、擴(kuò)增后進(jìn)行雜交,肉眼進(jìn)行判讀結(jié)果(檢測(cè)結(jié)果陽(yáng)性點(diǎn)為清晰可見(jiàn)的藍(lán)紫色圓點(diǎn))。該試劑可檢測(cè)HPV14種高危型亞型(16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59、66、68亞型),5種低危型亞型(6、11、42、43、44亞型),2種其它亞型(53、CP8304亞型)。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

    使用SPSS 22軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

    2 結(jié)果

    2.1 此次在我院篩查的6 181名女性中,平均年齡約為(39.64±8.34)歲;其中檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性的有618名,陽(yáng)性率約10.0%,陽(yáng)性人群平均年齡約為(39.20±9.61)歲。

    2.2 不同年齡段中陽(yáng)性率分布不一,≤20歲組陽(yáng)性率為1.13%(7/618),21~30歲組陽(yáng)性率為17.8%(110/618),31~40歲組陽(yáng)性率為38.51%(238/618),41~50歲組陽(yáng)性率為29.94%(185/618),51~60歲組陽(yáng)性率為10.84%(67/618),>60歲組陽(yáng)性率為1.78%(11/618)。

    2.3 在618例陽(yáng)性人群中,單一感染505例(81.7%),二重感染97例(15.7%),三重及以上感染占16例(2.6%);其中在多重感染中二重感染占比最高(85.84%),具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

    2.4 由于檢測(cè)病例中存在多重感染的情況,因此在陽(yáng)性人群中各亞型合計(jì)數(shù)量(678例)超過(guò)陽(yáng)性人群數(shù)量(618例):高危型505例,占74.48%(505/678),非高危型(低危型+其他型)173例,占25.52%(173/678)。高危型感染排前三的分別為52亞型151例,感染率為2.44%(151/6 181),陽(yáng)性占比為24.43%(151/618);58亞型89例,感染率為1.44%(89/6 181),陽(yáng)性占比為14.40%(89/6 181);39亞型54例,感染率為0.87%(54/6 181),陽(yáng)性占比為8.74%(54/618)。見(jiàn)表1。

    表1 6 181例女性HPV標(biāo)本中亞型感染分布情況(n,%)

    2.5 在6 181名女性中,高危型感染人數(shù)為533例(8.6%),非高危感染人數(shù)85例(1.38%),此處計(jì)算包括多重感染在內(nèi),僅考慮為高危型及非高危型感染情況。

    3 討論

    宮頸癌是女性三大常見(jiàn)腫瘤之一,與HPV的感染有著密不可分的關(guān)系,作為女性健康的殺手,其發(fā)病率僅在乳腺癌之下[7]。由于個(gè)人或環(huán)境的多種因素,現(xiàn)今癌癥呈年輕化現(xiàn)象,這也引起女性同胞更多地關(guān)注自己的身體健康。大約有70%~80%的女性一生中都感染過(guò)HPV,但并不是所有的人都會(huì)發(fā)展成宮頸癌,這些感染很多時(shí)候會(huì)像感冒一樣僅僅在體內(nèi)短暫停留,就可以被自身免疫系統(tǒng)清除,但是宮頸癌的發(fā)生會(huì)因?yàn)榘殡S的高危亞型持續(xù)感染而導(dǎo)致病情的發(fā)展[8-9]。HPV病毒高危亞型的持續(xù)感染作為引發(fā)宮頸癌的必要條件[10]。目前宮頸癌篩查的重要手段之一就是進(jìn)行HPV核酸的檢測(cè)。在目前所能鑒定出的所有亞型中,其中大約有40多種亞型與宮頸癌相關(guān)[11]。在本次研究中所收集的數(shù)據(jù)主要來(lái)自廣州市黃埔地區(qū)檢測(cè)人群,該地區(qū)陽(yáng)性率(10.0%)明顯低于黃俊遠(yuǎn)等[12]統(tǒng)計(jì)出的廣州地區(qū)陽(yáng)性率(24.74%)及陳波等[13]統(tǒng)計(jì)的數(shù)據(jù)(28.43%);高危型感染率8.6%低于相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道的中國(guó)高危型感染率14.8%[14];感染率最高的三個(gè)高危型分別是52型、58型和39型,其中高危型52感染率最高(24.43%),與黃俊遠(yuǎn)等[12]統(tǒng)計(jì)的廣州地區(qū)情況相符,但其他陽(yáng)性率略有出入,黃俊遠(yuǎn)等[12]和陳波等[13]統(tǒng)計(jì)出廣州感染率最高的三個(gè)亞型相同,均為16型、52型、58型,這可能由于他們統(tǒng)計(jì)的人群數(shù)據(jù)來(lái)源主要是廣州市老城區(qū),人口流動(dòng)相對(duì)穩(wěn)定,我院檢測(cè)分析的人群主要來(lái)自廣州黃埔開發(fā)區(qū),大多數(shù)以流動(dòng)人工為主,常住人口相對(duì)較少,說(shuō)明在同個(gè)城市中,由于每個(gè)區(qū)域的人群組成、生活習(xí)慣、環(huán)境的不同,可能會(huì)導(dǎo)致各個(gè)區(qū)域的感染率及亞型分布都會(huì)有一定的差異。

    從年齡分布來(lái)看,陽(yáng)性感染率隨著年齡而上升,到了31~40歲這個(gè)組別HPV陽(yáng)性率最高,同時(shí)也成為轉(zhuǎn)折點(diǎn),而后隨著年齡段的上升,感染率呈負(fù)相關(guān)現(xiàn)象,與趙俊琴等[15]、楊達(dá)平等[16]統(tǒng)計(jì)出的現(xiàn)象相一致。HPV主要的感染途徑是通過(guò)性傳播,而育齡女性在性生活方面比較活躍,所帶來(lái)的感染風(fēng)險(xiǎn)也相對(duì)較高,因此在此次分析中育齡女性的感染率較高;也有可能是現(xiàn)代女性隨著社會(huì)的發(fā)展以及醫(yī)學(xué)知識(shí)的推廣,使得現(xiàn)代女性對(duì)自身健康更加注重,在工作需要及個(gè)人原因下定期進(jìn)行健康體檢,在檢測(cè)數(shù)量的增長(zhǎng)下感染率也相應(yīng)提升;而老年女性由于沒(méi)有及時(shí)接收更多的醫(yī)學(xué)信息造成檢測(cè)率低下。隨著年齡的增長(zhǎng),女性的免疫力逐漸下降,整體激素水平也會(huì)發(fā)生變化,容易導(dǎo)致處于潛伏期的病毒復(fù)蘇。目前每年社區(qū)街道均有對(duì)適齡婦女進(jìn)行兩癌篩查的免費(fèi)檢測(cè),這是一個(gè)利民的項(xiàng)目,能更好地幫助普查人群,早期發(fā)現(xiàn)疾病。

    HPV亞型感染分布情況不同所對(duì)應(yīng)的宮頸病變嚴(yán)重程度也不同[17],在出現(xiàn)多重感染的時(shí)候更容易導(dǎo)致宮頸上皮細(xì)胞的病變,根據(jù)相關(guān)文獻(xiàn)[18]表明,多重亞型感染更加容易增加宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn),導(dǎo)致宮頸癌變,而其中高危型的感染是宮頸癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)鍵因素,因?yàn)榘l(fā)生持續(xù)的高危型感染,會(huì)更容易推動(dòng)宮頸發(fā)生病變,據(jù)相關(guān)研究表明,90.8%的宮頸癌患者感染了高危型HPV,宮頸癌前病變的患者中有76.6%被高危HPV感染[19],而有關(guān)統(tǒng)計(jì)在宮頸細(xì)胞學(xué)正常的女性中高危型HPV感染率為11.7%[20],大部分女性在1~2年內(nèi)自身免疫系統(tǒng)會(huì)清除這些病毒,但是如果沒(méi)有進(jìn)行定期體檢的話,這些不被清除的病毒有可能導(dǎo)致疾病隱患的出現(xiàn)。因此在出現(xiàn)高危型感染特別是多重感染的時(shí)候,如何治療及提前干預(yù),降低女性患宮頸癌的風(fēng)險(xiǎn),是我們一直都在努力的方向。

    宮頸癌可以通過(guò)篩查防治減少部分病例的發(fā)生,通過(guò)定期監(jiān)測(cè)HPV的感染情況,早發(fā)現(xiàn)、早診斷、早治療,可以降低子宮頸癌的疾病負(fù)擔(dān)。

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