五味子藤莖化學(xué)成分及保肝作用研究進(jìn)展

郝鑫龍，周 濤，畢鳳春，王 碩，佟 碩，賈豐碩，孫明月，胡彥武

（1.通化師范學(xué)院醫(yī)藥學(xué)院，通化 134002;2.通化永基藥業(yè)股份有限公司，通化 134002）

五味子[Schisandra chinens is(Turcz.)Bail1.]為木蘭科五味子屬植物，其成熟果實(shí)稱北五味子，廣泛分布在長(zhǎng)白山區(qū)，是東北道地藥材，該中藥始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，具補(bǔ)腎益氣、生津固澀之功效[1]。傳統(tǒng)上，五味子入藥部位以果實(shí)為主，藤莖多被當(dāng)作“非藥用部位”而廢棄，造成資源浪費(fèi)[2]。我國(guó)民間用五味子藤莖作調(diào)味劑和滋補(bǔ)強(qiáng)壯劑，可用防治感冒、肺虛咳喘等疾病[3]。近年來(lái)，關(guān)于五味子藤莖藥用價(jià)值研究逐漸增多，對(duì)其所含化學(xué)成分及藥理作用研究亦不斷深入，而有關(guān)藥理作用研究多集中于保肝作用方面[4]。本文針對(duì)近年來(lái)有關(guān)五味子藤莖的化學(xué)成分及保肝作用研究進(jìn)行綜述，以期為綜合有效利用五味子生物資源，延伸五味子資源產(chǎn)業(yè)鏈、開發(fā)新藥源提供參考。

1 化學(xué)成分

五味子藤莖含有多種與果實(shí)相同的化學(xué)成分，如木脂素、揮發(fā)油、萜類、多糖、黃酮、甾醇等，但存在含量差異[5]。

1.1 木脂素

木脂素是五味子果實(shí)的主要藥效成分，結(jié)構(gòu)類型多，立體結(jié)構(gòu)復(fù)雜，含量約占2%～8%[6]。有研究表明[7，8]，五味子藤莖中含有與五味子果實(shí)相同的木脂素成分，且不同采收期、不同年生藤莖中木脂素含量有所不同。其中，3～4年生五味子藤莖木脂素含量與五味子果實(shí)含量相當(dāng)。進(jìn)而提示，3年生以上的藤莖可替代果實(shí)作為提取木脂素的原料。目前，五味子果實(shí)及藤莖中所含木脂素類成分按結(jié)構(gòu)特點(diǎn)可以分為聯(lián)苯環(huán)辛烯、螺苯駢呋喃型聯(lián)苯環(huán)辛烯、芳基四氫萘、二芳基丁烷、四氫呋喃五大類[9-11]，其中主要特征性成分是聯(lián)苯環(huán)辛烯類，包括五味子醇甲、五味子醇乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素、戈米辛N、五味子酯甲等。

1.2 揮發(fā)油

五味子藤莖中所含揮發(fā)油主要成分為倍半萜（包括萜烴和含氧衍生物）化合物、含芳香族和脂肪族化合物等。徐海波等[12]運(yùn)用氣相層相-質(zhì)譜分析技術(shù)（Gas Chromatograph-Mass Spectrometer，GC-MS），對(duì)北五味子藤莖揮發(fā)油成分進(jìn)行了分析，鑒定出37個(gè)成分，占揮發(fā)油總量的57.19%，其中主要成分為：2-十三酮（5.47%），[+]-橋-二環(huán)倍半水芹烯（15.30%），[S-(Z)]-3,7,11-三甲基-1,6,10-十二三烯-3-醇（14.41%），與李曉寧[13]報(bào)道遼五味子果實(shí)揮發(fā)油中的兩個(gè)主要成分古巴烯、麝子油烯不同。朱玉梅等[14]采用水蒸氣蒸餾法從黔產(chǎn)華中五味子藤莖中提取揮發(fā)油，并用GC-MS聯(lián)用技術(shù)，對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行定性和定量分析，鑒定出54個(gè)化合物，占揮發(fā)油總量的97.54%，其中含量較高的成分為：金合歡醇（22.62%）、δ-杜松烯（10.69%）、β-蒎烯（4.59%）、α-蒎烯（4.34%）、α-水芹烯（4.57%）。

1.3 萜類

五味子藤莖中萜類化合物按結(jié)構(gòu)可分為三萜類、單萜類、倍半萜類等[15]。劉艷等[15]采用HPD-100大孔樹脂、硅膠、ODS和HPLC等對(duì)五味子藤莖95%乙醇提取物進(jìn)行分離純化，根據(jù)理化性質(zhì)及波譜數(shù)據(jù)鑒定出13個(gè)萜類化合物：retusenol、schizandrolic acid、cycloartenone、24-methylenecycloartenone、kadsuric acid、nigranoic acid、schizandronic acid、1-methyl-1-(trans-5＇-methyl-cis-5＇-vinyltetrahydrofuran-r-2＇-yl)-ethyl-6-O-α-arabinofuranosyl-β-D-glucopyranoside、(Z)-1-(5-ethenyl-5-methyltetrahydrofuran-2-yl)-1-methylethyl-O-β-D-apiofuranosyl-(1→6)-O-β-Dglucopyranoside、4,9-dihydroxy-4-olide、(R)-p-cymen-9-O-α-D-arabinofuranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside、ficumegasoside、6α,9α-dihydroxycadinan-4-en-3-one。

1.4 多糖

五味子藤莖中多糖含量較高，五味子原植物品種、藤莖采收期不同，其多糖含量亦存在差異。胡彥武[16]采用超聲技術(shù)從五味子藤莖中提取多糖，經(jīng)苯酚-硫酸法測(cè)定多糖含量為5.27%。劉俊霞等[17]對(duì)不同品種的北五味子藤莖中所含多糖含量進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果表明，撫松2號(hào)藤莖多糖含量最高（4.44%），黃果一年生藤莖多糖含量最低（2.46%），各品種藤莖多糖平均含量為3.58%。張崇禧[18]等研究表明，11月份采收的五味子藤莖中多糖含量最高（4.15%），8月份采收最低，推測(cè)可能是由于生長(zhǎng)旺季時(shí)植株生長(zhǎng)快，多糖供給生殖生長(zhǎng)和營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)，導(dǎo)致在植株內(nèi)積累較少所致。

1.5 黃酮類

劉俊霞等[19]采用回流提取法得到五味子藤莖90%乙醇提取物，并對(duì)其化學(xué)成分進(jìn)行分離及活性篩選，從中分離得到10種黃酮類成分：槲皮素、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、槲皮素-3-O-β-D-吡喃木糖苷、蘆丁、芹菜素、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、異鼠李素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、染料木素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、兒茶素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷、胡蘿卜苷。金銀萍等[20]以超高效液相色譜法，對(duì)19種不同種質(zhì)資源五味子藤莖中蘆丁、金絲桃苷、槲皮素-3-O-葡萄糖、槲皮素-3-O-木糖和槲皮素等5種黃酮類化合物含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同種質(zhì)資源間五味子藤莖的黃酮類成分含量存在較大差異。該課題組以蘆丁為對(duì)照品，采用紫外-可見(jiàn)分光光度法對(duì)不同種質(zhì)資源五味子藤莖中總黃酮含量進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，不同種質(zhì)資源間五味子藤莖的總黃酮含量亦存在較大差異[21]。

1.6 其他類

五味子藤莖中除含有木脂素、揮發(fā)油、萜類、黃酮類成分外，尚存在一些其他類成分。劉俊霞[19]等利用多種色譜分離技術(shù)，對(duì)五味子藤莖90%乙醇提取物的正丁醇部位進(jìn)行分離，純化出綠原酸、阿魏酸、咖啡酸、齊墩果酸等有機(jī)酸。武新亮等[22]采用各種色譜技術(shù)，對(duì)北五味子藤莖的化學(xué)成分進(jìn)行分離純化，分離得到6個(gè)化合物：去氫二異丁香酚、Eriobofuran、4,5-Dihydroxy-3-methoxybiphenyl、GomisinN、(+)deoxychizandrin、β-谷甾醇。

2 保肝作用

2.1 抗藥物性肝損傷作用

藥物性肝損傷亦稱藥物性肝病，是指肝臟受到藥物或其代謝產(chǎn)物所對(duì)肝臟造成的毒性損傷或發(fā)生過(guò)敏反應(yīng)[23]。對(duì)乙酰氨基酚（Acetaminophen，APAP）是常用的解熱鎮(zhèn)痛藥，長(zhǎng)時(shí)間服用或短時(shí)間內(nèi)過(guò)量服用會(huì)造成嚴(yán)重的肝損傷和肝功能衰竭。李艷姿[24]以APAP誘導(dǎo)小鼠造成急性肝損傷，探討了五味子藤莖乙醇提取物保肝作用及分子機(jī)制，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，五味子藤莖乙醇提取物能夠明顯改善APAP誘導(dǎo)的小鼠肝功能障礙和氧化應(yīng)激，顯著降低谷草轉(zhuǎn)氨酶（AST），谷丙轉(zhuǎn)氨酶（ALT），丙二醛（MDA）含量，顯著升高還原型谷胱甘肽（GSH）和超氧化物歧化酶（SOD）水平，顯著抑制脂質(zhì)過(guò)氧化終產(chǎn)物4-羥基壬烯醛（4-HNE）的生成，并降低硝基化終產(chǎn)物3-硝基酪氨酸（3-NT）的水平。此外，五味子藤莖乙醇提取物可顯著降低促凋亡蛋白Bax和Cleaved-Caspase-3的蛋白表達(dá)水平，抑制一氧化氮合酶（iNOS）和環(huán)氧合酶-2（COX-2）的過(guò)度表達(dá)。進(jìn)而提示，五味子藤莖乙醇提取物改善APAP誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷機(jī)制與抑制氧化應(yīng)激、炎癥反應(yīng)及抗凋亡有關(guān)。

2.2 抗酒精性肝損傷作用

中國(guó)的酒文化具有悠久的歷史，將飲酒賦予了更多的意義，但是長(zhǎng)期飲酒或短時(shí)間內(nèi)大量飲酒會(huì)引發(fā)酒精性肝損傷，原因之一是由于它在體內(nèi)的代謝過(guò)程能引起脂質(zhì)過(guò)氧化[25]。胡彥武等[26]利用急性酒精性肝損傷小鼠模型，研究了五味子藤莖水煎液對(duì)肝損傷小鼠血清ALT、AST的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，五味子藤莖水煎液和五味子果實(shí)水煎液具有相同的保肝作用，但并未分析其作用機(jī)制。劉群等[27]研究五味子藤莖木脂素和多糖對(duì)急性酒精肝損傷小鼠的保肝作用，結(jié)果表明，五味子木脂素和多糖高、中、低劑量（200、100、50 mg·kg-1）均可不同程度地降低血清ALT、AST活性及TG水平，升高肝臟SOD活性，降低MDA水平。多糖高劑量（200 mg·kg-1）的作用效果強(qiáng)于木脂素高劑量，與聯(lián)苯雙酯作用相當(dāng)。進(jìn)而提示，五味子藤莖木脂素和多糖對(duì)酒精誘導(dǎo)的急性肝損傷均具有一定的保護(hù)作用，其機(jī)制可能與抗自由基脂質(zhì)過(guò)氧化反應(yīng)有關(guān)。

孟憲軍等[28]采用56°白酒誘導(dǎo)小鼠急性酒精肝損傷，研究了北五味子藤莖總?cè)苹衔锏谋８巫饔谩＝Y(jié)果表明，北五味子藤莖總?cè)苹衔铮?0 mg·kg-1·d-1）能顯著降低酒精性肝損傷所致異常升高的ALT、AST活性，降低MDA含量，顯著升高SOD活性與GSH含量，減輕或逆轉(zhuǎn)小鼠肝臟病理學(xué)改變。

2.3 抗化學(xué)性肝損傷作用

丁傳波等[29]研究了五味子藤莖中木脂素和多糖對(duì)10%CCl4豆油溶液誘導(dǎo)的小鼠急性肝損傷的保護(hù)作用，結(jié)果表明，木脂素高（200 mg·kg-1）、中劑量（100 mg·kg-1）組小鼠血清ALT、AST及TG水平均顯著降低；多糖高劑量（100 mg·kg-1）組的AST和TG水平也顯著降低；各劑量木脂素和多糖均能顯著升高肝臟中SOD的活性，降低肝臟中MDA的含量，與劉群[27]的研究報(bào)道內(nèi)容相似。姚瑩等[30]以濃度為0.5%CCl4橄欖油溶液誘導(dǎo)小鼠肝損傷，結(jié)果表明，五味子藤莖中木脂素類成分對(duì)肝臟的保護(hù)作用與陽(yáng)性對(duì)照藥聯(lián)苯雙酯相當(dāng)，可顯著降低肝損傷小鼠血清ALT、AST水平，降低肝勻漿MDA含量，提高SOD、GSH-Px活力，改善肝臟病理?yè)p傷情況，減少壞死細(xì)胞及炎性細(xì)胞數(shù)量。進(jìn)而提示，五味子藤莖中木脂素類成分對(duì)CCl4所致小鼠肝損傷具有保護(hù)作用。胡彥武等[31]觀察了五味子藤莖提取物對(duì)小鼠的急性毒性反應(yīng)，并對(duì)CCl4誘導(dǎo)肝損傷小鼠保護(hù)作用進(jìn)行了探析，結(jié)果表明，五味子藤莖提取物毒性較低，對(duì)小鼠最大耐受量為32 g·kg-1·d-1，五味子藤莖提取物可有效降低肝損傷小鼠血清ALT、AST水平，對(duì)CCl4致小鼠急性肝損傷具有較強(qiáng)的保護(hù)作用。在上述研究基礎(chǔ)上，胡彥武等[32]進(jìn)一步觀察了五味子藤莖提取物抗CCl4所致大鼠肝纖維化的作用，并以蛋白印跡雜交（Western blot）法檢測(cè)了相關(guān)信號(hào)通路蛋白表達(dá)水平，對(duì)其抗肝纖維化作用機(jī)制進(jìn)行了深入分析。結(jié)果表明，五味子藤莖提取物能顯著降低肝纖維化大鼠血清ALT、AST活性及HA、LN、PCⅢ水平，明顯改善大鼠肝組織結(jié)構(gòu)，減輕肝纖維化程度，顯著降低肝組織TGF-β1、α-SMA蛋白表達(dá)水平。進(jìn)而提示，五味子藤莖提取物對(duì)CCl4所致大鼠肝損傷有明顯保護(hù)作用，其機(jī)制可能與降低肝組織TGF-β1、α-SMA蛋白表達(dá)、抑制肝星狀細(xì)胞活化有關(guān)。

3 展望

近年來(lái)，五味子藤莖相關(guān)研究已取得初步進(jìn)展，其中對(duì)化學(xué)成分的研究主要包括含量測(cè)定和化合物分離與鑒定，含量測(cè)定主要以木脂素和多糖的研究較多。在成分分離方面，已對(duì)木脂素、揮發(fā)油、萜類、多糖、黃酮類、甾醇類成分進(jìn)行了系統(tǒng)研究；在保肝作用方面，主要集中于藥物性肝損傷、酒精性肝損傷、化學(xué)性肝損傷，但具體分子機(jī)制研究不夠深入。今后應(yīng)加強(qiáng)對(duì)五味子藤莖化學(xué)成分和保肝作用進(jìn)行多角度、深層次研究，為探究其利用價(jià)值提供理論支撐。

綜合利用傳統(tǒng)中藥非藥用部位，開發(fā)適合現(xiàn)代醫(yī)療衛(wèi)生保健的產(chǎn)品是當(dāng)前中醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)化的重點(diǎn)方向之一。野生五味子廣泛分布在長(zhǎng)白山區(qū)，自然條件其藤莖生長(zhǎng)旺盛，開花結(jié)果率低，為提高產(chǎn)量，人工栽培基地每年需減掉植株約40%的藤莖，因無(wú)文獻(xiàn)記載其藥效價(jià)值，一直作為“非藥用部位”而廢棄，造成資源浪費(fèi)。隨著對(duì)五味子藤莖資源化學(xué)成分和保肝作用的深入研究，開發(fā)以五味子藤莖有效成分為藥效組分的保肝新藥，對(duì)延伸五味子經(jīng)濟(jì)產(chǎn)業(yè)鏈具有重要意義。