精油植生素對(duì)患輸卵管炎蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)及免疫激素水平的影響

王改琴，耿文靜，胡 濤，賈慧君，沈 波，徐 瑞，劉春雪

（安佑生物科技集團(tuán)股份有限公司，江蘇蘇州 215437）

在產(chǎn)蛋期，蛋雞輸卵管每天都在高效運(yùn)轉(zhuǎn)，易發(fā)生卵巢炎和輸卵管炎，從而導(dǎo)致產(chǎn)蛋率和蛋品質(zhì)下降，造成總蛋重和蛋殼質(zhì)量下降，破殼蛋、沙殼蛋、畸形蛋等增多，嚴(yán)重影響?zhàn)B殖經(jīng)濟(jì)效益[1]。輸卵管炎的主要誘因是禽舍衛(wèi)生環(huán)境差，沙門(mén)氏菌、大腸桿菌等細(xì)菌感染泄殖腔，進(jìn)而侵入輸卵管；病毒性輸卵管炎也較為常見(jiàn)，如新城疫病毒、腺病毒或冠狀病毒等誘發(fā)子宮及腺體細(xì)胞變形，導(dǎo)致黏膜分泌功能紊亂[2]、蛋殼變薄[3]或顏色異常[4]，禽流感病毒也會(huì)破壞生殖系統(tǒng)，使卵黃充血破裂，造成輸卵管炎[5]。此外，維生素A、維生素D 以及鈣磷等營(yíng)養(yǎng)素缺乏也會(huì)誘發(fā)輸卵管炎。蛋禽輸卵管防控除了日常的禽舍環(huán)境控制外，還可通過(guò)在飼料中添加抗菌消炎及免疫活化的物質(zhì)來(lái)保健，維護(hù)輸卵管的正常生理功能。精油植生素是由植物精油和中草藥復(fù)方組成的生物活性物質(zhì)，具有抑菌、消炎等作用。本文旨在研究日糧中添加精油植生素對(duì)患輸卵管炎的蛋雞生產(chǎn)性能、蛋品質(zhì)、免疫因子和激素水平的影響，以期為精油植生素在蛋雞生產(chǎn)中的應(yīng)用提供參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料 精油植生素由山川生物科技（武漢）有限公司提供，主要有效成分是肉桂醛、百里香酚、香芹酚、益母草、甘草、黃芪提取物等。試驗(yàn)所用基礎(chǔ)日糧由南通安佑生物科技有限公司提供；試驗(yàn)蛋雞品種為海蘭灰商品蛋雞。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及飼養(yǎng)管理 試驗(yàn)選擇162 只約560 日齡產(chǎn)蛋率較低（連續(xù)2～3 d 不產(chǎn)蛋）、蛋品質(zhì)較差[出現(xiàn)破殼、沙殼、軟殼、臟蛋（蛋殼粘血、糞便或黏液）、畸形蛋（大蛋、小蛋以及不規(guī)則蛋）]的患輸卵管炎的海蘭灰蛋雞，隨機(jī)分為3 組，分別為對(duì)照組、250 mg/kg和500 mg/kg 精油植生素試驗(yàn)組，每組6 個(gè)重復(fù)，每重復(fù)9 只雞。對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧，250、500 mg/kg 精油植生素組分別在基礎(chǔ)日糧中添加250、500 mg/kg 精油植生素。試驗(yàn)期28 d?；A(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平

試驗(yàn)在上海奉賢梨園雞場(chǎng)進(jìn)行。采用3 層階梯式籠養(yǎng)，根據(jù)蛋雞的飼養(yǎng)規(guī)程飼喂，自由采食和飲水，每日記錄舍內(nèi)溫度和濕度。

1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1 產(chǎn)蛋性能 每天以重復(fù)數(shù)為單位記錄產(chǎn)蛋數(shù)、蛋重、軟殼、破殼、沙殼、臟蛋及畸形蛋數(shù)，統(tǒng)計(jì)飼料耗用量。計(jì)算產(chǎn)蛋率、破蛋率、沙殼蛋率、畸形蛋率、平均蛋重及料蛋比，同時(shí)記錄整個(gè)試驗(yàn)期的死淘情況。

1.3.2 蛋品質(zhì) 試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，每個(gè)重復(fù)隨機(jī)選取2 枚接近平均蛋重的雞蛋（不含破蛋、軟蛋和不合格蛋），測(cè)定蛋殼厚度和強(qiáng)度、蛋白高度、哈夫單位、蛋黃顏色等蛋品質(zhì)指標(biāo)。用蛋殼強(qiáng)度儀EFG-0503（Robotmation,Japan）測(cè)定蛋殼強(qiáng)度（大頭、小頭及中端的平均強(qiáng)度）；用多功能蛋品質(zhì)分析儀 EMT-7300（Robotmation，Japan）測(cè)定蛋重、蛋白高度、哈夫單位。雞蛋放置1 周后進(jìn)行水印蛋的評(píng)分（表2），由蛋品儀器綜合評(píng)判蛋品質(zhì)，蛋品質(zhì)綜合評(píng)分分為AA 級(jí)、A 級(jí)及B 級(jí)。

表2 水印蛋蛋殼評(píng)分

1.3.3 血清免疫指標(biāo)和激素水平 于試驗(yàn)結(jié)束時(shí)每個(gè)重復(fù)隨機(jī)抽取1 只雞進(jìn)行翅靜脈采血5 mL，血樣4℃靜置待血清析出后，5 000 r/min 離心10 min，吸取上層血清-20℃冷凍保存待測(cè)。采用ELISA 方法檢測(cè)白細(xì)胞介素2（IL-2）、白細(xì)胞介素10（IL-10）、腫瘤壞死因子（TNF-α）及雌激素（E2）含量，相關(guān)試劑盒均購(gòu)自上海通蔚實(shí)業(yè)有限公司，用紫外可見(jiàn)光分光光度計(jì)（普析新世紀(jì)儀器有限公司產(chǎn)WF2 W-2102C）進(jìn)行測(cè)定。

1.4 統(tǒng)計(jì)分析 試驗(yàn)數(shù)據(jù)采用SPSS 20.0 軟件以單因素方差分析(One-Way ANOVA) 進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，Duncan's法進(jìn)行均值的多重比較，以P<0.05 為顯著性判斷標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

2 試驗(yàn)結(jié)果

2.1 精油植生素對(duì)產(chǎn)蛋性能的影響 從表3 可知，各組蛋雞的平均蛋重相對(duì)穩(wěn)定，采食量無(wú)明顯差異，各組的料蛋比及產(chǎn)蛋率略有改善（P>0.05）。

表3 精油植生素對(duì)輸卵管炎蛋雞采食量及產(chǎn)蛋性能的影響

2.2 精油植生素對(duì)蛋品質(zhì)的影響 由表4 可知，精油植生素對(duì)臟蛋率及破蛋率有改善，但未達(dá)統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著水平。250、500 mg/kg 精油植生素組的沙殼蛋比例比對(duì)照組分別降低64.24% 和82.32%（P<0.05）。250 mg/kg 精油植生素組未出現(xiàn)畸形蛋。

表4 精油植生素對(duì)輸卵管炎蛋雞產(chǎn)蛋相關(guān)品質(zhì)的影響

由表5 可見(jiàn)，3 個(gè)處理組的蛋殼強(qiáng)度、蛋殼厚度及平均蛋重?zé)o顯著差異。與對(duì)照組相比，500 mg/kg 精油植生素組的雞蛋哈夫單位提高12.00%（P<0.05），但250 mg/kg 精油植生素組的蛋白高度和哈夫單位未見(jiàn)改善。水印蛋評(píng)分以250 mg/kg 精油植生素組最佳。綜合蛋品質(zhì)中，雞蛋達(dá)到AA 級(jí)別的比例以試驗(yàn)2 組最高，達(dá)到91.67%，而對(duì)照組最低為63.64%。

表5 精油植生素對(duì)輸卵管炎蛋雞的雞蛋品質(zhì)的影響

2.3 精油植生素對(duì)輸卵管炎蛋雞免疫因子和激素水平的影響 由表6 可知，與對(duì)照組相比，250、500 mg/kg 精油植生素組的IL-2 分別提高22.67%和25.05%（P<0.05），IL-10 分別提高46.67%及74.39%（P<0.05）。TNF-α以250 mg/kg 組最低，比500 mg/kg 組降低13.13%（P<0.05）。500 mg/kg 組E2水平比對(duì)照組提高29.27%（P<0.05）。

表6 精油植生素對(duì)輸卵管炎蛋雞的免疫因子和激素水平的影響 pg/mL

3 討 論

3.1 精油植生素對(duì)輸卵管炎蛋雞生產(chǎn)性能的影響 輸卵管炎是蛋雞生產(chǎn)中常見(jiàn)的疾病，通常表現(xiàn)為產(chǎn)蛋率下降，臟蛋、破蛋、畸形蛋等比例增加，也會(huì)影響到雞蛋大小、蛋殼質(zhì)量、蛋黃顏色、蛋清粘稠度[1]。鑒于食品安全，抗生素或激素類(lèi)藥物在養(yǎng)殖中禁用，尋找安全高效的中草藥及相關(guān)植物提取物來(lái)解決蛋禽的輸卵管炎問(wèn)題具有重要意義。研究發(fā)現(xiàn)，益母草可以活血化瘀、利尿消腫、促進(jìn)輸卵管發(fā)育和改善輸卵管炎[6]，恢復(fù)機(jī)體的排卵功能[7]，提高種雞的產(chǎn)蛋率[8]，提高種蛋的孵化率和蛋黃顏色等[9]。益母草黃芪提取物[10]、益母草淫羊藿提取物[11]和甘草[12]同樣可補(bǔ)中益氣、抗病毒和提高免疫力，能緩急止痛，有效緩解炎癥，改善禽生產(chǎn)性能。而植物精油[13-17]具有抗菌抗病毒、消炎、提高機(jī)體免疫和產(chǎn)蛋率的功效，且精油具有很強(qiáng)的穿透力，可到達(dá)輸卵管部位，有效發(fā)揮抗菌消炎的作用。精油植生素是由益母草、甘草及黃芪提取物搭配肉桂醛、百里香酚、香芹酚等植物精油組成的復(fù)方產(chǎn)品。本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，與同雞場(chǎng)的其他正常蛋雞相比，試驗(yàn)所用輸卵管炎的對(duì)照組蛋雞產(chǎn)蛋率明顯較低（降低22.81%），料蛋比顯著升高，輸卵管炎造成較大的飼料損失。本試驗(yàn)中，飼喂精油植生素后，患有輸卵管炎蛋雞的產(chǎn)蛋率和料蛋比有一定程度的改善，這與之前益母草、黃芪等提取物或植物精油對(duì)提升蛋禽產(chǎn)蛋率的文獻(xiàn)結(jié)果一致[11,12,17-19]。也有研究認(rèn)為植物精油對(duì)蛋雞[20]及蛋鴨[21]的產(chǎn)蛋率和料蛋比無(wú)影響，這可能是單獨(dú)使用植物精油且與在正常健康狀況下對(duì)家禽的改善效果不及亞健康或發(fā)生輸卵管炎時(shí)的效果明顯有關(guān)。本試驗(yàn)所用的精油植生素融合了精油和益母草、黃芪等多種有效成分，兩類(lèi)活性物質(zhì)協(xié)同增效，改善效果得到綜合體現(xiàn)。

3.2 精油植生素對(duì)輸卵管炎蛋雞的蛋品質(zhì)影響 在蛋品質(zhì)方面，精油植生素表現(xiàn)出改善臟蛋率、破蛋率、沙殼蛋率以及畸形蛋率，特別是在改善沙殼蛋方面效果顯著，且對(duì)雞蛋的蛋白高度、哈夫單位以及雞蛋AA 級(jí)比例有提升效果，這與精油植生素的組成密不可分。精油植生素的有效成分益母草能夠顯著提高蛋形指數(shù)、蛋殼強(qiáng)度、蛋黃顏色評(píng)分、哈夫單位[22]；另外精油的活性成分肉桂醛、百里香酚及百里香精油能夠改善蛋白高度和蛋殼強(qiáng)度[18,23]，原因在于植物精油通過(guò)提高蛋白質(zhì)的消化利用率[24]和影響輸卵管腺體的濃蛋白的分泌量[23]來(lái)改善蛋白品質(zhì)。

3.3 精油植生素對(duì)免疫指標(biāo)和雌激素的影響 IL-2、IL-10 和TNF-α是機(jī)體免疫調(diào)節(jié)及炎癥調(diào)控的重要細(xì)胞因子，其中 IL-2、TNF-α是促炎因子，IL-10 是抗炎因子。資料顯示[25-27]，香芹酚、百里香酚、黃芪多糖、甘草都能夠促進(jìn)IL-10 分泌，抑制TNF-α的釋放。本試驗(yàn)中2 個(gè)試驗(yàn)組抗炎因子的IL-10 水平均顯著高于對(duì)照組，與文獻(xiàn)結(jié)果一致。有關(guān)精油對(duì)IL-2 的影響趨勢(shì)，不同文獻(xiàn)研究結(jié)果不同。有研究發(fā)現(xiàn)肉雞日糧中添加200 和400 g/t 百里香酚[28]，或添加80 g/t 的精油[29]均可顯著提高血清IL-2 水平，另一研究則認(rèn)為百里香酚降低IL-2 水平[30]。黃芪對(duì)IL-2 有雙向調(diào)節(jié)作用，低、中劑量黃芪可促進(jìn)小鼠IL-2 生成，高劑量抑制IL-2 生成[31]。本試驗(yàn)中2 個(gè)精油植生素添加組IL-2 水平均顯著高于對(duì)照組。理論上輸卵管炎得到改善后，促炎因子IL-2 水平理應(yīng)降低，但本試驗(yàn)得出相反的結(jié)論，可能與試驗(yàn)條件、添加劑量或樣本量大小有關(guān)，需進(jìn)一步驗(yàn)證確認(rèn)。

精油植生素中的活性成分黃芪、甘草具有植物雌激素作用，其與動(dòng)物內(nèi)源性E2結(jié)構(gòu)類(lèi)似，在動(dòng)物體內(nèi)E2水平較低時(shí)可以發(fā)揮弱雌激素效應(yīng)，水平較高時(shí)可以競(jìng)爭(zhēng)性地結(jié)合E2受體，減輕E2過(guò)多的不良影響[32]。資料顯示，1.0%和1.5%益母草也可以顯著提高綠殼蛋雞血清中E2含量[22]。本試驗(yàn)中精油植生素組E2水平高于對(duì)照組，尤其500 mg/kg 達(dá)到顯著水平，這可能與益母草、黃芪、甘草的雌激素作用有關(guān)，具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究探討。

4 結(jié) 論

本試驗(yàn)結(jié)果表明，精油植生素對(duì)患輸卵管炎蛋雞的產(chǎn)蛋率和料蛋比略有改善，但未達(dá)顯著水平；在蛋品質(zhì)方面也有不同程度的改善，其中沙殼蛋和畸形蛋比例顯著降低，AA 級(jí)雞蛋比例大幅提高。此外，精油植生素還能顯著提高蛋雞血清中IL-2、IL-10 及E2水平。綜合考慮以500 mg/kg 精油植生素組效果最佳。