白酒中甲醇含量的便攜式儀器快速檢測法

陳 嬋，張建良，陳秋菊

（廣東達(dá)元綠洲食品安全科技股份有限公司，廣東廣州 510530）

甲醇又稱工業(yè)酒精，是一種劇毒物質(zhì)，可經(jīng)呼吸道、胃腸道和皮膚吸收而引起中毒[1]。假酒和劣質(zhì)酒中含有高濃度的甲醇，飲用這類酒，輕度會導(dǎo)致雙目失明，嚴(yán)重可致死，甲醇是白酒的有害成分是重要衛(wèi)生指標(biāo)之一[2-3]。由于白酒的原料及釀造過程會引入或產(chǎn)生一定量的甲醇。例如原料中含有果膠、木質(zhì)素等物質(zhì)，在水解、發(fā)酵等生產(chǎn)過程中會產(chǎn)生甲醇[3]。但是由于甲醇和乙醇的沸點(diǎn)接近很難分離，甲醇還具有無色無味且高度揮發(fā)等特點(diǎn)，可與水和乙醇混溶，一般目測無法辨識，需要一定的試驗(yàn)方法 測定。

目前國家規(guī)定的白酒中甲醇測定的標(biāo)準(zhǔn)方法有化學(xué)顯色法和氣相色譜法，化學(xué)顯色法（包括變色酸法和乙酰丙酮法）具有操作簡單、成本低等優(yōu)點(diǎn)[4-5]。本文在化學(xué)顯色法的基礎(chǔ)上，結(jié)合便攜式食品安全綜合分析儀對顯色體系進(jìn)行上機(jī)測試，儀器所測的濃度值就是白酒樣品中甲醇的含量?？稍诖笈繖z測時(shí)，快速、簡單、準(zhǔn)確地測定白酒中甲醇的含量。

1 材料與方法

1.1 試劑

高錳酸鉀、磷酸、無水草酸（H2C2O4）、乙酰丙酮（C5H8O2）、乙酸銨（C2H7O2N）、冰乙酸（C2H4O2）、50%乙醇（體積分?jǐn)?shù)）、甲醇標(biāo)準(zhǔn)溶液（1 g/L）

1.2 儀器設(shè)備

酒精度數(shù)計(jì)、水浴鍋、移液槍、便攜式食品安全綜合分析儀。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

取2 mL處理后的待測酒樣，加入0.4 mL KMnO4-H3PO4試劑（有效期3個(gè)月），混勻后靜置反應(yīng)10 min；繼續(xù)加入0.4 mL草酸試劑，放入沸水浴至褪色后取出；向上述反應(yīng)管中加入1.5 mL乙酰丙酮試劑（有效期一個(gè)月），繼續(xù)沸水浴2 min后取出，冷卻，倒入比色皿中，上機(jī)。用便攜式食品安全綜合分析儀進(jìn)行測試，儀器所測的濃度值就是白酒樣品中甲醇的含量（g/100 mL）。

1.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

①準(zhǔn)確稱取0.1 g甲醇，加用1%色譜級乙醇溶液稀釋，并定容至100 mL。配制成10 g/100 mL白酒中甲醇的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液，密封后存于冰箱冷藏備用。

②分別吸取標(biāo)準(zhǔn)儲備液0 μL、60 μL、120 μL、200 μL、400 μL、800 μL，用1%色譜級乙醇溶液稀釋并定容至20 mL，現(xiàn)配現(xiàn)用。

③取上述②中系列標(biāo)準(zhǔn)溶液各2 mL，分別加入0.4 mL的KMnO4-H3PO4試劑（有效期3個(gè)月），混勻后靜置反應(yīng)10 min；繼續(xù)加入0.4 mL草酸試劑，放入沸水浴至褪色后取出；向上述反應(yīng)管中加入1.5 mL乙酰丙酮試劑（有效期一個(gè)月），繼續(xù)沸水浴2 min后取出，冷卻，倒入比色皿中，用便攜式食品安全綜合分析儀進(jìn)行吸光度的測定。重復(fù)3組實(shí)驗(yàn)后，取吸光度的變化平均值為橫坐標(biāo)，標(biāo)液濃度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線。

2 結(jié)果與分析

2.1 白酒中稀釋倍數(shù)的確定

為避免酒精度數(shù)對檢測結(jié)果的影響，需要對酒樣進(jìn)行稀釋。經(jīng)過對比實(shí)驗(yàn)，最終確定稀釋倍數(shù)如下表1所示。測試前，先用酒精度數(shù)計(jì)測試待測液的酒精度數(shù)后，取200 μL待測酒樣，按照不同的酒精度數(shù)，對照表1中的純水量，加入純水混勻后待測。

表1 不同度數(shù)的白酒稀釋倍數(shù)比例表

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線

取2 mL的1%乙醇體系的甲醇標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液，進(jìn)行顯色反應(yīng)后，冷卻，倒入比色皿中，用便攜式食品安全綜合分析儀進(jìn)行吸光度的測定。以吸光度為橫坐標(biāo)，標(biāo)液濃度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，見圖1。在0.03～0.4 g/100 mL的甲醇濃度范圍內(nèi)，相應(yīng)濃度與吸光度呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系。甲醇標(biāo)準(zhǔn)品的線性回歸方程為：y=0.684 5x-0.003 2，線性相關(guān)系數(shù)為0.999 7。

圖1 白酒中甲醇的標(biāo)準(zhǔn)曲線圖

2.3 方法檢出限

考慮到便攜式食品安全綜合分析儀進(jìn)行吸光度檢測時(shí)，儀器本身存在吸光度最低的檢出限為0.2 g/100 mL，扣除空白對照的影響，計(jì)算得出的檢出限為0.03 g/100 mL。

2.4 陰陽性樣品驗(yàn)證

《食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 蒸餾酒及配制酒》（GB 2757—2012）中規(guī)定，以糧谷類為原料的白酒甲醇的含量不能超過0.06 g/100 mL；以薯干等代用品為原料的白酒甲醇的含量不能超過0.2 g/100 mL（均以酒精度數(shù)100%）[6]。用4個(gè)濃度分別為0.05 g/100 mL、0.07 g/100 mL、0.19 g/100 mL、 0.21 g/100 mL的質(zhì)控樣驗(yàn)證限量點(diǎn)的陰陽性檢出情況，每個(gè)樣品分別做5次平行實(shí)驗(yàn)，檢測結(jié)果如下表2所示。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，該方法檢測質(zhì)控樣的陰陽實(shí)驗(yàn)結(jié)果與質(zhì)控樣一致，具有良好的符合率。

表2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果對比（單位：mg/kg）

表2 陰陽性檢出結(jié)果

3 結(jié)論

本文對白酒中甲醇含量的檢測方法進(jìn)行優(yōu)化，提供一種新的檢測方法。該方法測試過程操作簡單，結(jié)合便攜式食品安全綜合分析儀進(jìn)行檢測，儀器所測的濃度值就是白酒樣品中甲醇的含量。該方法檢測質(zhì)控樣的陰陽實(shí)驗(yàn)結(jié)果與質(zhì)控樣一致，具有良好的符合率。因此該方法可以滿足大批量檢測白酒中甲醇含量時(shí)快速、簡單、準(zhǔn)確的需求。