育齡期女性生殖道HPV感染與陰道微生態(tài)特征的相關(guān)性

何邵波，覃凱麗

(邵陽(yáng)學(xué)院 醫(yī)學(xué)技術(shù)學(xué)院，湖南 邵陽(yáng)，422000)

目前，宮頸癌是常見(jiàn)的女性疾病，對(duì)女性健康有嚴(yán)重的威脅性。根據(jù)世界衛(wèi)生組織的估計(jì)，全世界每年大約有53萬(wàn)例確診病例以及27萬(wàn)例死亡病例[1],且正向年輕化趨勢(shì)發(fā)展。陰道微生態(tài)內(nèi)環(huán)境的變化在宮頸癌的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用[2]。宮頸癌與正常微生態(tài)遭到破壞，如細(xì)菌性陰道炎(BV)、滴蟲(chóng)性陰道炎(TV)、陰道假絲酵母菌病(VVC)等感染性疾病有關(guān)。研究主要通過(guò)收集患者的人乳頭瘤病變(HPV)分型以及陰道分泌物的檢測(cè)結(jié)果，分析陰道微生態(tài)與HPV感染之間是否存在一定的關(guān)系。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象

收集了2020年12月至2021年3月在中山市小欖人民醫(yī)院體檢中心以及婦科門(mén)診就診的女性患者，年齡分布在20～45歲之間，且研究對(duì)象符合以下2個(gè)條件：(1)有過(guò)性生活史，非孕期，非月經(jīng)期；(2)取樣前3 d無(wú)性生活以及陰道用藥、沖洗。

1.2 方法

1.2.1 陰道微生態(tài)檢測(cè)

首先，需要取1支無(wú)菌棉拭子在女性陰道壁的中上1/3處收集女性陰道分泌物，然后，取部分分泌物進(jìn)行涂片檢查，再采用顯微鏡鏡檢的檢查方法，檢查分泌物中是否存在陰道毛滴蟲(chóng)、菌絲、孢子、線索細(xì)胞并判別其清潔度，剩下的部分標(biāo)本采用干化學(xué)酶法檢測(cè)陰道分泌物中的pH值、過(guò)氧化氫(H2O2)、白細(xì)胞酯酶以及唾液酸苷酶這4項(xiàng)指標(biāo)，并且記錄結(jié)果，試劑盒為陰道炎五聯(lián)試劑盒Ⅱ(干化學(xué)酶法)，由鄭州安圖生物工程股份有限公司提供。

1.2.2 HPV分型檢測(cè)

將子宮頸刷放在患者的宮頸口，順時(shí)針輕輕旋轉(zhuǎn)子宮頸刷5圈以上收集足夠量的子宮頸脫落細(xì)胞，隨后使用潮州凱普生物化學(xué)有限公司的HPV分型檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，此項(xiàng)檢測(cè)技術(shù)主要采用基因擴(kuò)增技術(shù)以及導(dǎo)流雜交原理，利用反向點(diǎn)雜交檢測(cè)擴(kuò)增的產(chǎn)物與包被有型特異性探針膜雜交結(jié)果，然后，采用堿性磷酸酶系統(tǒng)定性檢測(cè)的方法，對(duì)21種HPV基因型進(jìn)行分型檢測(cè)。具體操作流程以及結(jié)果判讀依照試劑盒的要求進(jìn)行。

1.3 觀察指標(biāo)

1.3.1 陰道微生態(tài)檢測(cè)

根據(jù)陰道炎五聯(lián)試劑盒Ⅱ(干化學(xué)酶法)提供的參考值判斷檢測(cè)結(jié)果。(1)陰道微生態(tài)正常診斷標(biāo)準(zhǔn)：pH值處于3.8～4.5范圍之內(nèi)、過(guò)氧化氫呈陰性、白細(xì)胞酯酶呈陰性、唾液酸苷酶呈陰性以及陰道分泌物中不存在菌絲、孢子以及陰道毛滴蟲(chóng)等病原體。(2)清潔度主要通過(guò)對(duì)白細(xì)胞、桿菌、球菌以及上皮細(xì)胞的數(shù)量進(jìn)行綜合評(píng)估分析。(3)BV：通過(guò)Amsel方法[3]進(jìn)行診斷。(4)TV：在陰道分泌物中觀察到陰道毛滴蟲(chóng)。(5)VVC：在陰道分泌物中存在菌絲和孢子。

1.3.2 HPV分型檢測(cè)

高危型有16，18，31，33，35，39，45， 51，52，53，56，58，59，66，68；低危型有6，11，42，43，44；其他分型CP8304。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 22.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，其中計(jì)數(shù)資料用率(%)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 HPV感染狀況

在937例患者中，HPV陽(yáng)性145例，感染率為15.47%。其中，高危型感染共有101例，感染率為69.66%；低危型感染共有11例，感染率為7.58%；混合型共有31例，感染率為21.38%；CP8304有2例，感染率為1.38%。

2.2 陰道微生態(tài)結(jié)果

對(duì)選取的937例患者進(jìn)行陰道微生態(tài)檢測(cè)，其中感染BV患者有321例，占34.26%；感染TV患者有76例，占8.11%；感染VVC的患者有81例，占8.64%；正常微生態(tài)患者有459例，占48.99%。

2.3 HPV感染與不同陰道疾病之間的相關(guān)性比較

在321例BV感染患者中共有HPV陽(yáng)性患者64例，感染率為19.94%，在616例非BV感染患者中HPV陽(yáng)性患者有81例，感染率為13.15%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。在76例TV感染患者中HPV陽(yáng)性患者有23例，感染率為30.26%，在861例非TV感染患者中HPV陽(yáng)性患者有122例，感染率為14.17%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。在81例VVC感染患者中HPV陽(yáng)性患者有9例，感染率為11.11%，在856例非VVC感染患者中HPV陽(yáng)性患者有136例，感染率為15.89%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。在17例混合感染(同時(shí)感染BV，TV，VVC中兩種或兩種以上)患者中HPV陽(yáng)性患者有12例，感染率為70.59%，在920例非混合感染患者中HPV陽(yáng)性患者有133例，感染率為14.46%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。具體見(jiàn)表1。

表1 不同陰道炎HPV感染率的比較

2.4 HPV感染與陰道微生態(tài)特征

在陰道微生態(tài)的5項(xiàng)檢測(cè)指標(biāo)中，清潔度、白細(xì)胞酯酶、唾液酸苷酶以及H2O2與HPV感染有一定關(guān)系(P<0.05)，而pH值與HPV感染無(wú)相關(guān)性(P>0.05)，具體見(jiàn)表2。

表2 HPV感染與陰道微生態(tài)特征的關(guān)系

3 討論

HPV為一種環(huán)狀的雙鏈DNA病毒，其不僅具有特異性并且在自然界中也具有良好的穩(wěn)定性，HPV感染可能引起人體鱗狀上皮細(xì)胞增殖。目前，已知分離出130多種，并且不同的分型產(chǎn)生了不同的臨床癥狀，HPV可分為低危型和高危型，低危型HPV感染通常情況下會(huì)引起尖銳濕疣等，但也有可能與宮頸癌前期病變有聯(lián)系；而高危型HPV感染可導(dǎo)致宮頸癌的發(fā)生，而HPV16和HPV18導(dǎo)致宮頸癌變的可能性最大，是宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)發(fā)展變?yōu)榻?rùn)癌的危險(xiǎn)因素之一[4]。人類對(duì)HPV病毒存在普遍易感的現(xiàn)象，對(duì)大多數(shù)人來(lái)說(shuō)，機(jī)體會(huì)自動(dòng)清除病毒，絕大多數(shù)HPV感染會(huì)在數(shù)月內(nèi)自行消退。但是，對(duì)于那些長(zhǎng)期未能清除病毒的人來(lái)說(shuō)，由于持續(xù)的HPV感染引起的細(xì)胞異常改變會(huì)導(dǎo)致宮頸的惡性病變，并且逐漸發(fā)展成宮頸癌。對(duì)于整個(gè)感染過(guò)程而言，陰道微生態(tài)與HPV感染以及持續(xù)感染的關(guān)系密不可分[5]。

陰道微生態(tài)由陰道的解剖結(jié)構(gòu)、內(nèi)分泌的變化、陰道的局部免疫以及陰道的正常菌群4個(gè)部分構(gòu)成。其中，陰道微生態(tài)研究的主要課題是陰道內(nèi)的正常菌群[6]，不同菌屬的正常菌群之間，正常菌群和宿主之間，正常菌群、宿主和環(huán)境之間通常都是處于一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡的狀態(tài)，從而形成了一個(gè)相互依靠且相互限制的陰道微生態(tài)環(huán)境，以此維持陰道微生態(tài)的一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡。然而在這種動(dòng)態(tài)平衡被打破了之后，會(huì)增加女性生殖系統(tǒng)感染的風(fēng)險(xiǎn)[7]。在育齡期健康婦女的陰道菌群中發(fā)現(xiàn)了大量的乳酸桿菌，這通常被認(rèn)為是抵抗病原體的第一道防線。乳酸桿菌通過(guò)降解的方式將陰道鱗狀上皮細(xì)胞的糖原轉(zhuǎn)化為乳酸，從而組成一個(gè)可以阻止其他微生物菌群過(guò)度生長(zhǎng)的陰道酸性環(huán)境(pH 3.8～4.5)，這樣才能更好地維持陰道的“自凈”作用。同時(shí)，乳酸桿菌也可以通過(guò)分泌過(guò)氧化氫、細(xì)菌素、類細(xì)菌素和生物表面活性劑等來(lái)實(shí)現(xiàn)抑制致病細(xì)菌生長(zhǎng)繁殖。研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在陰道微生態(tài)特征指標(biāo)的比較中，清潔度、白細(xì)胞酯酶、唾液酸苷酶以及H2O2這4項(xiàng)特征指標(biāo)與HPV感染相關(guān)。這與國(guó)內(nèi)大多數(shù)的研究結(jié)果一致。但是pH值與HPV感染無(wú)關(guān)，具體原因還需要進(jìn)一步研究論證。

女性陰道內(nèi)除了有較多的乳酸桿菌之外，還存在其他的微生物，例如加德納菌、念珠菌、支原體、衣原體、梭狀芽孢桿菌、葡萄球菌、大腸埃希氏菌等微生物。女性生殖道健康的關(guān)鍵要素之一是維持陰道微生態(tài)平衡, 而當(dāng)陰道微生態(tài)或菌群失調(diào)時(shí)，就有很大概率患上生殖道感染疾病和其他疾病，常見(jiàn)的有BV，TV和VVC等疾病。BV是一種常見(jiàn)的女性生殖道感染性疾病，它是由多種細(xì)菌共同感染所引起的，患者陰道內(nèi)減少或缺乏乳酸桿菌，給其他細(xì)菌如加德納菌、厭氧菌等細(xì)菌提供了生長(zhǎng)繁殖的機(jī)會(huì)，引起陰道微生態(tài)失調(diào)，陰道分泌物增多的綜合征[8]。陳婉珍等[9]對(duì)1 412例患者進(jìn)行回顧性分析，結(jié)果表明，BV的 HPV感染率為 27.49%，明顯高于陰道微環(huán)境正常者的 HPV 感染率，從而得出 HPV 感染與BV有著十分密切的聯(lián)系。還有研究顯示，BV與HPV的感染之間也存在明顯的關(guān)聯(lián)[10]。本次研究也證明BV與HPV感染之間有一定的相關(guān)性。還有其他研究指出，BV的產(chǎn)生和發(fā)展可能與不潔性生活史或者不良的衛(wèi)生習(xí)慣等有關(guān)聯(lián)[11]。TV是由陰道毛滴蟲(chóng)感染所引起的一種生殖道感染性疾病，它的主要傳播方式是通過(guò)性接觸傳播[12]。陰道毛滴蟲(chóng)通過(guò)不斷消耗陰道上皮細(xì)胞中的糖原，防止乳酸桿菌酵解，讓乳酸的生成持續(xù)的減少，導(dǎo)致了陰道內(nèi)pH值升高，從而更好地促進(jìn)陰道毛滴蟲(chóng)和其他致病細(xì)菌的存活和繁殖[12]，加劇陰道內(nèi)環(huán)境失衡。馬華蘭等[13]為了研究HPV感染與各種陰道炎之間的關(guān)系，對(duì)140例患者進(jìn)行研究分析，發(fā)現(xiàn)HPV陽(yáng)性患者TV感染率明顯高于HPV陰性患者，TV與HPV感染之間存在一定的關(guān)系。也有報(bào)道表示TV與HPV感染沒(méi)有關(guān)聯(lián)[9]。但是在本研究中發(fā)現(xiàn)，TV與HPV感染有一定的聯(lián)系(P<0.05)，近年來(lái)國(guó)內(nèi)研究報(bào)道中，TV與HPV感染之間有沒(méi)有關(guān)系，還存在著一定的爭(zhēng)議，需要更多的臨床研究來(lái)進(jìn)一步的證實(shí)。VVC是由于假絲酵母菌菌群失調(diào)而導(dǎo)致的一種疾病。有研究指出，VVC患者的HPV感染率明顯高于正常菌群患者的HPV感染率，兩組對(duì)比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，表明VVC與HPV感染之間有一定的關(guān)聯(lián)[14]。也有研究表明，VVC與HPV感染之間沒(méi)有關(guān)系[15]。在本研究中，VVC與HPV感染無(wú)關(guān)(P>0.05)，但與TV一樣，仍需大量臨床研究來(lái)證實(shí)這一結(jié)論。

綜上所述，各種陰道疾病與HPV感染之間都有十分密切的聯(lián)系，其中，BV，TV與HPV感染之間存在顯著的相關(guān)性。在HPV感染的發(fā)生發(fā)展的過(guò)程中，陰道微生態(tài)大概率扮演著重要的角色。因此，對(duì)于BV，TV感染及陰道微生態(tài)改變患者，HPV感染會(huì)有所提高，應(yīng)該引起臨床重視，這對(duì)于宮頸癌等疾病的監(jiān)測(cè)和治療來(lái)說(shuō)，都有比較重要的臨床意義。但就目前而言，陰道微生態(tài)與HPV感染的確切關(guān)系仍然缺乏大量可靠的臨床研究數(shù)據(jù)，未來(lái)還需積極開(kāi)展相關(guān)的臨床研究來(lái)進(jìn)一步探討。