宋 林 張錦偉 韓亞男
(大連市公共衛(wèi)生臨床中心(大連市第六人民醫(yī)院),遼寧 大連 116031)
據(jù)不完全統(tǒng)計(jì),全球約有4億乙型肝炎病毒攜帶者,其中亞太地區(qū)為乙型肝炎高發(fā)地區(qū)[1]。目前我國(guó)約有80%的病毒性肝病患者屬于乙型肝炎[2]。隨著醫(yī)療技術(shù)的不斷發(fā)展,基因診斷技術(shù)開(kāi)始廣泛應(yīng)用于臨床診斷中。尤其是磁性納米顆粒應(yīng)用于基因分離中會(huì)大幅度提高基因檢測(cè)的準(zhǔn)確性,實(shí)現(xiàn)超敏感檢測(cè)[3-4]。本文探究乙型肝炎病毒低病毒載量(HBV-DNA定量檢測(cè))與血清標(biāo)志物表達(dá)的關(guān)系,具體研究?jī)?nèi)容和結(jié)論如下。
1.1 臨床資料 選取2017年1月至2018年10月期間我院肝病科診療的乙型肝炎患者共180例為研究對(duì)象。其中男性95例,女性85例;年齡在21~68歲;慢性肝炎重度49例、中度81例、肝癌23例、肝硬化27例;低濃度血清標(biāo)本110例,高濃度血清標(biāo)本70例?;颊呔唇臃N相關(guān)疫苗,均符合最新修訂的關(guān)于病毒性肝炎及肝病的診斷標(biāo)準(zhǔn)[5]。
1.2 方法 ①樣本采集:患者均于清晨空腹抽血8 mL(肘靜脈抽血),使用密封凝膠管采血并保存,靜置一段時(shí)間,待血液完全凝固后再進(jìn)行血清分離,以3 500 r/min的速度離心10 min。血清保存,注意保存條件[6]。②儀器與試劑:選擇全自動(dòng)電化學(xué)發(fā)光免疫分析儀(羅氏公司生產(chǎn),型號(hào)E170),包括配套試劑、質(zhì)控品以及定標(biāo)液等。選擇羅氏熒光定量PCR儀Light Cycler 480 Ⅱ,包括配套試劑。嚴(yán)格按照乙型肝炎病毒載量檢測(cè)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。
1.3 觀察指標(biāo) ①檢測(cè)并記錄不同濃度病毒載量下乙型肝炎e抗原濃度和乙型肝炎表面抗原濃度。②分析乙型肝炎e抗原、乙型肝炎表面抗原、HBV-DNA三者間的相關(guān)性。③不同乙型肝炎e抗原濃度下乙型肝炎病毒載量。④比較在不同血清模式下HBV陽(yáng)性率以及HBV-DNA含量。
1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 200統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。計(jì)量資料采用()表示,組間比較行t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料采用[n(%)]表示,組間比較行χ2檢驗(yàn);以Pearson相關(guān)性分析進(jìn)行相關(guān)性判斷;P<0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 不同濃度下乙型肝炎e抗原、乙型肝炎表面抗原濃度對(duì)比 高濃度下乙型肝炎e抗原、乙型肝炎表面抗原濃度與低濃度下兩種抗原濃度相比差異明顯(P<0.05)。見(jiàn)表1。
表1 不同濃度下乙型肝炎e抗原、乙型肝炎表面抗原濃度對(duì)比()
表1 不同濃度下乙型肝炎e抗原、乙型肝炎表面抗原濃度對(duì)比()
2.2 低濃度乙型肝炎病毒載量組乙型肝炎e抗原、乙型肝炎表面抗原、HBV-DNA三者間的相關(guān)性分析 低濃度乙型肝炎病毒載量組中,Pearson相關(guān)性分析顯示,乙型肝炎e抗原、乙型肝炎表面抗原呈正相關(guān)關(guān)系(P<0.05),乙型肝炎e抗原、乙型肝炎表面抗原定量與HBV-DNA含量并無(wú)明顯相關(guān)性(P>0.05)。見(jiàn)表2。
表2 低濃度乙型肝炎病毒載量組乙型肝炎e抗原、乙型肝炎表面抗原、HBV-DNA三者間的相關(guān)性分析
2.3 不同乙型肝炎e抗原濃度下乙型肝炎病毒載量對(duì)比 乙型肝炎e抗原濃度介于0-1S/CO占比最多64.54%,濃度在100S/CO以上占比最少2.73%,對(duì)相關(guān)指標(biāo)進(jìn)行分析,發(fā)現(xiàn)乙型肝炎e抗原濃度與HBV-DNA含量存在相關(guān)性(P<0.001)。見(jiàn)表3。
表3 不同乙型肝炎e抗原濃度下乙型肝炎病毒載量
2.4 血清標(biāo)志物與乙型肝炎病毒載量定量檢測(cè)結(jié)果對(duì)比 不同血清模式下乙型肝炎病毒載量定量檢測(cè)結(jié)果存在顯著差異(P<0.05)。見(jiàn)表4。
表4 血清標(biāo)志物與乙型肝炎病毒載量定量檢測(cè)結(jié)果對(duì)比
乙型肝炎病毒的主要診斷依據(jù)包括癥狀、體征、病史、生化指標(biāo)(天門(mén)冬酸氨基轉(zhuǎn)移酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶)、分子生物學(xué)指標(biāo)以及血清學(xué)標(biāo)志物等。其中血清學(xué)標(biāo)志物檢測(cè)臨床較為常見(jiàn),其中包括乙型肝炎e抗原、乙型肝炎表面抗原、乙型肝炎e抗體、乙型肝炎表面抗體以及乙型肝炎核心抗體5項(xiàng)主要指標(biāo),另外還包括乙型肝炎病毒X蛋白、HBVS2抗原以及HBV前S1抗原等[7-9]。但前5項(xiàng)主要指標(biāo)是目前診斷乙型肝炎最重要、最常用的免疫學(xué)標(biāo)志物。另外,HBV-DNA定量檢測(cè)是檢測(cè)乙型肝炎病毒是否存在或者復(fù)制的重要方法[10-12]。在一般情況下,HBV檢驗(yàn)呈陽(yáng)性或者乙型肝炎表面抗原呈陽(yáng)性則表示乙型肝炎病毒存在,且多存在于慢性肝炎、急性肝炎或者無(wú)癥狀攜帶者[13-14]。乙型肝炎表面抗原是乙型肝炎病毒基因組mRNA表達(dá)產(chǎn)生的,乙型肝炎表面抗原濃度過(guò)高時(shí)則表示病毒正在復(fù)制[15-17]。本研究結(jié)果顯示,在低濃度與高濃度載量標(biāo)本中,乙型肝炎e抗原、乙型肝炎表面抗原2種標(biāo)志物濃度差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。隨著HBV-DNA含量的升高,乙型肝炎e抗原、乙型肝炎表面抗原濃度也會(huì)升高,說(shuō)明高濃度情況下乙型肝炎病毒的表達(dá)能力較強(qiáng)[18-20]。低濃度載量下,乙型肝炎e抗原、乙型肝炎表面抗原濃度成正相關(guān)(rs=0.398,P<0.001);HBV-DNA定量檢測(cè)與乙型肝炎e抗原、乙型肝炎表面抗原定量檢測(cè)不存在相關(guān)性。上述結(jié)果說(shuō)明不同濃度下,乙型肝炎e抗原、乙型肝炎表面抗原濃度變化呈正相關(guān),其濃度變化不會(huì)明顯影響HBV-DNA定量檢測(cè)結(jié)果,這一研究結(jié)果與多項(xiàng)研究結(jié)果相符[21-22]。分析其原因可能是因?yàn)橄薅ǖ腄NA濃度較低,隨著DNA數(shù)值增加,乙型肝炎e抗原、乙型肝炎表面抗原、HBVDNA三者間的相關(guān)性才會(huì)逐漸顯現(xiàn)出來(lái),對(duì)于低濃度標(biāo)本,應(yīng)側(cè)重于聯(lián)合檢驗(yàn)[23-24]。乙型肝炎e抗原濃度介于0-1S/CO占比最多64.54%,濃度在100S/CO以上占比最少2.73%,不同濃度下HBV-DNA檢測(cè)結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。盡管乙型肝炎e抗原為陰性,只能說(shuō)明病毒處于持續(xù)的低拷貝狀態(tài),并不能表示體內(nèi)無(wú)病毒拷貝,因此需要密切監(jiān)測(cè)HBV-DNA含量的變化[25-27]。此外,在不同血清模式下(陽(yáng)性)HBV-DNA含量存在顯著差異,組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。這一研究結(jié)果與王秀麗和姚鵬[29]的研究結(jié)果并不一致,可能因?yàn)闃颖玖康牟町愝^大,也可能因?yàn)闄z測(cè)過(guò)程中出現(xiàn)偏差,需進(jìn)一步探討。
綜上所述,乙型肝炎病毒低病毒載量與血清標(biāo)志物表達(dá)存在相關(guān)關(guān)系,聯(lián)合檢測(cè)可在乙型肝炎病毒感染早期進(jìn)行診斷并及時(shí)治療,另外在療效觀察、掌握病毒復(fù)制情況以及預(yù)后判斷等方面都有重要作用。