• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    蘇云金芽胞桿菌HA和HD對黃曲條跳甲成蟲的毒力分析

    2021-10-20 06:42:18殷先元蒲宇辰侯有明
    環(huán)境昆蟲學(xué)報 2021年5期
    關(guān)鍵詞:微絨毛黃曲蘇云金

    殷先元,蒲宇辰,黃 穎,黃 斌,侯有明*

    (1.福建農(nóng)林大學(xué)閩臺作物有害生物生態(tài)防控國家重點(diǎn)實驗室,福州 350002;2.福建省昆蟲生態(tài)重點(diǎn)實驗室,福州 350002;3.湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院植保土肥研究所,農(nóng)業(yè)農(nóng)村部華中作物有害生物綜合治理重點(diǎn)實驗室,武漢 430064;4.閩南師范大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院,福建漳州 363000)

    黃曲條跳甲Phyllotretastriolata(Fabricius)隸屬于鞘翅目Coleoptera葉甲科Chrysomelidae,是專門為害十字花科蔬菜的寡食性害蟲(Beranetal., 2011),也是十字花科蔬菜上危害最為嚴(yán)重的世界性害蟲之一(Andersenetal., 2006),在我國分布范圍廣泛,尤其在我國廣東和福建兩地危害嚴(yán)重,嚴(yán)重制約了蔬菜生產(chǎn)(賀華良等, 2012a)。黃曲條跳甲成蟲壽命長,繁殖力強(qiáng),為害狀嚴(yán)重(賀華良等, 2012b),并對多種化學(xué)藥劑產(chǎn)生抗性難以防治,急需尋找新的替代防治方法(Fengetal., 2000; Yanetal., 2013)。

    蘇云金芽胞桿菌Bacillusthuringiensis(Berliner)(簡稱Bt)對鱗翅目、雙翅目、鞘翅目等多種昆蟲幼蟲具有高效殺蟲活性,廣泛用于防治農(nóng)林業(yè)害蟲(Rohetal., 2007),是重要的生防菌(Groveetal., 2001)。Bt制劑澆淋土壤可以減少黃曲條跳甲產(chǎn)卵量和幼蟲數(shù)量,對成蟲的防效可達(dá)67.56%(胡珍娣等,2012)。楊建云等(2013)研究表明Bt工程菌施用后72 h可造成黃曲條跳甲幼蟲的校正死亡率為41.67%,并抑制黃曲條跳甲卵的孵化。同時,研究表明,蘇云金芽胞桿菌能夠影響昆蟲成蟲的生長發(fā)育(Yamaguchietal., 2008, 2013; Zhangetal., 2013; Wangetal., 2016)。西方玉米根蟲Diabroticavirgifera(LeConte)成蟲取食表達(dá)Cry3Bb1蛋白的轉(zhuǎn)基因玉米葉片后,雄蟲的存活率減少,雌蟲的體重和產(chǎn)卵量均下降(Meissleetal., 2011)。Qi等(2011)研究表明BtZQ-89菌株對云斑天牛Batocerahorsfieldi(Hope)成蟲的校正死亡率可達(dá)55.33%,同時使成蟲的體重和卵孵化率分別減少2.22%和19.62%。

    蘇云金芽胞桿菌是否能直接用于防治黃曲條跳甲成蟲?本研究基于蘇云金芽胞桿菌HA和HD這兩個菌株,其中蘇云金芽胞桿菌HA對紅棕象甲Rhynchophorusferrugineus(Olivier)2齡幼蟲具有較好的殺蟲活性(Puetal., 2017),而蘇云金芽胞桿菌HD對黃曲條跳甲幼蟲也表現(xiàn)出殺蟲活性(吉亮等, 2016)。本文通過測定蘇云金芽胞桿菌HA和HD對黃曲條跳甲成蟲的毒力,分析不同Bt菌株對谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)活性的影響,并利用透射電鏡觀察對比HA和HD對黃曲條跳甲中腸的影響,最終綜合判斷HA和HD兩株蘇云金芽胞桿菌用于防治黃曲條跳甲成蟲的價值,并分析其在黃曲條跳甲成蟲中腸中的作用機(jī)理。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料

    供試菌株:蘇云金芽胞桿菌HA和HD(記為菌株Bt-HA和Bt-HD),來自華中農(nóng)業(yè)大學(xué)微生物學(xué)國家重點(diǎn)實驗室孫明教授課題組。

    供試蔬菜:上海青(福州金銘種業(yè)有限公司),實驗室內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)化種植,整個生長周期內(nèi)不噴施任何殺蟲劑。

    供試?yán)ハx:黃曲條跳甲成蟲分別于采集于福建省建甌市西大街外的菜地。經(jīng)室內(nèi)用上海青飼喂48 h后備用。

    供試藥劑:Bradford法蛋白定量試劑盒(北京全式金生物技術(shù)有限公司),谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶測定試劑盒(南京建成生物工程研究所)。

    1.2 試驗方法

    1.2.1毒力測定

    分別用含0.1%吐溫-80的無菌水將Bt-HA粉劑稀釋成1.51×108、3.03×108、6.05×108、1.21×109、2.42×109CFU/mL,Bt-HD粉劑稀釋成7.46×107、1.49×108、2.99×108、5.97×108、1.19×109CFU/mL 5種等比濃度。以含0.1%吐溫-80的無菌水溶液為空白對照組。以新鮮洗凈的上海青葉片,剪成正方形(3×3 cm),將葉片分別浸漬于Bt-HA、Bt-HD菌懸液和對照組溶液中,25 min后取出葉片,在濾紙上自然晾干。將葉片放入墊有濕潤濾紙的塑料培養(yǎng)皿中(D=70 mm),每皿放入5片葉片,罩上塑料瓶。在溫度28℃±1℃,相對濕度75%±5%,光周期L∶D=14∶10的環(huán)境條件下,接入饑餓處理24 h的黃曲條跳甲成蟲約30頭,每2 d更換一次葉片,連續(xù)喂毒14 d,每天檢查成蟲的死亡數(shù),每個處理重復(fù)4次。采用Abbott公式計算校正死亡率(Abbott, 1987)。

    1.2.2GST酶活性測定

    試蟲準(zhǔn)備:同1.2.1。設(shè)Bt-HA、Bt-HD和空白對照3個處理,Bt-HA和Bt-HD菌懸液濃度為4.01×108CFU/mL,黃曲條跳甲成蟲饑餓處理24 h后接入,每天更換對應(yīng)處理的葉片,每一處理分別于接蟲后1、4、7和14 d取30頭黃曲條跳甲成蟲,共12個樣。樣本放入-80℃冰箱中冷凍保存?zhèn)溆谩?/p>

    酶活性測定:從-80℃冰箱中取出試蟲,每個樣5頭,裝入1.5 mL EP管中,每管加入 500 μL 0.02 M PBS(pH 7.4)緩沖液,并放入3顆鋯珠進(jìn)行組織研磨(65 Hz,60 s)。研磨后于4℃下10 000 rpm離心10 min,取上清液作為酶源。每個樣重復(fù)3次,采用Bradford法測定酶源蛋白含量,GST酶活性測定按照說明書進(jìn)行。

    1.2.3中腸組織病理學(xué)觀察

    黃曲條跳甲成蟲的處理方法同1.2.2。分別于取食葉片4 d和14 d時取樣,3種處理各取5頭黃曲條跳甲成蟲。成蟲用冰麻醉后解剖,截取小段中腸,用0.15 M NaCl洗凈后,放入2.5%戊二醛溶液中,進(jìn)行透射電鏡觀察。

    1.3 數(shù)據(jù)處理與分析

    實驗數(shù)據(jù)由SPSS 21.0進(jìn)行統(tǒng)計分析。菌株Bt-HA和Bt-HD毒力與GST酶活性數(shù)據(jù)采用ANOVA分析,Turkey HSD進(jìn)行多重比較;Probit機(jī)率值法計算致死中濃度LC50和線性回歸方程。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 菌株Bt-HA和Bt-HD對黃曲條跳甲成蟲的毒力測定

    Bt-HD對黃曲條跳甲成蟲的毒力強(qiáng)于Bt-HA,LC50分別為1.17×108CFU/mL和4.01×108CFU/mL(表1)。

    表1 菌株Bt-HA和Bt-HD對黃曲條跳甲成蟲的致死中濃度

    2.2 菌株Bt-HA和Bt-HD對黃曲條跳甲GST酶活性影響

    在1~14 d內(nèi),隨著時間的延長,對照組體內(nèi)的GST酶活性呈顯著性下降(F3,8=16.652,P=0.001);Bt-HA處理組的黃曲條跳甲GST酶在第4天時與對照組并沒有顯著差異,第7天活性顯著上升達(dá)到峰值,后顯著性降低(F3,8=6.066,P=0.019),而Bt-HD處理的黃曲條跳甲GST酶在第4天活性達(dá)到峰值,隨后呈下降趨勢(F3,8=2.732,P=0.114)(圖1)。

    圖1 不同處理的黃曲條跳甲體內(nèi)GST酶活性的時間變化動態(tài)

    同時,Bt-HD處理組的黃曲條跳甲體內(nèi)GST酶活性始終高于取食菌株Bt-HA處理組和對照組葉片的黃曲條跳甲體內(nèi)GST酶活性。

    2.3 菌株Bt-HA和Bt-HD對黃曲條跳甲成蟲中腸組織形態(tài)的影響

    電鏡觀察結(jié)果表明,取食處理葉片4 d后,Bt-HD處理組的黃曲條跳甲成蟲中腸微絨毛開始疏松脫落(圖2-C),對照組和菌株Bt-HA處理組的中腸微絨毛致密且排列整齊,形態(tài)未見變化(圖2-A和2-B);取食處理葉片14 d后,菌株Bt-HD處理組的黃曲條跳甲成蟲中腸柱狀細(xì)胞的底膜變形脫落(圖3-C),菌株Bt-HA處理組的中腸微絨毛開始腫脹脫落(圖4-B),但底膜與基質(zhì)結(jié)合緊密且形態(tài)完整(圖3-B),對照組中腸底膜和微絨毛形態(tài)完整,未見明顯變化(圖3-A和圖4-A)。這表明Bt-HA和Bt-HD皆能損傷黃曲條跳甲成蟲中腸的微絨毛,并且Bt-HD能使中腸的底膜變形脫落,對中腸的損傷更為明顯。

    圖2 取食3種不同處理葉片4 d后黃曲條跳甲成蟲中腸微絨毛的形態(tài)變化

    圖3 取食3種不同處理葉片14 d后黃曲條跳甲成蟲中腸柱狀細(xì)胞底膜的形態(tài)變化

    圖4 取食菌株Bt-HA處理的葉片14 d后黃曲條跳甲成蟲中腸微絨毛的形態(tài)變化

    3 討論與結(jié)論

    本研究結(jié)果表明,蘇云金芽胞桿菌Bt-HA和Bt-HD對黃曲條跳甲成蟲都具有殺蟲活性,且Bt-HD對黃曲條跳甲成蟲的毒力比Bt-HA強(qiáng)。用Bt-HA或Bt-HD處理黃曲條跳甲成蟲時都會觸發(fā)黃曲條跳甲的解毒機(jī)制,引起GST酶表達(dá)量上升。昆蟲體內(nèi)的解毒酶包括羧酸酯酶、乙酰膽堿酯酶、谷胱甘肽-S-轉(zhuǎn)移酶(GST)等,能夠代謝大量的外源毒素(任羽等, 2016)。小地老虎AgrotisypsilonRottemberg幼蟲在遇到相同劑量的BtCry2Ab和Cry1Ac毒蛋白時,毒性更高的Cry2Ab引起小地老虎幼蟲體內(nèi)GST酶活性顯著升高,而Cry1Ac對GST酶活性的影響不明顯(陸瓊等,2009),所以昆蟲體內(nèi)GST酶活性與底物的毒性相關(guān)。譚樹乾等(2013)發(fā)現(xiàn)在華北大黑鰓金龜Holotrichiaoblita幼蟲中GST酶活性與毒蛋白Cry8Ga1的濃度呈正相關(guān)。本文研究結(jié)果表明,毒性更高的Bt-HD會引起黃曲條跳甲強(qiáng)烈的防御反應(yīng),體內(nèi)GST酶活性顯著上升,并且高于Bt-HA處理組。

    昆蟲攝取Bt毒蛋白后,Bt毒蛋白與中腸上皮細(xì)胞上的受體結(jié)合,進(jìn)而穿孔,引起細(xì)胞滲透壓改變,導(dǎo)致昆蟲死亡(Vachonetal., 2012)。在組織病理學(xué)上表現(xiàn)為Bt毒蛋白造成昆蟲中腸微絨毛的腫脹脫落、中腸上皮細(xì)胞的腫脹和空泡化、腸腔空泡化、細(xì)胞內(nèi)容物外泄等(Endo and Nishiitsutsuji-Uwo, 1980; 李芳芳等, 2007; Bowlingetal., 2017)。本研究表明,蘇云金芽胞桿菌對黃曲條跳甲成蟲造成毒性的機(jī)制之一是Bt毒蛋白會對其中腸的組織形態(tài)造成損傷。蘇云金芽胞桿菌Bt-HA和Bt-HD皆能造成黃曲條跳甲成蟲中腸微絨毛脫落,其中Bt-HD作用速度更快并能使中腸柱狀細(xì)胞底膜變形脫落,這與Bt-HD毒性更強(qiáng)相一致。

    綜上所述,蘇云金芽胞桿菌HD具有用于田間防治黃曲條跳甲成蟲的應(yīng)用前景,有關(guān)蘇云金芽胞桿菌HD對黃曲條跳甲成蟲的殺蟲作用機(jī)理還需進(jìn)一步探索。

    猜你喜歡
    微絨毛黃曲蘇云金
    16000IU/mg蘇云金桿菌可濕性粉劑對桃樹梨小食心蟲的田間防效
    上海地區(qū)有機(jī)蔬菜上黃曲條跳甲的生物學(xué)特性及綜合防治技術(shù)
    黃曲毒素危害非洲食品安全
    致病性大腸桿菌致結(jié)腸癌細(xì)胞微絨毛損傷的毒力分子研究
    32 000 IU/mg蘇云金桿菌可濕性粉劑防治甘藍(lán)小菜蛾田間藥效試驗
    上海地區(qū)黃曲條跳甲發(fā)生規(guī)律與防治研究
    食用罐裝食品或傷胃腸道
    動物細(xì)胞的多功能細(xì)胞器
    ——鞭毛、纖毛和微絨毛(2)
    飛機(jī)噴灑蘇云金桿菌(Bt)防治美國白蛾效果調(diào)研
    蝦蛄眼識別偏振光機(jī)理的分析
    日本av手机在线免费观看| 级片在线观看| av在线亚洲专区| 国产精品人妻久久久久久| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 熟妇人妻久久中文字幕3abv| 国产午夜精品久久久久久一区二区三区| 亚洲av成人av| 在线免费十八禁| 亚洲国产精品sss在线观看| 日韩三级伦理在线观看| 男插女下体视频免费在线播放| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 亚洲在久久综合| 日韩精品青青久久久久久| 高清av免费在线| 亚洲欧美清纯卡通| 国产 一区 欧美 日韩| 欧美激情国产日韩精品一区| 国产一区二区在线观看日韩| 国产成人a∨麻豆精品| 免费看日本二区| 久久久久免费精品人妻一区二区| av播播在线观看一区| 91久久精品国产一区二区三区| 国产淫片久久久久久久久| 十八禁国产超污无遮挡网站| 高清午夜精品一区二区三区| 美女黄网站色视频| 欧美色视频一区免费| 国产高清三级在线| 1000部很黄的大片| 变态另类丝袜制服| 能在线免费观看的黄片| 午夜免费男女啪啪视频观看| 村上凉子中文字幕在线| 免费观看性生交大片5| 免费在线观看成人毛片| 国产午夜精品一二区理论片| 亚洲真实伦在线观看| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 乱系列少妇在线播放| 欧美一级a爱片免费观看看| 中文亚洲av片在线观看爽| 亚洲综合色惰| 亚洲欧美日韩高清专用| 赤兔流量卡办理| 在线观看av片永久免费下载| 听说在线观看完整版免费高清| 欧美xxxx性猛交bbbb| 天堂av国产一区二区熟女人妻| 午夜福利网站1000一区二区三区| 国产亚洲最大av| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 国产伦精品一区二区三区四那| 中文天堂在线官网| 乱人视频在线观看| 国产v大片淫在线免费观看| 久久久久久久久久成人| 亚洲成人中文字幕在线播放| 18禁在线无遮挡免费观看视频| av线在线观看网站| 身体一侧抽搐| 国产一区二区在线av高清观看| 亚洲国产精品成人久久小说| 欧美变态另类bdsm刘玥| 国产真实伦视频高清在线观看| 国产精品女同一区二区软件| 亚洲av电影不卡..在线观看| 国产精品久久久久久久电影| 久久久久久国产a免费观看| 国产成人aa在线观看| 波多野结衣巨乳人妻| 日韩av不卡免费在线播放| 丰满乱子伦码专区| 最近的中文字幕免费完整| 少妇的逼水好多| 日韩av不卡免费在线播放| 国产视频首页在线观看| 秋霞在线观看毛片| 日韩,欧美,国产一区二区三区 | 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 99久久九九国产精品国产免费| 亚洲欧洲国产日韩| 亚洲av免费高清在线观看| 成人综合一区亚洲| 2021天堂中文幕一二区在线观| 免费看美女性在线毛片视频| 99久久人妻综合| 国产精品国产高清国产av| 午夜a级毛片| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 日韩欧美国产在线观看| 日韩一本色道免费dvd| 国产精品爽爽va在线观看网站| 青春草国产在线视频| 欧美激情国产日韩精品一区| 七月丁香在线播放| 久久久国产成人免费| 欧美变态另类bdsm刘玥| 成人三级黄色视频| 一本久久精品| 日韩欧美在线乱码| 成人国产麻豆网| 亚洲va在线va天堂va国产| 亚洲在线观看片| 国产女主播在线喷水免费视频网站 | 日韩大片免费观看网站 | h日本视频在线播放| 色综合亚洲欧美另类图片| 亚洲va在线va天堂va国产| 成人综合一区亚洲| 免费观看a级毛片全部| 69av精品久久久久久| 国产精品永久免费网站| 一区二区三区高清视频在线| 91在线精品国自产拍蜜月| 麻豆成人av视频| 黄片无遮挡物在线观看| 最近手机中文字幕大全| 赤兔流量卡办理| 中文欧美无线码| 亚洲av熟女| 亚洲国产精品国产精品| 1000部很黄的大片| 成人午夜高清在线视频| 精品国内亚洲2022精品成人| 久久国产乱子免费精品| 亚洲av免费高清在线观看| 日韩一区二区视频免费看| 国产av在哪里看| 狠狠狠狠99中文字幕| 亚洲精品一区蜜桃| 久久精品人妻少妇| 亚洲av一区综合| 免费黄网站久久成人精品| 九九在线视频观看精品| 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 如何舔出高潮| 亚洲第一区二区三区不卡| 日韩制服骚丝袜av| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 成人av在线播放网站| 亚洲综合精品二区| 在线免费观看不下载黄p国产| 晚上一个人看的免费电影| 天堂网av新在线| 久久久久免费精品人妻一区二区| 久久精品91蜜桃| 国产av在哪里看| 免费av毛片视频| or卡值多少钱| 一夜夜www| 免费在线观看成人毛片| 中文亚洲av片在线观看爽| 国产精品日韩av在线免费观看| 最近的中文字幕免费完整| 国产在线男女| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄 | 成人高潮视频无遮挡免费网站| 草草在线视频免费看| 国产老妇伦熟女老妇高清| 中文资源天堂在线| 亚洲美女视频黄频| 国产淫片久久久久久久久| 欧美+日韩+精品| 精品久久久久久电影网 | 亚洲成人精品中文字幕电影| 国内精品宾馆在线| 成人午夜精彩视频在线观看| eeuss影院久久| 免费观看的影片在线观看| 国产成人午夜福利电影在线观看| 婷婷六月久久综合丁香| 美女高潮的动态| 波野结衣二区三区在线| 欧美性感艳星| 国产色婷婷99| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 国产精品熟女久久久久浪| 国产精品不卡视频一区二区| 黑人高潮一二区| 麻豆av噜噜一区二区三区| 国产高清不卡午夜福利| 国产精品女同一区二区软件| 联通29元200g的流量卡| av国产免费在线观看| 国产亚洲精品久久久com| 国产伦一二天堂av在线观看| 国产私拍福利视频在线观看| 国产精品蜜桃在线观看| 国产乱人视频| 国产精华一区二区三区| www.av在线官网国产| 国产成人精品婷婷| 久热久热在线精品观看| 亚洲av中文av极速乱| 欧美zozozo另类| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 亚洲成人精品中文字幕电影| 乱系列少妇在线播放| 伦理电影大哥的女人| 一边亲一边摸免费视频| 国产一级毛片在线| 久久久亚洲精品成人影院| 一个人观看的视频www高清免费观看| 青春草视频在线免费观看| 欧美日韩在线观看h| 久久国内精品自在自线图片| 九草在线视频观看| 乱人视频在线观看| 免费观看精品视频网站| 中文欧美无线码| 午夜福利视频1000在线观看| 女人久久www免费人成看片 | av福利片在线观看| 男女国产视频网站| 啦啦啦观看免费观看视频高清| 91av网一区二区| 男人和女人高潮做爰伦理| 伊人久久精品亚洲午夜| 男人舔女人下体高潮全视频| 中文字幕精品亚洲无线码一区| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜 | 日韩av在线大香蕉| 久久这里有精品视频免费| 在线观看一区二区三区| 午夜激情欧美在线| 亚洲av日韩在线播放| 青春草亚洲视频在线观看| 天堂影院成人在线观看| 久久99蜜桃精品久久| 美女cb高潮喷水在线观看| 国产免费男女视频| 一边亲一边摸免费视频| 观看免费一级毛片| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 51国产日韩欧美| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 国产精品久久久久久av不卡| 尾随美女入室| 色哟哟·www| 国产久久久一区二区三区| 国产三级中文精品| 国产淫片久久久久久久久| 国产白丝娇喘喷水9色精品| 国产成人福利小说| 别揉我奶头 嗯啊视频| 日韩av在线免费看完整版不卡| 一边摸一边抽搐一进一小说| 尾随美女入室| 国产亚洲最大av| 国产高清三级在线| 热99在线观看视频| 男人舔奶头视频| 91精品伊人久久大香线蕉| 国产又色又爽无遮挡免| 国产伦精品一区二区三区视频9| 国产黄色视频一区二区在线观看 | 久久久久网色| 亚洲国产高清在线一区二区三| 搡老妇女老女人老熟妇| 亚洲成av人片在线播放无| 五月玫瑰六月丁香| 国产 一区 欧美 日韩| 免费观看a级毛片全部| 国产精品美女特级片免费视频播放器| 午夜福利在线观看免费完整高清在| 狠狠狠狠99中文字幕| 免费一级毛片在线播放高清视频| 亚洲精品色激情综合| 亚洲国产成人一精品久久久| 只有这里有精品99| 人妻少妇偷人精品九色| 国产极品精品免费视频能看的| 岛国在线免费视频观看| 色5月婷婷丁香| 九色成人免费人妻av| 精品人妻一区二区三区麻豆| 亚洲怡红院男人天堂| 国产单亲对白刺激| 亚洲真实伦在线观看| 99在线视频只有这里精品首页| 在线观看66精品国产| 亚洲av电影在线观看一区二区三区 | 毛片一级片免费看久久久久| 久久精品国产亚洲av涩爱| 欧美一区二区国产精品久久精品| 欧美97在线视频| 国产成人91sexporn| 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 水蜜桃什么品种好| 91久久精品电影网| 1024手机看黄色片| 国内精品美女久久久久久| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 国产免费男女视频| 国产精品爽爽va在线观看网站| 夜夜爽夜夜爽视频| 国产一区亚洲一区在线观看| 中文在线观看免费www的网站| 欧美bdsm另类| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 2021天堂中文幕一二区在线观| 久99久视频精品免费| 国产av码专区亚洲av| 女人十人毛片免费观看3o分钟| 国产精品人妻久久久久久| 高清av免费在线| av在线老鸭窝| 美女黄网站色视频| 亚洲天堂国产精品一区在线| 成人国产麻豆网| 久久草成人影院| 国产亚洲5aaaaa淫片| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 午夜亚洲福利在线播放| 特级一级黄色大片| 免费观看人在逋| 成人美女网站在线观看视频| 97超视频在线观看视频| 亚洲国产精品久久男人天堂| 亚洲怡红院男人天堂| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产 一区精品| 久久精品夜色国产| 日韩av在线免费看完整版不卡| 国产片特级美女逼逼视频| 精品国产露脸久久av麻豆 | 一边摸一边抽搐一进一小说| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 男插女下体视频免费在线播放| 看十八女毛片水多多多| 日本av手机在线免费观看| 97超碰精品成人国产| 97在线视频观看| 成人一区二区视频在线观看| 精品久久久久久久久av| 国产激情偷乱视频一区二区| a级毛片免费高清观看在线播放| 国产免费又黄又爽又色| 亚洲av成人av| av专区在线播放| 亚洲av成人av| 日韩一区二区视频免费看| 亚洲av福利一区| 日本一本二区三区精品| 日韩三级伦理在线观看| 午夜精品一区二区三区免费看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| av线在线观看网站| 色吧在线观看| 黄色欧美视频在线观看| 国产亚洲91精品色在线| 99热精品在线国产| 成人特级av手机在线观看| 天堂av国产一区二区熟女人妻| eeuss影院久久| 1024手机看黄色片| 精品熟女少妇av免费看| 国产精品久久久久久av不卡| 久久亚洲国产成人精品v| 床上黄色一级片| 99热精品在线国产| 欧美性猛交黑人性爽| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 九九热线精品视视频播放| 成人午夜精彩视频在线观看| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 午夜免费男女啪啪视频观看| 国产精品爽爽va在线观看网站| 人人妻人人看人人澡| 久久久久久大精品| 国产午夜精品论理片| 成人漫画全彩无遮挡| 在线播放无遮挡| 欧美性感艳星| 黄色配什么色好看| videossex国产| 欧美日韩综合久久久久久| 性色avwww在线观看| .国产精品久久| videossex国产| 99视频精品全部免费 在线| 插阴视频在线观看视频| 人妻夜夜爽99麻豆av| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 欧美又色又爽又黄视频| 欧美3d第一页| 免费播放大片免费观看视频在线观看 | www.av在线官网国产| 一二三四中文在线观看免费高清| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 亚洲国产最新在线播放| 精品一区二区三区人妻视频| 精品一区二区三区视频在线| 久久欧美精品欧美久久欧美| 国产精品伦人一区二区| 搡女人真爽免费视频火全软件| 日本三级黄在线观看| 国产精品久久久久久精品电影| 色尼玛亚洲综合影院| 国产私拍福利视频在线观看| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 女人十人毛片免费观看3o分钟| 伦理电影大哥的女人| 午夜福利在线观看吧| 全区人妻精品视频| av女优亚洲男人天堂| 日韩人妻高清精品专区| 成年免费大片在线观看| 欧美bdsm另类| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 国产成年人精品一区二区| 联通29元200g的流量卡| 乱人视频在线观看| www.av在线官网国产| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 亚洲欧美精品自产自拍| 国产成人aa在线观看| 国产亚洲5aaaaa淫片| 久久草成人影院| 精品国产三级普通话版| 国产高清三级在线| 欧美性猛交黑人性爽| 久久久久久久久久成人| 精品久久久久久久末码| 三级国产精品欧美在线观看| 99热6这里只有精品| 亚洲欧美日韩无卡精品| 精品久久久久久成人av| 亚州av有码| 免费一级毛片在线播放高清视频| 视频中文字幕在线观看| 国产精品一区二区在线观看99 | 成人欧美大片| 亚洲最大成人av| 国产伦理片在线播放av一区| 69人妻影院| 夫妻性生交免费视频一级片| 中文乱码字字幕精品一区二区三区 | 亚洲真实伦在线观看| 啦啦啦啦在线视频资源| 色噜噜av男人的天堂激情| 午夜精品国产一区二区电影 | 插逼视频在线观看| 亚洲国产色片| 久久99蜜桃精品久久| 极品教师在线视频| 99久久精品热视频| 日韩视频在线欧美| 免费在线观看成人毛片| 亚洲欧美日韩无卡精品| 精品久久久久久久久久久久久| 精品午夜福利在线看| 国产在线男女| 日日摸夜夜添夜夜爱| 国产熟女欧美一区二区| av女优亚洲男人天堂| 人人妻人人澡欧美一区二区| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 久久久久久久久久黄片| 久久久欧美国产精品| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产老妇女一区| 国产精品一区www在线观看| 日本免费一区二区三区高清不卡| 免费看av在线观看网站| 亚洲av.av天堂| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 毛片一级片免费看久久久久| 麻豆久久精品国产亚洲av| 人妻系列 视频| 久久精品夜夜夜夜夜久久蜜豆| 久久久久久久亚洲中文字幕| 国产精品精品国产色婷婷| 国产毛片a区久久久久| 99久久精品国产国产毛片| 波多野结衣高清无吗| 中文字幕免费在线视频6| 日韩大片免费观看网站 | 国产高清视频在线观看网站| 中文字幕av在线有码专区| 一夜夜www| 一个人看的www免费观看视频| 1024手机看黄色片| 精品人妻视频免费看| 国产在线一区二区三区精 | 成年av动漫网址| 亚洲av福利一区| 国产成人一区二区在线| 亚洲va在线va天堂va国产| 亚洲精品乱码久久久久久按摩| 欧美丝袜亚洲另类| 久久久久精品久久久久真实原创| 精品久久久噜噜| 18禁在线播放成人免费| 插逼视频在线观看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 日韩制服骚丝袜av| 小蜜桃在线观看免费完整版高清| 免费搜索国产男女视频| 一区二区三区高清视频在线| 亚洲国产成人一精品久久久| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 国产免费男女视频| 亚洲最大成人手机在线| 深夜a级毛片| 中文在线观看免费www的网站| 国产亚洲最大av| 一个人看的www免费观看视频| 简卡轻食公司| 国内揄拍国产精品人妻在线| 国产精品野战在线观看| 色播亚洲综合网| 中文天堂在线官网| 精品久久久久久成人av| 成年女人永久免费观看视频| 白带黄色成豆腐渣| 乱系列少妇在线播放| 欧美bdsm另类| 日韩一区二区视频免费看| 日日摸夜夜添夜夜爱| 一区二区三区高清视频在线| 一卡2卡三卡四卡精品乱码亚洲| 国产av不卡久久| 不卡视频在线观看欧美| 国产老妇伦熟女老妇高清| 免费观看a级毛片全部| 久久久精品大字幕| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产精品一区二区性色av| 极品教师在线视频| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 成人av在线播放网站| 看非洲黑人一级黄片| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 精品一区二区三区视频在线| 日韩中字成人| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品 | 欧美zozozo另类| 成人毛片60女人毛片免费| 晚上一个人看的免费电影| 99在线人妻在线中文字幕| 黄色一级大片看看| 久99久视频精品免费| 亚洲av成人精品一二三区| 亚洲人成网站在线观看播放| 嫩草影院入口| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 国产综合懂色| 日本免费a在线| 国产免费一级a男人的天堂| 婷婷色av中文字幕| 国产av不卡久久| 伦理电影大哥的女人| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 精品一区二区免费观看| 日日摸夜夜添夜夜添av毛片| 男人的好看免费观看在线视频| av播播在线观看一区| 日韩欧美国产在线观看| 中国国产av一级| 国产熟女欧美一区二区| 免费看av在线观看网站| АⅤ资源中文在线天堂| 女人久久www免费人成看片 | 最新中文字幕久久久久| 波多野结衣巨乳人妻| 日韩高清综合在线| 国产三级在线视频| 欧美97在线视频| 一个人观看的视频www高清免费观看| 又粗又爽又猛毛片免费看| 国产乱人偷精品视频| 免费看美女性在线毛片视频| 我的老师免费观看完整版| 亚洲久久久久久中文字幕| 国产精品爽爽va在线观看网站| 全区人妻精品视频| 极品教师在线视频| 色综合站精品国产| 日本免费在线观看一区| 婷婷色av中文字幕| 亚洲欧洲日产国产| 精品国产露脸久久av麻豆 | 久久久久久久亚洲中文字幕| 亚洲欧美日韩卡通动漫| 波多野结衣高清无吗| 国产色爽女视频免费观看| 我要看日韩黄色一级片| 亚洲国产高清在线一区二区三| 女的被弄到高潮叫床怎么办| 国产亚洲午夜精品一区二区久久 | 欧美变态另类bdsm刘玥| 最近手机中文字幕大全| 久久精品国产自在天天线| 久久久欧美国产精品| 2021少妇久久久久久久久久久| 男女下面进入的视频免费午夜| 免费av观看视频| 毛片女人毛片| 少妇被粗大猛烈的视频| 国产精品人妻久久久久久| 日本欧美国产在线视频| 搡女人真爽免费视频火全软件| 国产伦理片在线播放av一区| 亚洲国产色片| 亚洲av.av天堂| 国内精品一区二区在线观看| 非洲黑人性xxxx精品又粗又长| 久久亚洲精品不卡| 伦精品一区二区三区| 国产美女午夜福利|