注射器內(nèi)分散固相萃取-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速測定茶葉中24種農(nóng)藥殘留

馬佳麗，王晨，陳紅平，柴云峰，諸力，劉新

注射器內(nèi)分散固相萃取-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法快速測定茶葉中24種農(nóng)藥殘留

馬佳麗1,2,3,4，王晨1,3,4*，陳紅平1,3,4，柴云峰1,3,4，諸力1,3,4，劉新1,3,4*

1. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院茶葉研究所，浙江 杭州 310008；2. 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院研究生院，北京 100081；3. 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部茶葉質(zhì)量安全控制重點實驗室，浙江 杭州 310008；4. 農(nóng)業(yè)農(nóng)村部茶葉產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險評估實驗室（杭州），浙江 杭州 310008

基于茶葉基質(zhì)特點，開發(fā)了注射器內(nèi)分散固相萃取快速前處理技術(shù)，建立了茶葉中24種農(nóng)藥殘留超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜檢測方法。茶葉樣品經(jīng)乙腈提取，無水MgSO4鹽析，在設(shè)計的注射器裝置內(nèi)以丙基乙二胺鍵合硅膠和石墨化炭黑作為分散吸附劑進行凈化，超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法進行檢測。在3個添加水平（0.01、0.05、0.5?mg·kg-1）下，紅茶和綠茶中24種農(nóng)藥的平均回收率為61.7%～98.8%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.4%～5.5%，準(zhǔn)確度和精密度良好。24種農(nóng)藥的紅茶和綠茶基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)（2）均大于0.995，檢出限（LOD）和定量限（LOQ）分別為0.05～5.36?μg·kg-1和0.18～17.86?μg·kg-1，該方法具有良好的靈敏度。本方法具有簡便快捷、所需儀器少、省時等優(yōu)勢，適用于茶葉中多農(nóng)藥殘留的定量檢測。

茶葉；超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜；農(nóng)藥殘留；注射器內(nèi)分散固相萃取

茶葉是一種重要的飲料產(chǎn)品。目前，我國已成為世界上最大的茶葉生產(chǎn)國，在國際茶葉貿(mào)易中占有重要地位[1]，同時我國也是世界上最大茶葉消費國。為保障茶葉的產(chǎn)量和質(zhì)量，在茶樹生長過程中需要對病蟲草害進行防控。生態(tài)化協(xié)調(diào)發(fā)展要求采用以生物防控的技術(shù)，而有些茶樹種植者往往采用了噴施農(nóng)藥的防控手段，從而導(dǎo)致茶葉中存在農(nóng)藥殘留。目前茶葉中新煙堿類、氨基甲酸酯類、有機磷類、三唑類等農(nóng)藥的檢出已被廣泛報道。陳思敏等[2]在15個茶葉樣品中檢出11種農(nóng)藥，其中多菌靈、苯醚甲環(huán)唑和噠螨靈的檢出率大于60%且殘留量較高；余璐等[3]在茶葉樣品中檢測出15種農(nóng)藥，其中包括噻嗪酮、啶蟲脒和三唑磷。

目前，茶葉中農(nóng)藥殘留的分析方法主要有氣相色譜法[4-5]、液相色譜法[6-7]、氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（GC-MS/MS）[8-10]、液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）[11-13]等。多農(nóng)殘檢測通常采用通用性強、選擇性好、靈敏度高的GC-MS/MS和LC-MS/MS法，尤其LC-MS/MS法對茶葉農(nóng)藥殘留的檢出限可達到ng·kg-1水平。茶葉作為一種高度復(fù)雜的基質(zhì)，富含嘌呤堿、多酚和一些特有的色素。其在樣品前處理階段易與目標(biāo)農(nóng)藥一同提取，導(dǎo)致直接干擾和基質(zhì)效應(yīng)，因此茶葉農(nóng)藥殘留檢測方法的開發(fā)與改進主要聚焦于前處理技術(shù)。傳統(tǒng)的前處理方法，如固相萃取[14-15]、基質(zhì)固相分散[4,16]、凝膠滲透色譜[17-18]等，雖然能夠有效去除茶葉中的共萃取物質(zhì)，但十分耗時、有機溶劑用量大且前處理設(shè)備昂貴，無法滿足對茶葉農(nóng)殘檢測便捷、快速、低成本、高通量等的需求。一些新型前處理方法利用注射器進一步簡化了操作，例如注射器內(nèi)分散固相萃?。↖S-dSPE）、快速濾過型凈化（m-PFC）等。其中IS-dSPE法憑借注射器特有的活塞推拉操作避免了費時的離心步驟和大量的開關(guān)蓋操作，實現(xiàn)高通量的同時簡化了操作，提高了前處理的效率。該方法已在蜂蜜[19]、河水[20]、魚[21]等的農(nóng)藥多殘留檢測中成功運用，但在茶葉中應(yīng)用較少。

因此，本研究選擇了茶葉中檢出率高的24種農(nóng)藥，其中16種農(nóng)藥我國已制定限量標(biāo)準(zhǔn)，其余8種暫未制定限量但應(yīng)用較為廣泛。以IS-dSPE法為基礎(chǔ)，進一步調(diào)整了注射器裝置，優(yōu)化了質(zhì)譜參數(shù)、提取條件、凈化條件、離心以及渦旋時間，以其建立具有簡單、快速、準(zhǔn)確和高通量等優(yōu)點的檢測方法，適用于茶葉中多農(nóng)藥殘留的快速檢測，保障茶產(chǎn)品的安全質(zhì)量。

1 材料與方法

1.1 儀器、試劑和材料

LC-30A超高效液相色譜儀（日本島津公司）-AB Sciex TQ 5500三重四極桿質(zhì)譜儀（美國Sciex公司），串聯(lián)使用；DMT-2500多管渦旋混合儀（杭州米歐儀器有限公司）；渦旋混勻儀[大龍興創(chuàng)試驗儀器(北京)股份公司]；4-16KS冷凍離心機（德國Sigma公司）；5?mL一次性使用無菌帶針注射器（江蘇治宇醫(yī)療器材有限公司）；6?mL固相萃?。⊿PE）柱管及篩板（天津博納艾杰爾科技有限公司）。

24種農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品均購自德國Dr. Ehrenstorfer公司和上海安譜實驗科技股份有限公司；乙腈、甲醇（HPLC級）均購自美國FIsher公司；-丙基乙二胺鍵合硅烷（PSA）、石墨化炭黑（GCB）、十八烷基鍵合硅膠（C18）、多壁碳納米管（MWCNTs）均購自天津博納艾杰爾科技有限公司；交聯(lián)乙烯聚吡咯烷酮（PVPP）購自美國Sigma-Aldrich公司；無水硫酸鎂（MgSO4）購自北京百靈威科技有限公司；尼龍濾器（孔徑0.22?μm，直徑13?mm）購自上海安譜實驗科技股份有限公司；試驗用水由Milli-Q試驗室水純化系統(tǒng)（美國Millipore公司）純化制得。茶葉樣品均為市售茶葉。

1.2 樣品前處理

將5?mL注射器拆解，取其中的活塞和針頭；在6?mL SPE柱管中加入篩板，在篩板上部填充100?mg PSA與25?mg GCB的組合吸附劑，將活塞從SPE柱管上部緩慢推到底，下部接上針頭，即獲得本研究所使用的組裝注射器。分散固相萃取注射器如圖1所示。

稱取2.00?g（精確至0.01?g）粉碎的茶葉試樣于50?mL離心管，加入5?mL去離子水，浸泡30?min，加入10?mL乙腈，充分渦旋振蕩30?s，加4?g無水MgSO4，渦旋振蕩30?s，以7?500?r·min-1離心5?min。吸取上清液1?mL至裝有100?mg PSA、25?mg GCB吸附劑的組裝注射器內(nèi)，充分渦旋振蕩30?s，緩慢推動注射器活塞，濾液直接經(jīng)尼龍濾器過濾，待超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜（UPLC-MS/MS）分析。

1.3 農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

混合標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱取各農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)品20.0?mg于20?mL容量瓶中，以乙腈溶解并定容至刻度，配成1?000?mg·L-1的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，–18℃以下貯存。以乙腈稀釋至所需濃度，得到混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。

混合標(biāo)準(zhǔn)工作液：取適量的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，以茶葉空白樣品經(jīng)1.2章節(jié)處理得到基質(zhì)溶液稀釋至1?mL，配置濃度為1、2、5、10、20、50、100、200、500?μg·L-1基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液。

圖1 分散固相萃取注射器示意圖

1.4 儀器條件

色譜條件：色譜柱采用Waters Acquity HSS T3柱（2.1?mm×100?mm，1.7?μm）。流動相：A相為含0.1%甲酸及1?mmol·L-1甲酸銨水溶液，B相為含0.1%甲酸及1?mmol·L-1甲酸銨的甲醇溶液。流動相梯度洗脫程序：0～1?min，保持10% B；1～2?min，變?yōu)?0% B；2～6?min，變?yōu)?8% B；6～8?min，保持98% B；8～8.1?min，變?yōu)?0% B；8.1～14?min，保持10% B；流速：0.3?mL·min-1；進樣量：1?μL；柱溫：40℃；運行時間：14?min。

質(zhì)譜條件：采用電噴霧正離子源模式（ESI+）；氣簾氣（Curtain gas）壓力241.3?kPa；碰撞氣（Collision gas）壓力48.3?kPa；噴霧電壓5?500?V；霧化溫度500℃，霧化氣（GS1）壓力334.7?kPa；輔助氣（GS2）壓力334.7?kPa。監(jiān)測模式：多反應(yīng)監(jiān)測（MRM）。

2 結(jié)果與分析

2.1 質(zhì)譜條件優(yōu)化

以乙腈配制質(zhì)量濃度為0.1?mg·L-1的24種目標(biāo)化合物標(biāo)準(zhǔn)溶液，經(jīng)針泵注射進樣，采用電噴霧正離子模式進行質(zhì)譜條件優(yōu)化，質(zhì)譜優(yōu)化結(jié)果如表1所示。

在選擇母離子時，24種目標(biāo)化合物中23種皆以[M+H]+為母離子進行了二級質(zhì)譜優(yōu)化。水胺硫磷的分子量為289.053?77，其加氫峰[M+H]+（m/z 290）的信號強度很弱，說明離子化效率低，靈敏度難以滿足要求。除了分子離子峰[M+H]+外，水胺硫磷還存在加氫脫氨基峰[M+H-NH3]+（m/z 273）、加銨峰[M+NH4]+（m/z 307）、加鈉峰[M+Na]+（m/z 312）和加鉀峰[M+K]+（m/z 328）。母離子全掃時，[M+H-NH3]+、[M+NH4]+、[M+Na]+信號強度較高，而[M+K]+的信號強度很弱，表明水胺硫磷與鉀離子的結(jié)合能力很弱，不考慮作為母離子。以[M+NH4]+為母離子的離子對經(jīng)液相色譜分離后峰形較差，分析可能是由于銨離子濃度不穩(wěn)定造成，不考慮作為母離子。以[M+H-NH3]+和[M+Na]+為母離子的離子對經(jīng)液相色譜分離后峰形均較好，但[M+H-NH3]+的離子對響應(yīng)值顯著高于[M+Na]+，兩者豐度最高的離子對273/230.9和312/270.1的響應(yīng)值之比為38∶1。因此本研究最終選擇[M+H-NH3]+（m/z 273）作為水胺硫磷的母離子，m/z 230.9、m/z 121分別作為其定量和定性子離子。分子結(jié)構(gòu)及碎片離子裂解途徑如圖2所示。

2.2 前處理條件優(yōu)化

2.2.1 提取條件的優(yōu)化

本研究采用對所測農(nóng)藥具有較強溶解性的乙腈作為提取溶劑。對于一些氨基甲酸酯類或是強極性的農(nóng)藥，用水浸泡茶葉再經(jīng)乙腈提取的效率高于用純乙腈提取的[11,22]。前期試驗表明，2?g茶樣加入5?mL水浸泡30?min后再經(jīng)10?mL乙腈提取，更有利于乙腈對茶葉中極性農(nóng)藥的提取，獲得穩(wěn)定的結(jié)果。提取時需要加入鹽析劑飽和水相，以促使目標(biāo)農(nóng)藥進入乙腈相，為此本研究比較了3種不同鹽處理（即1?g NaCl+4?g無水MgSO4、4?g無水MgSO4、3?g NaCl）對目標(biāo)農(nóng)藥提取效率的影響。結(jié)果發(fā)現(xiàn)（圖3），23種農(nóng)藥在3種處理下的回收率均在70%～120%，而烯啶蟲胺的回收率均低于70%。烯啶蟲胺的正辛醇水分配系數(shù)（log）為–0.66，水溶性較強，因此導(dǎo)致其易溶解于下層水相中，在提取時損失較大。由于烯啶蟲胺回收率在4?g無水MgSO4的處理下相對較高，為60.5%。因此本方法采用5?mL去離子水、10?mL乙腈提取并用4?g無水MgSO4鹽析。

2.2.2 注射器裝置及吸附劑優(yōu)化

當(dāng)注射器內(nèi)直接裝入吸附劑，在吸取提取液后置于混勻渦旋儀上渦旋過程中會出現(xiàn)漏液的現(xiàn)象。經(jīng)多次試驗驗證表明，在注射器底部加置篩板后，篩板可起到阻隔液體功能，可保證渦旋時不出現(xiàn)漏液情況?？疾霵SA、C18、GCB、PVPP和MWCNTs對目標(biāo)農(nóng)藥的凈化效果，用量分別為100、100、50、50、25?mg，以篩選合適的分散固相萃取吸附劑。試驗結(jié)果如圖4-A所示，在PSA和PVPP兩個處理下，大部分農(nóng)藥凈化效果相對較好，目標(biāo)農(nóng)藥（烯啶蟲胺除外）的回收率皆能保證在70%～120%。其中多菌靈在PSA處理下回收率為71.1%，比凈化前提高了7%。并且PSA對于基質(zhì)效應(yīng)的改善也優(yōu)于其他幾種吸附劑。

GCB、C18和MWCNTs作為QuEChERS前處理技術(shù)中常用的分散固相吸附劑，對基質(zhì)中的色素具有較強的去除能力，使提取液顏色變淺[23]。該現(xiàn)象在本試驗中也得到了證實（圖4-B），其中GCB凈化后的液體顏色最淺，對茶葉中色素類物質(zhì)凈化效果最好。

從回收率上看，GCB和MWCNTs均對多菌靈存在明顯的吸附作用，使其回收率降至60%以下，這與GCB和MWCNTs易吸附平面結(jié)構(gòu)的物質(zhì)有關(guān)。C18對毒死蜱、乙螨唑、噠螨靈、咪鮮胺和唑蟲酰胺等多種農(nóng)藥存在吸附現(xiàn)象，使其回收率顯著低于凈化前，可能由于C18本身極性較弱，對弱極性農(nóng)藥也具有一定吸附作用。因此，為了保證回收率并兼顧凈化效果，最終選擇將PSA作為吸附劑主體，并搭配少量GCB進一步去除色素類物質(zhì)。

表1 24種農(nóng)藥的UPLC-MS/MS多反應(yīng)監(jiān)測參數(shù)

注：*為定量離子對

Note: * denotes quantitative ion pair

圖2 正模式電噴霧串聯(lián)質(zhì)譜中水胺硫磷分子結(jié)構(gòu)及碎片離子裂解途徑

圖3 使用不同鹽析劑時茶葉中24種農(nóng)藥的回收率

對PSA用量進一步優(yōu)化，比較了200、150、100?mg和50?mg PSA處理后的凈化效果。如圖5-A所示，不同PSA用量對大部分目標(biāo)農(nóng)藥的回收率影響不顯著，但多菌靈在50?mg和100?mg PSA處理下的回收率可達到70%以上。從基質(zhì)效應(yīng)看（圖5-C），大部分農(nóng)藥的基質(zhì)抑制效應(yīng)隨著用量的增加而明顯改善。綜合回收率和基質(zhì)效應(yīng)考慮，選擇100?mg PSA為最終用量。

對GCB用量優(yōu)化時，比較了100?mg PSA基礎(chǔ)上分別加入50、25?mg和10?mg GCB處理后的凈化效果。如圖5-B所示，不同GCB用量對于大部分目標(biāo)農(nóng)藥的回收率影響不大，但多菌靈的回收率隨GCB用量增大而降低，在50?mg用量時降至60%以下。從基質(zhì)效應(yīng)看，隨著GCB用量的增加，大部分農(nóng)藥的基質(zhì)抑制未得到明顯改善（圖5-D），但對于色素類物質(zhì)的去除效果提升。因此本研究最終選擇100?mg PSA搭配25?mg GCB作為最終的吸附劑組合。

圖5 PSA和GCB不同用量分散固相萃取凈化處理下茶葉中24種農(nóng)藥的回收率和基質(zhì)效應(yīng)

2.2.3 渦旋時間的優(yōu)化

本方法共有3次渦旋操作，第一次為提取步驟加入提取溶劑后；第二次為提取步驟加入鹽析劑后；第三次為凈化步驟提取液加至吸附劑后。本試驗分別對3次渦旋時間進行了優(yōu)化，提取階段離心管中的2次渦旋時間均分別設(shè)置30?s、1?min、2?min和5?min進行比較，凈化階段注射器的渦旋時間設(shè)置30?s、1?min和2?min進行比較。結(jié)果如圖6所示，第一、三次渦旋時間對目標(biāo)農(nóng)藥回收率影響不顯著。而隨著第二次渦旋時間的延長，大部分農(nóng)藥的回收率略有上升，可能由于渦旋時間長對水分的去除更加充分。總體上，目標(biāo)農(nóng)藥在第二次渦旋30?s后得到的回收率為61.0%～98.3%，可以滿足檢測需求，因此，3次渦旋均選擇30?s作為渦旋時間以提高效率。

注：A：第一次渦旋B：第二次渦旋C：第三次渦旋

2.3 方法的準(zhǔn)確度和精密度

在空白的紅茶和綠茶樣品中添加24種農(nóng)藥的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液，開展添加回收試驗，添加水平分別為0.01、0.05、0.5?mg·kg-1?；厥章屎拖鄬?biāo)準(zhǔn)偏差結(jié)果見表2。除了綠茶中烯啶蟲胺在加標(biāo)濃度為0.01?mg·kg-1時未能檢出，其余目標(biāo)農(nóng)藥在紅茶和綠茶中的加標(biāo)回收率范圍在61.7%～98.8%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD，n=3）為0.1%～5.8%。結(jié)果表明，該方法準(zhǔn)確度和精密度良好，符合多農(nóng)殘檢測要求。

表2 紅茶和綠茶樣品中24種農(nóng)藥的平均回收率和相對標(biāo)準(zhǔn)偏差

續(xù)表2

2.4 方法的線性范圍、檢出限、定量限和基質(zhì)效應(yīng)

對1.3章節(jié)配制的系列混合標(biāo)準(zhǔn)工作液和基質(zhì)混合（紅茶、綠茶）標(biāo)準(zhǔn)工作液檢測，繪制溶劑、紅茶和綠茶的標(biāo)準(zhǔn)曲線。如表3所示，有23種農(nóng)藥的紅茶（發(fā)酵茶）和綠茶（不發(fā)酵茶）基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液在不窄于1～100?μg·L-1的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)（2）均大于0.995。綠茶和紅茶中23種農(nóng)藥的檢出限（LOD，S/N=3）和定量限（LOQ，S/N=10）分別為0.05～3.70?μg·kg-1和0.18～12.35?μg·kg-1，表明本方法具有良好的靈敏度。烯啶蟲胺在綠茶中靈敏度相對欠缺，檢出限為5.36?μg·kg-1，定量限為17.86?μg·kg-1，在5～500?μg·L-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好（2=0.999?2）。

目標(biāo)化合物的基質(zhì)效應(yīng)（ME值）計算公式如下：ME=基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率/溶劑標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率×100%。試驗結(jié)果表明，24種農(nóng)藥在紅茶和綠茶中的ME分別為20%～100%和11.1%～100%，總體上目標(biāo)農(nóng)藥在綠茶中的基質(zhì)抑制效應(yīng)比紅茶更強。噻蟲胺、吡蟲啉、噻蟲嗪、滅多威等一些農(nóng)藥存在很強的基質(zhì)抑制效應(yīng)，其中噻蟲胺、吡蟲啉、噻蟲嗪3個農(nóng)藥在綠茶中的ME均低于15%。為了校正基質(zhì)效應(yīng)，本方法使用基質(zhì)空白液配制混合標(biāo)準(zhǔn)工作液。

2.5 實際樣品分析與對比

采用建立的注射器結(jié)合UPLC-MS/MS法，對市售的紅茶和綠茶共10份茶葉樣品中的24種目標(biāo)農(nóng)藥進行定性定量檢測，并與實驗室傳統(tǒng)QuEChERS檢測方法的結(jié)果進行比對。結(jié)果顯示（表4），兩種檢測方法檢出的農(nóng)藥品種相同，檢出結(jié)果的相對偏差范圍為2.2%～17.3%，表明本研究建立的新型檢測方法與實驗室傳統(tǒng)方法結(jié)果具有一致性。

表3 紅茶和綠茶中24種農(nóng)藥的線性方程、線性范圍、相關(guān)系數(shù)、方法檢出限及定量限

在樣品前處理時間上，本研究建立的新型方法對單個樣品凈化時間可控制在2?min以內(nèi)，而實驗室傳統(tǒng)方法由于需要較長時間的渦旋離心，通常單個樣品的凈化時間需要15?min左右。由此可見，本研究建立的新型檢測方法可以在較短時間內(nèi)完成茶葉中多種農(nóng)藥殘留的提取凈化過程，較傳統(tǒng)方法在效率上有較大的提高。

表4 本研究方法與傳統(tǒng)方法對10份茶樣檢出結(jié)果對比

3 討論和結(jié)論

本研究通過對前處理條件、質(zhì)譜條件等優(yōu)化，建立了注射器內(nèi)分散固相萃取-超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜測定茶葉中24種農(nóng)藥殘留的方法。該方法采用乙腈對茶葉樣品提取，無水MgSO4鹽析，在設(shè)計的注射器裝置內(nèi)以PSA和GCB組合凈化，UPLC-MS/MS分析。通過對茶葉中24種農(nóng)藥平均回收率試驗，顯示該方法的平均回收率在61.7%～98.8%，RSD小于5.5%，說明該方法具有良好的準(zhǔn)確度和精密度。通過對該方法的檢出限試驗，方法檢出限在0.05～5.36?μg·kg-1，靈敏度良好。24種農(nóng)藥在線性范圍內(nèi)相關(guān)系數(shù)（2）均大于0.995，線性關(guān)系良好。與傳統(tǒng)QuEChERS方法采用的dSPE相比，通過注射器裝置簡化了操作，可將單個樣品的凈化時間控制在2?min以內(nèi)。方法具有操作簡單易上手、所用儀器少、時間節(jié)省、普適性好等優(yōu)點，適合用于茶葉中多農(nóng)藥殘留的日常檢測。

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Rapid Determination of 24 Pesticide Residues in Tea by in-Syringe Dispersive Solid Phase Extraction-Ultra High Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry

MA Jiali1,2,3,4, WANG Chen1,3,4*, CHEN Hongping1,3,4, CHAI Yunfeng1,3,4, ZHU Li1,3,4, LIU Xin1,3,4*

1. Tea Research Institute, Chinese Academy of Agriculture Sciences, Hangzhou 310008, China; 2. Graduate School, Chinese Academy of Agriculture Sciences, Beijing 100081, China; 3. Key Laboratory of Tea Quality and Safety Control, Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Hangzhou 310008, China; 4. Laboratory of Quality and Safety Risk Assessment for Tea Products (Hangzhou), Ministry of Agriculture and Rural Affairs, Hangzhou 310008, China

Based on the characteristics of tea matrix, a rapid pretreatment technology of in-syringe dispersive solid phase extraction (dSPE) was developed, and an analytical method based on ultra high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry was established for the detection of 24 pesticide residues in tea. Tea samples were extracted using acetonitrile, salted-out with MgSO4, purified with primary secondary amine and graphitized carbon black as dispersive adsorbents in designed syringe devices, and detected by UPLC-MS/MS. Recoveries of 24 pesticides in black and green teas were 61.7%-98.8% at three spiked levels (0.01?mg·kg-1, 0.05?mg·kg-1and 0.5?mg·kg-1), which indicated high accuracy with the relative standard deviations of 0.4%-5.5%. The calibration curves of 24 pesticides in black and green teas showed good linearity with correlation coefficients (R2) higher than 0.995. The limits of detection (LOD) and the limits of quantitation (LOQ) were 0.05-5.36?μg·kg-1and 0.18-17.86?μg·kg-1, respectively, which show high sensitivity of this method. Being simple, fast, less instrument required and time-saving, this method is suitable for quantification of multiple pesticide residues in tea.

tea, ultra high performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry, pesticide residues, in-syringe dispersive solid phase extraction

S571.1；TS207.3

A

1000-369X(2021)05-717-14

2021-02-01

2021-03-01

財政部和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部：國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系（CARS-19）、中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院創(chuàng)新團隊（CAAS-ASTIP-2014-TRICAAS-06）、國家農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全風(fēng)險評估項目（GJFP2020001）

馬佳麗，女，碩士研究生，主要從事茶葉質(zhì)量安全研究。*通信作者：wangchen@tricaas.com；liuxin@tricaas.com

（責(zé)任編輯：趙鋒）