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    響應(yīng)面法優(yōu)化桑葚膏滋處方用量的研究

    2021-10-14 02:25:32侯振源劉欣娜向超群田同漢
    現(xiàn)代食品 2021年15期
    關(guān)鍵詞:膏率龍眼肉桑葚

    ◎ 侯振源,劉欣娜,張 曌,向超群,田同漢,梁 偉

    (哈爾濱商業(yè)大學(xué)藥學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 150076)

    桑葚膏滋共四味藥,桑葚、山藥、龍眼肉和甘草。此方是在《慎齋遺書》和《民間方》中的桑葚膏,以及“玉液湯”和“歸脾湯”君藥功效的基礎(chǔ)上加入甘草而來。本方以“君臣佐使”為組方原理,選擇藥食同源的四味中藥,其方解如下[1]。桑葚甘,酸,寒。歸心、肝、腎經(jīng)。善滋陰補(bǔ)血,生津潤燥[2-3],故用為君藥。用量為45~55 g。山藥肝補(bǔ)澀斂性平,善養(yǎng)陰益氣,補(bǔ)脾肺腎,為平補(bǔ)氣陰之要藥[4],故用為臣藥。用量為15~25 g。龍眼肉甘、溫。歸心、脾經(jīng)。善補(bǔ)益心脾,養(yǎng)血安神[2],故用為佐藥。用量為5~10 g。甘草甘、平。歸心、脾、胃經(jīng)。善補(bǔ)益和氣、和中緩急且調(diào)和諸藥[5],故用為使藥。用量為2~10 g。現(xiàn)代研究表明該四味藥對人體機(jī)能尤其是在調(diào)節(jié)免疫方面有重要作用。

    本試驗通過響應(yīng)面法,篩選最佳處方量。通過外觀、相對密度和不溶物檢查進(jìn)行膏滋質(zhì)量評價。本項目旨在研制一種調(diào)節(jié)免疫、養(yǎng)心安神的膏劑,并為桑葚的開發(fā)利用提供了理論依據(jù)。

    1 材料與方法

    1.1 試驗材料、試劑與儀器

    1.1.1 試驗材料

    桑葚、山藥、龍眼肉、甘草(購自哈爾濱市道外區(qū)三棵樹中藥材專業(yè)市場,經(jīng)專家鑒定為真)。

    1.1.2 試驗試劑

    蒸餾水(批號:20201118),蜂蜜(批號:20201019)。

    1.1.3 試驗儀器

    BSA萬分之一電子分析天平,北京賽多利斯科學(xué)儀器有限公司;HH2電熱恒溫水浴鍋,天津因特萊斯儀器有限公司;GZX-9240MBE電熱鼓風(fēng)干燥箱,上海博訊實業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠;SDHCB8E30-210電磁爐(鍋),浙江紹興蘇泊爾生活電器有限公司;TP-214分析天平,托利多儀器有限公司。

    1.2 試驗內(nèi)容與方法

    1.2.1 響應(yīng)面法優(yōu)化處方用量

    (1)響應(yīng)面試驗因素及水平設(shè)計。以A桑葚添加量(g)、B山藥添加量(g)、C龍眼肉添加量(g)、D甘草添加量(g)為4因素,以出膏率為響應(yīng)值。以臣藥山藥為中等劑量20 g,君藥用量且要高于臣藥用量1/3,佐使藥也要低于臣藥1/3,最后以桑葚50 g、山藥20 g、龍眼肉10 g、甘草5 g,為處方的基礎(chǔ)用量,在此基礎(chǔ)上優(yōu)化用量。統(tǒng)一湯劑煎煮條件,試驗因素及水平設(shè)計如表1所示。

    表1 響應(yīng)面試驗因素及水平設(shè)計表

    (2)試驗方法。以上述的因素水平為依據(jù),進(jìn)行試驗方案的設(shè)計。運(yùn)用Design-Expert軟件設(shè)計試驗,并根據(jù)設(shè)計出的試驗方案進(jìn)行試驗[6]。

    依據(jù)試驗方案,稱取相應(yīng)桑葚、山藥、龍眼肉、甘草的用量置于燒杯中,加入沒過藥材表面的水,浸泡60 min后,將藥材置于鍋中,加入藥材6倍的水,先武火煎煮,后小火煎煮,煎煮60 min后,過濾得煎煮液1,再次將藥材置于鍋中,加入6倍的水,煎煮60 min后,過濾得煎煮液2,混合煎煮液1和煎煮液2,靜置,沉淀藥渣。過濾并置于鍋中濃縮,濃縮至滴液在紙上無滲潤水跡。得到清膏,并計算出膏率。重復(fù)試驗方案,直至完成。

    1.2.2 桑葚膏滋的制備

    (1)桑葚膏滋的制備工藝。桑葚膏滋的制備工藝如圖1所示。

    圖1 桑葚膏滋的制備工藝圖

    (2)桑葚膏滋的制備方法。按處方比例稱取藥材,取適量的蜂蜜作為矯味劑。取5份處方用量藥材分別放于燒杯內(nèi),各加水浸泡120 min。把浸泡之后的藥材放置于鍋中煎煮90 min,武火煮沸后文火加蓋慢煮,煎煮2次后,合并水煎液,靜置沉淀藥渣。將所得水煎液過濾后濃縮,濃縮至滴液在紙上沒有滲潤水跡的現(xiàn)象,即得5份清膏。選取無浮沫、死蜂等雜質(zhì)的優(yōu)質(zhì)蜂蜜,中火煉蜜。向清膏內(nèi)加入煉蜜,攪拌均勻,濃縮至滴液在紙上沒有滲潤水跡,冷卻之后即得成品。將膏滋分裝在潔凈干燥滅菌的大口容器中,待充分冷卻后加蓋密閉,防止水蒸氣冷凝后流回表面出現(xiàn)霉敗現(xiàn)象。貯藏于陰涼干燥處。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 響應(yīng)面試驗

    2.1.1 響應(yīng)面試驗設(shè)計及結(jié)果

    選擇A桑葚添加量(g)、B山藥添加量(g)、C龍眼肉添加量(g)、D甘草添加量(g)為4個影響因素,根據(jù)Box-Behnken中心組合試驗原理,進(jìn)行試驗因素及水平設(shè)計。根據(jù)確定的因素水平,各組藥材浸泡60 min,按條件進(jìn)行煎煮,以出膏率(Y)為響應(yīng)值,使用軟件Design-Expert8.0.6.1Trial進(jìn)行響應(yīng)面優(yōu)化設(shè)計。該試驗設(shè)計包含24個析因試驗和5個中心試驗,其中由4個影響因素所構(gòu)成的三維立體圖形的頂點為析因點,三維圖形的中心區(qū)域為零點,中心試驗重復(fù)5次以估計試驗誤差[7]。

    表2 響應(yīng)面試驗設(shè)計及結(jié)果表

    2.1.2 方程的建立與顯著性分析

    采 用 Design-Expert10.0.7軟 件 對“2.1.1” 中的中心組合試驗設(shè)計和結(jié)果進(jìn)行多元回歸統(tǒng)計分析,影響因素經(jīng)過多元擬合得到回歸方程如下,Y=39.57+2.93×A+0.12×B+0.023×C+1.408×D-0.58×AB+0.32×AC+0.28×AD-0.17×BC-0.19×BD+0.19×CD+3.93×A2-2.49×B2-4.68×C2-5.12×D2。

    統(tǒng)計分析結(jié)果得模型的P值<0.01,模型的F值為4.91,表明模型具有顯著性,有統(tǒng)計學(xué)意義。方差來 源A、B、D、A2、B2、C2、D2的P值 均 < 0.01,差異極顯著,AC、BD的P值<0.05,均為重要的模型項,有統(tǒng)計學(xué)意義,證明各因素之間有一定交互影響;同時回歸方程的R2=0.789 3,說明清膏得率有78.93%的可能是由所選因素決定的,因此所確定的回歸方程可以作為準(zhǔn)確估計各影響因素和清膏得率的標(biāo)準(zhǔn)。

    表3 響應(yīng)值二次模型的方差分析表

    2.1.3 各因素交互影響響應(yīng)面分析

    根據(jù)2.1.2得出的回歸方程,做出4個影響因素之間的響應(yīng)面圖,預(yù)測4個影響因素對出膏率的影響,結(jié)果如圖2~圖7所示。

    由圖2可知,等高線呈圓形,說明桑椹添加量和山藥添加量的相互作用不顯著[8]。由圖3可知,等高線呈橢圓形,說明桑椹添加量和龍眼肉添加量的相互作用顯著。出膏率隨著桑葚和龍眼肉二者的添加量的增加,呈現(xiàn)先增大再減小的趨勢。由圖4可知,等高線呈圓形,說明桑椹添加量和甘草添加量的相互作用不顯著。由圖5可知,等高線呈圓形,說明龍眼肉添加量和山藥添加量的相互作用不顯著。由圖6可知,等高線呈橢圓形,其軸線與坐標(biāo)軸之間有一定的角度,說明甘草添加量和山藥添加量的相互作用顯著。出膏率隨山藥添加量和甘草添加量的遞增,先增大后減小。由圖7可知,等高線呈圓形,說明甘草添加量和龍山肉添加量間的相互作用不顯著。

    圖2 A,B因素對出膏率影響的3D曲面圖

    圖3 A,C因素對出膏率影響的3D曲面圖

    圖4 A,D因素對出膏率影響的3D曲面圖

    圖5 B,C因素對出膏率影響的3D曲面圖

    圖6 B,D因素對出膏率影響的3D曲面圖

    圖7 C,D因素對出膏率影響的3D曲面圖

    2.1.4 桑葚膏滋處方的最佳用量確定

    根據(jù)上述確立的響應(yīng)面模型,通過Design-Expert10.0.7軟件得出桑葚膏滋處方用量最佳數(shù)值為桑葚用量53.68 g、山藥用量22.73 g、龍眼肉用量9.18 g、甘草用量7.75 g,預(yù)測出膏率最大為41.46%,為檢驗響應(yīng)曲面法所得結(jié)果的可靠性,同時又考慮到實際可操作性,將實際組合定的量,在以此條件進(jìn)行驗證試驗,出膏率為39.57%,與理論預(yù)測值近,說明運(yùn)用響應(yīng)面法優(yōu)化處方用量可靠。

    2.2 質(zhì)量檢查結(jié)果

    成品膏滋外觀性狀較好,無異味,氣味清香,膏體粘稠,顏色黑亮,經(jīng)過一段時間并未出現(xiàn)腐敗現(xiàn)象。供試品相對密度符合相對密度檢查標(biāo)準(zhǔn)。膏滋加熱水溶化靜置觀察無焦屑等異物,符合不溶物檢查標(biāo)準(zhǔn)。

    3 結(jié)論

    本試驗以桑葚為君藥,山藥為臣藥,龍眼肉為佐藥,甘草為使藥進(jìn)行配方。采用了響應(yīng)面法進(jìn)行篩方,確定了組方含量為桑葚53.68 g、山藥22.73 g、龍眼肉9.18 g、甘草7.75 g,此時出膏率為39.57%。所得膏滋湯為深紫色藥液,伴有獨(dú)特的香味。最后濃縮收膏得到暗紫色膏滋。進(jìn)行質(zhì)量檢查,結(jié)果表明本試驗所得膏滋無異味,膏體細(xì)膩、有光澤,口感較好,且稠度中等,無霉敗現(xiàn)象,無焦屑類不溶物,相對密度符合要求。

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