水酶法提取米糠油的試驗(yàn)研究

張 敏，許朵霞，王振華，郝 佳，楊煥月

（北京工商大學(xué)北京食品營(yíng)養(yǎng)與人類(lèi)健康高精尖創(chuàng)新中心，北京工商大學(xué)北京市食品添加劑工程技術(shù)研究中心，北京工商大學(xué) 食品與健康學(xué)院，北京 100048）

米糠含有稻米中64%營(yíng)養(yǎng)及人體所需90%必需營(yíng)養(yǎng)素，可廣泛地應(yīng)用于食品、醫(yī)藥、化工、化妝品等領(lǐng)域，是一種寶貴的可再生資源[1]。米糠含有15%～22%的油脂，不飽和脂肪酸占比高達(dá)80%，其中油酸與亞油酸之比約1∶1，是典型的油酸-亞油酸型植物油[2]。此外，米糠油中富含谷維素、維生素E、角鯊烯和植物甾醇等多種生物活性組分[3-4]，表現(xiàn)出極強(qiáng)的抗氧化作用，具有抑制腫瘤生長(zhǎng)、降低人體膽固醇水平和葡萄糖耐量等生理功能[5-7]。因此，米糠油廣受消費(fèi)者的喜愛(ài)。目前，機(jī)械壓榨法和溶劑浸出法是工業(yè)上常用的植物油提取方法。水酶法是以水代法為基礎(chǔ)，在特定條件下利用生物酶破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)，促使油脂釋放的一種油脂提取方法。提取條件溫和、綠色安全、可同時(shí)分離出油脂和蛋白質(zhì)等產(chǎn)品，是水酶法油脂提取的顯著優(yōu)勢(shì)。國(guó)內(nèi)外水酶法油脂提取，在大豆、菜籽、油茶籽、花生和芝麻等油料作物中有所應(yīng)用，并取得了一定的成果[8-10]。1996 年Sengupta 等[11]首次利用果膠酶和纖維素酶，結(jié)合有機(jī)溶劑提取米糠油。Hanmoungjai 等[12]研究證實(shí)，應(yīng)用Alcalase 2.4L 酶制劑可以顯著提高米糠油和蛋白質(zhì)的提取率。楊慧萍等[13]對(duì)水酶法提取米糠油進(jìn)行了工藝優(yōu)化，出油率達(dá)到85.76%。

水酶法油脂提取一般可將分為4 個(gè)階段：破碎、酶解、離心和破乳（如圖1 所示）。為提高出油率，通常應(yīng)用加熱、微波、超聲波、擠壓膨化、酶法和蒸汽閃爆等[15-17]方式對(duì)原料進(jìn)行預(yù)處理，破壞細(xì)胞結(jié)構(gòu)。糖酶和蛋白酶則是水酶法油脂提取常用的酶制劑，糖酶主要包括纖維素酶、果膠酶、半纖維酶、淀粉酶和葡聚糖酶等[8,18]。選擇合適的酶制劑及酶解工藝，是水酶法油脂提取工業(yè)化應(yīng)用的基礎(chǔ)。此外，在油脂提取過(guò)程中，磷脂、蛋白質(zhì)和細(xì)胞碎片與油脂形成穩(wěn)定的乳狀液，導(dǎo)致油脂的提取率較低。受油料成分和性質(zhì)的影響，不同油料形成的乳狀液性質(zhì)差異顯著[19]。有效地破壞乳狀液的穩(wěn)定性，提高出油率及產(chǎn)品品質(zhì)的破乳工藝，是目前國(guó)內(nèi)外水酶法油脂提取的技術(shù)瓶頸。本文開(kāi)展水酶法提取米糠油的酶制劑篩選、酶解工藝及破乳工藝研究，創(chuàng)新米糠油水酶法提取的高效綠色節(jié)能制油技術(shù)，促進(jìn)水酶法制油工藝在植物油脂行業(yè)的推廣與應(yīng)用，實(shí)現(xiàn)米糠高值化利用，具有現(xiàn)實(shí)的理論價(jià)值和實(shí)踐意義。

圖1 水酶法提取米糠油示意圖[14]Fig.1 Principle of extracting rice bran oil by aqueous enzymatic method[14]

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

經(jīng)擠壓膨化保鮮的米糠（水分含量7.43%、脂肪含量18.45%、蛋白質(zhì)含量12.69%）：黑龍江省樺川縣付士米業(yè)有限公司；Celluclast 1.5 L 纖維素酶（酶活力700 EGU/mL），Pectinex Ultra SP-L 果膠酶（酶活力26 000 PG/mL），Viscozyme L 糖酶復(fù)合酶（酶活力100 FBG/g），Alcalase 2.4 L堿性蛋白酶（酶活力2.4 AU/g）：丹麥諾維信公司；Hemicellulase 半纖維素酶（酶活力0.3～3.0 unit/mg）：美國(guó)Sigma 公司。

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 水酶法提取米糠油工藝及提油率測(cè)定

擠壓米糠粉碎過(guò)40 目篩，取100 g 米糠粉，按1∶6（w/v）加入超純水，90 ℃處理5 min 后，在一定的溫度和pH 值條件下，添加2%酶制劑400 r/min 攪拌酶解120 min。經(jīng)10 000 r/min 離心20 min 后得到游離油，按式（1）計(jì)算米糠提油率。

1.2.2 酶制劑的篩選

固定反應(yīng)條件（料液比1∶6、加酶量2%、酶解時(shí)間120 min、攪拌速度400 r/min），考察Celluclast 1.5 L、Hemicellulase、Pectinex Ultra SP-L、Viscozyme L、Alcalase 2.4 L 等4 種糖酶和1 種蛋白酶在酶解適宜條件下（50 ℃、pH 5.0；50 ℃、pH 5.0；50 ℃、pH 5.0；45 ℃、pH 3.4；60 ℃、pH 9.0），米糠提油率的變化。設(shè)置不添加酶制劑的反應(yīng)為對(duì)照組。

考察糖酶與蛋白酶復(fù)配對(duì)米糠提油率的影響。米糠混合液與1%糖酶作用60 min，再與1%Alcalase 2.4 L 作用60 min，其他處理與單一酶制劑處理相同。以添加單一蛋白酶Alcalase 2.4 L 為對(duì)照組。

1.2.3 酶解工藝的優(yōu)化

在單因素試驗(yàn)、Packett-Burman（PB）試驗(yàn)基礎(chǔ)上，以蛋白酶Alcalase 2.4 L 為酶制劑，從料液比、酶解時(shí)間、酶解溫度、加酶量、pH 值、攪拌速度等對(duì)提油率具有影響的因素中，篩選出料液比（A）、酶解時(shí)間（B）、酶解溫度（C）3 個(gè)因素為自變量，米糠提油率（Y）為響應(yīng)值，在加酶量2%，pH 值9.0，攪拌速度300 r/min 條件下設(shè)計(jì)三因素三水平的Box-Behnken 響應(yīng)面分析試驗(yàn)。試驗(yàn)因素及水平如表1 所示。

表1 Box-Behnken 試驗(yàn)因素及水平表Table 1 Box-Behnken experimental design factor level codes

1.2.4 乳狀液的制備與成分檢測(cè)

取100 g 過(guò)40 目篩的膨化米糠粉，按1∶7.5（w/v）料液比加入超純水，90 ℃處理5 min 后冷卻至室溫。添加2%的Alcalase 2.4 L 酶制劑，在pH 值9.0、57 ℃條件下300 r/min 酶解150 min。反應(yīng)結(jié)束后，離心收集乳狀液層。

參照羅紫-哥特里（Rose-Gottieb）法[20]測(cè)定乳狀液中油脂的含量，蛋白質(zhì)及水分的測(cè)定采用國(guó)標(biāo)方法。

1.2.5 破乳工藝的優(yōu)化

以室溫300 r/min 攪拌60 min 為基礎(chǔ)，不同時(shí)間（15、30、45、60、75、90 min）；不同溫度（20、30、40、50、60 ℃），確定乳狀液破乳工藝的基本條件。在優(yōu)化的破乳條件下（60 ℃下攪拌60 min），以未經(jīng)處理的乳狀液為對(duì)照組，分別在不同pH 值（2、3、4.5、5、7、9）、不同CaCl2溶液濃度（0.02、0.04、0.06、0.08、0.1 mol/L）、不同乙醇溶液濃度（10%、20%、30%、40%、50%）下進(jìn)行破乳操作。攪拌結(jié)束后，離心收集游離油層，按式（2）計(jì)算乳狀液的破乳率。

1.2.6 粒徑及表觀狀態(tài)的測(cè)定

經(jīng)破乳處理后的樣品用超純水稀釋10 倍，充分混勻后，應(yīng)用Microtrac S3500 激光粒度分析儀進(jìn)行粒徑分析，設(shè)定油滴的折光指數(shù)（RI）為1.47，分散劑的RI 為1.333。

采用激光共聚焦顯微鏡（CLSM）對(duì)破乳前、后乳狀液的微觀結(jié)構(gòu)進(jìn)行觀察。取2 mL 待測(cè)樣品，分別加入10 μL 的0.01%尼羅藍(lán)A（激發(fā)波長(zhǎng)637 nm）和0.1%尼羅紅（激發(fā)波長(zhǎng)488 nm）[21]，充分搖勻，制片后立即進(jìn)行觀察。

1.2.7 米糠油品質(zhì)的測(cè)定

按照參數(shù)優(yōu)化后的水酶法提取米糠油的工藝，制備水酶法提取米糠毛油。

使用有機(jī)溶劑在索氏抽提器中提取米糠油，經(jīng)減壓蒸發(fā)及氮吹去除殘留溶劑，獲得傳統(tǒng)有機(jī)溶劑法提取米糠毛油。

參考AOCS Official Method 方法測(cè)定油脂的酸價(jià)、碘值、皂化值、過(guò)氧化值、色澤等指標(biāo)。蠟和磷脂含量的測(cè)定參照Pandey 等[22]的方法。采用高效液相色譜法測(cè)定維生素E 含量，氣相色譜法測(cè)定甾醇和角烯鯊含量[23-24]。谷維素含量采用LS/T 6121.1—2017 的方法測(cè)定[25]。

1.3 數(shù)據(jù)分析

所有樣品進(jìn)行三次平行試驗(yàn)，試驗(yàn)結(jié)果表示為平均值±標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD），采用Origin 8.5 軟件和Design-Expert 8.0.6 軟件處理數(shù)據(jù)和繪圖，SPSS 17.0 軟件進(jìn)行顯著性分析，其中不同字母（a、b、c）表示差異顯著（P＜ 0.05）。

2 結(jié)果與分析

2.1 酶制劑的篩選

受稻米品種、產(chǎn)地、加工方式等影響，米糠的化學(xué)組分含量一般波動(dòng)較大。本研究的試驗(yàn)原料來(lái)源于制米車(chē)間，品質(zhì)相對(duì)純凈。

5 種單一酶制劑對(duì)米糠提油率的影響見(jiàn)圖2。由圖2 可知，酶制劑處理的提油率為28.59%～50.37%，無(wú)酶空白對(duì)照組，提油率為 21.30%～40.12%，堿性條件更有利于油脂提取。堿性蛋白酶Alcalase 2.4L 處理組的提油率最高，為50.37%；對(duì)照3（pH 值9.0）的提油率，顯著高于糖酶處理組的提油率。

圖2 單一酶制劑對(duì)提油率的影響Fig.2 Effect of single enzyme on the extraction yield of rice bran oil

Alcalase 2.4 L 提取米糠油的高效結(jié)果與Hanmoungjai 等[26]的結(jié)果一致。蛋白酶作用可破壞細(xì)胞的蛋白網(wǎng)絡(luò)和包圍脂質(zhì)體的蛋白膜，增加蛋白的溶解性，從而釋放出更多的油脂[27-28]。堿性條件更有利于米糠油脂的提取，應(yīng)該與蛋白質(zhì)在堿性條件下的溶解度增加及游離脂肪酸的皂化作用，提高了油脂體在高pH 和低表面張力下的分離效率有關(guān)[29]。

糖酶與蛋白酶（Alcalase 2.4L）復(fù)配對(duì)米糠提油率的影響如圖3 所示。圖3 結(jié)果表明，糖酶和蛋白酶的復(fù)配不能提高米糠提油率。這些糖酶主要是水解纖維素、半纖維素、果膠等細(xì)胞壁的成分，破壞植物細(xì)胞結(jié)構(gòu)的完整性，有利于油脂的聚集[8,18]。由于本研究中選用的米糠原料經(jīng)過(guò)擠壓膨化保鮮處理，細(xì)胞結(jié)構(gòu)已被破壞，因此出現(xiàn)了糖酶對(duì)米糠油脂的釋放和提取影響不顯著的結(jié)果。糖酶復(fù)合酶與蛋白酶復(fù)配使用（Vis 處理組），出現(xiàn)了提油率降低的現(xiàn)象。這應(yīng)該是聚集的油脂更多地進(jìn)入了水酶體系的乳化液中，從而降低了游離油脂的含量造成的。

圖3 酶制劑復(fù)配對(duì)提油率的影響Fig.3 Effect of composite enzyme on the extraction yield of rice bran oil

2.2 酶解工藝的參數(shù)優(yōu)化

Box-Behnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果見(jiàn)表2。對(duì)表2數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸擬合，得到回歸方程：Y=64.99+3.12A+0.84B+1.30C+1.33AB–1.63AC+0.67BC–2.03A2–2.81B2–4.57C2。

表2 Box-Behnken 試驗(yàn)設(shè)計(jì)及結(jié)果Table 2 The design and corresponding results of Box-Behnken experimental

對(duì)模型進(jìn)行方差分析，結(jié)果如表3 所示。由表3 可知，因素A、B、C的影響均極顯著，交互項(xiàng)AB、AC極顯著，BC顯著。

表3 Box-Behnken 試驗(yàn)方差分析Table 3 Analysis of variance for Box-Behnken experimental design

利用數(shù)據(jù)分析軟件擬合水酶法提取米糠油的最優(yōu)條件：料液比1∶7.94，酶解時(shí)間149.86 min，酶解溫度57.02 ℃，理論提油率為66.52%?？紤]到實(shí)際生產(chǎn)操作和成本問(wèn)題，對(duì)參數(shù)進(jìn)行修正：料液比1∶7.5，酶解時(shí)間150 min，酶解溫度57 ℃。進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，得到米糠提油率為66.24%±0.78%，與預(yù)測(cè)值基本一致。

2.3 破乳工藝的研究

水酶法制油后獲得的乳狀液主要成分含量如表4 所示，蛋白質(zhì)約占2.1%，蛋白的存在對(duì)乳狀液的形成和穩(wěn)定起著主要作用[30]；油脂約占50.6%，即乳狀液中一半以上的物質(zhì)是油脂。可見(jiàn)，對(duì)乳狀液的破乳技術(shù)開(kāi)展研究，對(duì)提高水酶法提取米糠油提油率，具有重要意義。

表4 乳狀液的主要成分含量Table 4 Main compositions of the emulsion %

2.3.1 破乳條件的優(yōu)化

破乳時(shí)間對(duì)米糠乳狀液破乳率的影響見(jiàn)圖4。由圖4 可知，隨著破乳時(shí)間延長(zhǎng)，破乳率逐漸提高；當(dāng)破乳時(shí)間超過(guò)60 min 后，破乳時(shí)間增加對(duì)破乳率不會(huì)產(chǎn)生顯著影響。這種破乳率隨時(shí)間變化的規(guī)律與Jung 等[31]的研究結(jié)果一致。

圖4 破乳時(shí)間對(duì)破乳率的影響Fig.4 Effect of demulsification time on the demulsification rate

破乳溫度對(duì)破乳率影響的試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖5。水酶法油脂提取的酶解溫度通常不超過(guò)60 ℃[19]，為節(jié)約能耗，設(shè)定60 ℃為最高破乳溫度。由圖5可知，加熱處理可有效提高乳狀液破乳率，60 ℃處理的破乳率可達(dá)71.23%。溫度升高，可以使乳狀液中粒子的布朗運(yùn)動(dòng)加快，減小乳狀液的粘度，加劇油滴的聚結(jié)，降低乳狀液穩(wěn)定性[32]。

圖5 破乳溫度對(duì)破乳率的影響Fig.5 Effect of demulsification temperature on the demulsification rate

2.3.2 破乳方法的選擇

經(jīng)蛋白酶處理后的乳狀液，初始 pH 值為8.3～8.6。調(diào)節(jié)體系pH 值對(duì)破乳率影響的試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖6。由圖6 可見(jiàn)，酸性條件下，隨pH 值的升高，乳狀液的破乳率逐漸增加，pH 值為7 時(shí)，破乳率達(dá)93.15%；堿性條件下，破乳率與對(duì)照組差異不顯著，均顯著低于酸性處理。

有研究表明，調(diào)節(jié)水酶法提取大豆油的乳狀液pH 值3～4.5 時(shí)，乳狀液可以實(shí)現(xiàn)完全破乳，這是由于乳狀液的 pH 值接近大豆蛋白的等電點(diǎn)（pH=4.5），蛋白質(zhì)發(fā)生聚集，促使油滴析出[33-34]。朱敏敏[35]在水酶法提取番茄籽油破乳工藝研究中發(fā)現(xiàn)，當(dāng)乳狀液pH 值為11 時(shí)，番茄籽的出油率最高。

由此可見(jiàn)，調(diào)節(jié)pH 值破壞水酶法油脂提取乳狀液的穩(wěn)定性，對(duì)于不同油料研究結(jié)果存在明顯差異。這應(yīng)該與油料組成與特性、粉碎方式及酶制劑等差異直接相關(guān)[36]。

CaCl2濃度對(duì)破乳率影響的試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖7。圖7 結(jié)果表明，添加CaCl2溶液沒(méi)有提高米糠乳狀液的破乳率，反而呈現(xiàn)隨CaCl2濃度增加，破乳率減小的變化趨勢(shì)。

乳狀液界面蛋白質(zhì)存在雙電層，可發(fā)生靜電排斥作用，使乳狀液保持穩(wěn)定，油滴無(wú)法聚集。當(dāng)加入CaCl2溶液，解離的Ca2+可以中和蛋白所帶負(fù)電荷，破壞蛋白質(zhì)的雙電層結(jié)構(gòu)，促使油滴間聚集，導(dǎo)致破乳[33]。本研究結(jié)果與前人的研究結(jié)果不一致。原因可能是，Ca2+雖可促使蛋白質(zhì)分子間發(fā)生交聯(lián)，但蛋白質(zhì)交聯(lián)截留了大量油脂，導(dǎo)致破乳率降低[37]；同時(shí)也說(shuō)明，破乳方法對(duì)不同油料乳狀液的破乳效果不盡相同。

添加乙醇對(duì)破乳作用的影響試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖8。如圖8 所示，隨著乙醇濃度的增加，破乳率呈先升高后降低的變化趨勢(shì)。乙醇濃度為20%～30%時(shí)，破乳效果最好，破乳率達(dá)78.3%。

圖8 乙醇濃度對(duì)破乳率的影響Fig.8 Effect of ethanol concentration on the demulsification rate

乙醇屬于水溶性破乳劑，破乳機(jī)理在于乙醇的親水基團(tuán)對(duì)構(gòu)成界面膜的蛋白質(zhì)親水端具有吸附力，從而破壞界面膜的穩(wěn)定性，使乳狀液失穩(wěn)，同時(shí)乙醇能夠使乳狀液中起乳化作用的蛋白質(zhì)變性，實(shí)現(xiàn)乳狀液破乳、釋放油脂的作用[38]。當(dāng)乙醇濃度超過(guò)30%時(shí)，破乳率降低，這可能與乙醇處理使油水兩相界面張力差異逐漸增大，導(dǎo)致破乳率變小有關(guān)[39]。

綜上研究，通過(guò)考察三種破乳方法對(duì)提油率的影響，確定調(diào)節(jié)pH值處理乳狀液為水酶法提取米糠油的破乳工藝。

2.3.3 pH 值對(duì)乳狀液的影響

乳狀液的粒徑大小及分布，可以直觀地反映破乳效果。pH值對(duì)乳狀液粒徑分布影響的試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)圖9。對(duì)照組（未調(diào)節(jié)pH，乳狀液在60℃下破乳處理60 min）的粒徑呈雙峰分布，主要集中在1～10μm 和10～100μm 范圍內(nèi)，且1～10μm油滴占比86.5%±0.67%。這說(shuō)明，對(duì)照組乳狀液中油滴較小且分布不均勻。隨著pH 升高，乳狀液中小油滴聚集、粒徑增大，破壞了乳狀液的穩(wěn)定性，粒徑呈單峰分布。

圖9 pH 值對(duì)乳狀液粒徑分布的影響Fig.9 Effect of pH value on particle size distribution of the emulsion

pH 值對(duì)乳狀液平均粒徑的影響見(jiàn)圖10。圖10 平均粒徑大小的數(shù)據(jù)圖可以更直觀地比較各樣品形態(tài)。未經(jīng)處理的對(duì)照組，平均粒徑最小，乳化液穩(wěn)定性好；酸性條件下，隨pH 值升高平均粒徑不斷增大，pH值7時(shí)，平均粒徑達(dá)到最大。結(jié)合圖4研究結(jié)果可知，乳狀液的平均粒徑與破乳率呈正相關(guān)。堿性條件下，乳狀液的平均粒徑顯著小于酸性處理的樣品，乳狀液穩(wěn)定性較好。粒徑分布結(jié)果同樣表明，堿性條件不利于水酶法提取米糠油乳狀液的破乳。

圖10 pH 值對(duì)乳狀液平均粒徑的影響Fig.10 Effect of pH value on mean particle size of the emulsion

乳狀液經(jīng)尼羅紅和尼羅藍(lán)A 染色后，通過(guò)CLSM觀察到的微觀結(jié)構(gòu)及樣品表觀形態(tài)示意圖見(jiàn)圖11。a 圖和b圖可清晰看到乳狀液中呈綠色油相和紅色蛋白相的分布情況。a 圖初始乳狀液的小油滴分布均勻，同時(shí)表面被一層蛋白界面膜包裹。當(dāng)調(diào)節(jié)pH 值7進(jìn)行破乳處理后（b圖），油滴表面的蛋白膜被破壞，小油滴聚集為大油滴，粒徑明顯增大。c圖為酶解后離心去除游離油的乳狀液樣品表觀形態(tài)，d 圖可清楚地看到乳狀液經(jīng)過(guò)破乳離心后獲得游離油的狀態(tài)。

圖11 破乳前后乳狀液微觀結(jié)構(gòu)及表觀狀態(tài)Fig.11 Microstructure and photographs of emulsion before and after demulsification

通過(guò)以上研究，確定水酶法提取米糠油最適工藝為，膨化米糠粉碎過(guò)40目篩，按1∶7.5（w/v）料液比加入超純水，90℃處理5 m in 后冷卻至57℃，添加2%的A lcalase 2.4 L 蛋白酶，在pH值9.0條件下300 r/m in 酶解150m in，1 000 r/m in離心20m in 后收集游離油層和乳狀液層。調(diào)節(jié)乳狀液pH值7.0，60℃下300 r/m in 攪拌60m in 破乳后，再次離心收集游離油層。此工藝獲得米糠提油率可以達(dá)到84.1%以上。

2.3.4米糠毛油的品質(zhì)

未經(jīng)精練處理的水酶法與傳統(tǒng)有機(jī)溶劑法提取米糠毛油的理化指標(biāo)見(jiàn)表5所示。由表5可以看出，水酶法提取的米糠毛油酸值略低，但二者差異不顯著；過(guò)氧化值較低，碘值、皂化值較高，油色較淺。蠟質(zhì)和磷脂含量，水酶法提取的米糠毛油明顯較低；生物活性物質(zhì)（維生素E、甾醇、角烯鯊和谷維素等）含量，則顯著高于有機(jī)溶劑法提取的米糠毛油。

表5 水酶法與有機(jī)溶劑法提取米糠毛油的品質(zhì)指標(biāo)Tab le 5 Physicochemical properties of rice bran oil obtained by aqueous enzymatic extraction and solvent extraction

可見(jiàn)，水酶法提取的米糠毛油具有較好的品質(zhì)，其開(kāi)發(fā)利用前景十分廣闊。

3結(jié)論

本研究開(kāi)展了水酶法提取米糠油的工藝研究。通過(guò)酶制劑的篩選，確定A lcalase 2.4 L 蛋白酶為水酶法提取米糠油的酶制劑；糖酶無(wú)法提高擠壓米糠原料的提油率；堿性條件更有利于米糠油脂的提取。通過(guò)優(yōu)化酶解工藝參數(shù)，在1∶7.5料液比、2%加酶量、57℃、pH 值9.0、300 r/min攪拌酶解150 m in 條件下，可獲得66.2%的米糠提油率。通過(guò)乳狀液的破乳條件和破乳方法研究，確定水酶法提取米糠油乳狀液的最佳破乳工藝：調(diào)節(jié)乳狀液pH 值至7.0，60℃條件下300 r/m in攪拌60 m in，破乳率可達(dá)93.15%；堿性條件及CaCl2處理，無(wú)助于水酶法提取米糠油乳狀液的破乳；20%～30%乙醇處理，可提高乳狀液的破乳率。應(yīng)用本研究創(chuàng)制的水酶法提取米糠油工藝，可獲得84.1%以上提油率的米糠毛油，毛油品質(zhì)特別是生物活性物質(zhì)的含量，明顯優(yōu)于傳統(tǒng)溶劑法提取米糠毛油。