■李園園 鄔乃霞 黃 靖 周潔蕊 盧世杰 馬忠文 李紅美 吳紅翔*
(1.江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)技術(shù)學(xué)院,江西南昌 330045;2.江西省九江市柴桑區(qū)農(nóng)業(yè)農(nóng)村局,江西九江 332100)
隨著目前一系列限抗政策的出臺(tái),人們?cè)絹?lái)越希望尋求一種安全無(wú)害能替代抗生素類物質(zhì)的日糧添加劑。因此,有許多學(xué)者已經(jīng)開始著手對(duì)此進(jìn)行研究。目前,國(guó)際公認(rèn)的能代替抗生素作為日糧添加劑的主要有益生素和中草藥等。我國(guó)每年都會(huì)生產(chǎn)大量的蘋果,在加工蘋果的過(guò)程中會(huì)形成大量的蘋果渣[1-2]。這些蘋果渣經(jīng)過(guò)一些處理,可以成為有效的日糧添加劑。蘋果渣發(fā)酵飼料,是以蘋果渣為主要基質(zhì),并在適宜的營(yíng)養(yǎng)、溫度、濕度、pH、通氣(或厭氧)等條件下,通過(guò)有益微生物在基質(zhì)中的大量繁殖生長(zhǎng)而將基質(zhì)中的無(wú)機(jī)氮轉(zhuǎn)化為菌體自身的有機(jī)氮(蛋白質(zhì)),其發(fā)酵最終的產(chǎn)物就是蘋果渣菌體飼料。Sudha等[3]認(rèn)為蘋果渣中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),如果沒(méi)有合理利用這些蘋果渣將會(huì)造成資源浪費(fèi)和環(huán)境污染。劉倩男等[4]研究發(fā)現(xiàn),經(jīng)蘋果渣發(fā)酵后制成的蛋白飼料,可以降低飼喂成本,增加經(jīng)濟(jì)效益。利用微生物發(fā)酵蘋果皮渣生產(chǎn)單細(xì)胞蛋白飼料可大幅度提高蘋果皮渣中蛋白質(zhì)、脂肪等營(yíng)養(yǎng)元素的含量[5-6]。中草藥具有促進(jìn)畜禽生長(zhǎng)和調(diào)節(jié)畜禽機(jī)體代謝及免疫的作用,可為畜禽生長(zhǎng)提供一定的營(yíng)養(yǎng)成分,具有替代抗生素成為新型日糧添加劑的潛質(zhì)。目前,發(fā)酵蘋果渣和中草藥作為日糧添加劑單獨(dú)使用的研究很多,但將兩者一起配合使用的相關(guān)研究較少。本研究旨在探究日糧添加發(fā)酵蘋果渣和中草藥對(duì)鵪鶉生產(chǎn)性能、屠宰性能、肌肉品質(zhì)及血清生化指標(biāo)的影響,為這類日糧添加劑應(yīng)用到實(shí)際生產(chǎn)中提供理論依據(jù)。
選取180日齡鵪鶉300羽,隨機(jī)分成4組,每組3個(gè)重復(fù),每個(gè)重復(fù)25羽,每個(gè)重復(fù)之間體重接近。對(duì)照組飼喂不添加發(fā)酵蘋果渣和中草藥的基礎(chǔ)日糧,基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平參照NRC(1994)營(yíng)養(yǎng)需要配制,見(jiàn)表1。根據(jù)江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)科院動(dòng)物健康與安全生產(chǎn)實(shí)驗(yàn)室前期對(duì)益生素和中草藥的研究結(jié)果,最終擬定最佳添加量,對(duì)照組飼喂基礎(chǔ)日糧(Ⅳ組),試驗(yàn)組在基礎(chǔ)日糧基礎(chǔ)上分別添加0.3%發(fā)酵蘋果渣(Ⅰ組)、0.15%發(fā)酵蘋果渣和0.15%中草藥(Ⅱ組)、0.3%中草藥(Ⅲ組)。試驗(yàn)期45 d。各組均自由采食、飲水,分籠飼養(yǎng)。在此期間按照正常免疫程序免疫預(yù)防,同時(shí)做好夜間保溫工作。
表1 基礎(chǔ)日糧組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))
發(fā)酵蘋果渣:蘋果渣85%,麩皮15%,嗜酸乳桿菌、酵母菌、放線菌的菌配比為1∶1∶0.5,總接種量15%,發(fā)酵溫度30 ℃,物料水分約為65%,pH 6.5,裝于500 mL三角瓶中,密閉發(fā)酵72 h,65 ℃恒溫干燥至恒重,室溫保存,發(fā)酵后蘋果渣風(fēng)干樣的營(yíng)養(yǎng)成分含量:粗蛋白(20.20±0.50)%、粗脂肪(5.2±0.80)%、粗纖維(12.6±2.20)%、粗灰分(3.51±0.30)%、鈣(0.16±0.03)%、總磷(0.09±0.02)%。
中草藥添加劑:松針、黃芪(均購(gòu)置于江西農(nóng)業(yè)大學(xué)校醫(yī)院中藥房)。中藥除去雜質(zhì)后按比例混合均勻,過(guò)60 目篩粉碎,裝袋密封于陰冷干燥處貯藏備用。
主要儀器設(shè)備:分析天平、攪碎機(jī)、發(fā)酵罐、恒溫干燥箱、C-LM3 型數(shù)顯式肌肉嫩度儀、WW-2A 型應(yīng)變式無(wú)側(cè)限壓儀、恒溫水浴鍋等。
1.3.1 生產(chǎn)性能
試驗(yàn)期間,每天記錄每個(gè)重復(fù)的采食量、總蛋重,計(jì)算平均日采食量、蛋重、產(chǎn)蛋率、料蛋比。
平均日采食量(g)=[投料量(g)-回收料量(g)]/試驗(yàn)動(dòng)物總數(shù)(只)
蛋重(g)=總產(chǎn)蛋重(g)/總產(chǎn)蛋數(shù)(枚)
產(chǎn)蛋率(%)=產(chǎn)蛋數(shù)(枚)/試驗(yàn)動(dòng)物數(shù)量(只)×100
料蛋比=日采食量(g)/[蛋重(g)×產(chǎn)蛋率(%)]
1.3.2 屠宰性能的測(cè)定試驗(yàn)結(jié)束后,禁食12 h,每組重復(fù)隨機(jī)抽取9 只接近平均體重健康狀況良好的鵪鶉,先記錄稱重,之后按照楊寧[7]主編的《家禽生產(chǎn)學(xué)》中的方法測(cè)定鵪鶉的屠宰率、半凈堂率、全凈堂率、胸肌率。
1.3.3 肌肉品質(zhì)的測(cè)定
將屠宰后的鵪鶉分離胸肌,按照周貴等[8]主編的《畜禽生產(chǎn)學(xué)實(shí)驗(yàn)教程方法》測(cè)定鵪鶉的肌肉嫩度、系水率、熟肉率及滴水損失。
1.3.4 血清指標(biāo)的測(cè)定
試驗(yàn)結(jié)束后,禁食12 h,每組重復(fù)隨機(jī)抽取9 只接近平均體重、健康狀況良好的鵪鶉,翅靜脈采血1.5 mL,靜置1 h后,放于離心機(jī)中以2 500 r/min的轉(zhuǎn)速離心15 min,吸取血清上清液分裝于200 μL 的EP管中,置于-20 ℃冰箱冷藏保存,用于血清生化生理指標(biāo)的測(cè)定。血清生化測(cè)定試劑盒均為南京建成生物工程研究所產(chǎn)品,具體操作按說(shuō)明書進(jìn)行。血尿素氮:采用二乙?!鄯?。白蛋白:采用溴甲酚綠比色法??偟鞍祝翰捎秒p縮脲法。葡萄糖:采用葡萄糖氧化酶法。
血清生理指標(biāo):采用全自動(dòng)血液細(xì)胞分析儀(邁瑞B(yǎng)C-2800,深圳)測(cè)定血清中白細(xì)胞數(shù)(WBC)、紅細(xì)胞數(shù)(RBC)、血紅蛋白濃度(HGB)、紅細(xì)胞壓積(HCT)、平均紅細(xì)胞體積(MCV)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白含量(MCH)、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度(MCHC)。
試驗(yàn)數(shù)據(jù)用Excel 2010 進(jìn)行初步分析,采用SPSS 20.0 軟件進(jìn)行單因子方差分析(one-way ANO?VA),用LSD 方法進(jìn)行多重比較,試驗(yàn)數(shù)據(jù)用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示,P<0.05 為差異顯著,P>0.05 為差異不顯著。
表2 發(fā)酵蘋果渣和中草藥對(duì)鵪鶉生產(chǎn)性能的影響
由表2可知,與對(duì)照組相比,試驗(yàn)Ⅱ組的蛋重顯著提高(P<0.05),相較于對(duì)照組提高9.75%(P<0.05)。
表3 發(fā)酵蘋果渣和中草藥對(duì)鵪鶉屠宰性能的影響
由表3 可知,與對(duì)照組相比,Ⅱ組的屠宰率顯著提高(P<0.05),其余指標(biāo)均有所提高,但差異不顯著(P>0.05)。
由表4 可知,與對(duì)照組相比,Ⅰ組和Ⅱ組的系水率顯著提高(P<0.05),3 個(gè)試驗(yàn)組的其他各項(xiàng)指標(biāo)均有所改善,但差異不顯著(P>0.05)。
表4 發(fā)酵蘋果渣和中草藥對(duì)鵪鶉肌肉品質(zhì)的影響
由表5 可知,與對(duì)照組相比,Ⅰ組和Ⅱ組鵪鶉血清中總蛋白、球蛋白以及血尿素氮的含量顯著增加(P<0.05);Ⅱ組鵪鶉血清中白蛋白的含量顯著增加(P<0.05),而血糖量顯著降低(P<0.05);Ⅲ組鵪鶉血清中堿性磷酸酶含量顯著增加(P<0.05)。
表5 發(fā)酵蘋果渣和中草藥對(duì)鵪鶉血清指標(biāo)的影響
與對(duì)照組相比,Ⅱ組的平均紅細(xì)胞體積、紅細(xì)胞血紅蛋白含量及平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度顯著提高(P<0.05),分別較對(duì)照組提高了5.01%、12.26%、6.95%(P<0.05);Ⅲ組的血紅蛋白濃度顯著提高(P<0.05),較對(duì)照組提高11.79%(P<0.05)。
齊紅杰[9]在蛋雞的日糧中添加發(fā)酵蘋果渣,發(fā)現(xiàn)其可以提高蛋雞的產(chǎn)蛋率及產(chǎn)蛋量,降低料蛋比。楊鎮(zhèn)瑋等[10]報(bào)道,在日糧中添加5%的松針?lè)?,能顯著改善竹絲蛋雞的產(chǎn)蛋量。王昌業(yè)[11]在蛋雞日糧中添加一定比例的黃芪多糖,發(fā)現(xiàn)其可以提高蛋雞的平均日采食量及平均蛋重。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,單一添加發(fā)酵蘋果渣或中草藥時(shí),對(duì)鵪鶉的生產(chǎn)性能影響不顯著,但當(dāng)兩者同時(shí)添加時(shí),可以顯著提高鵪鶉的蛋重(P<0.05)。說(shuō)明發(fā)酵蘋果渣與中草藥兩者發(fā)生了協(xié)同作用,發(fā)酵蘋果渣中有大量的有益菌可以產(chǎn)生多種酶,進(jìn)而促進(jìn)中藥成分的分解吸收。而中草藥添加劑中含有多糖等生物活性物質(zhì),會(huì)促進(jìn)蛋白質(zhì)維生素類物質(zhì)的吸收。在兩者的共同作用下,鵪鶉的蛋重得到提高。
張?chǎng)螛s等[12]發(fā)現(xiàn),在日糧中添加發(fā)酵蘋果渣可以有效增加獺兔的全凈膛重和半凈膛重。韋宗海等[13]研究發(fā)現(xiàn),松針提取物能顯著提高優(yōu)質(zhì)型青腳麻雞的屠宰性能。熊春梅等[14]研究發(fā)現(xiàn),松針?lè)劭梢悦黠@提高肉雞的屠宰率。李麗等[15]認(rèn)為,黃芪多糖可以提高半番鴨的屠宰性能。本試驗(yàn)結(jié)果顯示,發(fā)酵蘋果渣與中草藥單一添加時(shí)對(duì)屠宰性能的影響不顯著,但都有所增加,當(dāng)兩者同時(shí)添加時(shí),能顯著提高鵪鶉的屠宰率(P<0.05)。
畜禽肉質(zhì)的持水性能直接關(guān)系到肌肉的質(zhì)地、風(fēng)味和組織狀態(tài),具有重要的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。高系水力表明水分不易滲出,對(duì)維持肌肉的嫩度、多汁性十分有利,與熟肉率呈正相關(guān)。如果肌肉的持水性能差,那么肌肉會(huì)在畜禽屠宰后的一系列加工過(guò)程中因失水而失重,造成較大經(jīng)濟(jì)損失,且肌肉的口感風(fēng)味也會(huì)受影響。鄭建婷等[16]研究發(fā)現(xiàn),日糧中添加蘋果渣對(duì)斷奶幼兔的肌肉品質(zhì)影響不顯著。Fang等[17]研究發(fā)現(xiàn),在日糧中添加蘋果渣混合青貯日糧飼喂育肥豬,可以增加育肥豬肌肉的含水量,但卻降低了肌肉的系水力。Lee等[18]研究發(fā)現(xiàn),在育肥豬日糧中添加發(fā)酵蘋果渣,可以改善育肥豬的肌肉品質(zhì)。姜賀等[19]研究發(fā)現(xiàn),在日糧中添加由黃芪粉、刺五加粉和松針?lè)壑瞥傻膹?fù)合中草藥制劑,可以改善蘆花雞的肌肉品質(zhì)。陸海英等[20]研究發(fā)現(xiàn),松針提取物能改善廣西麻雞的肌肉品質(zhì),但差異不顯著。王夢(mèng)迪等[21]研究發(fā)現(xiàn),在日糧中添加黃芪多糖對(duì)獺兔后腿肌的滴水損失、蒸煮損失和熟肉率等肉品質(zhì)指標(biāo)無(wú)顯著影響。本試驗(yàn)結(jié)果表明,單一添加發(fā)酵蘋果渣與混合添加發(fā)酵蘋果渣和中草藥時(shí)可以顯著提高鵪鶉肌肉中的系水率(P<0.05),同時(shí)可以改善肌肉的熟肉率和滴水損失。這說(shuō)明發(fā)酵蘋果渣與兩者混合添加組對(duì)鵪鶉肉中自由水含量和存在狀態(tài)有改善的作用,使水分不易滲出。
血清生化指標(biāo)可以較為直觀地反映出畜禽體內(nèi)的新陳代謝水平[22]??偟鞍?、白蛋白和尿素氮等血清生化指標(biāo)可以準(zhǔn)確反映動(dòng)物體內(nèi)的蛋白質(zhì)代謝情況以及日糧中氨基酸平衡的狀況[23]。高印等[24]研究發(fā)現(xiàn),在日糧中添加6%益生菌發(fā)酵蘋果渣可以明顯升高血清中的總蛋白含量和白蛋白含量。本試驗(yàn)結(jié)果表明,添加發(fā)酵蘋果渣可以顯著性提高鵪鶉血清中總蛋白、球蛋白和血尿素氮的含量(P<0.05),當(dāng)與中草藥同時(shí)添加時(shí)效果更好??偟鞍缀颓虻鞍缀可哒f(shuō)明發(fā)酵蘋果渣可以促進(jìn)鵪鶉體內(nèi)的蛋白質(zhì)代謝;血尿素氮含量升高,表明機(jī)體內(nèi)蛋白質(zhì)合成減弱,進(jìn)而使得氮沉積減少。球蛋白占總蛋白的比例較大,而球蛋白又是由單核巨噬細(xì)胞產(chǎn)生,當(dāng)機(jī)體循環(huán)抗體水平升高時(shí),血清球蛋白數(shù)量增加,引起總蛋白含量上升。說(shuō)明體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝加強(qiáng),血清中充足的白蛋白和總蛋白有利于促進(jìn)動(dòng)物的生長(zhǎng);并有利于氨基酸的消化和吸收。當(dāng)發(fā)酵蘋果渣與中草藥一同添加時(shí),球蛋白含量高說(shuō)明抗體水平提高了,這是由于中藥含有多糖、生物堿、皂苷等不同的免疫活性物質(zhì)。血清尿素氮反映了動(dòng)物體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝和日糧氨基酸平衡狀況,蛋白質(zhì)代謝良好時(shí),血漿尿素氮濃度降低。Ⅰ組血清尿素氮顯著提高,說(shuō)明發(fā)酵蘋果渣使蛋白分解代謝加強(qiáng),組織和血液中總蛋白增加,導(dǎo)致其分解產(chǎn)物尿素氮增多。攝入過(guò)多的蛋白質(zhì)或蛋白質(zhì)中氨基酸不平衡時(shí),則血清尿酸(或尿素氮)濃度增加[25],Ⅱ組血清總蛋白含量高,血清尿素氮也高,表明兩者呈正相關(guān),日糧蛋白高,導(dǎo)致了血清總蛋白含量和血清尿素氮含量提高。
本試驗(yàn)結(jié)果表明,添加松針?lè)酆忘S芪粉制成的復(fù)合中草藥組可顯著增加鵪鶉血清中堿性磷酸酶(AKP)活性(P<0.05),對(duì)其余血清生化指標(biāo)影響雖然不顯著(P>0.05),但卻能提高血清中的總蛋白、白蛋白以及葡萄糖的含量,降低血清中球蛋白和血尿素氮的含量。血清中堿性磷酸酶活性升高、血尿素氮含量的下降表明鵪鶉體內(nèi)蛋白質(zhì)合成的增強(qiáng)。血清堿性磷酸酶在機(jī)體代謝過(guò)程中起著非常重要的作用,水解磷酸單酯、磷酸核苷以及6-磷酸糖等類似化合物可被其催化。它的活性高低能較準(zhǔn)確地反映機(jī)體的成骨活動(dòng),代謝的強(qiáng)度及生產(chǎn)性能等[26]。3 個(gè)試驗(yàn)組的血清堿性磷酸酶活性均高于對(duì)照組,說(shuō)明發(fā)酵蘋果渣與中草藥及兩者的混合物都能加強(qiáng)成骨活動(dòng)、代謝的強(qiáng)度及生產(chǎn)性能。近來(lái)很多研究發(fā)現(xiàn)雞血清堿性磷酸酶活性的高低與產(chǎn)蛋性能有正相關(guān)[27]。飼喂發(fā)酵蘋果渣、中草藥添加劑的鵪鶉的血液中的堿性磷酸酶的含量都在正常值內(nèi)顯著增加,可間接說(shuō)明試驗(yàn)組產(chǎn)蛋性能高。
本試驗(yàn)的血糖數(shù)據(jù)在劉珍清[28]測(cè)得正常鵪鶉血清血糖范圍內(nèi),發(fā)酵蘋果渣與中草藥單獨(dú)使用時(shí)提高了血清葡萄糖濃度,血清葡萄糖的來(lái)源主要是飼料中的糖類被消化進(jìn)入血液,血液中葡萄糖含量是由胰島素的合成代謝和糖原、兒茶酚胺、腎上腺皮質(zhì)激素的分解代謝來(lái)決定。中草藥中所含黃酮類、萜烯類具有促進(jìn)外源性葡萄糖合成肝糖原和雙向調(diào)節(jié)血糖的作用。一方面促進(jìn)糖原異生,另一方面促進(jìn)糖原分解、使血糖升高。有益菌產(chǎn)生的能消化多糖的半乳糖苷酶和葡萄糖苷酶的活性高,因而單獨(dú)添加組的血糖相應(yīng)提高,本次試驗(yàn)中發(fā)酵蘋果渣與中草藥混合添加時(shí),鵪鶉血液中的血糖濃度可保持較低水平。李亞杰等[29]用益生菌和黃芪多糖的合生元飼養(yǎng)仔雞后,試驗(yàn)組血糖含量均較對(duì)照組降低,與本研究Ⅱ組結(jié)果一致,說(shuō)明蘋果渣發(fā)酵飼料與中草藥配伍后,促進(jìn)肝臟轉(zhuǎn)化以及組織細(xì)胞利用葡萄糖的能力[30]。
血細(xì)胞結(jié)果生理值是反應(yīng)機(jī)體健康狀況的主要指標(biāo),可根據(jù)這些指標(biāo)診斷疾病。本試驗(yàn)測(cè)得的血常規(guī)指標(biāo)與龐有志等[31]文章中對(duì)蛋用鵪鶉血液生理學(xué)參數(shù)大致相同,白細(xì)胞在臨床醫(yī)學(xué)主要用于判斷動(dòng)物體健康狀況,與動(dòng)物機(jī)體的免疫反應(yīng)相關(guān),主要抵御細(xì)菌、病毒等病原體的侵入。WBC 計(jì)數(shù)升高的程度取決于感染的范圍、嚴(yán)重程度和機(jī)體的反應(yīng)能力,本試驗(yàn)中Ⅱ組WBC降低,說(shuō)明兩者配伍使用,可使炎癥入侵程度降低,增強(qiáng)抗感染力。
紅細(xì)胞數(shù)、血紅蛋白濃度、紅細(xì)胞壓積指標(biāo)主要用來(lái)判斷有無(wú)貧血及貧血的程度,三者降低即貧血,三者增高主要見(jiàn)于各種原因引起的骨髓代償性增生或血液濃縮,會(huì)引起全血黏度增高,易引起機(jī)體血栓。本試驗(yàn)中Ⅱ組紅細(xì)胞數(shù)目最低,紅細(xì)胞血紅蛋白含量最高,且Ⅱ組提高了紅細(xì)胞血紅蛋白含量。血紅蛋白含量表示動(dòng)物的載氧能力,說(shuō)明發(fā)酵蘋果渣與中草藥配合能提高紅細(xì)胞載氧能力,較單獨(dú)使用時(shí)起了很好的協(xié)同作用,促進(jìn)機(jī)體新陳代謝。
日糧中添加發(fā)酵蘋果渣與松針?lè)酆忘S芪粉制成的復(fù)合中草藥能改善鵪鶉的生產(chǎn)性能、屠宰性能、肌肉品質(zhì)及血清指標(biāo)。