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    白及化學成分、藥理作用和白及多糖提取工藝的研究進展

    2021-10-11 01:59:22孔偉華徐建波崔琦盛振華袁強張春椿李石清
    中醫(yī)藥信息 2021年9期
    關(guān)鍵詞:白及類化合物衍生物

    孔偉華,徐建波,崔琦,盛振華,袁強,張春椿,李石清*

    (1.浙江中醫(yī)藥大學藥學院,浙江 杭州 310053;2.浙江中醫(yī)藥大學中醫(yī)藥科學院,浙江 杭州 310053)

    白及,別名白及子、白及粉等,屬多年生陸地蘭科草本植物,多分布于我國西南三省地區(qū)山野、山谷等比較潮濕的地方,另外在東南沿海的安徽、浙江、江蘇等地也有少量分布。野生白及在全球分布較少,除我國外,僅見于日本、朝鮮半島及緬甸等。白及性微寒,味苦、甘、澀,歸肺、肝、胃經(jīng),收斂止血,消腫生肌,多用于外傷出血、吐血、咯血、瘡瘍腫毒、皮膚皸裂等,應(yīng)用前景良好。為進一步研究白及,開發(fā)新藥,為臨床應(yīng)用創(chuàng)新等方面提供科學依據(jù),本文從化學成分、藥理作用和其主要活性成分白及多糖(Bletilla striata polysaccharide,BSP)的提取工藝三個方面對白及的研究進展進行了綜述。發(fā)現(xiàn),白及的主要化學成分有氨基酸、螺環(huán)烷甾類皂苷、聯(lián)芐衍生物、聯(lián)芐類、類胡蘿卜素、二氫菲呋喃類、糖苷、菲類、蒽醌類等;主要發(fā)揮了止血、免疫調(diào)節(jié)、促進傷口愈合、抗菌、抗炎、抗腫瘤、抗氧化、抗?jié)?、促進造血、抗病毒等藥理活性;以傳統(tǒng)回流提取法為主的溶劑提取法在BSP提取純化中應(yīng)用最廣,超聲法、微波法、酶法等也有一定的應(yīng)用。

    1 化學成分

    1.1 氨基酸

    吳德喜等[1]通過氨基酸自動分析儀,按照GB/T5009.124—2003 的方法檢測云南昆明不同藥店的野生白及A、B和樣品白及假鱗莖中的氨基酸含量,結(jié)果如表1所示。根據(jù)測定結(jié)果來看,白及中含有18種總氨基酸,17種游離氨基酸,但是并沒有胱氨酸、蛋氨酸和脯氨酸存在的跡象。研究推定,人工種植的白及由于追求最大化的產(chǎn)量,導(dǎo)致使其生長過快,而自然狀態(tài)下生長緩慢,其氨基酸含量明顯較人工種植的白及高。

    表1 氨基酸測定結(jié)果比較

    1.2 螺環(huán)烷甾類皂苷

    WANG 等[2]在白及中發(fā)現(xiàn)了4 個新的螺環(huán)烷甾類皂苷:(1α,3α)-1-O-[(β-D 吡喃并吡喃糖基-(1→2)-α-L鼠李糖吡喃糖基)]-3-OD-吡喃葡糖基-5α 螺旋體(1),(1α,3α)-1-O-[(β-D-吡喃并吡喃糖基-(1→2)-α-L-鼠李糖吡喃糖基)氧基]-3-OD-吡喃吡喃糖基-25(27)-烯-5α-螺旋素(2),(1α,3α)-1-O-[(β-D-吡喃吡喃糖基-(1→2)-α-L-鼠李糖基吡喃糖基)氧基]-表皮生成素(3)和(1α,3α)-1-O-[(β-D-吡喃糖基-(1→2)-α-L-鼠李糖基吡喃糖基)氧基]-腎上腺皮質(zhì)激素(4)。在后續(xù)的工作中,從白及乙醇提取物中分離出了兩種已知的化合物:bletilnoside A(5)和3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-3-epi-neususcogenin(6),結(jié)構(gòu)圖見圖1。同時在體外測試了分離的化合物對7 種腫瘤細胞系的細胞毒性、對環(huán)氧化酶1、2(Cox-1、Cox-2)的抗炎活性以及止血活性。實驗結(jié)果顯示化合物1~4和6 對所有測試的腫瘤細胞系均表現(xiàn)出顯著的細胞毒性,同時化合物1~6均顯示出止血活性。

    圖1 螺環(huán)烷甾類皂苷結(jié)構(gòu)式

    1.3 聯(lián)芐衍生物

    JIANG 等[3]從白及的根莖中分離出10種先前未描述的聯(lián)芐衍生物Bletistrins A~J,其中有5 個手性化合物在脂肪族聯(lián)芐橋上有-OH 取代,另外還有12 種已知的聯(lián)芐衍生物。他們應(yīng)用NMR 得到了1D 與2D NMR 數(shù)據(jù),經(jīng)過分析后闡明了Bletistrins A~J的結(jié)構(gòu),并且通過電子圓二色性(electrostatic circular dichroism,ECD)光譜分析和旋光度值確定了Bletistrins A、D、F、H 和I 的絕對構(gòu)型。分離出來的聯(lián)芐衍生物的結(jié)構(gòu)見圖2。

    圖2 聯(lián)芐衍生物Bletistrins結(jié)構(gòu)式

    JIANG 等[4]從白及塊根中發(fā)現(xiàn)3 種新的聯(lián)芐衍生物,應(yīng)用了NMR 光譜,新化合物的結(jié)構(gòu)經(jīng)由1D 與2D NMR數(shù)據(jù)的分析得到闡明。除此之外在白及塊根中還發(fā)現(xiàn)了18種已知的化合物,所有化合物的結(jié)構(gòu)見圖3。

    圖3 聯(lián)芐衍生物結(jié)構(gòu)式

    1.4 聯(lián)芐類

    LI 等[5]通過各種色譜技術(shù)分離乙酸乙酯(EtOAc)萃取液,從黃花白及根莖中發(fā)現(xiàn)了10 種新發(fā)現(xiàn)的等聚聯(lián)芐基(41~46)和菲(47~50)以及11 種已知的天然產(chǎn)物,新發(fā)現(xiàn)的化合物中包括了6 種聯(lián)芐類化合物和4 種菲衍生物。分離出的化合物的結(jié)構(gòu)表征通過光譜分析得到了闡明。見圖4。

    圖4 6種聯(lián)芐類化合物和4種菲類衍生物結(jié)構(gòu)式

    1.5 類胡蘿卜素

    KANG 等[6]在白及中分離出來了兩種新的類胡蘿卜素(62,63),這兩種類胡蘿卜素的結(jié)構(gòu)經(jīng)由分析光譜數(shù)據(jù)得到了闡明,見圖5。

    圖5 兩種新的類胡蘿卜素結(jié)構(gòu)式

    1.6 糖苷

    ZHAO 等[7]從白及塊根中分離出了1 種新的糖苷Bletilloside A(64),此糖苷的結(jié)構(gòu)通過廣泛的光譜分析得到了確定。見圖6。

    圖6 新的糖苷Bletilloside A 結(jié)構(gòu)式

    1.7 蒽醌類

    SUN 等[8]從白及中分離出了兩種具有抗癌活性的新蒽醌,分別是7-羥基-2-甲氧基菲-3,4-二酮(65)和3′,7′,7-三羥基-2,2′,4′-三甲氧基-[1,8′-聯(lián)菲]-3,4-二酮(66),結(jié)構(gòu)見圖7。這些化合物對人類癌細胞系具有很強的抗增殖作用,并會在作用于A549細胞24 h后,誘導(dǎo)產(chǎn)生活性氧(ROS)。對A549細胞系進行細胞周期分析,結(jié)果表明化合物65和66能誘導(dǎo)G0/G1 期停滯,并伴有S 期減少。這些結(jié)果證明了ROS的產(chǎn)生可導(dǎo)致癌細胞凋亡,表明了化合物65和66是體外和體內(nèi)治療癌癥的良好候選者,未來的研究應(yīng)基于這兩種化合物的精確分子作用機制進行研究。

    圖7 兩個新蒽醌結(jié)構(gòu)式

    1.8 二氫菲呋喃類

    LI 等[9]從黃花白及的根莖中分離得到了4 種新的二氫菲呋喃類化合物(67~70),以及21 種已知化合物,包括了菲類衍生物(71~80)和聯(lián)芐類化合物(81~91)。他們結(jié)合了1D/2D NMR 技術(shù)和基于經(jīng)驗螺旋度規(guī)則的ECD 光譜,確定了這些分離物的化學結(jié)構(gòu)見圖8。他們還通過MTS 分析評估了所有化合物對HL-60、SMMC-7721、A-549、MCF-7 和SW480 人癌細胞系的細胞毒性和在脂多糖(LPS)刺激的RAW 264.7巨噬細胞中產(chǎn)生一氧化氮(NO)的抗炎活性。根據(jù)細胞毒性測定結(jié)果表明,大多數(shù)化合物對5 種腫瘤細胞系均具有細胞毒活性。其中,化合物67 對HL-60、A-549 和MCF-7 表現(xiàn)出最強的活性,IC50值為(0.24±0.03)~(3.51±0.09)μmol/L。抗炎試驗表明,化合物76 的IC50為(2.86 ± 0.17)μmol/L,在RAW 264.7巨噬細胞中表現(xiàn)出最大的抗NO活性。

    圖8 氫菲呋喃類化合物結(jié)構(gòu)式

    1.9 菲類

    SHI等[10]從藥用植物白及中分離并鑒定了12種菲類化合物。他們將與病毒混合的菲類化合物通過尿囊途徑接種到雞蛋中,以觀察在其體內(nèi)的抗病毒活性,并且通過血凝抑制試驗研究菲類化合物對病毒受體的阻斷作用,病毒釋放的作用通過神經(jīng)氨酸酶(NA)抑制試驗進行評估。實驗結(jié)果表明與菲類化合物92、100、101和103相比,菲類化合物93~99和102具有更強的抑制活性,結(jié)構(gòu)見圖9。

    圖9 菲類化合物結(jié)構(gòu)式(1)

    QIAN 等[11]從白及須根中分離出4 種新的9′,10′-二氫聯(lián)菲,包括新發(fā)現(xiàn)的1,2′-聯(lián)聯(lián)菲,4,7,3′,5′-四甲氧基-9′,10′-二氫1,2′-聯(lián)菲-2,7′-二醇(104),一種新的1,3′-連接的聯(lián)菲:4,7,7′-三甲氧基-9′,10′-二氫1,3′-聯(lián)菲-2,2′,5′-三醇(105)和兩個新的1,1′-聯(lián)苯菲:4,7,4′-三甲氧基-9′,10′-二氫1,1′-聯(lián)菲-2,2′,7′-三醇(106)和4,7,3′,5′-四甲氧基-9′,10′-二氫1,1′-聯(lián)菲-2,2′,7′-三醇(107)。他們通過這些化合物的手性光學性質(zhì)和HF/3-21G 水平的勢能表面掃描,同時考慮了這些化合物的對映異構(gòu)性,從而揭示了它們的外消旋混合物形式。XIAO等[12]在白及塊莖中新發(fā)現(xiàn)了1-對羥基芐基-4,7-二甲氧基菲-2-醇(108),1-對羥基芐基-4,7-二甲氧基菲-2,8-二醇(109)和1-對羥基芐基-4,7-二甲氧基菲-2,6-二醇(110)。結(jié)構(gòu)見圖10。

    圖10 菲類化合物結(jié)構(gòu)式(2)

    2 藥理作用

    2.1 止血作用

    白及中以BSP 為主的活性成分具有止血作用,其機制可能是通過激活P2Y1 和PKC 受體來激活A(yù)DP 受體信號通路,導(dǎo)致血小板的變形、聚集和分泌,從而發(fā)揮其止血作用[13]。此外,白及多糖/氧化石墨烯復(fù)合海綿具有高孔隙率海綿結(jié)構(gòu),吸收血液速度快,因其帶有高表面電荷,可以激活血小板,促進纖維蛋白形成,故可作為一種安全、有效、低成本的止血劑[14]。

    2.2 免疫調(diào)節(jié)作用

    WANG 等[15]從白及塊莖中分離純化出了BSP-1 和BSP-2兩種水溶性多糖,其中BSP-1以摩爾比4∶1的甘露糖和葡萄糖組成。根據(jù)體內(nèi)實驗結(jié)果得出,BSP-1可以抑制免疫調(diào)節(jié)活性,表現(xiàn)為胸腺和脾臟相關(guān)指數(shù)的增加。

    研究發(fā)現(xiàn),BSP能通過影響LPS促進B淋巴細胞的增殖,同時促進刀豆蛋白(Con A)誘導(dǎo)T 淋巴細胞的增殖,對小鼠的特異性免疫和非特異性免疫都有顯著的增強效果[16];還可使小鼠體內(nèi)天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)和血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)的活性降低;同時通過影響Con A,抑制肝臟酶活性的升高,保護肝臟,緩解Con A導(dǎo)致的免疫性肝損傷[17];對于環(huán)磷酰胺造成的小鼠免疫功能低下、吞噬指數(shù)降低的情況有顯著的抑制效果,并且因其對LPS 和Con A 的作用,可提升二者的促脾細胞增殖能力[18]。白及水提物還能提高虹鱒外周血白細胞的氧呼吸爆發(fā)活性和吞噬活性[19]。

    2.3 促進傷口愈合作用

    BSP能誘導(dǎo)肌腱細胞的增殖,同時誘導(dǎo)羥色胺遷移,增加細胞外基質(zhì)膠原蛋白Ⅰ和Ⅲ的分泌,促進肌腱愈合,該功能通過激活PI3K/Akt和MEK/ERK1/2信號通路實現(xiàn)[20]。另外,BSP提取后的殘液可以促進燒傷后皮膚的再生,這可能是通過抗氧化、抗感染和減少傷口面積實現(xiàn)的。其中酚類成分能減少瘢痕形成和增強血管生成[21]。白及多糖精片可以加速乙酸誘導(dǎo)的兔口腔潰瘍的傷口愈合[22]。

    白及多糖水凝膠也可以作為一種敷料,促進傷口愈合,如Bsp/CMC/CBM 940多糖水凝膠,結(jié)合了BSP和羧甲基纖維素,對羥自由基具有顯著的清除效果,從而促進傷口愈合[23]。由殼聚糖-氧化BSP和殼聚糖-銀組成的雙層敷料分別與京尼平交聯(lián)作為下層和上層的雙層海綿也可以作為傷口修復(fù)的理想敷料[24]。

    2.4 抗菌作用

    白及中的聯(lián)芐衍生物有顯著的抗菌作用。研究表明,從白及中分離出的聯(lián)芐衍生物能明顯抑制金黃色葡萄球菌ATCC 6538、枯草芽孢桿菌ATCC 6051 和耐甲氧西林金黃色葡萄球菌ATCC 43300的活性,其可抑制的菌群包括了革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌[3-4]。

    2.5 抗炎作用

    提取分離自黃花白及塊莖中的菲類化合物可以抑制LPS刺激下的巨噬細胞中NO的產(chǎn)生[7]。BSP能通過TLR2途徑抑制血管緊張素誘導(dǎo)的ROS的產(chǎn)生,同時抑制腫瘤壞死因子和促炎細胞因子白細胞介素6 的活化,降低血管緊張素誘導(dǎo)的Toll 樣受體2(TLR2)的表達,這一作用通過TLR2/MyD88 途徑,在血管緊張素誘導(dǎo)的高遷移率族蛋白細胞中表現(xiàn)出顯著的抗炎活性[25]。此外,BSP對COX-2也有選擇性抑制作用[2]。

    2.6 抗腫瘤作用

    BSP能刺激荷瘤小鼠脾臟中CD4+T細胞的擴增,從而起到顯著的腫瘤異種移植物的生長抑制作用[26]。BSP 也有一定的抑制人肝腫瘤細胞HepG2 增殖的作用,可以顯著抑制荷瘤小鼠的瘤質(zhì)量,同時可能刺激胸腺和脾臟產(chǎn)生免疫細胞,提高小鼠免疫功能[27]。阿侖膦酸鹽(ALN)與BSP 共同形成ALN-BSP 偶聯(lián)物,對巨噬細胞起到凋亡誘導(dǎo)作用。ALN-BSP 偶聯(lián)物具有顯著的對腫瘤相關(guān)巨噬細胞的消除作用,且具有特異性,同時可抑制血管的形成、恢復(fù)機體內(nèi)局部的免疫監(jiān)視機制,能夠安全有效地抑制腫瘤[28]。白及中的二氫菲呋喃和芪類化合物對多種人癌細胞系具有細胞毒活性[5,7]。

    同時,BSP 能靶向地向腫瘤部位遞送藥物,且具有選擇性[29]。如葉酸介導(dǎo)的硬脂酸修飾白及多糖(FABSP-SA)共聚物能借助葉酸受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用和網(wǎng)格蛋白機制,作為載體向腫瘤部位遞送藥物,增強抗腫瘤效果[30]。在FA-BSP-SA 膠束中添加d-α 琥珀酸生育酚聚乙二醇酯(TPGS)可促進阿霉素對4T1 細胞的協(xié)同抗腫瘤作用,該混合膠束是一種潛在載體[31]。

    2.7 抗氧化作用

    體外抗氧化活性也是BSP 具有的顯著的作用之一[32]。白及多糖b 是一種新的從白及中分離得到的水溶性多糖,能劑量依賴性地抑制血管緊張素誘導(dǎo)的ROS的產(chǎn)生,有效阻斷還原型輔酶Ⅱ氧化酶的上調(diào)[25]。

    CHEN 等[33]從白及根中分離出一種新的多糖成分(pFSP),組成單元為D-甘露糖、D-半乳糖和D-葡萄糖,pFSP 對超氧自由基以及DPPH 都表現(xiàn)出顯著的清除作用,且強于BSP,具有作為抗氧化劑的潛力。

    2.8 抗?jié)冏饔?/h3>

    BSP能抑制MAPK/NF-κB信號通路的活性,通過減輕氧化應(yīng)激、中性粒細胞浸潤和炎癥細胞因子的積累來保護乙醇誘導(dǎo)的大鼠急性胃黏膜損傷;此外,BSP可以促進酸性黏液的產(chǎn)生,促進內(nèi)源性前列腺素E2的產(chǎn)生,保護胃黏膜免受乙醇損傷[34]。

    體外實驗證明,BSP 具有保護經(jīng)乙醇誘導(dǎo)損傷的人胃黏膜細胞GES-1 的作用,且效果顯著,其機制可能是提高了谷胱甘肽過氧化物酶、過氧化氫酶、超氧化物歧化酶等抗氧化酶的活性,從而減少氧化產(chǎn)物(過氧化脂質(zhì)、丙二醛),調(diào)節(jié)基因轉(zhuǎn)錄(血紅素氧合酶-1、PGC-1α、Bcl-2、Bax、NF-κB)[35]。

    BSP 還可以作為一種良好的生物粘附材料。添加BSP 增加了可溶性淀粉微球的流動性,降低了其剛性。與BSP混合后,水楊酸基質(zhì)的溶脹性、黏蛋白吸附能力和在胃黏膜上的滯留率均有所提高,在微球系統(tǒng)中混合的水楊酸-白及多糖具有較強的黏膜粘附性,在胃中的停留時間比水楊酸微球長得多,是開發(fā)胃滯留給藥系統(tǒng)的潛在藥物載體[36]。

    2.9 促進造血作用

    BSP 能促進小鼠脾集落形成細胞,恢復(fù)骨髓有核細胞,從而改善骨髓造血功能,使外周血白細胞有所增加,抵抗環(huán)磷酰胺對脾細胞造血功能的損傷,促進造血[18]。

    2.10 抗病毒作用

    從白及中分離出的菲類化合物在體內(nèi)有明顯的病毒抑制作用,能減少病毒基質(zhì)蛋白基因轉(zhuǎn)錄,具有較強的抗流感病毒活性。其中聯(lián)菲比單菲化合物具有更強的抑制活性,可能是因為羥基影響了化合物的親水性/疏水性,其機制還需進一步深入研究[9]。

    3 白及多糖的提取工藝

    BSP 有較顯著的生物活性。隨著提取技術(shù)的發(fā)展,不斷有新的BSP提取工藝出現(xiàn),除了傳統(tǒng)回流法及其優(yōu)化工藝,現(xiàn)代提取技術(shù)如超聲、微波等也應(yīng)用較廣。

    3.1 傳統(tǒng)提取方法

    現(xiàn)有研究中,最常采用回流提取等溶劑法提取BSP,其他傳統(tǒng)方式還包括浸提法、煎煮法等。此種方法常使用熱水提取、水提醇沉以達到較好的提取效果,但溶劑用量較大,且高溫可能使BSP 有一定的損失。程安媛等[37]提取BSP 使用的是浸漬法,提取前先進行預(yù)處理,用10 倍蒸餾水浸漬提取白及顆粒,使水溫保持在70 ℃,浸漬30 min,重復(fù)3次后用有機溶劑精制處理提取液,獲得BSP 含量63.7%,收率13.8%。劉光斌等[38]提取BSP采用的是煎煮法,煎煮之前進行預(yù)處理,浸泡藥材24 h。為了進行吸附澄清精制,加入了一定量的天然澄清劑(Ⅱ型ZTC1+1)。提取得到BSP 的含量為44.4%,乙醇用量比常規(guī)煎煮法更少,且澄清劑無殘留。董建新等[39]采取在100 ℃下回流提取3 h 的方法,采用1∶34(g∶mL)的料液比,85%的乙醇濃度,醇膠采取8∶1(g∶g)的比例,醇沉6 h 的情況下,BSP 提取率為26.44%。陳美君[40]取白及粉末回流提取2 h,醇沉,得到的BSP 平均含量為63.832%。同時考察了醇提水提法,與水提醇沉法相比較,所得多糖含量相近,但此法重復(fù)性較差。孫達峰等[41]采用連續(xù)逆流提取法提取BSP,以1∶14 的料液比在60 ℃下提取3 h,BSP 得率為90.5%。

    3.2 超聲提取法

    通過空化效應(yīng)來達到提取效果的超聲提取法,一般無需采用高溫,降低了對所需成分的損耗,起到快速而高效的提取作用。吳夢晴[42]取用干燥的白及塊莖為材料,應(yīng)用了超聲波提取法,提取其中的BSP,控制料液比為1∶35(g∶mL),在400 W 的超聲功率下提取50 min,得到BSP 的提取率為(8.18 ± 0.04)%。劉煜等[43]取用白及粉末為原材料,采用表面活性劑輔助超聲法提取BSP,表面活性劑優(yōu)選結(jié)果為聚乙二醇(PEG)系列的PEG-400,其用量為0.1 g,料液比采用1∶30(g∶mL),超聲功率為126 W 的提取工藝下,提取80 min,獲得BSP的最大得率為21.81%。

    3.3 微波提取法

    微波提取法利用了微波穿透和加熱的特點,其優(yōu)點有操作簡便、能耗低、提取成分純度高、快速而高效等。韓偉等[44]利用表面活性劑輔助微波提取白及根莖中的BSP,以BSP 得率為指標優(yōu)化工藝,最佳提取工藝為使用濃度為5 g/L 的PEG-400,液料比為63 mL/g,并調(diào)節(jié)溶液pH 值為7,在504 W 的功率下提取5 min。通過此工藝,白及總多糖的得率為(32.48 ± 0.18)%。宋志姣等[45]以粗BSP 提取率為指標,采用小白及假鱗莖為材料提取BSP,優(yōu)化工藝條件,在40%額定微波功率下微波50 s,在60 ℃下浸提90 min,最終BSP 的得率為38.33%。

    3.4 酶輔助提取法

    酶法提取適用于植物中成分的提取,采用此法BSP 的得率較高,純度較好。孔俊豪等[46]利用木瓜蛋白酶提取純化了BSP,最佳工藝為調(diào)pH 值到7.0~7.5,每克底物加入8~10 mg 的木瓜蛋白酶,在45~50 ℃下作用120~150 min,BSP 得率可以達到92%。與常規(guī)水提相比純度更高。雷燕妮等[47]采用植物蛋白酶解法獲得BSP,并篩選了最優(yōu)的提取條件,即加10倍量的水,設(shè)置55 ℃超聲提取2次,每次時間為1 h,植物蛋白酶添加量3‰(W/V),將溫度保持為45 ℃,攪拌3 h 進行酶解。朱富成等[48]采用果膠酶輔助法提取BSP,經(jīng)過優(yōu)化,得出最佳的果膠酶添加量為12%,在52 ℃下酶解82 min,此法獲得BSP的提取率為64.8%。

    3.5 其他

    QU 等[32]通過紅外輔助水提白及得到BSP,液料比采用53 mL/g,在75 ℃下提取2.5 h,BSP 得率為(43.95±0.26)%,該方法不需要復(fù)雜的操作,成本低。蔡錦源等[49]采用超聲波與微波相協(xié)提取的方法,以BSP得率為指標,采用1∶20(g∶mL)的料液比,浸泡360 s,設(shè)定微波功率為200 W,進行30 s 的提取,最終得到的BSP 得率為(6.98±0.19)%。此后蔡錦源等[50]又研究先以微波預(yù)處理白及,再進行超聲提取的工藝,同樣以BSP 得率為指標,具體的優(yōu)化條件為按4∶1(mL∶g)的解析劑比加蒸餾水,微波預(yù)處理90 s,按1∶25(g∶mL)的料液比,100 W 超聲提取20 min,得率達到7.081%。經(jīng)過對比研究,結(jié)果證明進行了微波預(yù)處理的提取效果比單純的超聲波提取更好。

    4 總結(jié)和展望

    白及是我國重要的中藥資源,其化學成分已被證實有糖、聯(lián)芐類、聯(lián)芐衍生物、菲類、二氧菲類、二氫菲呋喃類、聯(lián)菲類、雙菲醚類、甾體、三萜等;主要有止血、免疫調(diào)節(jié)、促進傷口愈合、抗菌、抗炎、抗腫瘤、抗氧化、抗?jié)?、促進造血、抗病毒等藥理作用。白及各類成分是其豐富的藥理作用的主要物質(zhì)基礎(chǔ),尤其是BSP,具有愈傷、增強免疫、抗炎、抗氧化、抗?jié)兊榷喾N藥理活性;其提取工藝以水提醇沉的回流提取法為主,超聲、微波、酶輔助等提取方法也隨著研究的不斷深入得到應(yīng)用與優(yōu)化。現(xiàn)有的資料為白及進一步的開發(fā)利用提供了理論基礎(chǔ)。隨著現(xiàn)代研究技術(shù)的發(fā)展,白及的成分、作用機制也將得到更全面和深入的研究與應(yīng)用。

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