一起野禽H5N8 亞型禽流感疫情的處置與思考

宋曉莉，王相子，開 妍，魏若瑤，岑 雪，劉 云

（江蘇省動物疫病預防控制中心，江蘇南京 210036）

高致病性禽流感（highly pathogenic avian influenza，HPAI）是由A 型流感病毒中的高致病力病毒引起的禽類烈性傳染病，以發(fā)熱、腹瀉、麟腳出血為特征，雞、火雞、鴨、鵝、鵪鶉、雉雞、鷓鴣、鴕鳥、鴿子、孔雀等多種禽類對其均易感，是世界動物衛(wèi)生組織（OIE）規(guī)定的須通報動物疫病，我國將其列為一類動物疫病[1]。自2004 年2月22 日廣西隆安縣發(fā)生HPAI 疫情以來，高致病性禽流感病毒（HPAIV）一直嚴重威脅著我國養(yǎng)禽業(yè)的高質量發(fā)展和公共衛(wèi)生安全[2]。2010 年我國首次在鴨中分離到H5N8 亞型HPAIV[3]，隨后多次在野鳥中監(jiān)測到該亞型病毒。禽流感病毒的不斷變異進化，造成了H5 亞型禽流感疫情的復雜性，因而增加了防控難度[4-6]。

2020 年1 月，江蘇省連云港市野保站發(fā)現一起野禽感染H5N8 亞型HPAIV 異常死亡事件。江蘇省農業(yè)農村廳迅速組織相關人員，指導連云港市開展現場調查、實驗室診斷和應急處置，分析疫點向外傳播疫病的風險，以便及時控制疫情，降低疫情影響。

1 流行情況及初診

2020 年1 月20 日，連云港市野保站發(fā)現云臺山景區(qū)云臺街道西隅水庫野禽異常死亡。經進一步觀測，該水庫內棲息野生禽類共計97 只，現場發(fā)現死亡鴛鴦10 只。同時，在距離該水庫6 km 的小島山還發(fā)現5 只大雁死亡。1 月22 日，在西隅水庫又發(fā)現2 只鴛鴦死亡。1 月21 日開始，連云港市獸醫(yī)站會同市野保站人員聯合開展流行病學調查，對死亡的17 只野禽開展臨床診斷并采集樣品進行實驗室檢測。

1 月23 日，經連云港市獸醫(yī)站檢測，所采集的野禽樣本為H5 亞型禽流感陽性。為進一步確定這些野禽死亡的原因，1 月26 日連云港市獸醫(yī)站和市野保站有關人員聯合對野生鳥類分布狀況和疫病發(fā)生等情況開展了流行病學調查，并采集了部分野禽糞便及口鼻腔拭子。1 月27 日上午，連云港市獸醫(yī)站將所采集的21 份樣品送江蘇省動物疫病預防控制中心檢測。

2 實驗室病原學診斷

2.1 樣品

共收到采集的野禽樣品21 份，其中9 份為云臺山景區(qū)宿城水庫野禽糞便拭子，9 份為云臺山景區(qū)小島山救護中心死亡野禽糞便拭子，3 份為云臺山景區(qū)小島山救護中心死亡野禽口腔拭子。

2.2 方法

拭子樣品離心取上清，用全自動核酸提取工作站（購自德國QIAGEN 公司）進行核酸提取。對提取的核酸樣品，分別用禽流感H5、H7、H9亞型三重熒光RT-PCR 檢測試劑盒（哈爾濱國生生物有限公司，生產批號20210305）、禽流感病毒N8 基因核酸測定試劑盒（上海之江生物科技股份有限公司，生產批號P20201101）檢測樣品中的禽流感病毒核酸。

將實驗室檢測結果為AIV 核酸陽性的樣品送中國農業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所國家禽流感參考實驗室進行病毒分離及分型鑒定。

2.3 結果

經江蘇省動物疫病預防控制中心熒光RT-PCR檢測，21 份樣品中，有3 份為H5N8 亞型HPAIV核酸陽性（圖2～3），陽性檢出率為14.29%，3 份陽性樣品均為小島山救護中心野禽口腔拭子。

圖1 樣品H5 亞型熒光RT-PCR 檢測擴增曲線

圖2 樣品N8 亞型熒光RT-PCR 檢測擴增曲線

經中國農業(yè)科學院哈爾濱獸醫(yī)研究所國家禽流感參考實驗室鑒定，從2 份野禽口腔拭子中各分離到1 株H5N8 亞型禽流感病毒，其余樣品未分離到禽流感病毒。病毒序列數據顯示，分離到的H5N8 亞型禽流感病毒HA 基因裂解位點均具有高致病性病毒特征，結合雞胚死亡時間，證實為高致病性毒株。病毒表面HA 基因同源性比較結果顯示，2 株H5N8 病毒的HA 基因核苷酸同源性為99.7%，均屬于2.3.4.4 分支，與2020 年11月報道的山西省平陸縣三灣大天鵝景區(qū)野生天鵝H5N8 疫情毒株高度同源，HA 基因核苷酸同源性為99.5%～99.7%。

3 應急處置

江蘇省政府組織林業(yè)及農業(yè)農村主管部門聯合召開緊急會議，迅速組建處置小組，指導連云港市按照國家相關規(guī)范要求[7-10]，劃定疫點、疫區(qū)和受威脅區(qū)，封鎖相關區(qū)域，開展應急監(jiān)測、緊急流行病學調查、全面消毒等應急處置工作。

3.1 劃定疫點、疫區(qū)和受威脅區(qū)

將檢出陽性樣品的小島山設為疫點，由疫點邊緣向外延伸3 km 的區(qū)域（內有散戶9 戶，家禽存欄375 只）設為疫區(qū)，由疫區(qū)邊緣向外延伸5 km 的區(qū)域（家禽存欄共計34 000 余只，其中291 戶散戶存欄4 000 余只，1 個規(guī)模雞場存欄3 000 余只）設為受威脅區(qū)。疫點地理位置見圖3。

圖3 疫點地理位置

3.2 相關區(qū)域封鎖

對疫區(qū)實行封鎖，撲殺疫區(qū)內所有禽只，并對撲殺禽只和死亡野禽及其排泄物，以及被污染或可能被污染的飼料和墊料、污水等進行無害化處理；禁止禽類及禽類產品運出疫區(qū)，對被污染或可能被污染的物品、交通工具、用具、場地環(huán)境等進行徹底清洗消毒；對疫區(qū)內的運載工具和相關設施設備按規(guī)定要求進行消毒；疫區(qū)內設立警示標志，設置臨時檢查消毒站，對出入的相關人員和車輛進行消毒；對疫區(qū)內養(yǎng)殖場戶實施嚴密隔離觀察，對疫區(qū)和受威脅區(qū)內養(yǎng)殖場戶加強應急監(jiān)測和風險評估，根據評估結果開展緊急免疫；持續(xù)對受威脅區(qū)內所有飼養(yǎng)家禽進行采樣檢測和臨床觀察。

3.3 應急監(jiān)測排查

對連云港市所有養(yǎng)殖場戶開展應急監(jiān)測和臨床排查，對重點區(qū)域、關鍵環(huán)節(jié)和異常死亡家禽加強監(jiān)測，及時發(fā)現疫情隱患。全省組織力量對轄區(qū)內家禽養(yǎng)殖戶開展摸底排查，加大對家禽交易場所、屠宰場所、無害化處理廠的巡查力度，有針對性地開展監(jiān)測，并高度關注家禽、野禽的異常死亡情況。

3.4 緊急流行病學調查及全面消毒

通過調查，掌握疫點、疫區(qū)、受威脅區(qū)及連云港市易感禽類的養(yǎng)殖情況、免疫情況、環(huán)境狀況及野禽分布情況，統(tǒng)計發(fā)病禽種類、數量、死亡數等相關信息，分析疫病發(fā)生情況并每日對環(huán)境進行消毒。至解除封鎖前，累計使用消毒藥原液453 kg，消毒面積114.9 萬m2，其中疫點、疫區(qū)和受威脅區(qū)分別為26.3 萬、38.7 萬和49.9 萬m2。

3.5 解除封鎖

3 月8—9 日，連云港市農業(yè)農村局組織對疫區(qū)進行實驗室檢測、風險評估和現場驗收，認為風險評估（表1）和驗收結果符合疫區(qū)解除封鎖相關規(guī)定，決定自3 月10 日零時起，云臺山景區(qū)解除H5N8亞型高致病性禽流感疫區(qū)封鎖，疫情處置結束。

表1 疫點向家禽傳播H5N8 亞型HPAI 的風險評估

4 事件引發(fā)的思考

4.1 揭示出的問題

本次疫情1 月20 日林業(yè)部門發(fā)現野禽異常死亡，1 月23 日連云港市獸醫(yī)站對死亡野禽樣品進行檢測，直到1 月26 日市獸醫(yī)站和市野保站才開始開展流行病學調查并采集相關樣品檢測，說明林業(yè)部門和農業(yè)農村部門之間溝通協作有待進一步增強；在小島山日常的禽流感監(jiān)測中未檢測到H5N8亞型病毒，直至出現野禽感染死亡才發(fā)現，說明平時的野禽禽流感監(jiān)測力度不夠大，監(jiān)測面不夠廣。H5N8 亞型為近些年剛出現的新亞型，雖然不同H5 亞型禽流感病毒具有一定的交叉保護性，但是目前家禽中使用的H5 亞型禽流感疫苗與現流行的H5N8 亞型毒株可能存在著一定的抗原差異性，需要開展此方面的研究進行確定。有報道[11]稱，在俄羅斯，H5N8 亞型病毒或已出現“禽傳人”，且已經在多個國家家禽中引發(fā)疫情，導致數以萬計的家禽被撲殺。目前我國尚未發(fā)現該亞型病毒在家禽中流行，這導致群眾的防范意識較為薄弱，沒有認識到野禽攜帶的H5N8 亞型禽流感病毒的公共衛(wèi)生危害，部分地區(qū)捕捉和食用野禽情況依然存在。

4.2 措施建議

林業(yè)部門和農業(yè)農村部門要進一步健全野禽禽流感防控工作聯席會議機制和野生動物疫病防控分工負責機制，共同研究分析野禽及家禽禽流感疫情形勢，評估野生動物重大動物疫情風險，討論制定有針對性的解決方案。林業(yè)部門要建立高質量巡護隊伍，在野生動物主要活動區(qū)域、繁殖地、遷徙通道等棲息地等區(qū)域進一步加強巡護，高度關注病死野禽，及時排查野生禽類疫情。農業(yè)部門可成立督查組，對日常工作開展情況進行督導檢查，確保巡查責任落實到位，進一步提升禽流感疫情預警防控能力。

繼續(xù)加大對養(yǎng)殖場、活禽市場和野禽的監(jiān)測力度，建設野鳥防護網，減少野鳥與家禽、野鳥與人之間的直接接觸，防止傳染給家禽和人，做到一旦傳入及時發(fā)現和控制，保障家禽、野生動物和人類健康安全，避免出現嚴重的公共衛(wèi)生危機。HPAIV 具有一定的交叉保護性，因此各養(yǎng)殖場要制定科學合理的免疫程序，及時開展免疫工作并建立免疫檔案。

地方相關部門要制定禽流感監(jiān)測計劃，切實開展疫病監(jiān)測工作，及時掌握疫病免疫保護水平、流行現狀及相關風險因素，適時調整疫病控制策略；科研單位需要對H5N8 亞型2.3.4.4 分支病毒的傳播性、致病性和抗原性進行進一步評估，一旦發(fā)現發(fā)生抗原變異，應及時進行疫苗毒株更新。

地方政府要進一步加強對群眾的禽流感防控教育和宣傳，提高其防范意識，教育其加強個人防護，遠離野鳥并杜絕狩獵和食用野鳥等。