海藻-甘草反藥組合在海藻玉壺湯抗丙硫氧嘧啶致甲狀腺腫大中的作用研究△

王鑫，葛超冉，霍敏，賀佳，陳豐，李娜，柳海艷，修琳琳，陳紹紅，許皖，呂艷敏，葛東宇，董瑞娟，鐘贛生

北京中醫(yī)藥大學(xué)，北京 100029

“十八反”屬于中藥配伍禁忌的基本內(nèi)容，對(duì)于反藥組合臨床應(yīng)用的問(wèn)題，眾多醫(yī)家各持己見，歷來(lái)爭(zhēng)議頗多。有醫(yī)家主張反藥組合會(huì)產(chǎn)生一些不良反應(yīng)，重則危及生命，因此臨床中應(yīng)避免使用；也有醫(yī)家支持反藥組合在臨床中的應(yīng)用，認(rèn)為如果反藥組合運(yùn)用得當(dāng)，甚至可以治療沉疴痼疾。海藻和甘草是“十八反”反藥組合之一，但卻不乏兩者同用的古籍記載和臨床應(yīng)用。王利敏等[1]通過(guò)整理古代文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，含有海藻和甘草的方藥有17 首，主要用于癭病和瘰疬的治療?！吨腥A人民共和國(guó)藥典臨床用藥須知·中藥卷》2005 年版中共收載含“十八反”反藥組合的成方共9 個(gè)，其中內(nèi)消核片和消瘰疬丸均含海藻、甘草[2-3]。海藻玉壺湯為治癭瘤之氣滯痰凝證的代表方，也是海藻、甘草同用的代表方，《外科正宗》記載其“治癭瘤初起，或腫或硬，或赤或不赤，但未破者”[4]，現(xiàn)代醫(yī)家常將其用于治療甲狀腺和乳腺增生性疾病及婦科腫瘤等疾病，療效顯著[5]。

本課題組前期對(duì)含海藻-甘草反藥組合的海藻玉壺湯對(duì)甲狀腺腫大大鼠的藥效進(jìn)行了相關(guān)的實(shí)驗(yàn)研究，結(jié)果表明，海藻玉壺湯中海藻和甘草選用不同品種、不同給藥劑量和不同配伍比例對(duì)甲狀腺腫大模型大鼠的治療效果會(huì)產(chǎn)生一定的影響[6-8]。為驗(yàn)證其差異是否與反藥組合有關(guān)，本實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)海藻玉壺湯全方及去掉1味或2味反藥組，選擇前期篩選出的藥效最明顯的組合，即海藻和甘草劑量為《中華人民共和國(guó)藥典》（以下簡(jiǎn)稱《中國(guó)藥典》）2015 年版規(guī)定高限劑量的2 倍（海藻24 g，生甘草20 g），海藻的品種為海蒿子[9]，探究此劑量下海藻玉壺湯對(duì)甲狀腺腫大大鼠的影響及反藥組合是否是影響藥效的重要因素。

1 材料

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

雄性Wistar大鼠，84 只，體質(zhì)量180～220 g，購(gòu)于北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生產(chǎn)許可證號(hào)：SCXK（京）2016-0006；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物屏障環(huán)境飼養(yǎng)，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物使用許可證號(hào)：SYXK（京）2016-00038，溫度：（22±2）℃，相對(duì)濕度：50%～70%，動(dòng)物飼料為清潔級(jí)鼠飼料。

1.2 試藥

生甘草（產(chǎn)地：內(nèi)蒙古，批號(hào)：1901025）為豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensisFisch.的干燥根和根莖；海藻（產(chǎn)地：福建，批號(hào)：1904028）為馬尾藻科植物海蒿子Sargassum pallidum(Turn.) C.Ag.的干燥藻體；法半夏（產(chǎn)地：四川，批號(hào)：D190511001）為天南星科植物半夏Pinellia ternata（Thunb）Breit 的塊莖經(jīng)甘草和石灰炮制的炮制品；貝母（產(chǎn)地：浙江，批號(hào)：1802404）為百合科植物浙貝母Fritillaria thunbergiiMiq.的干燥鱗莖；連翹（產(chǎn)地：山西，批號(hào)：1905008）為木犀科植物連翹Forsythia suspensa（Thunb.）Vahl 的干燥果實(shí)；川芎（產(chǎn)地：四川，批號(hào)：1904005）為傘形科植物川芎Ligusticum chuanxiongHort.的根莖；獨(dú)活（產(chǎn)地：四川，批號(hào)：1903009）為傘形科植物重齒毛當(dāng)歸Angelica pubescensMaxim.f.biserrataShan et Yuan 的干燥根；昆布（產(chǎn)地：福建，批號(hào)：1812407）為海帶科植物海帶Laminaria japonicaAresch.或翅藻科植物昆布Ecklonia kuromeOkam.的葉狀體；醋青皮（產(chǎn)地：四川，批號(hào)：1812403）為蕓香科植物橘Citrus reticulataBlanco 及其栽培變種的幼果或未成熟果實(shí)的干燥果皮；陳皮（產(chǎn)地：四川，批號(hào)：1901071）為蕓香科植物橘Citrus reticulataBlanco 及其栽培變種的成熟干燥果皮；當(dāng)歸（產(chǎn)地：甘肅，批號(hào)：1905012）為傘形科植物當(dāng)歸Aaugellica sinensis(Oliv) Diels.的根；上述飲片購(gòu)自北京雙橋燕京中藥飲片廠，經(jīng)北京中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)學(xué)院李偉高級(jí)實(shí)驗(yàn)員鑒定均為該科屬合格中藥飲片。

丙硫氧嘧啶片（PTU，批號(hào)：H31021082，上海朝暉藥業(yè)有限公司），使用時(shí)配制成0.01 mg·mL-1的溶液；左甲狀腺素鈉片（批號(hào)：H20140052，Merck KGaA 公司），使用時(shí)配制成0.02 μg·mL-1的溶液；三碘甲狀腺原氨酸（T3）放免試劑盒（批號(hào)：20190928）、甲狀腺素（T4）放免試劑盒（批號(hào)：20190928）、促甲狀腺激素（TSH）放免試劑盒（批號(hào)：20190928）、游離三碘甲狀腺原氨酸（FT3）放免試劑盒（批號(hào)：20190928）、游離甲狀腺素（FT4）放免試劑盒（批號(hào)：20190928）均購(gòu)自北京華英生物技術(shù)研究所。

1.3 儀器

HY-YQ-08型酶標(biāo)分析儀（無(wú)錫華衛(wèi)德朗儀器有限公司）；JJ-12J型脫水機(jī)、JB-P5型號(hào)包埋機(jī)、JB-L5型凍臺(tái)（武漢俊杰電子有限公司）；RM2016 型病理切片機(jī)（上海徠卡儀器有限公司）；KD-P 型組織攤片機(jī)（浙江省金華市科迪儀器設(shè)備有限公司）；DHG-9140A 型烤箱（上?；厶﹥x器制造有限公司）；10212432C 型載玻片及蓋玻片（江蘇世泰實(shí)驗(yàn)器材有限公司）。

2 方法

2.1 藥品制備

海藻玉壺湯處方：生甘草24 g、海蒿子20 g、法半夏9 g、浙貝母9 g、連翹9 g、川芎9 g、獨(dú)活9 g、昆布18 g、醋青皮9 g、陳皮9 g、當(dāng)歸9 g，除生甘草、海蒿子和昆布外，其他飲片劑量皆延續(xù)本課題組前期實(shí)驗(yàn)劑量?！逗Ｔ逵駢販吩街屑扔泻?，又有昆布，本課題組前期研究中兩藥均用9 g，《中國(guó)藥典》2015 年版規(guī)定，昆布為海帶科植物海帶或翅藻科植物昆布（鵝掌菜）的干燥葉狀體，在中醫(yī)臨床中，兩者藥性皆為寒，均具有消痰、軟堅(jiān)散結(jié)和利水消腫的功效，都可以用于治療癭瘤、瘰疬、痰飲水腫和睪丸腫痛等病癥[10]，故此方中選用2 倍劑量昆布（即18 g）。根據(jù)大鼠（200 g）與成人（70 kg）用藥劑量的換算系數(shù)0.018 計(jì)算飲片劑量，稱取藥物，第一次用10 倍量水浸泡2 h，煮沸后再煎1 h，濾過(guò)；第二次用8 倍量的水，煮沸后煎煮1 h，濾過(guò)，將2 次藥液充分混勻，用水浴鍋加熱，最后得到濃縮液，冷卻后放入冰箱保存。其余藥液在去除相應(yīng)中藥飲片后，按上述方法煎煮，第一次用10 倍量水，濾過(guò)；第二次用8 倍量的水，濾過(guò)，將2 次藥液充分混勻、濃縮、冷卻，放入冰箱保存。

2.2 模型復(fù)制與分組

Wistar 雄性大鼠84 只，按體質(zhì)量隨機(jī)分為對(duì)照組、模型組、陽(yáng)性藥優(yōu)甲樂(lè)組、海藻玉壺湯全方組（簡(jiǎn)稱“全方組”）、海藻玉壺湯全方去海藻組（簡(jiǎn)稱“去海藻組”）、海藻玉壺湯全方去甘草組（簡(jiǎn)稱“去甘草組”）、海藻玉壺湯全方去海藻及甘草組（簡(jiǎn)稱“去藻草組”），共7 組，每組12 只。造模期間，對(duì)照組大鼠給予去離子水，其余各組大鼠灌胃給予PTU（10 mg·kg-1），每日1 次，連續(xù)給藥14 d。模型制備成功后，對(duì)照組與模型組大鼠灌胃給予去離子水，陽(yáng)性藥組灌胃給予優(yōu)甲樂(lè)（20 μg·kg-1），各治療組給予相應(yīng)中藥煎液，海藻玉壺湯全方原劑量為134 g，根據(jù)200 g 大鼠與70 kg 成人用藥換算系數(shù)0.018，得出大鼠給藥劑量為全方組12.06 g·kg-1，依次計(jì)算其他給藥劑量，去海藻組9.9 g·kg-1、去甘草組10.26 g·kg-1、去藻草組8.1 g·kg-1，連續(xù)給藥28 d。給藥期間，為維持模型大鼠的穩(wěn)定性，除對(duì)照組外，其余各組大鼠均灌胃給予PTU，劑量依前，每2 d 給藥1 次。造模和給藥期間，每周稱體質(zhì)量1次，測(cè)肛溫1次，不限制進(jìn)食、飲水。

2.3 樣本采集

造模第十四天，大鼠眼眶取血，根據(jù)大鼠血清結(jié)果，T3、T4水平顯著降低，TSH水平顯著降低，提示模型復(fù)制成功。給藥第二十九天，稱體質(zhì)量，戊巴比妥鈉麻醉，腹主動(dòng)脈取血，離心（4 ℃，3000 r·min-1，15 min，離心半徑：10 cm），留取上清液，分裝，于-80 ℃保存，待檢血清中相關(guān)指標(biāo)；迅速剝離甲狀腺，稱定質(zhì)量后，根據(jù)公式（1）計(jì)算甲狀腺系數(shù)，然后將一側(cè)置于無(wú)RNA 酶的凍存管中，待檢分子生物學(xué)相關(guān)指標(biāo)，另一側(cè)置于4%多聚甲醛中，進(jìn)行常規(guī)蘇木精-伊紅（HE）染色，以觀察甲狀腺組織病理形態(tài)學(xué)的變化。

2.4 甲狀腺組織病理形態(tài)

取HE 染色切片，在200×視野下，每張切片隨機(jī)選擇10個(gè)濾泡上皮細(xì)胞，每組選60個(gè)，用Image J軟件測(cè)量上皮細(xì)胞直徑，同時(shí)測(cè)量每張切片細(xì)胞核數(shù)和濾泡面積腔。

2.5 大鼠血清中激素水平檢測(cè)

血清中各項(xiàng)指標(biāo)的檢測(cè)均由北京華英生物技術(shù)研究所完成。

2.6 統(tǒng)計(jì)分析

3 結(jié)果

3.1 海藻玉壺湯對(duì)甲狀腺腫大模型大鼠甲狀腺系數(shù)的影響

與對(duì)照組比較，模型組大鼠甲狀腺系數(shù)均顯著升高（P＜0.01）。與模型組比較，優(yōu)甲樂(lè)組大鼠甲狀腺系數(shù)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；全方組、去海藻組、去甘草組、去藻草組大鼠甲狀腺系數(shù)均顯著降低（P＜0.01）。與陽(yáng)性藥組比較，全方組、去海藻組、去甘草組、去藻草組大鼠甲狀腺系數(shù)均顯著降低（P＜0.05，P＜0.01），且全方組和去甘草組降低效果更顯著。全方組與全方去掉1味或2味反藥組各組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（表1）。

表1 含海藻-甘草反藥組合的海藻玉壺湯對(duì)甲狀腺腫大模型大鼠甲狀腺系數(shù)的影響（,n=12）

表1 含海藻-甘草反藥組合的海藻玉壺湯對(duì)甲狀腺腫大模型大鼠甲狀腺系數(shù)的影響（,n=12）

注：與對(duì)照組比較，**P＜0.01；與模型組比較，##P＜0.01；與陽(yáng)性藥組比較，$P＜0.05，$$P＜0.01。

3.2 海藻玉壺湯對(duì)甲狀腺腫大模型大鼠血清中激素水平的影響

與對(duì)照組比較，模型組大鼠血清中T3、T4水平顯著降低（P＜0.05）。與模型組比較，優(yōu)甲樂(lè)組、全方組大鼠血清中T3、T4水平顯著升高（P＜0.05），去海藻組、去甘草組、去藻草組大鼠血清中T3、T4水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與優(yōu)甲樂(lè)組比較，去海藻組、去甘草組、去藻草組大鼠血清中T3、T4水平均顯著降低（P＜0.05）。與全方組比較，去海藻組、去甘草組、去藻草組大鼠血清中T3、T4水平顯著降低（P＜0.05，表2）。

與對(duì)照組比較，模型組大鼠血清中FT3、FT4水平顯著降低（P＜0.05）。與模型組比較，各給藥組大鼠血清中FT3、FT4水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與優(yōu)甲樂(lè)組比較，去海藻組、去藻草組大鼠血清中FT3水平顯著降低（P＜0.05），去海藻組、去甘草組、去藻草組大鼠血清中FT4 水平均顯著降低（P＜0.05）。其余各組間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（表2）。

表2 海藻玉壺湯對(duì)甲狀腺腫大大鼠血清T3、T4、FT3、FT4及TSH水平的影響（,n=12）

表2 海藻玉壺湯對(duì)甲狀腺腫大大鼠血清T3、T4、FT3、FT4及TSH水平的影響（,n=12）

注：與對(duì)照組比較，*P＜0.05；與模型組比較，#P＜0.05；與優(yōu)甲樂(lè)組比較，$P＜0.05；與全方組比較，★P＜0.05；表3同。

與對(duì)照組比較，模型組大鼠血清中TSH 水平顯著升高（P＜0.05）。與模型組比較，優(yōu)甲樂(lè)組、全方組大鼠血清中TSH 水平有降低趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。與優(yōu)甲樂(lè)組比較，去海藻組、去甘草組、去藻草組大鼠血清中TSH 水平顯著升高（P＜0.05）。與全方組比較，去藻草組大鼠血清中TSH水平顯著升高（P＜0.05），去海藻組和去甘草組大鼠血清中TSH 水平有升高趨勢(shì)，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（表2）。

3.3 海藻玉壺湯對(duì)甲狀腺腫大模型大鼠甲狀腺形態(tài)的影響

對(duì)照組大鼠甲狀腺組織被光滑的結(jié)締組織分隔成結(jié)構(gòu)清晰、排列規(guī)則的小葉，小葉內(nèi)濾泡多呈球形或卵圓形，呈中等大小，內(nèi)部充滿均勻的膠質(zhì)，濾泡壁由排列規(guī)則的單層上皮細(xì)胞構(gòu)成，多為立方形，扁平狀或矮柱狀，濾泡間結(jié)締組織未見異常增生（圖1）。

與對(duì)照組比較，模型組大鼠甲狀腺組織在光鏡下無(wú)法分辨甲狀腺小葉的排列情況和內(nèi)部結(jié)構(gòu)。濾泡上皮細(xì)胞核數(shù)目顯著增加（P＜0.05），細(xì)胞直徑顯著增加（P＜0.05），呈高柱狀，排列無(wú)序，有的由單層變?yōu)閺?fù)層，局部出現(xiàn)復(fù)層化。濾泡形狀各異，大小不一，濾泡內(nèi)膠質(zhì)減少，著色不均勻，濾泡面積顯著減少（P＜0.05，圖1和表3）。

與模型組比較，優(yōu)甲樂(lè)組大鼠甲狀腺組織在光鏡下觀察，各指標(biāo)未見明顯改善。全方組大鼠甲狀腺組織形態(tài)明顯改善，已接近對(duì)照組。甲狀腺小葉排列較整齊，邊緣清晰，上皮細(xì)胞排列較整齊，細(xì)胞核數(shù)目顯著減少（P＜0.05），細(xì)胞直徑降低（P＜0.05），局部濾泡形狀規(guī)則，呈圓形或卵圓形，腔內(nèi)分泌物著色均勻，濾泡腔面積顯著升高（P＜0.05）。去海藻組、去甘草組和去藻草組大鼠甲狀腺組織細(xì)胞核數(shù)目減少（P＜0.05），高度降低（P＜0.05），局部出現(xiàn)復(fù)層化；濾泡形狀各異，大小不一，濾泡內(nèi)膠質(zhì)減少，著色不均勻，濾泡腔面積顯著升高（P＜0.05，圖1和表3）。

表3 海藻玉壺湯對(duì)甲狀腺腫大大鼠甲狀腺形態(tài)的影響（,n=12）

表3 海藻玉壺湯對(duì)甲狀腺腫大大鼠甲狀腺形態(tài)的影響（,n=12）

圖1 各組大鼠甲狀腺組織HE染色（×200）

4 討論

海藻與甘草反藥組合最早記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》：“甘草、干漆、苦參為使；惡遠(yuǎn)志；反甘遂、大戟、芫花、海藻”。古今不乏對(duì)海藻-甘草同用的記載，現(xiàn)代臨床中亦不乏醫(yī)家應(yīng)用。國(guó)醫(yī)大師蒲輔周發(fā)現(xiàn)海藻、甘草同用之后，其軟堅(jiān)散結(jié)之功效更強(qiáng)，不良反應(yīng)亦并不明顯[11]。朱良春等[12]將海藻-甘草藥對(duì)用于治療單純性及地方性甲狀腺腫大、頸淋巴結(jié)核和腫瘤，療效顯著；將這一藥對(duì)與甘遂同用，治療胸水、滲出性胸膜炎，皆療效顯著且未顯示出不良反應(yīng)。以海藻和甘草為主藥的攻癌奪命湯在臨床上用于治療多種惡性腫瘤，療效顯著[13]?，F(xiàn)代研究表明，海藻和甘草在特定條件下同用，不僅無(wú)不良反應(yīng)，而且對(duì)特定疾病的治療效果顯著，如甲狀腺腫大。海藻玉壺湯作為經(jīng)典名方，現(xiàn)代臨床常用于治療甲狀腺疾病，其處方組成中含有海藻-甘草反藥組合。Zhang等[14]通過(guò)整合微陣列基因表達(dá)譜、網(wǎng)絡(luò)分析和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證的綜合研究，發(fā)現(xiàn)海藻玉壺湯能夠減輕PTU 所致的大鼠甲狀腺腫大，并進(jìn)一步驗(yàn)證其治療作用是通過(guò)調(diào)節(jié)甲狀腺激素合成而實(shí)現(xiàn)的。Xiu 等[15]實(shí)驗(yàn)證明，含海藻-甘草反藥組合的海藻玉壺湯通過(guò)作用于下丘腦-垂體-甲狀腺軸起到抗甲狀腺腫大的作用。以上實(shí)驗(yàn)說(shuō)明，含反藥組合的海藻玉壺湯抗甲狀腺腫大的作用與激素調(diào)節(jié)有關(guān)。丁選勝等[16]從多個(gè)角度探究海藻單煎液、甘草單煎液、兩者不同配伍比例合煎液及單煎后的混合液對(duì)甲狀腺腫大大鼠的治療作用，結(jié)果顯示，海藻-甘草合煎液在降低甲狀腺指數(shù)方面效果明顯優(yōu)于單煎后混合液組，且強(qiáng)于含碘的對(duì)照組，說(shuō)明海藻、甘草反藥合用后對(duì)甲狀腺腫大的糾正作用不僅是因?yàn)橹兴庯嬈泻懈邉┝康庠?，還與中藥配伍的協(xié)同作用關(guān)系密切，進(jìn)一步強(qiáng)調(diào)了這一藥對(duì)配伍使用的必要性和重要性。李玉婷[17]運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)方法探究含海藻-甘草反藥組合的海藻玉壺湯治療甲狀腺腫大大鼠的作用機(jī)制，共篩選出8 個(gè)基因，均與甲狀腺激素的合成有關(guān)，推測(cè)海藻玉壺湯對(duì)甲狀腺腫大大鼠的糾正作用與甲狀腺激素的合成通路有密切關(guān)系。

碘由碘同向轉(zhuǎn)運(yùn)體（NIS）轉(zhuǎn)運(yùn)到甲狀腺濾泡細(xì)胞中，繼而被過(guò)氧化物酶活化，活化的碘與酪氨酸殘基結(jié)合形成碘酪氨酸，單碘酪氨酸（MIT）和二碘酪氨酸（DIT）偶聯(lián)形成T4 和T3。本實(shí)驗(yàn)選擇PTU 為造模藥，其主要機(jī)制是抑制甲狀腺過(guò)氧化物酶，阻斷甲狀腺內(nèi)酪氨酸碘化及碘化酪氨酸的縮合，從而抑制甲狀腺素的合成，通過(guò)下丘腦-垂體-甲狀腺軸的負(fù)反饋機(jī)制促進(jìn)TSH 升高，導(dǎo)致甲狀腺腫大的發(fā)生。本課題組前期實(shí)驗(yàn)表明，應(yīng)用PTU 造模后，模型組大鼠的尿碘水平明顯升高[6]，進(jìn)一步證明，PTU通過(guò)影響碘的代謝導(dǎo)致甲狀腺腫大的發(fā)生。給予相應(yīng)中藥治療后，海藻玉壺湯全方及去掉1 味或2 味反藥組合各組對(duì)模型大鼠均有糾正作用。根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果，與模型組相比，各中藥治療組大鼠甲狀腺系數(shù)顯著降低，甲狀腺腫大的癥狀明顯改善。呂艷敏等[18]在對(duì)甲狀腺組織進(jìn)行評(píng)價(jià)時(shí)，引入了細(xì)胞核數(shù)目、濾泡腔面積2 個(gè)參數(shù)，來(lái)反映濾泡上皮細(xì)胞的增生程度。何全利等[19]在探究白藜蘆醇對(duì)甲狀腺腫大大鼠的作用時(shí)，分別測(cè)量上皮細(xì)胞的高度和濾泡腔面積，以此進(jìn)行組間比較。在本實(shí)驗(yàn)中，各給藥組大鼠較模型組表現(xiàn)出不同程度的改善，細(xì)胞核數(shù)目明顯減少，濾泡上皮細(xì)胞高度降低，濾泡腔面積顯著增加，以上參數(shù)的變化充分表明海藻玉壺湯全方及去掉1 味或2 味反藥組均對(duì)甲狀腺腫大大鼠有良好的治療效果。優(yōu)甲樂(lè)組因其能夠直接升高甲狀腺腫大大鼠體內(nèi)的甲狀腺激素水平，所以未對(duì)甲狀腺腫大的癥狀起到治療作用。

甲狀腺的主要功能是合成甲狀腺激素，最能直接反映其功能狀態(tài)的指標(biāo)是甲功5 項(xiàng)，即T3、T4、FT3、FT4和TSH。本實(shí)驗(yàn)中所復(fù)制的模型是甲減模型，其診斷標(biāo)準(zhǔn)為血清中T3、T4水平降低及TSH水平增高[20-21]。甲狀腺激素是垂體前葉合成和分泌的一種糖蛋白，其合成與分泌與T3 和T4 水平有密切關(guān)系。甲減狀態(tài)下，體內(nèi)T3、T4水平明顯降低，通過(guò)下丘腦-垂體-甲狀腺軸的負(fù)反饋機(jī)制促進(jìn)TSH 的分泌，TSH 能夠刺激甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞增生肥大，從而導(dǎo)致甲狀腺腫大。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與模型組相比，全方組和陽(yáng)性藥組大鼠血清中T3、T4水平顯著升高，與對(duì)照組激素水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，血清中TSH 含量有降低趨勢(shì)。全方去掉1 味或2 味反藥組激素含量變化不明顯。進(jìn)一步說(shuō)明海藻和甘草這一反藥組合是海藻玉壺湯中不可缺少的重要配伍。FT3、FT4雖然在體內(nèi)水平較低，但卻是甲狀腺激素的活性部分，是真正發(fā)揮生理作用的重要成分。有學(xué)者主張聯(lián)合測(cè)定FT3、FT4和TSH，因?yàn)檫@樣才能更準(zhǔn)確地判斷甲狀腺的功能狀態(tài)[21]。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，模型組大鼠血清中FT3、FT4的水平顯著降低。與模型組比較，陽(yáng)性藥組和全方組有升高趨勢(shì)。在甲狀腺激素水平上，含反藥組合的海藻玉壺湯對(duì)甲狀腺激素的糾正作用明顯優(yōu)于全方去掉1 味或2 味反藥組，進(jìn)一步證明海藻-甘草反藥組合對(duì)于海藻玉壺湯的重要性，而海藻玉壺湯全方及加減海藻-甘草組對(duì)甲狀腺激素水平的糾正主要體現(xiàn)在T3、T4 水平的升高，并未對(duì)FT3、FT4 和TSH水平表達(dá)有顯著影響，推測(cè)可能由于海藻玉壺湯的碘離子加速了T3、T4的合成，而未對(duì)其他激素的生成產(chǎn)生顯著作用。優(yōu)甲樂(lè)通過(guò)迅速補(bǔ)充T4，體內(nèi)轉(zhuǎn)換為生物活性較強(qiáng)的T3，起到補(bǔ)充甲狀腺素的作用。在課題組前期研究中，同樣發(fā)現(xiàn)優(yōu)甲樂(lè)能夠顯著恢復(fù)血清激素水平，但在甲狀腺系數(shù)和甲狀腺病理形態(tài)等方面無(wú)明顯糾正作用[7,18]。

綜上所述，海藻玉壺湯全方及去掉1味或2味反藥組合對(duì)PTU 引起的甲狀腺腫大均有糾正作用，使大鼠甲狀腺系數(shù)顯著降低，病理形態(tài)明顯改善，且全方組效果明顯優(yōu)于全方去掉1味或2味反藥組，說(shuō)明海藻與甘草這一反藥組合若合理應(yīng)用，在治療甲狀腺腫大方面效果顯著。但對(duì)于激素的影響，全方與全方去掉1味或2味反藥組顯示出一定差異，提示海藻玉壺湯對(duì)甲狀腺腫大大鼠的治療并不僅限于調(diào)節(jié)激素水平。張晨[22]實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，海藻玉壺湯能夠影響凋亡蛋白B 細(xì)胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、Bcl-2 相關(guān)X 蛋白（Bax）的表達(dá)水平，從而起到抗甲狀腺腫大的作用。Bcl-2 家族是細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)劑，提示含反藥組合的海藻玉壺湯對(duì)甲狀腺腫大的治療作用與調(diào)節(jié)細(xì)胞凋亡有關(guān)，這一研究成果為探究含反藥組合的海藻玉壺湯對(duì)甲狀腺腫大的治療機(jī)制提供了新的思路。本實(shí)驗(yàn)初步探討了海藻玉壺湯對(duì)甲狀腺腫大大鼠的影響，其具體作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。