IL-8 等炎性因子與bFSH在子宮內(nèi)膜異位癥不孕患者腹腔液水平及其與不孕的關(guān)系

王莉，翟俊英，鈕紅麗

（南陽市第一人民醫(yī)院生殖科，河南 南陽 473000）

子宮內(nèi)膜異位癥(endometriosis,EMs)是指脫離的子宮內(nèi)膜組織異位到宮腔以外的部位,且在其局部生長、浸潤，引起反復(fù)出血、疼痛等一系列臨床癥狀[1]。除與子宮內(nèi)膜異位癥致盆腔結(jié)構(gòu)改變有關(guān)外還可能造成機體生化反應(yīng)異常，引起不孕。目前臨床上對于該病的發(fā)病機制尚未完全闡明，既往有研究指出,脫離的子宮內(nèi)膜組織之所以能夠成功異位種植,與炎性因子細(xì)胞分泌及炎性反應(yīng)增加而有密切聯(lián)系[2]。為進(jìn)一步明確炎性因子與EMs 之間的關(guān)系，本文選取240例行腹腔鏡手術(shù)治療患者進(jìn)行了白介素-8(interleukin-8,IL-8)、血管內(nèi)皮生長因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、腫瘤壞死因子-α (tumor necrosis factor-α,TNF-α)、糖類抗原125 (carbohydrate antigen 125,CA125)、基礎(chǔ)卵泡刺激素 (basal follicle-stimulating hormone,bFSH)臨床實驗探究，旨在分析子宮內(nèi)膜異位癥不孕患者腹腔液有關(guān)炎癥因子水平與病情進(jìn)展及bFSH的關(guān)系?，F(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 分析2017年6 月-2020年10 月診治的240例行腹腔鏡手術(shù)治療患者的臨床資料。根據(jù)疾病的不同分為觀察組（患有EMs 不孕患者）與對照組（同期手術(shù)非EMs 不孕患者），各120例。診斷標(biāo)準(zhǔn)：觀察組患者均符合“子宮內(nèi)膜異位癥的診治指南”[3,4]中關(guān)于子宮內(nèi)膜異位癥的診斷標(biāo)準(zhǔn)，符合“不孕癥診斷指南”中關(guān)于不孕診斷標(biāo)準(zhǔn)，即正常性生活一年未妊娠者。納入標(biāo)準(zhǔn)：⑴首次行腹腔鏡手術(shù)治療；⑵觀察組患者經(jīng)病理證實為子宮內(nèi)膜異位癥，囊腫直徑＞6cm；⑶所有受檢人員經(jīng)術(shù)前檢查其凝血功能正常；⑷臨床資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：⑴伴有嚴(yán)重臟器功能障礙,如肝腎功能不全等；⑵伴有嚴(yán)重糖尿病及高血壓；⑶手術(shù)治療前3 個月內(nèi)服過激素類藥物。觀察組年齡范圍為23～45歲，平均值34.25±1.65 歲；BMI 指數(shù)18～25kg/m2，平均值21.25±2.12kg/m2；月經(jīng)周期8～15d,平均值11.25±2.32d；經(jīng)病理檢查確診為Ⅰ～Ⅱ期60例、Ⅲ-Ⅳ期60例。對照組年齡范圍為22～45 歲，平均值33.19±1.68 歲;BMI 指數(shù)19～25kg/m2,平均值21.29±2.08kg/m2；月經(jīng)周期5～8d,平均值6.25±1.05d；對照組因子宮肌瘤行腹腔鏡手術(shù)治療共80例、因多囊卵巢綜合征行手術(shù)治療共30例、因畸胎瘤等其他手術(shù)治療共10例。兩組在年齡、BMI 指數(shù)等一般資料比較齊同（P＞0.05），存在可比性。

1.2 方法 腹腔液采集方法：受檢人員均在月經(jīng)結(jié)束后3～7d 行腹腔鏡手術(shù)治療；手術(shù)治療期間采集腹腔液，即選擇無菌取卵針，在子宮直腸凹陷及膀胱凹陷部位采集，取出腹腔液后立即離心（2000g/min,10min），分離上清液將其放置在-70 ℃環(huán)境下保存待檢測。

實驗室檢測，IL-8、VEGF、TNF-α 采用酶聯(lián)免疫吸附雙抗夾心法測定，試劑盒由深圳晶美公司提 供；CA125、bFSH 采用免 疫發(fā)光 法（Bayer ACS180 化學(xué)發(fā)光免疫分析儀及其配套試劑）測定。標(biāo)本采集均由經(jīng)驗豐富的醫(yī)師進(jìn)行，實驗室檢測嚴(yán)格按照說明書步驟操作。

1.3 觀察指標(biāo) a 評估觀察組與對照組的白介素-8(IL-8)、血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)、糖類抗原125 (CA125)、基礎(chǔ)卵泡刺激素bFSH)水平；b 評估不同EMs 分期的IL-8、VEGF、TNF-α、CA125、bFSH水平；c 分析EMs 分期與VEGF、TNF-α、CA125、IL-8的相關(guān)性；d 分析IL-8與VEGF、TNF-α、CA125、bFSH的相關(guān)性；e評估IL-8、bFSH的AUC 值。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 采用SPSS22.0 軟件分析本次數(shù)據(jù)。計量資料用（）表示，行獨立樣本t 檢驗；計數(shù)資料用（n；%）表示，行χ2檢驗；相關(guān)性采用Pearsom 法分析；預(yù)測價值采用ROC 曲線分析；P＜0.05 為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 IL-8、VEGF、TNF-α、CA125、bFSH 指標(biāo)比 較觀察組的IL-8、VEGF、TNF-α、CA125、bFSH 高于對照組（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組IL-8、VEGF、TNF-α、CA125、bFSH 比較

2.2 不 同 EMs 分期的 IL -8、VEGF、TNF -α、CA125、bFSH 指標(biāo)比較Ⅰ-Ⅱ期的IL-8、VEGF、TNF-α、CA125 低于Ⅲ-Ⅳ期（P＜0.05）；Ⅰ-Ⅱ期的bFSH與Ⅲ-Ⅳ期相比，隨著分期增加差異也有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 Ⅰ-Ⅱ期與Ⅲ-Ⅳ期的IL-8、VEGF、TNF-α、CA125、bFSH 比較

2.3 相關(guān)性分析 Pearson 相關(guān)性顯示，VEGF、TNF-α、CA125、IL-8與EMs 分期呈正相關(guān)性（P＜0.05）。見表3。

表3 EMs 分期與VEGF、TNF-α、CA125、IL-8的相關(guān)性分析

2.4 相關(guān)性分析 Pearson 相關(guān)性顯示，VEGF、TNF-α、CA125、bFSH與IL-8 呈正相關(guān)性（P ＜0.05）。見表4。散點圖見圖1、2、3、4。

表4 IL-8與VEGF、TNF-α、CA125、bFSH的相關(guān)性分析

圖1 VEGF

2.5 IL-8和bFSH 鑒別EMs 分期的效能分析ROC 曲線分析顯示，IL-8、bFSH 曲線下面積AUC值為（0.992/0.853，P＜0.05）。見表5。ROC 曲線見圖5。

表5 IL-8、bFSH的效能分析

圖5 ROC 曲線分析

3 討論

子宮內(nèi)膜異位癥（EMs）是育齡期女性常見、以侵襲性生長、反復(fù)發(fā)作及轉(zhuǎn)移為特點的雌激素依賴性疾病[5]。EMs 雖然是一種良性病變，但其存在向遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移或種植生長的可能，譬如種植在腹膜、盆腔臟器等部位，隨著病情發(fā)展可逐漸侵犯卵巢，引起排卵功能障礙和不孕。

圖2 TNF-α

圖3 CA125

圖4 bFSH

本研究結(jié)果顯示，觀察組腹腔液IL-8、VEGF、TNF-α、CA125、bFSH水平高于對照組（P＜0.05），其中尤以IL-8水平最高；VEGF、TNF-α 指標(biāo)顯著增高；CA125、bFSH 指標(biāo)次之，由此推測EMs患者腹腔微環(huán)境的變化對EMs 發(fā)生、發(fā)展具有一定影響，分析認(rèn)為引起不孕的不單單是卵巢功能障礙，還包括局部炎性介質(zhì)的增加,即在炎癥反應(yīng)和免疫反應(yīng)的作用下，細(xì)胞因子會在一定程度上損害腹膜表面，導(dǎo)致組胺、激素的增加，最終形成永久性粘連及包塊等炎癥性改變[6]。本文結(jié)果中還可見，觀察組IL-8、VEGF、TNF-α、CA125 病理Ⅲ-Ⅳ期的含量高于Ⅰ-Ⅱ期，說明炎癥因子參與了Ems 疾病病理的發(fā)病過程，而且會隨著疾病的加重而上升；同時臨床還發(fā)現(xiàn)，上述病理變化Ⅰ-Ⅱ期EMs患者嚴(yán)重程度不高，輸卵管和卵巢未完全受到損害。故本文認(rèn)為Ⅰ-Ⅱ期患者的不孕與局部解剖組織的變化無直接關(guān)系，經(jīng)深入研究觀察到，造成其不孕的原因為卵巢功能的變化，卵巢功能變化又與腹腔環(huán)境的突變、子宮腔內(nèi)環(huán)境的改變等因素具有很大相關(guān)性[7,8]。

本研究Pearson 相關(guān)性顯示，VEGF、TNF-α、CA125、IL-8 含量與EMs 分期呈正相關(guān)（P＜0.05），因此本文認(rèn)為檢測上述指標(biāo)水平十分必要，這些指標(biāo)在EMs患者不孕過程中有重要作用并能為臨床及早診斷提供重要信息。Pearson 相關(guān)性和散點圖還顯示，VEGF、TNF-α、CA125、bFSH與IL-8 呈正相關(guān)性（P＜0.05）,充分說明了IL-8的診斷價值。IL-8 是由多種細(xì)胞分泌而來如巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等，既能介導(dǎo)炎癥反應(yīng)過程，又能誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖及遷移如促進(jìn)血管生成，故臨床上認(rèn)為其具有多重作用。在腹膜炎癥環(huán)境下巨噬細(xì)胞會釋放大量的IL-8 經(jīng)血逆流至腹腔，子宮內(nèi)膜中的IL-8可帶至腹腔，進(jìn)一步提高腹腔液中的IL-8 含量，而IL-8的高表達(dá)能促使異位內(nèi)膜基底部形成毛細(xì)血管，導(dǎo)致異位內(nèi)膜增殖及進(jìn)一步浸潤[9,10]。另外其他因子，VEGF 能與血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的特異性受體結(jié)合，通過促使毛細(xì)血管增生，繼而支持異位內(nèi)膜的種植及生長[11]。TNF-α 是一種具備多功能的細(xì)胞因子，例如抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)、炎癥介導(dǎo)、細(xì)胞凋亡等，參與了多種生理及免疫過程[12]。CA125 是一種高分子糖蛋白，主要分布在胚胎體腔上皮，臨床上將其作為上皮性卵巢腫瘤的標(biāo)志物[13]。在研究結(jié)果中可見，隨著EMs 分期的增加，CA125水平也會相應(yīng)升高，表明該指標(biāo)參與了EMs 發(fā)病過程。bFSH水平是臨床評估卵巢儲備功能的重要指標(biāo),當(dāng)基礎(chǔ)bFSH水平上升，卵巢儲備功能就會不斷下降[14]。本研究可見，觀察組bFSH的水平高于對照組，從而提示EMs患者卵巢功能存在逐漸下降趨勢，且隨著分期的增加其下降趨勢明顯；經(jīng)相關(guān)性分析，bFSH與IL-8 呈正相關(guān)性，說明EMs患者的不孕及卵巢功能受損與炎癥反應(yīng)具有一定相關(guān)性，巨噬細(xì)胞活性的不斷提升，會對不孕的產(chǎn)生造成不利影響，進(jìn)一步證實了腹腔液IL-8水平在EMs 發(fā)生、發(fā)展中的重要作用。

綜上所述，EMs 不孕患者的腹腔液 IL-8、VEGF、TNF-α、CA125、bFSH水平均明顯升高，會隨著病情的進(jìn)展隨之上升；IL-8水平與病情進(jìn)展呈正相關(guān)，與bFSH 呈正相關(guān)；多項指標(biāo)聯(lián)合應(yīng)用對臨床診療價值和指導(dǎo)意義更高。由于EMs 病況與發(fā)病機制復(fù)雜，盡管已有一些單個項目的分析研究，但是本研究結(jié)果與既往他人有相通又有不同之處，進(jìn)一步對Ems與相關(guān)炎性因子關(guān)系展開深入探討仍具有實際應(yīng)用價值。