波生坦片在健康人體內(nèi)的生物等效性研究

何秀玲，譚金華，宋天云，夏小容，唐 霞

(江門市五邑中醫(yī)院，廣東 江門 529000)

波生坦片在體內(nèi)部分向活性產(chǎn)物羥基波生坦代謝，一方面具有對內(nèi)皮素A受體的親和作用，另一方面還具有對內(nèi)皮素B受體的親和作用，屬于一種雙重內(nèi)皮素受體拮抗劑，能夠促進(jìn)肺及全身血管阻力的降低，在不將心率提升的情況下將心臟輸出量增加[1]。在Ⅲ期、Ⅳ期動脈性肺動脈高壓患者的治療中應(yīng)用[2]。本文研究了健康體檢人員體內(nèi)波生坦片的生物等效性。

1 材料與方法

1.1 一般資料

回顧性選取2019年3月至2020年10月本院健康體檢人員80例，其中男性42例(52.5%)，女性38例(47.5%)，年齡18～35歲，平均(26.3±4.5)歲；體質(zhì)量55～76kg，平均(65.3±10.4)kg；身高164～180cm，平均(172.5±10.3)cm；體質(zhì)量指數(shù)19～24kg/m2，平均(21.3±3.4)kg/m2。

1.2 納入和排除標(biāo)準(zhǔn)

納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)均經(jīng)生命體征檢查、體格檢查、12導(dǎo)聯(lián)心電圖檢查、實(shí)驗(yàn)室檢查確定為健康人員；(2)體質(zhì)量均在50kg及以上；(3)均具有良好的依從性。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)有器官疾病史；(2)有藥物濫用史；(3)近2周內(nèi)應(yīng)用過中成藥、處方藥及非處方藥。

1.3 方法

1.3.1藥品、試劑和儀器

購買國內(nèi)醫(yī)藥企業(yè)生產(chǎn)的波生坦片(規(guī)格：125mg/片，生產(chǎn)批號：201560302)作為受試試劑(T)，購買美國Genentetch Inc與瑞典Actelion公司聯(lián)合開發(fā)生產(chǎn)的波生坦片(全可利，規(guī)格：125mg/片，生產(chǎn)批號：IPO59A0201)作為參比制劑(R)，購買國內(nèi)醫(yī)藥企業(yè)生產(chǎn)的波生坦對照品(純度96.7%，生產(chǎn)批號D0)、Toronto Research Chemicals生產(chǎn)的羥基波生坦對照品(純度98.0%，生產(chǎn)批號1-YHH-52-2)、內(nèi)標(biāo)波生坦-d4(純度95.0%，生產(chǎn)批號6-XAL-5-1)、羥基波生坦-d4(純度95.0%，生產(chǎn)批號14-MVI-183-3)。購買美國Applied Biosystems/SCIEX公司圣翰的QTRAP 5500質(zhì)譜，日本島津公司生產(chǎn)的LC-30AD液相色譜。

1.3.2測定方法

1.3.2.1 色譜條件

色譜柱：1.9μm Hypersil Gold C18，規(guī)格為2.1mm×100mm。流動相A相、B相分別為5mmol醋酸銨水溶液、甲醇，流速、柱溫分別為0.3mL/min、40℃。自動進(jìn)樣器溫度、進(jìn)樣量分別為4℃、5μl。洗脫梯度(A相：B相)：90：10、90：10～10：90、10：90、90：10分別0.00～0.30min、0.30～0.60min、0.60～2.50min、2.51～4.00min。

1.3.2.2 質(zhì)譜條件

采用正離子電噴霧離子源(ESI)，應(yīng)用多反應(yīng)監(jiān)測模式。離子化電壓、氣簾氣、溫度、霧化氣(Gas1)、輔助氣(Gas2)分別為5500V、40L/min、550℃、30L/min、60L/min。波生坦的檢測離子對為m/z552.0→m/z508.0，羥基波生坦的檢測離子對為m/z568.0→m/z202.0，內(nèi)標(biāo)波生坦-d4的檢測離子對為m/z556.0→m/z508.0，羥基波生坦-d4的檢測離子對為m/z572.0→m/z202.0。

1.3.2.3 血漿樣品處理

混旋50μl血漿樣品+400μl內(nèi)標(biāo)工作液(波生坦d-4/羥基波生坦-d4：10/6ng/mL)混勻2min，在4℃的溫度下離心10min，速率為3000r/min，將100μl上清液取出來進(jìn)樣分析。

1.4 觀察指標(biāo)

(1)健康人血漿中波生坦片、羥基波生坦的精密度和回收率；(2)健康人供試品和參比制劑波生坦片空腹、餐后主要藥動學(xué)參數(shù)。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

2.1 健康人血漿中波生坦片的精密度和回收率分析

健康人50ng/mL、100ng/mL、500ng/mL、3200ng/mL血漿中波生坦的日內(nèi)、跨日精密度均逐漸升高(P<0.05)。見表1。

表1 健康人血漿中波生坦片的精密度和回收率分析

2.2 健康人血漿中羥基波生坦的精密度和回收率分析

健康人50ng/mL、100ng/mL、500ng/mL、3200ng/mL血漿中羥基波生坦的日內(nèi)、跨日精密度均逐漸升高(P<0.05)。見表2。

表2 健康人血漿中羥基波生坦的精密度和回收率分析

2.3 健康人供試品和參比制劑波生坦片空腹主要藥動學(xué)參數(shù)比較

健康人波生坦片空腹試驗(yàn)、參考Cmax、AUC0-t、AUC0-∞均顯著高于羥基波生坦(P<0.05)，tmax、t1/2均顯著低于羥基波生坦(P<0.05)。見表3。

表3 健康人供試品和參比制劑波生坦片空腹主要藥動學(xué)參數(shù)比較

2.4 健康人供試品和參比制劑波生坦片餐后主要藥動學(xué)參數(shù)

健康人波生坦片餐后試驗(yàn)、參考Cmax、AUC0-t、AUC0-∞均顯著高于羥基波生坦(P<0.05)，tmax、t1/2均顯著低于羥基波生坦(P<0.05)。見表4。

表4 健康人供試品和參比制劑波生坦片餐后主要藥動學(xué)參數(shù)比較

3 討論

相關(guān)醫(yī)學(xué)研究表明[3-4]，在空腹條件下、餐后條件下，波生坦片受試制劑、參比制劑均具有生物等效性。本研究結(jié)果表明，健康人50ng/mL、100ng/mL、500ng/mL、3200ng/mL血漿中波生坦的日內(nèi)、跨日精密度均逐漸升高。健康人50ng/mL、100ng/mL、500ng/mL、3200ng/mL血漿中羥基波生坦的日內(nèi)、跨日精密度均逐漸升高。健康人波生坦片空腹試驗(yàn)、參考Cmax、AUC0-t、AUC0-∞均顯著高于羥基波生坦，tmax、t1/2均顯著低于羥基波生坦。健康人波生坦片餐后試驗(yàn)、參考Cmax、AUC0-t、AUC0-∞均顯著高于羥基波生坦，tmax、t1/2均顯著低于羥基波生坦，和上述研究結(jié)果一致。

綜上所述，健康體檢人員體內(nèi)波生坦片在空腹、餐后條件下均具有生物等效性。