電感耦合等離子體質(zhì)譜在細(xì)菌多組分分析中的應(yīng)用

張鈺清，孫公偉，邢 志，張四純，張新榮

(清華大學(xué)化學(xué)系，北京 100084)

細(xì)菌在微生物種群活動(dòng)與人體健康的關(guān)系、微生物致病研究中占據(jù)著重要的位置[1]。大量研究表明，除了侵入人體的細(xì)菌會(huì)直接或間接導(dǎo)致多種疾病，人體內(nèi)細(xì)菌群落的組成結(jié)構(gòu)也會(huì)對(duì)人體的激素水平、血壓調(diào)控，甚至癌癥治療產(chǎn)生影響[2]。為了深入研究細(xì)菌及其產(chǎn)物對(duì)生物體的作用，研究者們對(duì)精準(zhǔn)、快速的細(xì)菌檢測(cè)、鑒定和分型方法有了越來(lái)越高的需求[3-5]。

常用的細(xì)菌檢測(cè)方法有生化染色法、核酸測(cè)序法、電化學(xué)檢測(cè)法、熒光標(biāo)記法、酶聯(lián)免疫檢測(cè)法、質(zhì)譜檢測(cè)法等[6-16]。生化染色法和核酸測(cè)序法是早期細(xì)菌鑒定的金標(biāo)方法。前者主要通過(guò)觀察菌落形態(tài)和細(xì)菌細(xì)胞壁特殊分子的生化染色結(jié)果，識(shí)別菌株種類；后者則是通過(guò)對(duì)細(xì)菌核酸的擴(kuò)增檢測(cè)和基因測(cè)序來(lái)確定細(xì)菌的種類。但是這兩種方法對(duì)細(xì)菌的純度要求較高，需要在細(xì)菌的分離培養(yǎng)上花費(fèi)大量時(shí)間，難以實(shí)現(xiàn)對(duì)混合細(xì)菌的快速檢測(cè)[5]。電化學(xué)法、熒光標(biāo)記法、酶聯(lián)免疫法大多依靠細(xì)菌的特異性抗原或者特征核酸片段識(shí)別細(xì)菌，根據(jù)反應(yīng)前后電信號(hào)或光信號(hào)的變化表征細(xì)菌的數(shù)量。雖然檢測(cè)成本較低且檢測(cè)速度快，但在進(jìn)行多組分檢測(cè)時(shí)會(huì)受到限制。電化學(xué)法和酶聯(lián)免疫法不適用于多組分的同時(shí)檢測(cè)，而熒光法雖然有多種熒光標(biāo)記基團(tuán)可供選擇，但在實(shí)際進(jìn)行多組分檢測(cè)時(shí)，不可避免的光譜重疊會(huì)限制可同時(shí)使用的熒光探針數(shù)量[17-19]。

結(jié)合元素標(biāo)記策略的電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP-MS)法通過(guò)對(duì)標(biāo)記元素的直接檢測(cè)，可實(shí)現(xiàn)生物樣品的多組分定量分析[20]。2001年，本課題組提出了結(jié)合元素標(biāo)記策略的ICP-MS免疫分析法[21]。隨后，ICP-MS被進(jìn)一步用于生物樣品中蛋白質(zhì)、核酸等多種生物分子的定量分析[22-27]。ICP-MS對(duì)大多數(shù)金屬元素的檢測(cè)具有靈敏度高、線性范圍寬、可多元素同時(shí)定量等優(yōu)勢(shì)，且可僅通過(guò)質(zhì)荷比識(shí)別元素種類，不要求元素標(biāo)記，具有特殊的光、電、磁特性[28-30]。同時(shí)，作為標(biāo)記的每種無(wú)機(jī)元素信號(hào)對(duì)應(yīng)唯一的生物分子，元素探針之間一般不會(huì)互相干擾，且可以采用同位素比值進(jìn)行校正，有效地保證了檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性[31]。此外，還可使用金屬納米粒子標(biāo)記、結(jié)合多種信號(hào)放大方法，提高檢測(cè)的靈敏度。使用ICP-MS分析細(xì)菌樣品時(shí)，細(xì)菌的特征代謝物、蛋白質(zhì)和核酸片段均可作為待測(cè)對(duì)象，用于判斷細(xì)菌的種類并表征其種群數(shù)量。本文將綜述目前ICP-MS在細(xì)菌分析方面的應(yīng)用，并對(duì)相關(guān)研究的發(fā)展方向和前景進(jìn)行展望。

1 細(xì)菌的ICP-MS檢測(cè)方法

ICP-MS很難直接對(duì)不含特殊金屬元素的生物分子進(jìn)行檢測(cè)，但對(duì)于無(wú)機(jī)元素有著極高的靈敏度和寬線性范圍的定量能力。利用這一特性，既可以使用元素標(biāo)簽標(biāo)記目標(biāo)分子，通過(guò)相應(yīng)標(biāo)記的元素信號(hào)對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行定量檢測(cè)，也可通過(guò)檢測(cè)某些特殊細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)無(wú)機(jī)元素含量來(lái)識(shí)別特定細(xì)菌。選取生物體自身不含有的金屬元素作為標(biāo)記，能實(shí)現(xiàn)目標(biāo)物質(zhì)的絕對(duì)定量分析。不同標(biāo)記元素在ICP-MS檢測(cè)時(shí)會(huì)產(chǎn)生彼此獨(dú)立的信號(hào)峰，通常不存在譜線重疊問(wèn)題，適合進(jìn)行多組分檢測(cè)。為了更有效地識(shí)別細(xì)菌種類和確定濃度，采用ICP-MS檢測(cè)細(xì)菌時(shí)，大多會(huì)選擇蛋白抗原、特征核酸片段等可進(jìn)行特異性識(shí)別的生物大分子作為目標(biāo)物。

得益于對(duì)核酸序列和蛋白標(biāo)志物結(jié)構(gòu)的深入研究，這些特征大分子物質(zhì)的元素標(biāo)記更加高效。通過(guò)抗原-抗體識(shí)別、生物正交反應(yīng)、核酸互補(bǔ)雜交等特異性結(jié)合策略，目標(biāo)分子會(huì)與元素標(biāo)記的蛋白或核酸探針高效地結(jié)合，隨后只需根據(jù)標(biāo)記元素的信號(hào)強(qiáng)度就可以判斷相應(yīng)目標(biāo)分子的含量。ICP-MS檢測(cè)細(xì)菌時(shí)的樣品前處理過(guò)程更簡(jiǎn)單，結(jié)果更簡(jiǎn)潔明晰，且在鑒別種類的同時(shí)，能提供定量信息，適用于混合細(xì)菌的種群研究。這類直接檢測(cè)方式無(wú)需細(xì)菌純化培養(yǎng)，得到的細(xì)菌定量結(jié)果有可能更接近于種群原始的組成狀態(tài)[32]。

1.1 細(xì)菌中金屬元素的ICP-MS檢測(cè)方法

細(xì)菌自身含有的一些無(wú)機(jī)元素，和從外界環(huán)境中富集的元素都能被ICP-MS檢測(cè)到，作為細(xì)菌鑒定的依據(jù)。細(xì)菌吸收的金屬元素會(huì)存在于細(xì)菌的一些功能性蛋白質(zhì)中，幫助維持細(xì)菌結(jié)構(gòu)穩(wěn)定，也會(huì)用于維持細(xì)菌內(nèi)外滲透壓平衡或作為細(xì)菌生存的能量物質(zhì)，通過(guò)檢測(cè)細(xì)菌細(xì)胞的金屬元素種類和含量，可對(duì)細(xì)菌進(jìn)行區(qū)分和鑒定[33]。

ICP-MS對(duì)痕量元素的檢測(cè)能夠達(dá)到pg/g～ng/g的超低檢出限。2004年，Schaefer等[34]使用直接注射法對(duì)不同種類的芽孢桿菌進(jìn)行ICP-MS直接檢測(cè)，分析了多種無(wú)機(jī)元素在細(xì)菌細(xì)胞內(nèi)的含量，證明了不同種類的細(xì)菌由于其生長(zhǎng)歷史和生理功能的差異，其細(xì)胞內(nèi)無(wú)機(jī)元素含量的指紋圖譜存在差異。

2009年，Poole等[35]使用激光解吸電感耦合等離子體質(zhì)譜(LA-ICP-MS)對(duì)大腸桿菌菌落內(nèi)多種金屬元素的分布進(jìn)行原位檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)磷、錳、鋅、鐵、鈣等元素在同一菌落中的空間分布存在差異，并且提出了ICP-MS用于研究細(xì)菌生物膜形成過(guò)程的可能性。

隨后，有研究使用ICP-MS分析了大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、惡臭假單胞菌、綠膿桿菌、綿羊李斯特氏菌、英諾克李斯特氏菌等6種細(xì)菌體內(nèi)鎂、錳、銅等23種無(wú)機(jī)元素的富集程度，發(fā)現(xiàn)不同細(xì)菌含有的無(wú)機(jī)元素濃度分布有較大區(qū)別，通過(guò)分析不同細(xì)菌富集的無(wú)機(jī)元素的指紋譜圖，可以明顯地區(qū)分這6種細(xì)菌[36]。2016年，Lu等[37]通過(guò)分析含10種特征元素的指紋圖譜，鑒別了30種食源性細(xì)菌。Huang等[38]將微滲析采樣技術(shù)與ICP-MS檢測(cè)結(jié)合，對(duì)處于不同生長(zhǎng)階段的細(xì)菌進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)控。通過(guò)對(duì)細(xì)菌培養(yǎng)液中鈷、銅、鈣等元素的定量分析，發(fā)現(xiàn)不同生長(zhǎng)階段的細(xì)菌對(duì)于這些金屬元素的攝取量存在明顯差異。

1.2 細(xì)菌核酸特征片段的ICP-MS檢測(cè)方法

將元素標(biāo)記核酸檢測(cè)策略用于細(xì)菌核酸檢測(cè)，可以在不進(jìn)行核酸擴(kuò)增的情況下，實(shí)現(xiàn)以核酸特征片段為依據(jù)的細(xì)菌定量檢測(cè)。得益于近年來(lái)ICP-MS核酸檢測(cè)分析方法的發(fā)展，細(xì)菌特征核酸片段的檢測(cè)效果能逐漸滿足實(shí)際細(xì)菌樣品的檢測(cè)需求。細(xì)菌的DNA和核糖體RNA(rRNA)上的特征片段是常用的待測(cè)物[39]。且由于核糖體RNA在細(xì)菌細(xì)胞中的含量很高，與細(xì)胞功能相關(guān)的特征基因序列信息較豐富，是目前常用的目標(biāo)物[8,40-42]。

ICP-MS可以直接對(duì)DNA鏈中含有的元素進(jìn)行定量。比如，可以使用ICP-MS的碰撞反應(yīng)池測(cè)定磷的質(zhì)量分?jǐn)?shù)來(lái)反映基因組DNA的定量結(jié)果[43]。由于DNA的分子結(jié)構(gòu)會(huì)直接呈現(xiàn)出磷的含量，所以通過(guò)DNA測(cè)序數(shù)據(jù)，可以將ICP-MS分析結(jié)果轉(zhuǎn)化為DNA基因組單元數(shù)。采用該方法對(duì)嗜肺軍團(tuán)菌基因組DNA進(jìn)行檢測(cè)，其結(jié)果與常用的紫外分光光度法、熒光染料法和實(shí)時(shí)熒光定量PCR的分析結(jié)果基本一致[44]。

使用標(biāo)記探針可以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌核酸更有針對(duì)性的定量分析。Sun課題組[45]使用金納米顆粒標(biāo)記的核酸探針和磁分離技術(shù)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)致病微生物特征核酸的ICP-MS定量檢測(cè)。隨后，Hu課題組[46]報(bào)道了一種簡(jiǎn)便、靈敏的福氏志賀氏菌ICP-MS檢測(cè)方法，即用生物素修飾的捕獲探針和金納米標(biāo)記探針，通過(guò)核酸雜交法實(shí)現(xiàn)目標(biāo)細(xì)菌靶向DNA的鑒定。Jiang課題組[47]結(jié)合DNA/RNA的三明治雜交反應(yīng)、單分子磁捕獲和單顆粒電感耦合等離子體質(zhì)譜信號(hào)放大技術(shù)，建立了一種新型16s rRNA檢測(cè)方法。包被在磁性微球表面的捕獲抗體可以特異性地與待測(cè)物結(jié)合，而連接在金納米顆粒表面的核酸探針可在紫外光下解離。由此，該方法只需經(jīng)過(guò)磁分離和紫外照射兩步，即可完成待測(cè)物的分離富集和標(biāo)記的解離。納米粒子進(jìn)入ICP-MS時(shí)，脈沖信號(hào)頻次與金納米粒子濃度呈線性關(guān)系，由此可計(jì)算出待測(cè)RNA濃度。該方法可直接檢測(cè)對(duì)人類有致病風(fēng)險(xiǎn)的病原體的RNA，并能對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行高精度定量分析，檢出限可達(dá)10 fmol/L。

2020年，本課題組[48]提出使用稀土元素標(biāo)記的核酸探針對(duì)細(xì)菌核酸特征片段進(jìn)行多組分檢測(cè)的ICP-MS分析方法，用于混合細(xì)菌樣品的定量檢測(cè)。該方法利用S1核酸酶處理方法高效提取特征片段，用磁分離方法對(duì)待測(cè)核酸片段進(jìn)行捕獲分離，結(jié)合稀土元素標(biāo)記策略，通過(guò)核酸探針雜交法對(duì)待測(cè)組分進(jìn)行標(biāo)記檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)了對(duì)6種腸道相關(guān)細(xì)菌的同時(shí)鑒定，并在不進(jìn)行純化培養(yǎng)的情況下，對(duì)細(xì)菌數(shù)量進(jìn)行定量檢測(cè)。

1.3 細(xì)菌蛋白標(biāo)志物的檢測(cè)方法

使用ICP-MS檢測(cè)蛋白質(zhì)或者多肽時(shí)，大多需要給待測(cè)物加上金屬元素標(biāo)簽。常用的標(biāo)記方法有化學(xué)修飾標(biāo)記法和免疫親和標(biāo)記法?；瘜W(xué)修飾標(biāo)記法主要依靠細(xì)菌蛋白或多肽上含有的特殊基團(tuán)(可以是天然存在的，也可能是通過(guò)人工培養(yǎng)使細(xì)菌表達(dá)出來(lái)的)，通過(guò)化學(xué)反應(yīng)帶上標(biāo)記。為了在保證標(biāo)記效率的同時(shí)盡量使細(xì)菌的存活率和生理狀態(tài)不受影響，化學(xué)修飾法一般會(huì)選擇低危害的生物正交反應(yīng)進(jìn)行標(biāo)記[49]。而免疫親和標(biāo)記法則是通過(guò)抗原抗體的親和反應(yīng)使細(xì)菌帶上元素標(biāo)簽。免疫親和反應(yīng)是一種高效無(wú)害的溫和反應(yīng)，對(duì)細(xì)菌特征蛋白具有較高的特異性識(shí)別[21]。但是篩選特異性抗體非常耗時(shí)，很難保證需要檢測(cè)的所有細(xì)菌都能找到對(duì)應(yīng)的特異性抗體。為解決這一問(wèn)題，由于核酸適配體具有可控的結(jié)構(gòu)和識(shí)別能力，也被用于特征蛋白的免疫標(biāo)記。

化學(xué)修飾標(biāo)記大多需要培養(yǎng)細(xì)菌以使其細(xì)胞結(jié)構(gòu)帶上特殊的高反應(yīng)效率基團(tuán)。Wang課題組[50]于2019年首次報(bào)道了一種用于計(jì)數(shù)和識(shí)別單個(gè)細(xì)菌細(xì)胞的鑭系元素編碼的ICP-MS檢測(cè)方法，示于圖1。他們將炔基修飾的D型氨基酸(aDA)添加到多種菌株的培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，使細(xì)菌細(xì)胞壁中帶上大量這類炔基修飾的氨基酸。通過(guò)炔基和疊氮的點(diǎn)擊反應(yīng)，在細(xì)菌的細(xì)胞壁上連接含銪元素(Eu)的標(biāo)記物。這樣單個(gè)細(xì)菌細(xì)胞能夠產(chǎn)生超過(guò)5個(gè)數(shù)量級(jí)的信號(hào)擴(kuò)增，在使用單顆粒電感耦合等離子體質(zhì)譜(SP-ICP-MS)檢測(cè)時(shí)，可被視為分散的含Eu顆粒。同時(shí)，通過(guò)免疫反應(yīng)使細(xì)菌標(biāo)記上不同鑭系元素編碼的多克隆抗體，檢測(cè)時(shí)作為特異性細(xì)菌的鑒定信號(hào)識(shí)別細(xì)菌種類。

注：a.細(xì)菌的化學(xué)修飾和免疫標(biāo)記；b.使用SP-ICP-MS進(jìn)行細(xì)菌分類計(jì)數(shù)圖1 鑭系元素標(biāo)記細(xì)菌細(xì)胞計(jì)數(shù)示意圖[50]Fig.1 Scheme of lanthanide labeled bacterial cell count[50]

使用抗體通過(guò)免疫反應(yīng)對(duì)細(xì)菌進(jìn)行特異性標(biāo)記，是細(xì)菌蛋白質(zhì)ICP-MS檢測(cè)的一種常用策略。為了直接檢測(cè)細(xì)菌時(shí)得到更好的檢測(cè)效果，通常會(huì)選擇納米粒子作為元素標(biāo)記[51]。2010年，文獻(xiàn)[52]報(bào)道了一種快速、靈敏的檢測(cè)大腸桿菌的方法，采用抗體親和反應(yīng)、金納米顆粒標(biāo)記和ICP-MS檢測(cè)策略，將修飾了特異性抗體的金納米顆粒作為親和探針識(shí)別大腸桿菌上的特征抗原，隨后根據(jù)ICP-MS測(cè)出的金納米顆粒濃度對(duì)細(xì)菌細(xì)胞進(jìn)行定量分析。利用金納米顆粒的信號(hào)放大特性和ICP-MS的高靈敏度，該方法在40 min內(nèi)即可完成檢測(cè)，且檢出限達(dá)到500 CFU/mL。2015年，Hamme課題組[53]報(bào)道了類似方法，使用金納米標(biāo)記的親和抗體對(duì)沙門氏菌進(jìn)行定量分析，檢出限為100 CFU/mL。

磁性分離是元素標(biāo)記ICP-MS檢測(cè)中常用的分離方法。通過(guò)使待測(cè)物吸附或偶聯(lián)在磁性固體表面，在磁場(chǎng)作用下可以快速有效地將待測(cè)物從復(fù)雜基底中分離，增加檢測(cè)的靈敏度和結(jié)果的準(zhǔn)確性。這種磁免疫分析策略也可用于細(xì)菌特征蛋白和表面抗原的ICP-MS檢測(cè)。2018年，Lim課題組[54]利用新合成的多核磁性納米粒子，建立了傷寒沙門氏菌的磁分離ICP-MS免疫分析方法，可對(duì)傷寒沙門氏菌進(jìn)行絕對(duì)定量檢測(cè)。該方法的獨(dú)特之處在于使用摻雜銫的磁性納米粒子進(jìn)行分離和檢測(cè)，實(shí)現(xiàn)了快速、高靈敏度的分析，且結(jié)果可靠。用填充了25%聚乙二醇的微管對(duì)磁性納米粒子-斑疹傷寒反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行磁電泳分離，隨后用ICP-MS測(cè)定，可以實(shí)現(xiàn)分離和檢測(cè)的連續(xù)進(jìn)行。

結(jié)合了信號(hào)放大策略的ICP-MS免疫分析方法，可以在檢測(cè)細(xì)菌表面標(biāo)志蛋白時(shí)得到更高的靈敏度。如使用金納米顆粒標(biāo)記的雜交鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，對(duì)微生物的檢出限可達(dá)0.12 μg/L[55]。

細(xì)菌從環(huán)境中攝取的金屬元素有時(shí)可以反映細(xì)菌生長(zhǎng)的狀態(tài)和生存歷史[56-57]。結(jié)合元素標(biāo)簽的質(zhì)譜流式細(xì)胞分析方法(CyTOF)已被廣泛用于細(xì)胞分型研究中[58-60]，進(jìn)行高通量的細(xì)菌分型和計(jì)數(shù)[61]，并且還能提供單個(gè)細(xì)菌內(nèi)金屬元素的含量。2017年，Muller等[62]使用流式細(xì)胞儀對(duì)細(xì)菌進(jìn)行單細(xì)胞水平檢測(cè)，使用釕紅和順鉑共同標(biāo)記區(qū)分樣品中活細(xì)胞和死細(xì)胞，并進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，示于圖2。同時(shí)使用ICP-MS檢測(cè)單個(gè)活細(xì)胞中的銀元素，檢出限可達(dá)到1.5 fg。由于同種細(xì)菌不同個(gè)體細(xì)胞中的銀含量可以反映細(xì)菌所處的生理狀態(tài)，用此方法能夠快速檢測(cè)出生長(zhǎng)和不生長(zhǎng)的惡臭假單胞菌細(xì)胞，并分選出其中生長(zhǎng)狀態(tài)良好和活性不足的菌株。

注：a.細(xì)胞經(jīng)染色和標(biāo)記后用CyTOF檢測(cè)；b.正常培養(yǎng)和饑餓培養(yǎng)的細(xì)胞Ru信號(hào)差異區(qū)分；c.使用順鉑標(biāo)記區(qū)分出的死細(xì)胞(Q2)和活細(xì)胞(Q3)；d.使用熒光流式細(xì)胞儀區(qū)分出的死細(xì)胞(R2)和活細(xì)胞(R3)圖2 使用CyTOF檢測(cè)細(xì)菌流程示意圖[56] Fig.2 Scheme of bacterial detection process using CyTOF[56]

2 結(jié)論與展望

近20年來(lái)，基于ICP-MS檢測(cè)的生物分子的多組分分析方法不斷發(fā)展，得以滿足更多細(xì)胞、細(xì)菌等生物樣品的定量分析需求。結(jié)合元素標(biāo)記策略的ICP-MS檢測(cè)方法，目前已經(jīng)可以對(duì)混合細(xì)菌樣品進(jìn)行多組分同時(shí)分析。且隨著對(duì)細(xì)菌研究的深入和檢測(cè)技術(shù)的發(fā)展，越來(lái)越多的生物標(biāo)志物被篩選出來(lái)，作為目標(biāo)待測(cè)物用于細(xì)菌檢測(cè)。然而，現(xiàn)有的細(xì)菌ICP-MS分析工作仍較少，且應(yīng)用范圍大多局限在實(shí)驗(yàn)室研究中，主要原因在于未經(jīng)純化培養(yǎng)的實(shí)際樣品細(xì)菌檢測(cè)難度較大。一方面受限于細(xì)菌分析可用的目標(biāo)物質(zhì)。免疫分析通常會(huì)選擇位于細(xì)菌細(xì)胞壁上或是分泌到細(xì)胞外的目標(biāo)物，但是并非所有細(xì)菌都能篩選出特異性較高的蛋白、多肽類生物標(biāo)志物，現(xiàn)在可以直接檢測(cè)的細(xì)菌特征標(biāo)志物種類有限。而細(xì)菌的特征核酸序列雖然更容易篩選，但是由于核酸大多存在于細(xì)胞內(nèi)部，檢測(cè)前需要較為復(fù)雜的提取過(guò)程，耗時(shí)更長(zhǎng)，因此需要發(fā)展更便捷的樣品前處理方法高效地提取目標(biāo)核酸片段。另一方面則是細(xì)菌定量分析效果會(huì)受限于分析方法的靈敏度。在對(duì)細(xì)菌含量極低的實(shí)際樣品進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，仍然會(huì)存在難以檢出的問(wèn)題。因此需要研制信號(hào)響應(yīng)性更好的元素標(biāo)記，結(jié)合多種信號(hào)擴(kuò)增方法使ICP-MS檢測(cè)能夠更好地滿足低濃度混合細(xì)菌分析的需求，才能進(jìn)一步將其推廣到生物醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用中。

結(jié)合元素標(biāo)記策略的ICP-MS細(xì)菌分析方法，可以快速定量同一群落中不同細(xì)菌的數(shù)目，得到更接近群落原始狀態(tài)的細(xì)菌組成結(jié)構(gòu)。同時(shí)，使用ICP-MS免疫分析方法還能有效地檢測(cè)細(xì)菌的毒性因子、化學(xué)信息素等特殊分泌物，反映細(xì)菌對(duì)外界環(huán)境刺激的響應(yīng)方式。因此，在微生種群的快速鑒定、微生物相互作用研究方面，ICP-MS檢測(cè)仍有較大的發(fā)展空間和應(yīng)用前景。