VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1的表達(dá)對子宮內(nèi)膜異位癥患者診斷的臨床意義

劉 婭，王秀美，薛曉玲，盧 紅

子宮內(nèi)膜異位癥 （endometriosis，EMS）是指功能性的子宮內(nèi)膜組織出現(xiàn)在子宮腔被覆黏膜以外的其他部位，主要癥狀包括痛經(jīng)、月經(jīng)紊亂、不孕以及盆腔疼痛等[1]。EMS在孕齡婦女中發(fā)病率高達(dá)10%～15%，且呈逐年上升趨勢[2]。血清中的生物標(biāo)志物容易獲得，且可以重復(fù)獲取標(biāo)本，已成為很多疾病診斷的重要方法[3-5]。目前，一系列EMS相關(guān)血清標(biāo)志物已被報(bào)道出來[6]。截止目前，無論采用單一指標(biāo)，還是聯(lián)合若干生物標(biāo)志物組合，均未能達(dá)到診斷預(yù)測早期EMS所需的準(zhǔn)確性水平[7-10]。近年來許多學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）參與了EMS的病理過程[11-12]。Glycodelin-A是子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，能促進(jìn)新生血管的生成和細(xì)胞的再生。有研究表明Glycodelin-A在EMS患者血清中的表達(dá)明顯高于卵巢良性囊腫中，從而證明Glycodelin-A可作為卵巢子宮內(nèi)膜異位囊腫的生物標(biāo)志物[13]。Kim等[14]亦證實(shí)在超聲檢查陰性的EMS患者血清中有Glycodelin-A的表達(dá)。可溶性細(xì)胞間黏附分子-1（soluble intercellular adhesion molecule-1，sICAM-1）是一種單鏈糖蛋白，研究證明sICAM-1在Ⅰ-Ⅱ的EMS中表達(dá)水平提高，而在Ⅲ-Ⅳ的患者中表達(dá)水平進(jìn)一步提高，同時在超聲檢查陰性的EMS患者中也有表達(dá)[15]。目前國內(nèi)外較少見對EMS患者血清中VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1的表達(dá)及聯(lián)合三者用于EMS診斷的相關(guān)研究。筆者擬研究EMS患者血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1表達(dá)水平，并評估單獨(dú)及聯(lián)合使用上述指標(biāo)在EMS診斷中的價值。

1 對象與方法

1.1 對象 選取2017年1月—2019年12月于南通大學(xué)附屬海安醫(yī)院就診患者42例（觀察組），并經(jīng)術(shù)后病理確診為EMS，為同期于我院體檢的健康女性42例為對照組。觀察組年齡22～47歲，平均（36.7±5.2）歲，對照組年齡23～46歲，平均（38.2±5.5）歲，2組患者一般資料具有可比性。全部患者均排除內(nèi)分泌疾病及其他可能影響研究結(jié)果的內(nèi)外科疾病，且患者6個月內(nèi)均無激素藥物用藥史。本研究經(jīng)本院倫理委員會審批通過。

1.2 觀察指標(biāo) 患者血清標(biāo)本采集：每個研究對象分別采集靜脈血5 ml，清晨空腹采集，置于含有EDTA-K2抗凝劑的離心管中，常溫下3 500 r/min離心10 min，取上清分裝于多個無菌EP管中，－80 ℃冷凍保存。ELISA法測定2組患者血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1表達(dá)。VEGF-A檢測試劑盒、Glycodelin-A檢測試劑盒、sICAM檢測試劑盒均購自上海齊一生物科技有限公司。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS 22.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，本研究中計(jì)量資料以±s表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；Pearson相關(guān)性分析法進(jìn)行相關(guān)性分析；繪制ROC曲線并對曲線下面積（AUC）進(jìn)行比較；以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 血清中VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1表達(dá)量比較 觀察組血清中VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1表達(dá)水平均顯著高于對照組，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表1）。

表1 子宮內(nèi)膜異位癥患者血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1濃度比較

2.2 血清3項(xiàng)指標(biāo)表達(dá)水平比較 觀察組采用R-AFS分期分為Ⅰ-Ⅳ期，Ⅰ-Ⅱ期患者共計(jì)21例，Ⅲ-Ⅳ期患者21例。分期Ⅲ-Ⅳ期患者血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1濃度均明顯高于Ⅰ-Ⅱ期患者，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）（表2）。

表2 不同分期子宮內(nèi)膜異位癥患者血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1濃度

2.3 血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1表達(dá)相關(guān)性 相關(guān)性分析結(jié)果可見，EMS患者血清VEGF-A、Glycodelin-A濃度水平呈正相關(guān)（r=0.7134，P＜0.01），VEGF-A、sICAM-1濃度水平呈正相關(guān)（r =0.7961，P＜0.01），Glycodelin-A、sICAM-1濃度水平呈正相關(guān)（r=0.7105，P＜0.01）。

2.4 血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1聯(lián)合檢測對EMS診斷效能分析 計(jì)算各組AUC值發(fā)現(xiàn)，單獨(dú)檢測血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1的AUC值分別為0.821、0.805和0.678，三者聯(lián)合檢測的AUC值為0.826?？梢娐?lián)合三項(xiàng)指標(biāo)檢測的診斷價值高于單獨(dú)檢測（圖1）。

圖1 血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1診斷EMS的ROC曲線

3 討論

EMS是一種影響全球數(shù)百萬婦女的疾病，其診斷仍然具有挑戰(zhàn)性。針對EMS無創(chuàng)性的診斷方法成為近年來研究熱點(diǎn)之一。血清標(biāo)記物作為EMS診斷工具的發(fā)展可能使一個及時和無創(chuàng)的診斷成為可能，生物標(biāo)志物檢測具有安全、便捷等許多優(yōu)勢，在臨床上可以作為腹腔鏡探查的一種有效補(bǔ)充。

很多研究均對VEGF在EMS發(fā)生發(fā)展、診斷發(fā)現(xiàn)和治療應(yīng)對過程中所發(fā)揮的作用進(jìn)行了探索[13-14]。前期研究發(fā)現(xiàn)VEGF在EMS轉(zhuǎn)移和種植過程中發(fā)揮著重要作用[15]，其在子宮內(nèi)膜組織中的表達(dá)可以反應(yīng)該組織的血管生成活性。另有研究指出，VEGF可以通過自分泌或旁分泌的方式促進(jìn)內(nèi)膜異位增殖，形成特定的異位灶[16]；且血清中VEGF含量與病變嚴(yán)重程度密切相關(guān)。本研究發(fā)現(xiàn)，EMS患者血清VEGF-A顯著高于正常女性，且Ⅲ-Ⅳ期患者血清VEGF-A含量顯著高于Ⅰ-Ⅱ期患者，這提示VEGF在EMS發(fā)生發(fā)展過程中發(fā)揮了重要的作用，與前期研究結(jié)果一致。

Glycodelin-A是由子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞分泌的一種糖蛋白，在多種組織（如血清、羊水、內(nèi)膜等）中均有表達(dá)，對正常妊娠維持具有重要作用。體外研究結(jié)果顯示Glycodelin-A在EMS種植過程中發(fā)揮著重要作用，其不僅對新生血管的形成有促進(jìn)作用，而且也顯著影響著細(xì)胞增殖過程[17]。本研究中，EMS患者血清Glycodelin-A顯著高于對照組，且伴隨病情嚴(yán)重程度增加而增加。提示Glycodelin-A和EMS發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。

sICAM-1是細(xì)胞黏附分子的可溶性脫落片段，具有多種生物功能，如抑制NK細(xì)胞活性、降低白細(xì)胞趨化性等。早期研究發(fā)現(xiàn)正常子宮內(nèi)膜細(xì)胞所分泌的sICAM-1具有周期性[18]，其中增生期內(nèi)膜所分泌sICAM-1顯著高于分泌期，但EMS患者sICAM-1分泌不會出現(xiàn)周期性變化，與種植灶的多少呈正相關(guān)。本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)EMS患者血清sICAM-1顯著高于正常女性，且病情越嚴(yán)重表達(dá)越高，推測其原因，高表達(dá)sICAM-1可通過與NK等細(xì)胞表面的淋巴細(xì)胞功能相關(guān)分子結(jié)合，降低免疫監(jiān)視中NK細(xì)胞作用，影響免疫細(xì)胞對異位黏膜的殺傷，從而促進(jìn)EMS的進(jìn)展。

本研究發(fā)現(xiàn)EMS患者VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-13項(xiàng)指標(biāo)均顯著高于正常女性，提示3項(xiàng)指標(biāo)均為EMS潛在的診斷標(biāo)志物。相關(guān)性分析發(fā)現(xiàn)3項(xiàng)指標(biāo)均呈顯著正相關(guān)，提示上述指標(biāo)可共同驅(qū)動EMS的發(fā)生發(fā)展，且聯(lián)合上述指標(biāo)有提高EMS診斷的潛能。進(jìn)一步ROC曲線分析發(fā)現(xiàn)，3項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢測的AUC值為0.826，高于單獨(dú)檢測血清VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1的AUC值，說明三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)用診斷效能更好。

綜上所述，EMS患者相比正常女性血清中VEGF-A、Glycodelin-A及sICAM-1均顯著性升高，且隨著病情的發(fā)展，升高程度逐漸增加。血清三項(xiàng)指標(biāo)聯(lián)合檢查有助于進(jìn)一步提高對EMS的診斷效能，希望能為臨床提供相應(yīng)參考。