丹參酮乳房注入劑與頭孢噻呋聯(lián)合用藥對(duì)奶牛乳房炎臨床療效試驗(yàn)

張鳳鳳，侯佳琪，陳胡羚，張 欣，辛怡霖，楊彥武，李引乾*

(1.西安市未央?yún)^(qū)動(dòng)物疾病預(yù)防控制中心，陜西西安 710016；2.西北農(nóng)林科技大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)院，陜西楊凌 712100;3.四川省北川羌族自治縣動(dòng)物疫病預(yù)防控制中心，四川北川 622750)

奶牛乳房炎是由于乳腺在化學(xué)、物理、微生物等因素刺激下而導(dǎo)致奶牛乳房的炎癥，可分為臨床型、亞臨床型和非臨床型乳房炎[1]，屬于奶牛較為常見的一種多發(fā)病。據(jù)統(tǒng)計(jì)，全球2億多頭奶牛中約有30%的奶?；加懈黝惾榉垦准膊。瑤淼慕?jīng)濟(jì)損失可達(dá)300億人民幣，嚴(yán)重威脅奶牛養(yǎng)殖業(yè)的健康發(fā)展[2]。目前，奶牛乳房炎主要通過注射抗菌藥物以及乳房灌注治療[3]，抗感染藥物作用迅速，針對(duì)性強(qiáng)，但存在易產(chǎn)生耐藥性和獸藥殘留的問題，而天然中藥具有低毒性、低殘留、無耐藥性的特點(diǎn)，兩者結(jié)合應(yīng)用可取長補(bǔ)短、內(nèi)外兼顧，降低成本，提高療效，具有廣闊的發(fā)展前景[4]，因而近年來中西獸藥聯(lián)合應(yīng)用逐漸成為國內(nèi)外學(xué)者的研究熱點(diǎn)。本試驗(yàn)使用丹參酮乳房注入劑、頭孢噻呋及其聯(lián)合用藥對(duì)奶牛乳房炎進(jìn)行臨床療效試驗(yàn)，以觀察中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所研制的中獸藥制劑丹參酮乳房注入劑與頭孢噻呋聯(lián)合用藥對(duì)奶牛乳房炎臨床治療效果。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 試驗(yàn)用動(dòng)物 患臨床型乳房炎的奶牛15頭，選自陜西省寶雞市眉縣首善鎮(zhèn)曉峰奶牛標(biāo)準(zhǔn)示范基地，以病牛乳房變化(紅、腫、熱、痛癥狀明顯)，體溫升高，乳汁變化明顯等臨床癥狀為依據(jù)，同時(shí)查閱牛場獸醫(yī)對(duì)奶牛發(fā)病的記錄，包括時(shí)間、病程、癥狀等，確定所選動(dòng)物為患臨床型乳房炎的奶牛，初步記錄和統(tǒng)計(jì)患乳房炎奶牛頭數(shù)及乳區(qū)數(shù)。試驗(yàn)前均未給任何藥物。

1.1.2 試驗(yàn)藥品 丹參酮乳房注入劑，規(guī)格為23 g/支(每1 g含隱丹參酮>0.48 mg；每1 g含丹參酮ⅡA>1.33 mg)，由浙江海正藥業(yè)股份有限公司委托中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所提供；注射用頭孢噻呋鈉，規(guī)格為1 000 mg/支(以頭孢噻呋計(jì))，江西邦誠動(dòng)物藥業(yè)有限公司產(chǎn)品。

1.1.3 主要儀器 便攜式體細(xì)胞計(jì)數(shù)儀C-Reader，韓國Digital Bio Technology公司產(chǎn)品。

1.2 方法

1.2.1 試驗(yàn)用動(dòng)物分組 將臨床診斷確診為患臨床型奶牛乳房炎的奶牛15頭，隨機(jī)分為3組(每組5頭奶牛)，其中，丹參酮乳房注入劑給藥組：20個(gè)乳區(qū)中確證患病乳區(qū)，計(jì)數(shù)，只注射丹參酮乳房注入劑(23 g)；聯(lián)合用藥組：20個(gè)乳區(qū)中確證患病乳區(qū)，計(jì)數(shù)，同時(shí)注射丹參酮乳房注入劑(23 g)和頭孢噻呋(500 mg)；對(duì)照藥物治療組：20個(gè)乳區(qū)中確證患病乳區(qū)，計(jì)數(shù)，只注射對(duì)照藥頭孢噻呋(500 mg)。

1.2.2 用法與用量 用藥時(shí)擠掉幾把奶，然后乳房消毒，從乳管注入藥物。每次分別從感染乳管注入藥物，2次/d(早晚各1次)，7 d為一療程。

1.2.3 乳樣體細(xì)胞數(shù)(SCC)檢測 分別采集各治療乳區(qū)用藥前、每天給藥后乳樣，測定乳樣體細(xì)胞數(shù)。采樣時(shí)先擠掉前3把乳，隨后擠取約30 mL乳樣于50 mL離心管中，作為檢測乳樣，采用便攜式體細(xì)胞檢測儀進(jìn)行檢測。

1.2.4 奶牛乳房炎的療效判定 綜合考察給藥前及停藥后第7天試驗(yàn)?zāi)膛５木駹顟B(tài)、采食飲水、糞尿排泄、乳房局部癥狀(腫脹、潮紅發(fā)熱、疼痛等)、泌乳量及乳汁性狀等指標(biāo)，最后1次給藥后7 d，綜合各方面檢查結(jié)果，按下列標(biāo)準(zhǔn)判定藥物療效。

1.2.4.1 治愈 治療后患病牛精神和食欲正常，乳中的凝塊、絮狀物消失，乳色和產(chǎn)奶量恢復(fù)正常，乳區(qū)的紅、腫、熱、痛消失，無復(fù)發(fā)現(xiàn)象。乳汁SCC<50萬/mL；主要病原菌消除。

治愈率=(組內(nèi)治愈乳區(qū)數(shù)/組內(nèi)用藥乳區(qū)數(shù))× 100%

1.2.4.2 有效 治療后患病牛精神和食欲正常，乳中的凝塊、絮狀物消失，乳色和產(chǎn)奶量恢復(fù)正常，乳區(qū)的紅、腫、熱、痛消失，無復(fù)發(fā)現(xiàn)象。乳汁SCC為50萬個(gè)/mL～100萬個(gè)/mL；主要病原菌消除。

有效率=(組內(nèi)有效乳區(qū)數(shù)/組內(nèi)用藥乳區(qū)數(shù))× 100%

1.2.4.3 無效 治療后病牛臨床癥狀如乳區(qū)的紅、腫、熱、痛沒有減輕或消失，甚至出現(xiàn)病情繼續(xù)惡化現(xiàn)象，均確定為無效。乳汁SCC>100萬個(gè)/mL；主要病原菌未見消除。

無效率=(組內(nèi)無效乳區(qū)數(shù)/組內(nèi)用藥乳區(qū)數(shù))× 100%

1.2.5 臨床癥狀觀察及記錄 奶牛發(fā)生臨床型乳房炎時(shí)，癥狀明顯，乳汁也明顯異常。本試驗(yàn)綜合考察患病奶牛的整體狀況與感染乳區(qū)的局部癥狀，記錄治療后奶?；厝闀r(shí)間及臨床表現(xiàn)。

1.2.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法 使用SPSS12.0軟件統(tǒng)計(jì)分析各組間用藥后乳汁體細(xì)胞數(shù)的差異顯著性，使用卡方檢驗(yàn)對(duì)各試驗(yàn)組的無效率、治愈率和有效率等進(jìn)行差異顯著性比較。

2 結(jié)果

2.1 治療前患乳房炎奶牛乳區(qū)統(tǒng)計(jì)情況

治療前將15頭患臨床型乳房炎奶牛隨機(jī)分成3組，分別統(tǒng)計(jì)各組奶牛的患病乳區(qū)，結(jié)果見表1。

表1 治療前奶牛乳房炎患病奶區(qū)統(tǒng)計(jì)結(jié)果

2.2 治療前后乳樣體細(xì)胞數(shù)(SCC)檢測結(jié)果

給藥前和給藥期間每天對(duì)乳樣體細(xì)胞數(shù)(SCC)進(jìn)行檢測，連續(xù)7 d，結(jié)果見表2。

表2結(jié)果表明治療前(0 d)，3組奶牛乳樣體細(xì)胞數(shù)之間無顯著性差異(P>0.05)?；既榉垦啄膛Ｈ榉糠謩e灌注丹參酮(丹參酮組)、頭孢噻呋(頭孢噻呋組)、頭孢噻呋與丹參酮(聯(lián)合用藥組)7 d后，與用藥前相比，3組均可顯著降低乳樣體細(xì)胞數(shù)(P<0.01)；聯(lián)合用藥組和頭孢噻呋組乳樣體細(xì)胞數(shù)明顯少于丹參酮組，存在極顯著差異(P<0.01)，聯(lián)合用藥組的體細(xì)胞數(shù)較頭孢噻呋組少，存在顯著差異(P<0.05)。

表2 乳房炎奶牛乳汁SCC檢測結(jié)果

2.3 丹參酮乳房注入劑與頭孢噻呋對(duì)奶牛乳房炎的臨床治療效果

治療后各組奶牛治愈的的乳區(qū)數(shù)情況見表3，丹參酮乳房注入劑與頭孢噻呋對(duì)奶牛乳房炎的臨床治療效果見表4。

由表3和表4可知，丹參酮組、頭孢噻呋組以及聯(lián)合用藥組均對(duì)奶牛乳房炎有一定療效?；既榉垦啄膛Ｈ榉糠謩e灌注丹參酮(丹參酮組)、頭孢噻呋(頭孢噻呋組)、頭孢噻呋與丹參酮(聯(lián)合用藥組)后，聯(lián)合用藥組治愈奶牛臨床性乳房炎治愈率可達(dá)83.3%，頭孢噻呋組治愈率可達(dá)73.3%，丹參酮組的臨床型乳房炎治愈率為0。經(jīng)統(tǒng)計(jì)分析，聯(lián)合用藥組和頭孢噻呋組對(duì)患乳房炎奶牛治愈的乳區(qū)數(shù)均高于丹參酮組，具有極顯著差異(P<0.01)，兩組對(duì)患乳房炎奶牛乳區(qū)治愈作用明顯，且聯(lián)合用藥組治愈率高于頭孢噻呋組。

表3 治療后統(tǒng)計(jì)奶牛治愈乳區(qū)數(shù)

表4 丹參酮乳房注入劑與頭孢噻呋對(duì)奶牛乳房炎的臨床治療效果

2.4 丹參酮乳房注入液與頭孢噻呋治療后奶?；厝闀r(shí)間及臨床表現(xiàn)

2.4.1 治療后奶牛回乳時(shí)間 治療后統(tǒng)計(jì)奶?；厝闀r(shí)間見表5。

表5 治療后統(tǒng)計(jì)奶?；厝闀r(shí)間

由表5可以看出，患乳房炎奶牛乳房分別灌注丹參酮(丹參酮組)、頭孢噻呋(頭孢噻呋組)、頭孢噻呋與丹參酮(聯(lián)合用藥組)后，聯(lián)合用藥組與頭孢噻呋組奶?；厝闀r(shí)間相近，且回乳均達(dá)100%，而丹參酮組奶牛只有1頭回乳(20%)，且需要在治療后7 d才回乳(雖然回乳，但未治愈)。

2.4.2 丹參酮乳房注入劑與頭孢噻呋乳房治療后的臨床表現(xiàn) 治療前患牛乳房緊張、紅腫、觸診感溫?zé)?，甚至有痛感；乳房?nèi)部有腫塊或整個(gè)乳房腫脹；乳汁量小或全無，乳汁稀薄，有的乳汁呈水樣，或自動(dòng)排奶。后期乳汁逐漸變?yōu)樽攸S色液體并有少許顆?；虺市鯛钗铮惑w溫升高至40 ℃以上，精神沉郁，食欲廢絕，飲欲減少，反芻微弱，鼻鏡干燥，不愿行走。

經(jīng)用藥后，丹參酮組患牛臨床癥狀基本無變化，只有1頭奶牛有所好轉(zhuǎn)。頭孢噻呋組與聯(lián)合用藥組在用藥治療后的患病奶牛精神和食欲均恢復(fù)正常，乳中的凝塊、絮狀物消失，乳色和產(chǎn)奶量恢復(fù)正常，乳區(qū)的紅、腫、熱、痛消失，無復(fù)發(fā)現(xiàn)象。

3 討論

奶牛乳房炎由多種因素導(dǎo)致，大多由于病原微生物的感染，主要包括葡萄球菌、無乳鏈球菌及大腸埃希氏菌[5]。除與病原微生物直接相關(guān)之外，飼養(yǎng)環(huán)境差，管理不良，擠乳流程不正確等都容易導(dǎo)致奶牛出現(xiàn)病原體感染而引發(fā)乳房炎癥，不僅對(duì)產(chǎn)奶量及奶質(zhì)量有影響，對(duì)人類身體健康也會(huì)產(chǎn)生危害，給養(yǎng)殖場帶來巨大的經(jīng)濟(jì)損失。因此，奶牛乳房炎的防治需進(jìn)行全面考慮，采取切實(shí)可行的措施才能取得最佳效果。目前奶牛乳房炎主要使用抗菌藥物，然而隨著抗菌藥物耐藥性問題的不斷暴露，學(xué)者們開始積極探索新的治療方式。近年來，聯(lián)合用藥療法不斷發(fā)展，合理聯(lián)合用藥，不僅可以延長藥物壽命，增強(qiáng)藥物療效，還能夠解決新藥開發(fā)的困難局面，具有非常廣闊的發(fā)展前景。

本試驗(yàn)初步研究了丹參酮乳房注入劑、頭孢噻呋及其聯(lián)合用藥對(duì)奶牛乳房炎的臨床治療效果，通過用藥后乳房體細(xì)胞數(shù)、治愈乳區(qū)數(shù)及臨床癥狀，分別評(píng)價(jià)各試驗(yàn)組的臨床療效。結(jié)果顯示，丹參酮與頭孢噻呋均能夠降低乳房炎奶牛的乳樣體細(xì)胞數(shù)，但頭孢噻呋的治療效果要顯著高于丹參酮乳房注入劑，而丹參酮乳房注入劑與頭孢噻呋聯(lián)合使用可顯著降低患病奶牛乳樣體細(xì)胞數(shù)，治愈率可達(dá)83.3%，對(duì)奶牛乳房炎的臨床治療效果要顯著高于單純用藥組，證明頭孢噻呋與丹參酮乳房注入劑聯(lián)合用藥有良好的協(xié)同作用。頭孢噻呋對(duì)奶牛乳房炎的治療作用在國內(nèi)外已得到證實(shí)，但耐藥性導(dǎo)致治療效果不佳仍是一大問題[6-7]。丹參味苦，性微寒，歸心、肝經(jīng)，具有祛瘀止痛、活血通經(jīng)、涼血消癰的功效[8]，研究表明丹參具有良好的抗炎作用[9-10]，其中丹參酮類與抗炎藥效關(guān)聯(lián)度最大[11]。有研究表明，丹參酮ⅡA通過減少M(fèi)PO與NO的釋放，下調(diào)促炎因子TNF-α和IL-1β的表達(dá)水平抑制炎性細(xì)胞浸潤，發(fā)揮其抗炎作用[12]。頭孢噻呋與丹參酮乳房注入劑聯(lián)用，既能降低抗菌藥物耐藥性及藥物殘留，又能發(fā)揮中藥的整體治療功效。西藥治標(biāo)，中藥治本，中西藥合方可發(fā)揮中西獸藥各自的優(yōu)勢(shì)，彌補(bǔ)不足之處，提高防治效果[13]。蔡文利等[14]通過使用乳酸環(huán)丙沙星及其與中藥聯(lián)合對(duì)比臨床療效，結(jié)果顯示，中西藥治療的效果更好。范建新等[15]通過對(duì)33頭病奶牛進(jìn)行中西醫(yī)結(jié)合治療，達(dá)到了96.96%的臨床治療有效率，顯著高于單純西藥治療組，王海秋[16]采用中西藥結(jié)合治療奶牛乳房炎治愈率為83%，有效率高達(dá)90%。近年來，中西藥結(jié)合應(yīng)用尤其是中藥與抗菌藥物合用以治療動(dòng)物細(xì)菌性、病毒性疾病的報(bào)道越來越多，已成為獸醫(yī)臨床用藥的一種趨勢(shì)，為合理解決抗菌藥物耐藥性問題提供了有效策略。