術(shù)后血清CYFRA21-1、TK1 表達(dá)對(duì)膀胱尿路上皮癌患者生存預(yù)后的關(guān)系

陳楚君，王 寧，王麗娜，沈光輝

膀胱尿路上皮癌（BUC）是膀胱癌的主要類型，具有局部浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移、易復(fù)發(fā)和進(jìn)展的特點(diǎn)［1］。手術(shù)切除是BUC 的最主要治療方法，但術(shù)后依舊存在較高的復(fù)發(fā)率和進(jìn)展率［2-3］。 目前，腫瘤患者預(yù)后評(píng)估主要依據(jù)術(shù)后組織標(biāo)本檢測(cè)，受治療方法和個(gè)體差異的影響，相同病理學(xué)特征患者預(yù)后可能存在一定差異［4］。腫瘤標(biāo)志物是癌細(xì)胞分泌或脫落到體液、組織中的特異性物質(zhì)，對(duì)腫瘤的診斷和病情評(píng)估具有重要參考價(jià)值。 細(xì)胞角蛋白 19 片段（CYFRA21-1）和胸苷激酶1（TK1）是兩種重要的腫瘤標(biāo)志物，在肺癌、浸潤(rùn)性膀胱癌等惡性腫瘤的篩查診斷中具有較高應(yīng)用價(jià)值，但 BUC 預(yù)后評(píng)估的報(bào)道較少［5］。 本研究通過(guò)檢測(cè)85 例BUC 患者手術(shù)前后血清CYFRA21-1、TK1 的表達(dá)情況， 評(píng)估患者生存預(yù)后的應(yīng)用價(jià)值，為BUC 的臨床治療提供依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象 選取 2013 年 1 月 ~ 2015 年 1 月屯昌縣人民醫(yī)院確診并行手術(shù)治療的85 例BUC 患者，其中男 52 例， 女 33 例； 年齡 35 ~ 78 歲， 平均（61.35 ± 7.52）歲；腫瘤單發(fā) 61 例，多發(fā) 24 例；腫瘤直徑 0.9 ~ 3.5 cm，平均（2.62 ± 0.72） cm；腫瘤分期Ta~ T1期 47 例，T2~ T3期；分期高級(jí)別 45 例，低級(jí)別40 例。 納入標(biāo)準(zhǔn)： 經(jīng)臨床病理學(xué)檢驗(yàn)確診為BUC；術(shù)前尚未接受過(guò)相關(guān)抗腫瘤治療；腫瘤未侵犯膀胱頸及尿道，未發(fā)生轉(zhuǎn)移；積極配合治療，資料完整［6］。 排除標(biāo)準(zhǔn)：凝血障礙、免疫性疾病及內(nèi)分泌疾??；心肝腎等臟器功能異常；存在手術(shù)禁忌證；既往泌尿系統(tǒng)手術(shù)史；膀胱良性腫瘤、尿路狹窄、結(jié)石或前列腺增生。

1.2 方法 所有患者均接受經(jīng)尿道膀胱腫瘤整體剜除術(shù)， 采用全身麻醉， 取截石位。 經(jīng)尿道置入GYRUS 觀察鏡，灌注生理鹽水，觀察并確定腫瘤部位、數(shù)目和形態(tài)，明確腫瘤切除部位；置入鈥激光光纖，設(shè)置功率25 ~ 40 W，頻率為15 ~ 25 Hz，輸出功率1.2 ~ 2.4 J； 從腫瘤病灶旁1 cm 處切開(kāi)黏膜，逐步擴(kuò)大切除面積，深部達(dá)膀胱深肌層，切除的同時(shí)電凝出血點(diǎn)，沿深肌層整體剜除腫瘤，充分止血，灼燒腫瘤周?chē)? cm 處黏膜；沖洗并吸出標(biāo)本送檢，留置導(dǎo)尿管，手術(shù)結(jié)束。術(shù)后24 h 內(nèi)持續(xù)膀胱沖洗，術(shù)后1 周采取30 mg 吡柔比星（輝瑞制藥，國(guó)藥準(zhǔn)字H20045983）膀胱灌注化療，前8 周每周 1 次，之后改為每月1 次，總療程1 年。

1.3 觀察指標(biāo) 采集患者術(shù)前及術(shù)后1 月時(shí)空腹靜脈 4 ml，在 3 000 r/min（離心半徑 10 cm）低速低溫離心10 min，小心分離血清待檢。采用化學(xué)發(fā)光免疫技術(shù)測(cè)定血清CYFRA21-1 水， 檢測(cè)試劑盒購(gòu)于瑞士羅氏公司； 采用Western blot 技術(shù)測(cè)定TK1 水平，檢測(cè)試劑盒儀器購(gòu)于深圳瑞華同康生物公司。所有檢測(cè)操作嚴(yán)格依據(jù)說(shuō)明書(shū)執(zhí)行，依據(jù)試劑盒說(shuō)明書(shū)所規(guī)定的參考臨界值，CYFRA21-1 參考臨界值為3.5 μg/L，CYFRA21-1 > 3.5 μg/L 為陽(yáng)性；TK1 參考臨界值為2.0 pmol/L，TK1 > 2.0 pmol/L 為陽(yáng)性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 采用SPSS 19.0 軟件分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料采用（）描述，治療前后采用配對(duì)樣本t 檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以（%）表示，用 χ2檢驗(yàn)；采用 Cox回歸模型評(píng)估影響B(tài)UC 患者預(yù)后的危險(xiǎn)因素，Logrank 檢驗(yàn)對(duì)比術(shù)后不同 CYFRA21-1、TK1 表達(dá)患者生存率差異；以P < 0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 BUC 患者手術(shù)前后血清 CYFRA21-1、TK1 表達(dá)情況比較 與術(shù)前相比， 術(shù)后BUC 患者血清CYFRA21-1、TK1 表達(dá)量和陽(yáng)性率均顯著降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。 見(jiàn)表 1。

表1 85 例BUC 患者手術(shù)前后血清CYFRA21-1、TK1表達(dá)情況比較

2.2 不同臨床特征患者術(shù)后血清CYFRA21-1、TK1 表達(dá)情況比較 不同腫瘤數(shù)目、分期、分級(jí)和不同預(yù)后患者術(shù)后血清CYFRA21-1、TK1 表達(dá)陽(yáng)性率比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）；而術(shù)后血清CYFRA21-1、TK1 表達(dá)與患者性別、 年齡和腫瘤直徑無(wú)明顯相關(guān)性（P > 0.05）。 見(jiàn)表 2。

表2 85 例不同臨床特征BUC 患者血清CYFRA21-1、TK1 表達(dá)比較

2.3 術(shù)后血清CYFRA21-1、TK1 表達(dá)與患者臨床預(yù)后的關(guān)系 多發(fā)病灶、腫瘤T2~ T3分期、高級(jí)別和術(shù)后血清 CYFRA21-1、TK1 陽(yáng)性表達(dá)是影響B(tài)UC 患者獨(dú)立危險(xiǎn)因素， 差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P <0.05）；而患者年齡、性別和腫瘤直徑與臨床預(yù)后無(wú)明顯相關(guān)性（P > 0.05）。 見(jiàn)表 3。

2.4 術(shù)后不同血清CYFRA21-1、TK1 表達(dá)患者預(yù)后情況 經(jīng) Log-Rank 分析顯示， 術(shù)后血清CYFRA21-1 陽(yáng)性表達(dá)患者5 年生存率顯著低于陰性表達(dá)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05），且術(shù)后TK1 陽(yáng)性表達(dá)患者5 年生存率也低于陰性表達(dá)組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P < 0.05）。

表 3 85 例 BUC 患者術(shù)后血清 CYFRA21-1、TK1 表達(dá)與患者臨床預(yù)后的關(guān)系

3 討論

隨著分子醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展，腫瘤標(biāo)志物在腫瘤性疾病的普查、診斷和療效評(píng)價(jià)方面的應(yīng)用日益廣泛，而不同治療方案對(duì)腫瘤標(biāo)志物的影響存在較大差異，密切監(jiān)測(cè)腫瘤標(biāo)志物的表達(dá)情況有助于判斷病情轉(zhuǎn)歸和指導(dǎo)臨床治療［7］。CYFRA21-1 是上皮細(xì)胞中的結(jié)構(gòu)蛋白，主要以寡聚物形式存在，在正常人體液和組織液中含量極低。 當(dāng)上皮細(xì)胞癌變時(shí)，細(xì)胞角蛋白被蛋白酶所降解，CYFRA21-1 被釋放進(jìn)入血液及組織液，導(dǎo)致其水平顯著升高［8-9］。有研究發(fā)現(xiàn)，CYFRA21-1 可作為肺癌、卵巢癌等多種惡性腫瘤的標(biāo)志物，對(duì)于評(píng)估患者病情具有重要的應(yīng)用價(jià)值［10］。 TK1 是細(xì)胞增殖的重要標(biāo)志物，能催化胸苷嘧啶核苷酸轉(zhuǎn)變?yōu)閱瘟姿嵝叵汆奏ぃ?參與DNA 合成過(guò)程， 主要用于腫瘤普查和癌前病變?cè)u(píng)估，可以評(píng)估腫瘤細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化，分析細(xì)胞的增長(zhǎng)速率［11］。本研究通過(guò)動(dòng)態(tài)分析BUC 患者手術(shù)前后血清中CYFRA21-1、TK1 表達(dá)情況，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，BUC患者在術(shù)后1 個(gè)月時(shí)血清中CYFRA21-1、TK1 表達(dá)量和陽(yáng)性率均有顯著下降， 說(shuō)明經(jīng)手術(shù)治療后，腫瘤病灶被切除， 癌變細(xì)胞的增殖活性降低， 血清CYFRA21-1、TK1 表達(dá)也得到有效控制。 然而，BUC患者在術(shù)后1 個(gè)月時(shí)血清CYFRA21-1、TK1 的陽(yáng)性率依然超過(guò)30%， 分析可能是由于治療時(shí)間較短，體內(nèi)殘留的腫瘤細(xì)胞活性尚未得到有效控制，術(shù)后CYFRA21-1、TK1 仍存在一定表達(dá)。

既往研究顯示，病理學(xué)特征與腫瘤患者的預(yù)后密切相關(guān)，但其能僅顯示患者治療前的靜點(diǎn)情況，并不能反映治療干預(yù)和個(gè)人體質(zhì)對(duì)病情變化的影響，故分析腫瘤患者術(shù)后狀況對(duì)于驗(yàn)證手術(shù)的有效性和評(píng)估生存預(yù)期具有重要意義［12］。 本研究探討B(tài)UC 患者5 年生存預(yù)后的影響因素發(fā)現(xiàn)，除腫瘤數(shù)目、分期、分級(jí)外，術(shù)后血清 CYFRA21-1、TK1 高表達(dá)也是導(dǎo)致預(yù)后不良的重要危險(xiǎn)因素，且術(shù)后1 月時(shí)血清CYFRA21-1、TK1 表達(dá)陽(yáng)性患者的5 年生存率低于陰性表達(dá)患者， 提示CYFRA21-1、TK1 可作為預(yù)測(cè)BUC 術(shù)后不良預(yù)后的潛在分子標(biāo)志物，密切監(jiān)測(cè)血清中CYFRA21-1、TK1 表達(dá)水平可為擬定個(gè)性化干預(yù)方案提供參考。

綜上所述，CYFRA21-1 和TK1 的表達(dá)與 BUC病理分期、分級(jí)和預(yù)后情況有關(guān)，密切監(jiān)測(cè)術(shù)后血清CYFRA21-1、TK1 水平對(duì)判斷臨床治療效果和評(píng)估患者預(yù)后具有重要意義。