尿液相關(guān)細(xì)胞因子在系統(tǒng)性紅斑狼瘡腎臟病情評估中的意義

吳永卓，曹文婷，鄧丹琪

（昆明醫(yī)科大學(xué)第二附屬醫(yī)院皮膚科，云南 昆明 650101）

系統(tǒng)性紅斑狼瘡（systemic lupus erythematosus,SLE）是一種以自身抗體異常產(chǎn)生、補(bǔ)體激活和免疫復(fù)合物沉積為特征，導(dǎo)致多組織器官損傷的慢性自身免疫性疾病[1-3]；狼瘡性腎炎（lupus nephritis,LN）是SLE常見也是重要的臨床表現(xiàn)之一，也是影響SLE預(yù)后的主要危險(xiǎn)因素之一[4-6]。細(xì)胞因子在自身免疫反應(yīng)中具有重要作用，可由T細(xì)胞、B細(xì)胞及巨噬細(xì)胞等分泌產(chǎn)生，通過調(diào)節(jié)固有免疫和適應(yīng)性免疫誘導(dǎo)局部炎性反應(yīng)及全身急性期炎性反應(yīng)[7]；IL-6、TNF-α屬于前炎癥因子，它們主要由T淋巴細(xì)胞分泌，在炎癥、腫瘤的發(fā)生中扮演重要角色[8-10]。本研究通過檢測紅斑狼瘡患者尿液尿細(xì)胞因子IL-6、TNFα水平，以探討其與紅斑狼瘡腎臟病情的相關(guān)性?，F(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 依據(jù)美國風(fēng)濕病學(xué)會1997年修訂的SLE分類標(biāo)準(zhǔn)，選取2018年2月至2019 年2月在昆明醫(yī)科大學(xué)附屬第二醫(yī)院住院的、診斷明確的SLE患者30例，其中女性24例，男性6例，年齡（17～56）歲，平均年齡（42±6.3）歲，重度活動者2例（SLEDAI評分≥15），中度活動者9例（15＞SLEDAI評分≥10），輕度活動者14例（10＞SLEDAI評分≥5），無病情活動者5例（SLEDAI評分＜5）；排出糖尿病腎病等非狼瘡腎病患者。同期納入性別、年齡相匹配的非狼瘡及其他自身免疫性疾病患者30例作為對照，其中男11例，女19例，年齡（19～58）歲，平均（39±5.7）歲；兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。分別收集實(shí)驗(yàn)組和對照組尿液，并對兩組的尿TNF-α、IL-6水平進(jìn)行比較。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 采集系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者和對照組受檢者晨尿5ml，于4℃條件下1 200r/min離心5min，提取上清液至1.5mlEP管內(nèi)，并分裝后于-80℃超低溫冰箱保存。

1.2.2 指標(biāo)檢測 采用聯(lián)科生物預(yù)包被特異性抗人IL-6、TNFα單克隆抗體ELISA試劑盒測定尿液中IL-6、TNFα表達(dá)水平。

1.2.3 SLE患者臨床和實(shí)驗(yàn)室數(shù)據(jù)資料收集 收集患者的基本資料，包括年齡、性別和病程及實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)尿微量蛋白尿肌酐比及SLEDAI評分等。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，偏態(tài)分布計(jì)量資料用M(P25,P75)表示。SLE組與對照組間尿IL-6、TNF-α水平差異比較采用Mann-Whitney U檢驗(yàn)。尿IL-6、TNF-α值與尿微量蛋白尿肌酐比的關(guān)系及尿IL-6、TNF-α值與SLEDAI評分的相關(guān)性評估采用Spearman相關(guān)分析，并對相關(guān)系數(shù)進(jìn)行假設(shè)檢驗(yàn)，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 SLE患者與對照組尿IL-6、TNF-α值比較 結(jié)果顯示：SLE患者尿IL-6、TNF-α水平均高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表1。

表1 尿中細(xì)胞因子TNF-α、IL-6測定結(jié)果M(P25,P75)

2.2 SLE組尿IL-6、TNF-α值與尿微量蛋白尿肌酐比的相關(guān)分析 結(jié)果顯示：IL-6表達(dá)水平與尿微量蛋白尿肌酐比呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.90，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；TNF-α表達(dá)水平與尿微量蛋白尿肌酐比也呈正相關(guān)，相關(guān)系數(shù)為0.84，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。見表2。

表2 SLE患者尿TNF-α、IL-6水平與尿微量蛋白尿肌酐比的相關(guān)性

2.3 SLE組尿IL-6、TNF-α值與SLEDAI評分的相關(guān)分析 結(jié)果顯示：尿IL-6和尿TNF-α表達(dá)水平與SLEDAI評分均無相關(guān)性（P＞0.05）。見表3。

表3 SLE患者尿TNF-α、IL-6水平與SLEDAI評分的相關(guān)性

3 討論

SLE臨床表現(xiàn)多樣，多系統(tǒng)受累[11-12]；狼瘡腎炎（lupus nephritis,LN）是SLE最常見且嚴(yán)重的臨床表現(xiàn)之一，進(jìn)行性腎功能損害仍是SLE患者死亡的主要原因，尤其是活動性狼瘡，臨床預(yù)后差[12-15]。腎活檢是評估狼瘡性腎炎病情嚴(yán)重程度或狼瘡確診的重要檢查手段，但是存在出血、損傷周圍組織、穿刺失敗等風(fēng)險(xiǎn)，導(dǎo)致部分患者不愿接受該檢查，或因病情過重不能行腎活檢檢查，因此，臨床急需無創(chuàng)的檢測方法來明確LN的診斷及評估病情活動度或判斷預(yù)后；如果能通過尿液無創(chuàng)性檢測一些生物標(biāo)志物作為LN患者疾病活動性以及預(yù)后判斷的指標(biāo)，將會給患者的病情判斷和治療方案選擇提供幫助。

白介素-6（IL-6）是由活化的T細(xì)胞和成纖維細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子，是一種多效細(xì)胞因子，在免疫調(diào)節(jié)、造血、炎癥、腫瘤發(fā)生、代謝和控制睡眠的過程中起作用；有研究認(rèn)為IL-6的基因多樣性與SLE易感性相關(guān)[16]，并有研究顯示SLE患者血清IL-6水平高于對照組，并與SLE病情相關(guān)[17-18]。腫瘤壞死因子-α（tumour necrosis factor-α,TNF-α）是巨噬細(xì)胞分泌的小分子蛋白，作為機(jī)體對組織損傷或?qū)Σ≡源碳さ拿庖邞?yīng)答，其與兩種受體（TNFR1、TNFR2）相互作用，可以誘導(dǎo)炎癥、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡等多種信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑[19-21]。在SLE患者中，機(jī)體異常免疫復(fù)合物可刺激巨噬細(xì)胞表達(dá)分泌TNF-α，其可進(jìn)一步致T細(xì)胞反應(yīng)性降低并促進(jìn)抗凋亡分子表達(dá)，從而促進(jìn)炎性反應(yīng)，并使新的致病性自身抗體產(chǎn)生[22-23]。有研究發(fā)現(xiàn)，SLE患者血漿中TNF-α顯著高于對照組[24-26]，說明TNF-α在SLE的發(fā)病中具有一定作用；并有學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)，TNF-α相關(guān)基因TNF-376G/A、tf-1031T/C的多態(tài)性與SLE、LN易感性具有相關(guān)性[27-28]。國內(nèi)外多項(xiàng)研究也發(fā)現(xiàn)LN患者尿TNF-α、IL-6水平明顯高于SLE不伴腎損害患者的水平[29-33]。本研究結(jié)果也顯示，與對照組比較，SLE患者尿中細(xì)胞因子TNF-α、IL-6表達(dá)水平均有明顯升高；且SLE患者尿TNF-α、IL-6表達(dá)水平與尿微量蛋白尿肌酐比呈正相關(guān)；上述結(jié)果均表明尿TNF-α、IL-6水平可能是評估SLE腎臟病情的潛在指標(biāo)。本研究中SLE患者尿TNF-α、IL-6表達(dá)水平與SLEDAI評分均無相關(guān)性，考慮可能因?yàn)镾LEDAI評分是根據(jù)SLE患者整體病情評估，腎臟病情只占評分中的一部分，也不排外是本研究樣本量較少的原因。樣本量較小是本研究存在一定的局限性，且其中大部分患者并未進(jìn)行腎組織活檢以明確病理分型，因此本研究只發(fā)現(xiàn)尿TNF-α、IL-6水平可能有望用于評價(jià)SLE腎臟病情，而對于是否可區(qū)分LN的病理分型則未進(jìn)行相應(yīng)研究，仍需要進(jìn)一步臨床探究。另外，本研究為橫斷面研究，未進(jìn)行隨訪分析，對患者預(yù)后的估測未能進(jìn)行相應(yīng)的研究。綜上所述，尿TNF-α、IL-6水平在本研究的SLE患者中均顯著升高，是有望成為評估SLE腎臟病情的良好生物學(xué)指標(biāo)，有望為SLE臨床治療方案的制定提供參考，將早期腎損傷患者的相關(guān)指標(biāo)控制在理想范圍內(nèi)，以改善腎臟功能。尿TNF-α、IL-6的檢測具有無創(chuàng)性及可普及性高等的優(yōu)點(diǎn)，值得我們進(jìn)一步針對此指標(biāo)進(jìn)行大樣本且深入的研究。