無(wú)償獻(xiàn)血者血液病原體酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)與核酸檢測(cè)結(jié)果研究

吳樹(shù)

摘要：目的 分析血液病原體經(jīng)2遍血清學(xué)（酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA））檢測(cè)加1遍核酸檢測(cè)（NAT）與1遍血清學(xué)檢測(cè)加1遍核酸檢測(cè)在無(wú)償獻(xiàn)血者血液檢測(cè)中的應(yīng)用效果情況，為探討更適合的無(wú)償獻(xiàn)血血液篩查檢測(cè)策略提供參考。方法 選擇2018年9月至2019年8月期間本血站采集的65405份無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本，將其作為常規(guī)組;另選擇2019年9月至2020年8月期間本血站采集的69243份無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本，將其作為實(shí)驗(yàn)組。其中常規(guī)組血液標(biāo)本采用2遍血清學(xué)檢測(cè)和1遍核酸檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)組血液標(biāo)本采用1遍血清學(xué)檢測(cè)和1遍核酸檢測(cè)檢測(cè)。主要對(duì)比兩組中乙肝感染標(biāo)志物HBsAg和HBV-DNA檢測(cè)不合格率。結(jié)果 常規(guī)組與實(shí)驗(yàn)組血液標(biāo)本HBsAg檢測(cè)不合格率分別是0.61%、0.38%（P<0.05），常規(guī)組與實(shí)驗(yàn)組血液標(biāo)本HBV-DNA檢測(cè)不合格率分別是0.21%、0.21%（P>0.05）。結(jié)論 在無(wú)償獻(xiàn)血者血液病原體檢測(cè)中開(kāi)展1遍ELISA檢測(cè)和1遍核酸檢測(cè)，在能夠最大限度降低血液檢測(cè)成本，又能夠縮短病毒檢測(cè)“窗口期”，達(dá)到有效降低輸血感染風(fēng)險(xiǎn)，保障臨床用血安全。

關(guān)鍵詞：無(wú)償獻(xiàn)血者;核酸檢測(cè);酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn);不合格率 ;檢測(cè)策略

【中圖分類號(hào)】Q461 ? ? ? ? ? ? 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A ? ? ? ? ? ? 【文章編號(hào)】2107-2306（2021）05-127-01

在無(wú)償獻(xiàn)血者血液病原體檢測(cè)中，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）為血清學(xué)檢測(cè)常用方式之一，其在病毒抗原或抗體檢測(cè)中可發(fā)揮良好作用，但是在病毒感染病患感染窗口期以及病毒變異時(shí)會(huì)出現(xiàn)漏檢情況[1]，是當(dāng)前影響血液安全的主要因素。核酸檢測(cè)（NAT）技術(shù)是一種新檢測(cè)技術(shù)，具有高度的敏感性和特異性。有研究表明[2]，核酸檢測(cè)可將HBV、HCV、HIV感染的平均窗口期縮短9天、59天、11天。而西班牙的Alvarez[3]研究顯示核酸檢測(cè)可將血清學(xué)陰性血液HBV的殘留風(fēng)險(xiǎn)降低。為探索更適合的無(wú)償獻(xiàn)血血液篩查檢測(cè)策略，本文通過(guò)分別對(duì)兩種不同檢測(cè)策略下乙肝感染標(biāo)志物HBsAg和HBV-DNA檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，現(xiàn)匯報(bào)如下。

1資料與方法

1.1一般資料

選擇2018年9月至2019年8月期間本血站采集的65405份無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本，將其作為常規(guī)組;另選擇2019年9月至2020年8月期間本血站采集的69243份無(wú)償獻(xiàn)血者血液標(biāo)本，將其作為實(shí)驗(yàn)組。常規(guī)組中9月-次年8月血液標(biāo)本采集例數(shù)分別是5275份、4843份、5444份、5473份、6036份、4338份、5299份、5688份、5871份、5944份、5359份、5835份。實(shí)驗(yàn)組中9月-次年8月血液標(biāo)本采集例數(shù)分別是5788份、5264份、5527份、6396份、5754份、3884份、5467份、6056份、6627份、6871份、6213份、5396份。兩組一般資料對(duì)比，P>0.05，可分組研究。所有獻(xiàn)血者均符合獻(xiàn)血指征。

1.2研究方法

1.2.1檢測(cè)試劑

常規(guī)組：2種HBsAg檢測(cè)試劑盒（ELISA），分別采購(gòu)自伯樂(lè)公司、北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司。

實(shí)驗(yàn)組：1種HBsAg檢測(cè)試劑盒（ELISA） ，北京萬(wàn)泰生物藥業(yè)股份有限公司

核酸檢測(cè)試劑：羅氏cobas Taqman MPX test，version2.0（PCR-熒光法），華益美乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、人類免疫缺陷病毒（1+2型）核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光法）

1.2.2檢測(cè)方法

ELISA檢測(cè)方法（灰區(qū)設(shè)置0.9）：采集血液標(biāo)本，在離心處理后，選擇血清進(jìn)行HIV、HBV和HCV感染標(biāo)志物檢測(cè)。常規(guī)組分別使用2個(gè)不同廠家試劑盒實(shí)施檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)組使用1個(gè)廠家試劑盒實(shí)施檢測(cè)。全部操作均嚴(yán)格按照試劑盒使用說(shuō)明進(jìn)行。

核酸檢測(cè)方法：核酸標(biāo)本用美國(guó)BDEDTA 2K帶分離膠抗凝真空管留取5mL全血，采樣后在4h內(nèi)于2-8℃低溫水平離心機(jī)以1600g離心20 min，用于核酸檢測(cè)，選擇羅氏全自動(dòng)核酸檢測(cè)系統(tǒng)和華益美核酸檢測(cè)系統(tǒng)交替使用，對(duì)血清學(xué)（ELISA）檢測(cè)陰性結(jié)果標(biāo)本再實(shí)施核酸檢測(cè)。全部操作均嚴(yán)格按照試劑盒使用說(shuō)明進(jìn)行。

常規(guī)組血液標(biāo)本采用2遍ELISA檢測(cè)和1遍核酸檢測(cè)，先開(kāi)展2遍ELISA檢測(cè)，對(duì)ELISA陰性結(jié)果標(biāo)本再實(shí)施核酸檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)組血液標(biāo)本采用1遍ELISA檢測(cè)和1遍核酸檢測(cè)，先選擇一個(gè)廠家的試劑盒實(shí)施ELISA檢測(cè)，對(duì)ELISA陰性結(jié)果標(biāo)本再實(shí)施核酸檢測(cè)。

1.3觀察項(xiàng)目

（1）對(duì)比兩組HBsAg檢測(cè)不合格率。（2）對(duì)比兩組HBV-DNA檢測(cè)不合格率。

1.4數(shù)據(jù)處理

在本次研究中，數(shù)據(jù)均使用SPSS22.0軟件開(kāi)展計(jì)算，計(jì)數(shù)資料采用百分比的形式表達(dá)，實(shí)施 X2檢測(cè)，當(dāng)檢測(cè)結(jié)果顯示 P<0.05時(shí)，表明數(shù)據(jù)存在研究?jī)r(jià)值。

2研究結(jié)果

2.1對(duì)比兩組HBsAg檢測(cè)不合格率

常規(guī)組血液標(biāo)本HBsAg檢測(cè)不合格率高于實(shí)驗(yàn)組（P<0.05）。見(jiàn)下表1：

2.2對(duì)比兩組HBV-DNA檢測(cè)不合格率

常規(guī)組64443份血液標(biāo)本中，核酸檢測(cè)中HBV-DNA不合格數(shù)量為136份;實(shí)驗(yàn)組68503份血液標(biāo)本中，ELISA檢測(cè)中HBV-DNA不合格數(shù)量為142份。兩組血液標(biāo)本HBV-DNA檢測(cè)不合格率對(duì)比無(wú)明顯差異（P>0.05）。見(jiàn)下表2：

3討論

機(jī)體血液一方面可以維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，另一方面也可發(fā)揮防御效果，機(jī)體營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)也會(huì)通過(guò)血液進(jìn)行運(yùn)輸，進(jìn)而維持生命。同樣血液也會(huì)給病毒傳播提供途徑，例如HIV、HBV、HCV等。無(wú)償獻(xiàn)血一定程度上會(huì)增加病毒傳播機(jī)率，使得傳染性疾病發(fā)病率升高。為避免增加傳染性疾病患病率，需要對(duì)無(wú)償獻(xiàn)血者血液開(kāi)展病原體檢測(cè)。如何最大限度地降低經(jīng)血傳播疾病的危險(xiǎn)，確保血液及血液制品的安全，成為各國(guó)該領(lǐng)域研究者面臨的主要問(wèn)題。

ELISA檢測(cè)對(duì)于生物酶活性能夠發(fā)揮良好催化效果，操作方便，檢測(cè)成本低，并且具有較高的敏感。但是對(duì)于變異病毒以及處于窗口期的抗原檢測(cè)效果不佳，進(jìn)而出現(xiàn)漏診率高等情況。本次對(duì)乙肝感染標(biāo)志物研究中，常規(guī)組血液標(biāo)本HBsAg在ELISA檢測(cè)不合格率高于實(shí)驗(yàn)組（P<0.05），同時(shí)證明實(shí)驗(yàn)組HBsAg檢出率更低，漏檢率更高，但常規(guī)組與實(shí)驗(yàn)組HBV-DNA的核酸檢測(cè)不合格率卻一致。核酸檢測(cè)方法對(duì)“窗口期”、隱匿性感染標(biāo)本在檢測(cè)方面有明顯優(yōu)勢(shì)，同一地區(qū)的疾病流行水平下，如果實(shí)驗(yàn)組漏檢率更高，經(jīng)ELISA檢測(cè)后進(jìn)入核酸檢測(cè)中潛在陽(yáng)性標(biāo)本應(yīng)會(huì)更多，實(shí)驗(yàn)組HBV-DNA不合格率理應(yīng)升高，但實(shí)際結(jié)果卻是一致的，這可能是由于常規(guī)組與實(shí)驗(yàn)組對(duì)象分別來(lái)自兩個(gè)年度下不同的個(gè)體，本身就存在一定的流行病學(xué)差異，從實(shí)驗(yàn)組HBV-DNA的不合格率并未發(fā)生偏高，可以推論血液標(biāo)本實(shí)施“1遍血清學(xué)檢測(cè)加1遍核酸檢測(cè)”對(duì)比“2遍血清學(xué)檢測(cè)加1遍核酸檢測(cè)”策略的血液殘余風(fēng)險(xiǎn)并未升高，也可以達(dá)到2遍血清學(xué)檢測(cè)加1遍核酸檢測(cè)的血液檢測(cè)安全水平。鑒于本次研究中，均未對(duì)血清學(xué)陽(yáng)性、核酸檢測(cè)陽(yáng)性樣本進(jìn)行確認(rèn)試驗(yàn)，也沒(méi)進(jìn)行相關(guān)流行病學(xué)追蹤檢測(cè)，但也對(duì)探尋更優(yōu)的無(wú)償獻(xiàn)血者血液篩查檢測(cè)策略具有一定的參考意義。

綜上，在無(wú)償獻(xiàn)血者血液病原體檢測(cè)中開(kāi)展1遍ELISA檢測(cè)和1遍核酸檢測(cè)，能夠最大限度降低血液檢測(cè)成本，減少經(jīng)濟(jì)投入，又能夠縮短病毒檢測(cè)“窗口期”，達(dá)到有效降低輸血感染風(fēng)險(xiǎn)，保障臨床用血安全。

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