ER、PR、Ki-67、CA125在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及臨床意義

西安市第四醫(yī)院(西安710004)

蔡鳳梅 王卉芳 劉 輝 郅玲然 王亞樓

ER、PR、Ki-67、CA125在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及臨床意義

西安市第四醫(yī)院(西安710004)

蔡鳳梅 王卉芳 劉 輝 郅玲然 王亞樓

目的：探討ER、PR、Ki-67、CA125在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及臨床意義。方法：應(yīng)用免疫組化SP法對(duì)58例子宮內(nèi)膜癌組織中4種基因蛋白的表達(dá)情況進(jìn)行研究。結(jié)果：ER、PR、Ki-67、CA125在子宮內(nèi)膜癌組織中陽性表達(dá)率分別是79.3%、72.4%、62.1%和51.7%；ER的表達(dá)強(qiáng)度與手術(shù)病理分期和組織分級(jí)有關(guān)；PR和CA125的表達(dá)強(qiáng)度與手術(shù)病理分期、組織分級(jí)及肌層浸潤深度有關(guān)；Ki-67的表達(dá)強(qiáng)度與組織分級(jí)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)。結(jié)論：在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展中，ER、PR、Ki-67和CA125起著非常重要的作用,可作為判斷子宮內(nèi)膜癌惡性程度及評(píng)估預(yù)后的分子標(biāo)記物。

子宮內(nèi)膜癌是一種發(fā)生在子宮內(nèi)膜的上皮性惡性腫瘤,是僅次于宮頸癌的女性生殖系統(tǒng)第二大惡性腫瘤。近年有研究發(fā)現(xiàn)，一些特定的分子標(biāo)記物與子宮內(nèi)膜癌的產(chǎn)生及預(yù)后關(guān)系密切。為此，本研究擬通過檢測子宮內(nèi)膜癌中雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、Ki-67和CA125 這些分子標(biāo)記物基因蛋白的表達(dá)情況，探討其與子宮內(nèi)膜癌的臨床病理特征及與預(yù)后的關(guān)系。

材料與方法

1 材 料 選取我院2008年5月至2013年7月手術(shù)切除且資料完整的子宮內(nèi)膜癌標(biāo)本58例，術(shù)前均經(jīng)診斷性刮宮確診，所有患者均未行放療、化療和激素治療，手術(shù)方式為廣泛或次廣泛性全子宮切除術(shù)+盆腔淋巴結(jié)切除術(shù)?；颊吣挲g在23～75歲,平均年齡58.34歲；平均初潮年齡14.2歲；有生育史46例,無生育史者12例。手術(shù)病理分期采用2009年國際婦產(chǎn)科聯(lián)盟(FIGO)標(biāo)準(zhǔn)：Ⅰ期26例,Ⅱ期16例,Ⅲ期10例,Ⅳ期6例；組織分級(jí)：Ⅰ級(jí)(高分化)28例,Ⅱ級(jí)(中分化)18例,Ⅲ級(jí)(低分化)12例；按照肌層浸潤深度分為：無浸潤22例，侵及肌層淺部28例,侵及肌層深部者8例。淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者10例,無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者48例。另外選取24例正常增殖期子宮內(nèi)膜作對(duì)照,年齡27～52歲。

2 方 法 手術(shù)切除收集的標(biāo)本采用10%甲醛固定,石蠟包埋處理,切片厚度為4μm,常規(guī)二甲苯脫蠟,梯度酒精脫水,3% H2O2封閉內(nèi)源性過氧化物酶,微波處理修復(fù)抗原,10%正常山羊血清封閉組織中非特異性抗原，加入兔抗人ER、PR、Ki-67和CA125抗體(Santa Cruz 公司),置濕盒中4 ℃冰箱過夜，PBS液替代一抗作為陰性對(duì)照，次日滴加生物素標(biāo)記的羊抗兔IgG(二抗),加SP復(fù)合物、DAB顯色,蘇木素復(fù)染,中性樹脂封片。

3 結(jié)果判定 ER、PR和Ki-67陽性染色為棕黃色顆粒,均定位于細(xì)胞核。CA125陽性染色定位在細(xì)胞質(zhì)以及膜上，主要為胞膜和(或)胞質(zhì)出現(xiàn)棕黃色顆粒。實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷采用半定量積分法：①根據(jù)每張切片中細(xì)胞的染色強(qiáng)度給予評(píng)分：無染色定為0 分，淺黃色定為1 分，棕黃色定為2 分，棕褐色定為3分；②按照組織切片中的陽性染色細(xì)胞的數(shù)量占全部腫瘤細(xì)胞的數(shù)量的百分比來記分：≤5%： 0分，≤25%：1 分，≤50%：2 分，≤75%：3 分，>75%：4 分；③前兩項(xiàng)指標(biāo)的評(píng)分相乘，陰性(-)為0分，弱陽性(+)為1～4分，中度陽性()為5～8分，強(qiáng)陽性()為9～12 。(+)～()定為陽性表達(dá)，()～()為過陽性表達(dá)。

結(jié) 果

1 4種基因蛋白在增殖期子宮內(nèi)膜組織和子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá) 見表1。增殖期子宮內(nèi)膜組織和子宮內(nèi)膜癌中ER的陽性表達(dá)分別為87.5%及79.3%，PR的陽性表達(dá)分別為91.7%及72.4%，Ki-67的陽性表達(dá)分別為25.0%及62.1%，CA125的陽性表達(dá)分別為8.3%及51.7%，差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

表1 4種基因蛋白在增殖期子宮內(nèi)膜組織和子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá) [例(%)]

2 4種基因蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系 見表2。①ER陽性表達(dá)率與手術(shù)病理分期和組織分級(jí)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與肌層浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。②PR陽性表達(dá)率與手術(shù)病理分期、組織分級(jí)及肌層浸潤深度有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。③Ki-67陽性表達(dá)率與組織分級(jí)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與手術(shù)病理分期和肌層浸潤深度無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。④CA125陽性表達(dá)率與手術(shù)病理分期、組織分級(jí)及肌層浸潤深度有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

討 論

在子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展中，ER和PR起著非常重要的作用。研究認(rèn)為，子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病機(jī)制與激素的紊亂，尤其是雌激素的增多密切相關(guān)。一方面，雌激素可以促進(jìn)子宮內(nèi)膜細(xì)胞的有絲分裂，從而導(dǎo)致DNA 發(fā)生突變，進(jìn)而導(dǎo)致內(nèi)膜增殖，而后者是子宮內(nèi)膜癌的基本病變。另一方面，孕激素可以促進(jìn)子宮內(nèi)膜細(xì)胞的分化，抑制細(xì)胞的有絲分裂，引起蛋白合成減少，從而促使增生期的子宮內(nèi)膜轉(zhuǎn)為分泌期，從而發(fā)揮拮抗內(nèi)膜發(fā)生癌變的作用。當(dāng) ER和PR 各自與相應(yīng)的激素結(jié)合，相應(yīng)受體激活，以活化的形式與DNA特定部位結(jié)合，啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄，進(jìn)一步合成新的蛋白質(zhì)。這些新合成的具有特定生物學(xué)功能的蛋白質(zhì)繼而參與調(diào)節(jié)細(xì)胞生長及代謝過程。近年來大多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道[1-3]，在子宮內(nèi)膜樣腺癌的病理分期為早期和組織分化較好的患者中，其ER和PR 陽性率高于特殊的組織分類；在病理分期晚期和組織分化較差的患者中，高陽性ER和PR患者預(yù)后相對(duì)較好。但也有個(gè)別研究認(rèn)為，ER和PR與腫瘤組織的類型、分級(jí)、病理分期并無關(guān)聯(lián)，并且和腫瘤的復(fù)發(fā)無關(guān)[4]。ER 和 PR本身相比較，PR是影響子宮內(nèi)膜癌預(yù)后的獨(dú)立因素，PR對(duì)內(nèi)膜癌預(yù)后的判斷作用優(yōu)于 ER。但在 PR 陰性的情況下，ER 對(duì)也在一定意義上與預(yù)后關(guān)聯(lián)，可以用于判斷指標(biāo)[5]。本研究結(jié)果顯示，ER和PR在子宮內(nèi)膜癌中的陽性率分別是79.3%和72.4，比正常增殖期子宮內(nèi)膜的87.5%和91.7%低，ER無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，而PR有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，ER陽性表達(dá)率與手術(shù)的病理分期及組織分級(jí)二者均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異， 但肌層浸潤深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與ER陽性表達(dá)率并無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。PR陽性表達(dá)率與手術(shù)病理分期、組織分級(jí)及肌層浸潤深度均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。這些結(jié)果說明 ER和PR 與手術(shù)病理分期及組織分級(jí)聯(lián)系緊密，手術(shù)病理分期、組織分級(jí)越高，ER、PR表達(dá)越低，與文獻(xiàn)報(bào)道結(jié)果一致，說明腫瘤分化越差，激素受體的陽性率越低。提示ER、PR水平的高低對(duì)評(píng)估子宮內(nèi)膜癌的預(yù)后及指導(dǎo)臨床治療具有重要的作用。

表2 4種基因蛋白表達(dá)與子宮內(nèi)膜癌臨床病理特征的關(guān)系[n(%)]

注：*P<0.05

Ki-67 抗原是一種重要的反映腫瘤增殖活性的蛋白，除G0期和G1早期外，在其他細(xì)胞周期均有表達(dá)，在有絲分裂周期S 期的后半段上升，在G2和M 期達(dá)到高峰。Ki-67 過量表達(dá)與多種惡性腫瘤的生物學(xué)行為和預(yù)后密切相關(guān)，如大腸癌[6]、口腔癌[7]、透明細(xì)胞腎細(xì)胞癌[8]等。雖然Ki-67 和子宮內(nèi)膜癌的病理特征的相關(guān)性研究報(bào)道較多，但結(jié)論尚不統(tǒng)一，多數(shù)報(bào)道指出，Ki-67 和子宮內(nèi)膜癌的組織類型、分級(jí)、分期、浸潤深度有關(guān)，并與預(yù)后有密切關(guān)系[9]。但另外也有部分研究報(bào)道認(rèn)為子宮內(nèi)膜癌的組織分級(jí)、分期、浸潤深度、轉(zhuǎn)移及復(fù)發(fā)與Ki-67的表達(dá)無明顯關(guān)系[4,10]。本研究結(jié)果顯示，Ki-67在子宮內(nèi)膜癌中的陽性率是62.1%，Ki-67陽性表達(dá)率與組織分級(jí)和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但與手術(shù)病理分期及肌層浸潤深度無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。提示Ki-67與疾病進(jìn)程有一定的關(guān)系，Ki-67表達(dá)越高，細(xì)胞增殖越活躍，其侵襲性強(qiáng)，更易發(fā)生轉(zhuǎn)移，且患者的預(yù)后差。CA125是一組含有半乳糖、N-乙酰氨基葡萄糖和N-乙酰氨基半乳糖鏈的高分子糖蛋白，分布廣泛，在正常組織、良性病變和惡性腫瘤中均有表達(dá)。CA125主要存在于胚胎發(fā)育中的體腔上皮細(xì)胞中，其成體表達(dá)于體腔上皮分化而來的各種組織中，如胸腹膜、子宮以及蛻膜組織等。較多文獻(xiàn)對(duì)子宮內(nèi)膜癌患者血清CA125進(jìn)行了大量研究[2]，但對(duì)子宮內(nèi)膜癌組織中CA125的表達(dá)及其意義研究較少。本研究對(duì)子宮內(nèi)膜癌進(jìn)行了CA125免疫組化檢測，結(jié)果顯示，CA125在子宮內(nèi)膜癌中的陽性率是51.7%，比正常增殖期子宮內(nèi)膜的8.3%高，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。CA125陽性表達(dá)率與手術(shù)病理分期、組織分級(jí)及肌層浸潤深度有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。CA125在高度、中度分化的子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)顯著增強(qiáng)，而在低分化的子宮內(nèi)膜癌中表達(dá)減少，可能與分化較差的腫瘤組織，大多數(shù)呈實(shí)體片狀樣排列，具有分泌功能的內(nèi)膜腺體、癌細(xì)胞形成的腺管及腺腔結(jié)構(gòu)大部分消失，而CA125的表達(dá)能力在被腫瘤侵蝕的細(xì)胞分化過程中逐漸喪失表達(dá)有關(guān)。因此，CA125是反映子宮內(nèi)膜癌發(fā)生發(fā)展過程及生物學(xué)行為的重要腫瘤標(biāo)志物，對(duì)預(yù)測預(yù)后也有一定的參考價(jià)值。

ER、PR、Ki-67和CA125這4種蛋白的聯(lián)合檢測，對(duì)評(píng)估子宮內(nèi)膜癌的發(fā)生發(fā)展、生物學(xué)行為、分化程度及判斷預(yù)后提供了科學(xué)依據(jù)，對(duì)指導(dǎo)子宮內(nèi)膜癌的診斷及早期治療具有重要的參考價(jià)值。相信隨著子宮內(nèi)膜癌相關(guān)研究的不斷深入，有關(guān)其診斷和治療的方法和標(biāo)準(zhǔn)將更加科學(xué)合理。

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(收稿：2014-07-16)

Expressions and significance of ER, PR, Ki-67 and CA125 in endometrial carcinoma

Xi’an NO.4 Hospital(Xi’an 710004)

Cai Fengmei Wang Huifang Liu Hui et al

Objective：To study the expression and significance of ER, PR, Ki-67 and CA125 in endometrial carcinoma. Methods：ER, PR, Ki-67 and CA125 were detected by immunohistochemical SP method respectively in 58 cases of endometrial carcinoma.Results：The positive expression rates of ER, PR, Ki-67 and CA125 were 79.3%,72.4%,62.1% and 51.7%in endometrial carcinoma respectively. The expression of ER was related to operation stage and histologic classification. The expression of PR and CA125 were related to operation stage, histologic classification and depth of myometrial invasion. The expression of Ki-67 was related to histologic classification and lymph node metastases. Conclusion：The abnormal expression of ER, PR, Ki-67 and CA125 are maybe take important part in endometrial carcinoma, which will be useful biomarkers to estimate the grade of endometrial carcinoma and prognosis early detection and judging prognosis.

Endometrial neoplasms Estrogen receptor Progesterone receptor Immunohistochemistry Ki-67 Antigen @CA125

子宮內(nèi)膜腫瘤 雌激素受體 孕激素受體 免疫組織化學(xué) Ki-67抗原 @CA125

R711.32

A

10.3969/j.issn.1000-7377.2015.02.010