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    新疆鼠尾草根中酚酸類(lèi)化學(xué)成分的純化工藝研究

    2021-09-10 08:09:18任春暉王曉梅王新玲依明尕哈甫胡君萍
    西北藥學(xué)雜志 2021年4期
    關(guān)鍵詞:鼠尾草項(xiàng)下酚酸

    任春暉,王曉梅,王新玲,依明·尕哈甫,胡君萍

    (新疆醫(yī)科大學(xué)藥學(xué)院,烏魯木齊 830011)

    新疆鼠尾草(SalviadesertaSchang)是唇形科(Labiatae)鼠尾草屬(Salvia)的一種芳香型多年生草本植物,產(chǎn)于新疆北部,生于海拔為270~1 850 m的田野荒地、溝邊、沙灘草地及林下。新疆鼠尾草也被稱為新疆丹參,在新疆分布廣泛,資源豐富。民間通常以全草入藥,具有清熱解毒、止咳祛痰、消腫利尿之功效[1]。

    課題組前期研究對(duì)新疆鼠尾草進(jìn)行了初步的化學(xué)成分和藥理活性研究,從中分離得到20余種化學(xué)成分,主要包括水溶性的酚酸類(lèi)和脂溶性的二萜醌類(lèi)、三萜類(lèi)[1-3]。這些化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)類(lèi)型與其同科同屬的丹參(Salviamiltiorrhiza)類(lèi)似,而丹參的酚酸類(lèi)化學(xué)成分具有治療糖尿病性心肌病[4]、糖尿病腎病(DN)[5]、糖尿病性視網(wǎng)膜病[6]等糖尿病并發(fā)癥以及抗病毒[7]和抗炎[8]等作用,丹參脂溶性化學(xué)成分則可保護(hù)心血管系統(tǒng)、呼吸系統(tǒng)和胰腺[9-11]?,F(xiàn)有研究證明,新疆鼠尾草的水溶性酚酸類(lèi)化學(xué)成分能通過(guò)抑制腎臟組織細(xì)胞蛋白激酶C(PKC)的活性保護(hù)DN大鼠腎臟[12],脂溶性成分則具有顯著的抗血栓作用,能增強(qiáng)抗血小板聚集和凝血失活[13]。課題組前期對(duì)新疆鼠尾草酚酸類(lèi)化學(xué)成分的提取工藝進(jìn)行了研究[14],發(fā)現(xiàn)該提取物可明顯改善實(shí)驗(yàn)性糖尿病SD大鼠的血糖、血脂紊亂,降低血清中肌酐質(zhì)量濃度及血尿素水平,對(duì)糖尿病大鼠腎臟具有一定的保護(hù)作用[15]。但課題組制備的新疆鼠尾草提取物中總酚酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)僅為68.0%,其化學(xué)組成尚需闡明。研究顯示,鼠尾草屬植物主要的酚酸類(lèi)化學(xué)成分有丹參素、丹參素甲酯、原兒茶酸、原兒茶醛、咖啡酸、迷迭香酸及丹酚酸K等,上述成分均具有抗炎、抗氧化活性[16-17]。故本文以新疆鼠尾草根中4種代表性酚酸類(lèi)成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為指標(biāo),通過(guò)Design-Expert軟件,采用Box-Behnken中心組合設(shè)計(jì)方法,優(yōu)選大孔吸附樹(shù)脂法純化新疆鼠尾草酚酸類(lèi)化學(xué)成分的工藝條件,并對(duì)制備的3批樣品進(jìn)行質(zhì)量控制,為闡明新疆鼠尾草酚酸類(lèi)化學(xué)成分和后期藥理研究提供參考。

    1 儀器與試藥

    1.1儀器 ODS HYPERSⅡ色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),美國(guó)賽默飛世爾科技公司;Waters 2695高效液相色譜儀和Waters 2489雙波長(zhǎng)紫外可見(jiàn)檢測(cè)器,均購(gòu)自沃特世科技(上海)有限公司;KQ-500DE型離心機(jī),昆山市超聲儀器有限公司;TDL-5A型離心機(jī),上海菲恰爾分析儀器有限公司;2HWY-2102C型恒溫培養(yǎng)振蕩器,上海智城分析儀器有限公司;T6型新世紀(jì)紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì),北京普析通用儀器有限責(zé)任公司。

    1.2試藥 新疆鼠尾草,采于新疆烏魯木齊水磨溝區(qū),由王曉梅副教授鑒定為唇形科鼠尾草屬新疆鼠尾草SalviadesertaSchang的干燥根和根莖。對(duì)照品:丹參素(批號(hào)628B021),原兒茶醛(批號(hào)1228A024)和咖啡酸(批號(hào)806D022),均購(gòu)自北京索萊寶科技有限公司;迷迭香酸(批號(hào)Y06A9K67402),上海源葉生物科技有限公司;沒(méi)食子酸(批號(hào)110831-200803),中國(guó)食品藥品檢定研究院。AB-8型、D301-12型和HP20型大孔吸附樹(shù)脂,均購(gòu)自天津市光復(fù)精細(xì)化工研究所;S-8型、DM130型和D3520型大孔吸附樹(shù)脂,均購(gòu)自滄州寶恩吸附材料科技有限公司;ADS-17型、HPD100型、HPD722型、HPD600型、HPD400型、HPD500型和HPD826型大孔吸附樹(shù)脂,均購(gòu)自鄭州勤實(shí)科技有限公司;甲酸、鹽酸和氫氧化鈉(分析純),均購(gòu)自天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司;甲醇(色譜純),美國(guó)Fisher Scientific公司;其余試劑均為分析純,均購(gòu)自國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司。

    2 方法與結(jié)果

    2.1新疆鼠尾草根提取物浸膏的制備以及4種酚酸類(lèi)成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定

    2.1.1新疆鼠尾草根提取物浸膏的制備 取一定量新疆鼠尾草根粉末(過(guò)40目篩),以25倍量體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇加熱回流提取3次,每次1 h,過(guò)濾,合并濾液,水浴蒸干得干浸膏[14]。浸膏得率為23.8%。

    2.1.2溶液的制備

    2.1.2.1混合對(duì)照品溶液 精密稱取咖啡酸、迷迭香酸、原兒茶醛及丹參素對(duì)照品適量,加甲醇制成質(zhì)量濃度分別為1.01、3.02、0.98、1.00 mg·mL-1的單一對(duì)照品儲(chǔ)備液。精密吸取上述4種單一對(duì)照品儲(chǔ)備液加甲醇制成質(zhì)量濃度分別為50.5、39.2、22.5、40.1 μg·mL-1的混合對(duì)照品溶液。

    2.1.2.2供試品溶液 取2.1項(xiàng)下制備的干浸膏粉末適量,用體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇超聲溶解,離心,用0.22 μm微孔濾膜濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。

    2.1.3色譜條件 ODS HYPERSⅡ 色譜柱(250 mm×4.6 mm,5 μm)。流動(dòng)相:甲醇(A)-2 mL·L-1甲酸(B),梯度洗脫,洗脫程序?yàn)椋?~10 min,20%A~25%A;10~20 min,25%A~30%A;20~25 min,30%A~35%A;25~35 min,35%A~36%A;35~37 min,36%A~47%A;37~42 min,47%A~60%A;42~47 min,60%A~80%A。流速:1 mL·min-1;檢測(cè)波長(zhǎng):285 nm;柱溫:40 ℃;進(jìn)樣量:10 μL。

    2.1.4系統(tǒng)適用性考察 分別精密吸取2.1.2項(xiàng)下制備的混合對(duì)照品溶液和供試品溶液各10 μL,按照2.1.3項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定,記錄色譜圖,結(jié)果見(jiàn)圖1。由圖1可知,4種成分的保留時(shí)間分別為4.917、7.383、11.583、32.133 min,色譜峰之間的分離度均大于1.5,與其他組分分離完全,拖尾因子在0.95~1.05之間,理論塔板數(shù)以迷迭香酸峰計(jì)算均大于3 000,符合質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定要求。

    圖1 HPLC圖

    2.1.5線性關(guān)系考察 吸取適量2.1.2.1項(xiàng)下制備的混合對(duì)照品溶液,0.22 μm微孔濾膜過(guò)濾,按照2.1.3項(xiàng)下色譜條件分別進(jìn)樣5、10、15、20、25 μL,以4種成分的質(zhì)量為橫坐標(biāo)(x)、色譜峰面積為縱坐標(biāo)(y),繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,回歸方程分別為y1=8×106x1+38 460(r1=0.999 2),y2=5×107x2-40 696(r2=0.999 6),y3=4×106x3-15 333(r3=0.999 9),y4=2×106x4-55 878(r4=1.000 0),4種成分分別在0.21~1.03、0.02~0.09、0.04~0.21、0.20~1.00 μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

    2.1.6精密度實(shí)驗(yàn) 精密吸取2.1.2.1項(xiàng)下制備的混合對(duì)照品溶液,按照2.1.3項(xiàng)下色譜條件重復(fù)進(jìn)樣測(cè)定6次,結(jié)果4種成分的峰面積RSD值分別為0.54%、1.40%、1.32%、1.27%,表明儀器精密度良好。

    2.1.7穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn) 取2.1.2.2項(xiàng)下制備的供試品溶液,分別于配制后的 0、1、2、4、6、8 h 測(cè)定4種成分的峰面積,結(jié)果RSD值分別為0.77%、0.65%、0.32%、0.84%,表明供試品溶液在8 h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

    2.1.8重復(fù)性實(shí)驗(yàn) 按照2.1.2.2項(xiàng)下方法制備6份供試品溶液,按照2.1.3項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定。結(jié)果4種成分峰面積的RSD值分別為0.49%、1.72%、1.59%、1.56%,表明該方法重復(fù)性較好。

    2.1.9回收率實(shí)驗(yàn) 精密稱定2.1.1項(xiàng)下制備的新疆鼠尾草提取物浸膏適量,按照2.1.2.2項(xiàng)下方法制備9份供試品溶液,分別精密加入適量高、中、低質(zhì)量濃度的混合對(duì)照品溶液,再按照2.1.3項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定,計(jì)算平均回收率和RSD值,結(jié)果見(jiàn)表1。

    表1 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果 (n=3)

    2.1.10質(zhì)量分?jǐn)?shù)測(cè)定 按照2.1.2.2項(xiàng)下方法制備供試品溶液,按照2.1.3項(xiàng)下色譜條件進(jìn)樣測(cè)定,結(jié)果提取物中4種成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)之和為1.35%。

    2.2新疆鼠尾草酚酸類(lèi)化學(xué)成分純化工藝的考察

    2.2.1大孔吸附樹(shù)脂的預(yù)處理 取適量ADS-17、D3520、D301-12、HPD100、S-8、HPD722、HPD500、HPD600、AB-8、HPD400、HP20、DM130和HPD826共13種型號(hào)的樹(shù)脂,用體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇浸泡24 h,濕法裝柱,再用體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇洗滌至流出液與5個(gè)柱體積(BV)水混合不顯白色渾濁,加水洗至無(wú)醇味,再用2 BV體積分?jǐn)?shù)為5%的鹽酸浸泡4 h,用水洗至中性,最后用2 BV體積分?jǐn)?shù)為2%的氫氧化鈉浸泡4 h,用水沖洗至中性,備用[18]。

    2.2.2供試品溶液的制備 取2.1.1項(xiàng)下制備的新疆鼠尾草根提取物浸膏粉末適量,用體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇超聲溶解,離心,取上清液,即得。

    2.2.3樹(shù)脂的篩選 稱取1 g預(yù)處理后各種型號(hào)的大孔吸附樹(shù)脂,置于錐形瓶中,分別加入2.2.2項(xiàng)下制備的質(zhì)量濃度為20 mg·mL-1的供試品溶液10 mL,封口后置于恒溫培養(yǎng)振蕩器中振蕩8 h,抽濾后濾液離心,定容至10 mL,過(guò)濾,取續(xù)濾液,按照2.1.3項(xiàng)下色譜條件測(cè)定4種成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù),并按照公式(1)計(jì)算樹(shù)脂的吸附率。

    將上述吸附飽和的樹(shù)脂晾干后置于錐形瓶中,加入體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇10 mL,封口后置于恒溫培養(yǎng)振蕩器中振蕩8 h,抽濾后濾液離心,定容至10 mL,過(guò)濾,取續(xù)濾液,按照2.1.3項(xiàng)下色譜條件測(cè)定總酚酸質(zhì)量分?jǐn)?shù),并按照公式(2)計(jì)算樹(shù)脂的解吸附率。公式(1):E=(C0-C1)÷C0×100%,公式(2):D=[C2÷(C0-C1)]×100% (E為吸附率(%);D為解吸附率(%);C0、C1、C2分別為樣品溶液中總酚酸質(zhì)量濃度、吸附后溶液中總酚酸質(zhì)量濃度、解析液中總酚酸質(zhì)量濃度)。綜合考慮各型號(hào)樹(shù)脂的吸附與解吸附情況,選擇HPD600進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。結(jié)果見(jiàn)表2。

    表2 13種大孔吸附樹(shù)脂的吸附率和解吸附率

    2.2.4單因素考察

    2.2.4.1上樣質(zhì)量濃度考察 將48 mL(1 BV)按照2.2.2項(xiàng)下方法制備的不同質(zhì)量濃度的供試品溶液(1、10、20、30、40 mg·mL-1)分別通過(guò)HPD600樹(shù)脂柱(徑高比為1∶10),以1 mL·min-1的流速進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附,收集流出液定容至48 mL,按照2.1.3項(xiàng)下色譜條件測(cè)定總酚酸的質(zhì)量濃度,計(jì)算吸附率。結(jié)果顯示,上樣液質(zhì)量濃度小于30 mg·mL-1時(shí),吸附率隨著上樣液質(zhì)量濃度的增大而升高;而上樣液質(zhì)量濃度大于30 mg·mL-1時(shí),吸附率隨著上樣質(zhì)量濃度的增大而下降,上樣液質(zhì)量濃度為30 mg·mL-1時(shí)吸附率達(dá)到最高,為83%。

    2.2.4.2上樣量的考察 稱取處理好的30 g樹(shù)脂置于樹(shù)脂柱中(徑高比為1∶10),取2.2.2項(xiàng)下制備的供試品溶液55 mL,上樣,吸附流速為1 mL·min-1。每10 mL收集1份流出液,按照2.1.3項(xiàng)下色譜條件測(cè)定4種成分的質(zhì)量濃度,結(jié)果顯示,上樣量為40 mL時(shí)達(dá)到飽和吸附,以40 mL計(jì)算,1 g樹(shù)脂最大動(dòng)態(tài)吸附約為39.10 mg總酚酸提取物。

    2.2.4.3水洗用量考察 稱取適量HPD600置于樹(shù)脂柱中,取2.2.2項(xiàng)下制備的供試品溶液40 mL以1 mL·min-1的流速進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附,吸附完全后加6 BV蒸餾水洗脫水溶性雜質(zhì)及未吸附的提取液,收集洗脫液,每1個(gè)BV為1流份,按照2.1.3項(xiàng)下色譜條件進(jìn)行測(cè)定,結(jié)果顯示,第3個(gè)BV中基本無(wú)酚酸,故確定水洗用量為3 BV。

    2.2.4.4洗脫溶劑體積分?jǐn)?shù)考察 稱取適量處理好的HPD600大孔吸附樹(shù)脂濕法裝柱,取2.2.2項(xiàng)下制備的供試品溶液40 mL,以1 mL·min-1流速進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附,吸附完全后加3 BV水洗脫除雜,再用10 BV體積分?jǐn)?shù)分別為20%、40%、60%、80%、95%的乙醇以1 mL·min-1的流速洗脫,分別收集洗脫液并濃縮,按照2.1.3項(xiàng)下色譜條件測(cè)定4種成分的質(zhì)量濃度,計(jì)算洗脫率,結(jié)果顯示,乙醇體積分?jǐn)?shù)為60%時(shí),洗脫率達(dá)最大值,為51%,故選用體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇進(jìn)行洗脫。

    2.2.4.5洗脫溶劑用量考察 稱取適量處理好的HPD600大孔吸附樹(shù)脂濕法裝柱,取2.2.2項(xiàng)下制備的供試品溶液40 mL,以1 mL·min-1的流速進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附,吸附完全后加3 BV水洗脫除雜,再用6 BV體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇以1 mL·min-1的流速洗脫,收集洗脫液并濃縮,按照2.1.3項(xiàng)下色譜條件測(cè)定4種成分的質(zhì)量濃度,計(jì)算洗脫率,結(jié)果顯示,在3 BV時(shí)已基本洗脫完全,故選用3 BV體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇進(jìn)行洗脫。

    2.2.4.6洗脫流速考察 稱取適量處理好的HPD600大孔吸附樹(shù)脂裝3根樹(shù)脂柱,取2.2.2項(xiàng)下制備的供試品溶液40 mL,以1 mL·min-1的流速進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附,吸附完全后加3 BV水洗脫除雜,再分別用3 BV體積分?jǐn)?shù)為60%的乙醇以0.5、1、2 mL·min-1的流速洗脫,收集洗脫液并濃縮至50 mL,按照2.1.3項(xiàng)下色譜條件測(cè)定總酚酸質(zhì)量濃度,并精密量取各流速的洗脫液45 mL水浴蒸干,稱定質(zhì)量后計(jì)算得總酚酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)分別為2.70%、2.55%、2.69%。結(jié)果表明,洗脫流速為0.5 mL·min-1時(shí),總酚酸質(zhì)量分?jǐn)?shù)最高。

    2.2.5響應(yīng)面法優(yōu)選純化工藝 根據(jù)單因素考察結(jié)果,以4種成分質(zhì)量分?jǐn)?shù)為考察指標(biāo),選取上樣液質(zhì)量濃度、洗脫劑體積分?jǐn)?shù)和洗脫流速3個(gè)因素,設(shè)計(jì)3因素3水平實(shí)驗(yàn)方案,見(jiàn)表3。

    表3 因素與水平

    通過(guò)Design-Expert 8.0.6響應(yīng)面分析軟件設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),共17組。通過(guò)軟件對(duì)表3的數(shù)據(jù)進(jìn)行回歸擬合分析,得到質(zhì)量分?jǐn)?shù)與各因素水平間的二次多項(xiàng)式方程:R=0.035+1.887×10-3A-8.159×10-3B-2.212×10-3C-2.150×10-3AB+3.711×10-4AC+1.970×10-3BC-8.125×10-4A2+4.513×10-3B2-2.475×10-3C2。設(shè)計(jì)方案見(jiàn)表4。方差分析結(jié)果見(jiàn)表5。

    表4 響應(yīng)面設(shè)計(jì)方案

    由表5可知,各因素對(duì)吸附率的影響順序依次為:B(洗脫劑體積分?jǐn)?shù))>C(洗脫流速)>A(上樣液質(zhì)量濃度)。模型回歸分析結(jié)果顯示,模型P=0.000 7<0.01,表示差異極顯著,失擬項(xiàng)P=0.362 6>0.05,表示差異不顯著,說(shuō)明實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)擬合度良好,誤差??;同時(shí)決定系數(shù)R2=0.953 0,說(shuō)明實(shí)驗(yàn)可靠性較好,模型可用于分析和預(yù)測(cè)大孔吸附樹(shù)脂吸附新疆鼠尾草總酚酸的能力。為更直觀地反映各因素與響應(yīng)值的關(guān)系,繪制了各因素交互作用的三維響應(yīng)面圖,結(jié)果見(jiàn)圖2。通過(guò)軟件分析計(jì)算得出最佳純化條件為:上樣液質(zhì)量濃度為40 mg·mL-1,洗脫劑體積分?jǐn)?shù)為40%,洗脫流速為0.67 mL·min-1。在此條件下4種成分最大理論質(zhì)量分?jǐn)?shù)之和為5.22%。

    圖2 響應(yīng)面圖

    表5 方差分析結(jié)果

    2.2.6驗(yàn)證實(shí)驗(yàn) 按照響應(yīng)面法優(yōu)化出的純化工藝進(jìn)行驗(yàn)證實(shí)驗(yàn),即上樣液質(zhì)量濃度為40 mg·mL-1,上樣體積為40 mL進(jìn)行吸附,吸附飽和用3 BV水以1 mL·min-1流速洗脫,再用3 BV體積分?jǐn)?shù)為40%的乙醇以0.67 mL·min-1流速洗脫,收集洗脫液后濃縮蒸干,即得總酚酸純化物,得率為67.6%。按照2.1.3項(xiàng)下方法測(cè)定丹參素、原兒茶醛、咖啡酸及迷迭香酸4種成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù),平行測(cè)定3次,其質(zhì)量分?jǐn)?shù)之和為5.92%,相較于純化前增加了4.4倍,表明HPD600大孔吸附樹(shù)脂對(duì)新疆鼠尾草總酚酸有純化作用,是有效的純化材料。

    3 討論

    據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道,酚酸類(lèi)化合物丹參素、原兒茶醛、咖啡酸和迷迭香酸等是鼠尾草屬植物的主要活性成分,都具有一定的抗炎、抗氧化作用,能較好地清除體內(nèi)自由基[19]。其中丹參素能降低H2O2誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷中丙二醛(MDA)的質(zhì)量分?jǐn)?shù),提高超氧化物歧化酶(SOD)的活性,增加細(xì)胞清除氧自由基的能力[20];原兒茶醛能顯著降低紫外線照射的人真皮成纖維細(xì)胞(HDF)細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)、一氧化氮(NO)和前列腺素(PGE2)的水平,還可抑制環(huán)氧合酶(COX-2)的表達(dá)[21];咖啡酸、迷迭香酸因其具有鄰二酚羥基,可通過(guò)抑制ROS的產(chǎn)生,升高SOD和谷胱甘肽(GSH)水平,改善小鼠氧化性肺損傷中肺組織的病理變化,發(fā)揮保護(hù)作用[22-23]。結(jié)合DN的發(fā)病機(jī)制,推測(cè)新疆鼠尾草的酚酸類(lèi)化學(xué)成分可能通過(guò)抗氧化具有一定防治DN的作用[11,14]。故本實(shí)驗(yàn)采用HPLC法同時(shí)檢測(cè)上述4種具有代表性結(jié)構(gòu)的酚酸類(lèi)化合物作為優(yōu)化純化工藝的指標(biāo)。鑒于對(duì)新疆鼠尾草化學(xué)成分的研究尚不完善,本研究擬進(jìn)一步闡明純化物的化學(xué)組成。

    通過(guò)考察ADS-17、D3520、D301-12、HPD100、S-8、HPD722、HPD500、HPD600、AB-8、HPD400、HP20、DM130及HPD826 13種不同型號(hào)和極性的大孔吸附樹(shù)脂對(duì)新疆鼠尾草總酚酸的靜態(tài)吸附及解吸附功能,最終選擇HPD600大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行單因素實(shí)驗(yàn)。研究表明,新疆鼠尾草的有效成分包括水溶性化學(xué)成分和脂溶性化學(xué)成分[24],水溶性化學(xué)成分中主要是極性較大的酚酸類(lèi)化學(xué)成分,而HPD600為極性吸附樹(shù)脂,洗脫溶劑為極性較大的乙醇,便于酚酸類(lèi)化學(xué)成分的洗脫,因此HPD600型大孔吸附樹(shù)脂適用于新疆鼠尾草酚酸類(lèi)化學(xué)成分的純化。

    在考察洗脫溶劑的體積分?jǐn)?shù)時(shí)發(fā)現(xiàn),當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)達(dá)到60%時(shí),洗脫率最高(51%),當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)從20%增加到60%時(shí),洗脫率增加,當(dāng)乙醇體積分?jǐn)?shù)大于60%時(shí),解吸能力下降。因?yàn)樗苄苑铀嵝枰欢ǖ暮h(huán)境,隨著乙醇體積分?jǐn)?shù)的增加,酚酸很難被溶出,解吸率也較低。

    本實(shí)驗(yàn)篩選出的純化工藝能有效去除雜質(zhì),純化有效成分。純化物中4種成分的質(zhì)量分?jǐn)?shù)之和為5.92%。綜上所述,該純化工藝操作簡(jiǎn)單,參數(shù)準(zhǔn)確可靠,經(jīng)濟(jì)環(huán)保,為新疆鼠尾草總酚酸后續(xù)的研究奠定了基礎(chǔ)。

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