中藥藤茶化學(xué)成分及抗感染作用研究進展＊

張云坤，李娟，黃丹，歐陽文，姚蓉，何壽生，3＊＊，李順祥＊＊

（1.湖南中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院/湖南省中藥活性物質(zhì)篩選工程技術(shù)研究中心長沙410208；2.湖南食品藥品職業(yè)學(xué)院長沙410208；3.湖南省藥品監(jiān)督管理局長沙410013）

藤茶，為葡萄科蛇葡萄屬顯齒蛇葡萄Ampelopsis grossedentata(Hand-Mazz)W.T.Wang.）[1]的嫩枝葉，又稱莓茶、茅巖酶、雪茶、白茶、甜茶、甘露茶等，廣泛分布于湖南、廣西壯族自治區(qū)、貴州、湖北、江西、福建、廣東等地[2]。藤茶是一種在中國南方地區(qū)廣泛應(yīng)用的保健茶和中草藥，在民間已有上千年的應(yīng)用歷史，其味甘、淡、性涼，具有清熱解毒、消腫利咽、消癰散結(jié)等功效，常用于治療口腔潰瘍、咽喉腫痛、感冒發(fā)熱、濕熱黃疸、目赤腫痛、癰腫瘡癤等癥[3]。近年來研究發(fā)現(xiàn)，藤茶主要含有黃酮類、甾體類、萜類、多酚、多糖類等化學(xué)成分，具有顯著的抗病毒、抗菌、抗炎、調(diào)節(jié)免疫功能等抗感染生物活性。在當(dāng)前新型冠狀病毒肺炎（COVID-19）等病毒性傳染病全球暴發(fā)，中醫(yī)藥在應(yīng)對新型突發(fā)性傳染病方面取得顯著成效的背景下，深入發(fā)掘中藥藤茶抗感染作用物質(zhì)基礎(chǔ)及功效，對遏制日益嚴(yán)重的病原微生物的挑戰(zhàn)具有重要的意義。因此，本文對藤茶的化學(xué)成分、抗感染作用研究進展進行綜述，以期為該藥材進一步研究和開發(fā)提供參考。

1 化學(xué)成分

1.1 黃酮類化合物

藤茶主含黃酮類成分，其總黃酮類物質(zhì)含量高達(dá)43.4%-44.0%[4]，在植物界中極為罕見，是目前已發(fā)現(xiàn)的黃酮類物質(zhì)含量最高的藥材，被稱為“黃酮之王”。目前已從該植物中分離得到35種黃酮類化合物，主要包括黃酮醇、黃酮、異黃酮、查耳酮、黃烷酮等類型。其中，二氫楊梅素（dihydromyricetin，DMY或DHM），又稱蛇葡萄素（ampelopsin，AMP），屬于二氫黃酮醇類化合物，是藤茶中含量最高的黃酮類單體化合物（藤茶中含量高達(dá)37.4%-38.5%[4]），也是近年來國內(nèi)外學(xué)者研究的熱點天然產(chǎn)物之一[5]。

覃潔萍等[6]從廣西壯族自治區(qū)瑤族藤茶中分離出兩種黃酮類化合物，分別為二氫楊梅素（dihydromyricetin，1）和楊梅素（myricetin，14）；何桂霞等[7-9]從中分離得到二氫槲皮素(dihydroquercetin，2)、芹菜 素(apigenin，5)、芹 菜 苷（apiin，6）、柚 皮 素（naringenin，9）、橙 皮 素(hesperitin，10)、圣 草 酚(eriodictyol，11)、山柰酚(kaempferol，16)；白秀秀等[10-12]分離鑒定得到(2R,3S)-二氫楊梅素（(2R,3S)-Dihydromyricetin，3)、5,7,3',4',5'-五羥基二氫黃酮(5,7,3',4',5'-Pentahydroxy flavanone，8)；Zheng XJ等[11]從中發(fā)現(xiàn)了3-二羥基槲皮素(3-Dihydroxyquercetin，7)；張友勝等[13]從中分離得到蘆丁(rutinum，17)；王定勇等[14]從福建藤茶中分離得到槲皮素（quercetin，15）、槲皮素-3-0-β-D-葡 萄 糖 苷（quercetin-3-O-β-Dglucoside，18）、藤 茶 素(grossedentstasin，30)、藤茶苷(grossedentataside，31)；袁阿興等[15]從中分離得到楊梅素-3-O-L-鼠李糖苷（myricitrin，21）；付明等[16]從中分離鑒定了二氫山柰酚(dihydrokaempferol，4)、楊梅素-3-O-β-D-吡 喃 木 糖 苷(myricetin-3-O-β-Dxylopyranoside，20)，楊 梅 素-3-O-β-D-葡 萄 糖 苷(myricetin-3-O-α-L-glucoside，22)、紫云英苷(astragalin，23)、槲皮素-3-O-α-L-吡喃鼠李糖苷(quercetin-3-Oα-L-rhamnopyranoside，24)、阿福豆素（afzelin，25）；張巖松等[17]分離到楊梅素-3-O-β-D-半乳糖苷(myricetin-O-β-D-galactopyranoside，26)；Daniela等[22]從中鑒定了兒茶素（catechin，27）、阿夫兒茶精（afzelechin，28）、表兒茶素（epicatechin，29）等成分；Gao Q等[18]從中鑒定得到根皮素(phloretin，12)、根皮苷(phloridzin，13)和槲皮素-3-O-β-D-木糖苷(Quercetin-3-O-β-D-xyloside，19)；Wang DY等[19]從中分離得到四種異黃酮類化合物，分別為：6,7-Dihydroxy-3'-methoxy-4',5'-methylenedioxyisoflavone（32）、6,7-Dihydroxy-3'-methoxy-4',5'-methylenedioxyisoflavone 6-O-β-D-glucopyranoside（33）、6,7-dihydroxy-3'-methoxy-4',5'-methylenedioxyisoflavone 6-O-α-Lrhamnopyranoside（34）、6,7-dihydroxy-3'-methoxy-4',5'-methylenedioxyisoflavone 6-O-β-D-xylopyranosyl-(1-6)-β-D-glucopyranoside（35）（表1）。

表1 藤茶中黃酮類化合物

續(xù)表

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1.2 甾體及萜類成分

王巖等[23]從藤茶的石油醚提取液中的分離得到β-谷甾醇（β-sitosterol，36）、豆甾醇（stigmasterol，37）等化合物；付明等[14,16]分離得到齊墩果酸（Oleanolic acid，38）等化合物；袁阿興等[15]分離得到龍涎香醇（ambrein，39）（表2）。

表2 藤茶中甾體及萜類成分

續(xù)表

1.3 其他成分

藤茶中除含有豐富的黃酮類物質(zhì)外，熊皓平等[21]分析了不同季節(jié)顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉，得出酚類化合物約為20%。白秀秀等[10,13]分離得到?jīng)]食子酸（gallic acid，40）、沒食子酸甲酯（methyl Gallate，41）、沒食子酸乙酯（ethyl Gallate，42）、沒食子酰-β-D-葡萄糖苷（Gallic-β-D-glucoside，43），Daniela等[22]從中分離到白藜蘆醇（resveratrol，44）等多酚類成分；此外，王定勇等[14]分離得到棕櫚酸（cetostearic acid，45），付明等[14,16]分離得到大黃素（emodin，46）、大黃素甲醚（physcion，47）、龍膽酮酚（bellidifodin，48）等化合物（表3）。

表3 藤茶多酚等其他成分

續(xù)表

此外，藤茶中還含有較多的水溶性多糖成分，熊皓平等[21]分析了不同季節(jié)顯齒蛇葡萄幼嫩莖葉中水溶性多糖等化合物的含量，得出水溶性糖含量約為10%。羅祖友等[24-26]從顯齒蛇葡萄中分離得到AGP-3、AGP-4等兩種含蛋白質(zhì)的復(fù)合多糖。藤茶中含有發(fā)油成分，目前已鑒定出α-萜品醇、β-畢橙茄醇、葉綠醇、雪松醇、香葉醇、正己醇、芳樟醇、橙花叔醇、橙花醇、芳樟醇、β-環(huán)梓檬醛、香葉基丙酮、β-紫羅蘭酮、棕櫚酸、壬酸、癸酸、水楊酸甲酯、柏木腦等70余種香氣成分[27-29]。藤茶中富含17種氨基酸成分，其中9種為人體所必需的氨基酸，包括γ-氨基丁酸、蛋氨酸等特殊氨基酸，以及對鮮爽滋味具舉足輕重作用的天冬氨酸等；同時還含有Ca、Mg、Fe、Zn、Mn、K、Se等14種微量元素[30]，其營養(yǎng)成分比較齊全，對人體健康與疾病預(yù)防起重要的作用。

2 抗病原微生物的作用

相對于化學(xué)藥物，中醫(yī)藥在抗感染防治方面具有獨特的優(yōu)勢，能夠發(fā)揮其多途徑、多靶點的綜合效應(yīng)，往往能取得意想不到的結(jié)果。藤茶作為一種常見的清熱解毒類中藥，具有顯著的抗病毒、抗菌、抗炎、增強免疫功能等生物活性，可通過直接或間接作用等多種途徑達(dá)到抑制病原微生物的目的。

2.1 抗病毒

目前有關(guān)藤茶抗病毒作用的研究集中在藤茶提取物、總黃酮類及多糖類化合物，主要通過阻斷病毒復(fù)制過程中某個環(huán)節(jié)以抑制病毒繁殖、控制感染，或調(diào)節(jié)機體系統(tǒng)免疫功能來發(fā)揮抗病毒作用。鄭作文等[31]研究結(jié)果表明，在最大無毒質(zhì)量濃度下（TC0為62.5 μg·mL-1），藤茶總黃酮在2215細(xì)胞培養(yǎng)過程中對乙型肝炎病毒分泌HBsAg及HBeAg具有明顯的抑制效果（抑制率分別為43.14%、33.76%），對HBV-DNA復(fù)制也有一定的抑制作用。楊柯等[32]研究了藤茶提取物對感染鴨乙型肝炎病毒病毒（DHBV）的影響，發(fā)現(xiàn)藤茶提取物（300 mg·kg-1，2次/天，連續(xù)口服給藥10天）對感染鴨體內(nèi)DHBV-DNA的復(fù)制有明顯的抑制作用（P<0.01），且停藥3天后無反跳現(xiàn)象。任啟生等[33]發(fā)明了一種包含有二氫楊梅素和楊梅素等成分的組合物（包括但不限：二氫楊梅素80 g，楊梅素20 g），通過體外抗病毒試驗表明，該組合物具有廣譜抗病毒作用（可對抗乙肝病毒、流感病毒或冠狀病毒等），同時該組合物低劑量組（75 mg·kg-1，連續(xù)口服給藥7天，1次/天）顯示出明顯促進小鼠脾淋巴細(xì)胞增殖的作用，具有增強免疫力的功能。劉淼淼等[34]研究表明楊梅素及二氫楊梅素在體外能明顯的抑制甲型流感病毒的復(fù)制，其作用機制主要通過作用于流感病毒PB2cap蛋白而影響病毒核蛋白（vRNP）活性，并且能通過Toll樣受體3（TLR3）信號通路調(diào)控流感病毒感染導(dǎo)致的過度炎癥免疫反應(yīng)。Liu DY等[35]研究發(fā)現(xiàn)，藤茶中蛇葡萄素（AMP）能有效地保護敏感細(xì)胞免受人類免疫缺陷病毒1型（HIV-1）感染，顯著降低HIV-1抗原P24的表達(dá)；此外，AMP還能誘導(dǎo)外周血單核細(xì)胞（PBMCs）表面的HIV-1輔助受體CXCR4內(nèi)化，從而降低PBMCs表面受體分子數(shù)量，達(dá)到抑制急性感染的目的。

2.2 抗菌

目前認(rèn)為，藤茶中發(fā)揮抗菌作用的主要為黃酮類化合物，特別是二氫楊梅素等含量比較高的成分，具有廣譜、高效的抑菌效果，對革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌都有很強的抑制作用，主要通過抑制菌體的呼吸代謝、破壞菌體的結(jié)構(gòu)形態(tài)、改變細(xì)胞膜的滲透性等發(fā)揮抗菌作用。熊皓平等[36]研究表明，顯齒蛇葡萄不同極性溶劑提取物對枯草芽抱桿菌等12種常見食品污染菌均表現(xiàn)明顯的抗菌效果，其中醇層、乙酸乙酯層及單體二氫楊梅素抗菌效果最為明顯，且依次增強。劉勝貴等[37]研究表明，顯齒蛇葡萄的根、莖、幼葉水提取物對大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、雞沙門氏桿菌、糞腸球菌、陰溝腸桿菌等5種細(xì)菌均有很強的抑制作用，尤其對金黃色葡萄球菌、糞腸球菌抑菌作用最強（MIC為0.98 g·L-1），其中幼葉提取物抑菌效果最強，不同部位的抑菌作用有較大的差別。陳帥等[38]報道藤茶總黃酮水溶液（5 mg·mL-1）對金黃色葡萄球菌等5種供試菌均有抑菌效果，抑菌效果從高到低依次為志賀氏菌>沙門氏菌>枯草芽孢桿菌>金黃色葡萄球菌>大腸桿菌。Wu Y等[39]研究發(fā)現(xiàn)二氫楊梅素能與金色葡萄球菌細(xì)胞膜膜脂及蛋白相互作用，導(dǎo)致膜流動性顯著降低、膜蛋白構(gòu)象發(fā)生變化，從而破壞細(xì)胞膜的完整性，并與細(xì)胞內(nèi)DNA結(jié)合以實現(xiàn)殺菌效果。Xiao XN等[40]利用紙片擴散法測定了藤茶中二氫楊梅素（75%乙醇溶液）對黃色葡萄球菌、枯草芽孢桿菌、大腸埃希菌、副傷寒沙門氏菌和銅綠假單胞菌等五種食源性細(xì)菌的抗菌活性，結(jié)果均顯示出良好的抗菌活性，其機制可能與細(xì)胞壁溶解、細(xì)胞內(nèi)成分泄漏及三羧酸循環(huán)途徑抑制有關(guān)。

2.3 抗其他病原微生物

3 抗炎作用

藤茶作為一種民間習(xí)用的保健茶或中草藥，常用于治療口舌生瘡、咽喉腫痛等癥，具有顯著的抗炎鎮(zhèn)痛活性。近年來研究證明藤茶及其黃酮類物質(zhì)主要通過抑制前列腺素E2（PGE2）、腫瘤壞死因子（TNFα）、白介素1（IL-1）、白介素6（IL-6）、白介素8（IL-8）、白介素10（IL-10）等表達(dá)水平，以及白介素1受體關(guān)聯(lián)激酶1（IRAK1）、腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6（TRAF6）、IκB激酶β（IKKβ）、核因子κB（NF-κB）等炎癥信號通路，來發(fā)揮抗炎作用，改善炎癥病變過程。

林建峰等[43]報道藤茶水提物大劑量組（8 g生藥/kg，連續(xù)灌胃3-4天）能顯著抑制角叉菜膠致小白鼠足腫脹、巴豆油性耳廓水腫、醋酸致小鼠腹腔毛細(xì)血管通透性增高等，表現(xiàn)出較好的消炎鎮(zhèn)痛的作用。陳立峰等[44]研究表明藤茶總黃酮（劑量為84、266、840 mg·kg-1，口腔局部涂布3-4天）能使表皮葡萄球菌性、乙酸性口腔黏膜潰瘍模型的潰瘍直徑明顯縮小，降低血清抗口腔黏膜抗體滴度等炎癥指數(shù)，縮短潰瘍愈合時間，并隨藥物劑量增加作用增強。祁佳等[45]采用大鼠足趾腫脹實驗法，觀察藤茶水提取物和醇提取物（0.5 g生藥/kg，1次/天，連續(xù)灌胃30天）對炎癥的抑制作用，結(jié)果表明藤茶水提取物和醇提取物都具有抗炎作用，且水提取物抗炎作用更為明顯，其抗炎機制可能與降低炎性組織中PGE2的含量有關(guān)。

Hou XL等[46]研究證明藤茶中DMY可通過抑制NF-κB的活化，以及p38、JNK磷酸化來抑制TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10等炎癥因子水平，發(fā)揮其局部抗炎作用。陳立峰等[47]發(fā)明了一種低溫處理重結(jié)晶法從顯齒蛇葡萄中制備DMY的方法，用于制備治療口腔潰瘍、口腔炎癥和胃潰瘍、胃炎的藥物，結(jié)果顯示DMY能顯著減低兔表皮葡萄糖球菌所致口腔潰瘍性、大鼠幽門結(jié)扎型胃潰瘍性、大鼠角叉菜膠性足趾腫脹性等炎癥反應(yīng)。Xu B等[48]研究表明藤茶中DMY可顯著減少支氣管肺泡灌洗液（BAL）中的炎性細(xì)胞總數(shù)，包括嗜酸性粒細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞，并且可降低BAL液中IL4、IL5和IL13的水平，以及血清中卵黃特異性IgE和IgG1的分泌，具有顯著的抗炎作用。Weng L等[49]研究發(fā)現(xiàn)藤茶中AMP可抑制脂多糖（LPS）誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細(xì)胞的炎癥反應(yīng)，其機制在于抑制LPS誘導(dǎo)的IkKβ/NF-κB炎癥通路的激活，并顯著降低JAK2-STAT3和STAT3核轉(zhuǎn)位磷酸化水平。Jia R等[50]報道藤茶中DHM能抑制雨蛙肽（caerulin）誘導(dǎo)的小鼠骨髓源性巨噬細(xì)胞中多種促炎因子（IL-1β、TNF-α和IL-17）的表達(dá)和產(chǎn)生，可作為一種潛在的抗急性胰腺炎藥物進一步研究。Huang B等[51]報道藤茶中DMY可通過抑制IRAK1/TRAF6/NF-κB介導(dǎo)的炎癥信號通路，對葡聚糖硫酸鈉（DSS）誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎有明顯的改善作用保護作用。Wu J等[52]研究結(jié)果表明，藤茶中DMY通過抑制NF-κB信號信號通路來減輕膠原誘導(dǎo)關(guān)節(jié)炎大鼠（CIA）及成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞（FLSs）的炎癥反應(yīng)。

此外，Chen YL等[53]從系統(tǒng)藥理學(xué)角度研究顯齒蛇葡萄對葡聚糖硫酸鈉（DSS）誘導(dǎo)的小鼠結(jié)腸炎的保護作用，實驗證實顯齒蛇葡萄顯著抑制DSS誘導(dǎo)的IRAK1、TRAF6、IkKβ和NF-κB介導(dǎo)的炎癥信號通路，并抑制TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的高表達(dá)水平，對DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎有明顯的改善作用。Wang B等[54]通過生物信息學(xué)分析和動物實驗研究發(fā)現(xiàn)藤茶中DHM能夠改善LPS攻擊后肺組織的病理改變、抑制肺組織的炎癥反應(yīng)，從而發(fā)揮其對急性肺損傷的保護作用。

4 免疫調(diào)節(jié)作用

藤茶中富含黃酮類、多糖類、氨基酸類和微量元素等多種營養(yǎng)成分，具有補脾、潤肺、保肝、固腎等多種功效，能夠全面調(diào)理五臟六腑功能，調(diào)節(jié)機體免疫力。閻莉等[55,56]研究探討藤茶總黃酮（TF）對小鼠免疫功能的影響（50、100、200 mg·kg-1，灌胃給藥，連續(xù)10 d），結(jié)果表明TF能夠提高小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬指數(shù)，增加血清溶血素（IgM）生成及補體C3含量等，且呈一定劑量依耐性。鐘正賢等[57]研究發(fā)現(xiàn)藤茶總黃酮大劑量組（0.1 g·kg-1，連續(xù)ig給藥7-10天）顯著提高單核巨噬細(xì)胞吞噬指數(shù)K值（P<0.05），以及免疫低下小鼠溶血素含量（P<0.05），從而增強體液免疫功能。曾春暉等[58-59]研究也證明藤茶中DMY中、高劑量組（5、10 μg·L-1）能增強刀豆蛋白（ConA）誘導(dǎo)的小鼠淋巴細(xì)胞增殖反應(yīng)（增強率分別為26.8%、59.6%）；此外，DMY（50、100、200 mg·kg-1，每天灌胃給藥1次，連續(xù)10d）能明顯提高小鼠的脾臟指數(shù)，增強小鼠腹腔巨噬細(xì)胞吞噬雞紅細(xì)胞的功能，增加小鼠體內(nèi)溶血素抗體含量和2,4-二硝基氯苯(DNCB）誘導(dǎo)的小鼠耳腫脹，其中高劑量組（200 mg·kg-1）作用最強（P<0.01），具有明顯的增強免疫的作用。羅祖友等[59]研究發(fā)現(xiàn)藤茶多糖中、高劑量組（50、100 mg·kg-1·d，腹膜注射給藥，連續(xù)9天）能顯著提高荷瘤小鼠遲發(fā)性超敏反應(yīng)、腹腔巨噬細(xì)胞吞噬率與吞噬指數(shù)、小鼠血清溶血素含量與脾細(xì)胞抗體形成等指標(biāo)，表明藤茶多糖能夠增強荷瘤小鼠免疫功能。

5 展望

中藥藤茶是一種民間習(xí)用的類茶植物，其資源非常豐富，具有抗氧化、抑菌、抗炎、調(diào)節(jié)免疫、降血脂、降血壓、降血糖、保肝、抗腫瘤、抗病毒等廣泛的藥理活性，市場應(yīng)用前景廣闊。前人已對藤茶進行了化學(xué)成分和抗感染活性方面的研究和報道，證明藤茶及其提取物具有顯著的抗病毒、抑菌、抗炎、調(diào)節(jié)免疫等抗感染生物活性，其主要化學(xué)成分包括黃酮類、甾體類及萜類、酚類、多糖類、揮發(fā)油類、氨基酸類及微量元素等物質(zhì)，其中以二氫楊梅素為代表的黃酮類成分含量之高在植物界中極為罕見，具有非常廣闊的食用、藥用價值。

目前國內(nèi)外學(xué)者對藤茶及其黃酮類成分的生物活性研究基本限于體外實驗階段，對其體內(nèi)的相關(guān)研究比較少，對藤茶多途徑、多靶點抗感染作用機制研究不夠深入。應(yīng)借助系統(tǒng)藥理學(xué)的研究方法，深入分析并驗證其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)與疾病靶點之間的關(guān)系，充分挖掘其抗感染作用機制，以便更好地開發(fā)利用該藥材資源，特別是可能為新冠病毒等引起的疾病預(yù)防與治療提供新的藥物。

1中國科學(xué)院植物研究所.中國高等植物圖鑒（二冊）補編.北京:科學(xué)出版社,1983.

2石依姍,肖凌,聶晶,等.中國特色民族藥材藤茶的資源調(diào)查.中藥材,2020,43(5):1078-1082.

4何桂霞,裴剛,周天達(dá),等.顯齒蛇葡萄中總黃酮和二氫楊梅素的含量測定.中國中藥雜志,2000,25(7):39-41.