• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    UPLC-MS/MS 法測(cè)定注射用伏立康唑產(chǎn)品工藝組件中2,5-二甲基-2,5-己二醇

    2021-09-07 05:36:28邵紅霞秦秋明
    浙江化工 2021年8期
    關(guān)鍵詞:伏立康注射用內(nèi)標(biāo)

    汪 輝,邵紅霞,秦秋明

    (上海微譜化工技術(shù)服務(wù)有限公司,上海 200438)

    隨著醫(yī)藥行業(yè)的迅猛發(fā)展,公眾對(duì)藥品安全的要求也越來(lái)越高,這種要求不僅僅限于藥品本身的質(zhì)量,也逐漸擴(kuò)展到藥品的輔料及其包裝材料的質(zhì)量。人們討論藥品包裝材料的質(zhì)量時(shí),往往想到的是包裝材料本身的質(zhì)量,藥品生產(chǎn)工藝中直接接觸的工藝組件卻容易被忽視,工藝組件與工藝液體的相容性問(wèn)題也成為目前藥品研發(fā)過(guò)程中需要解決的問(wèn)題。與成品包裝材料一樣,工藝組件也會(huì)有浸出物浸出的風(fēng)險(xiǎn),一些浸出物會(huì)在生產(chǎn)過(guò)程中造成雜質(zhì)和不溶性微粒增多,影響產(chǎn)品質(zhì)量;一些浸出物會(huì)隨著生產(chǎn)過(guò)程進(jìn)入成品,最終被患者攝入而產(chǎn)生安全隱患。

    業(yè)界為鼓勵(lì)企業(yè)開展科學(xué)有效的可提取物和浸出物研究,自2010 年起,生物工藝系統(tǒng)聯(lián)盟(BPSA)[1-2]和生物醫(yī)藥聯(lián)盟(BPOG)發(fā)布了一系列白皮書[3];國(guó)家藥品監(jiān)督管理局(NMPA)分別在2018 年和2019 年發(fā)布了《除菌過(guò)濾技術(shù)及應(yīng)用指南》[4]和《化學(xué)藥品注射劑仿制藥質(zhì)量和療效一致性評(píng)價(jià)技術(shù)要求(征求意見稿)》[5];美國(guó)藥典也發(fā)布USP<665>和<1665>兩個(gè)指導(dǎo)原則的征求意見稿,分別關(guān)于藥品生產(chǎn)過(guò)程中用到的聚合物部件或系統(tǒng),旨在指導(dǎo)企業(yè)對(duì)生產(chǎn)工藝中使用到的工藝組件進(jìn)行有效的風(fēng)險(xiǎn)控制。

    伏立康唑是一種三唑類抗真菌藥物,為氟康唑衍生物,具有抗菌譜廣、毒性低及抗菌效力強(qiáng)的特點(diǎn)[6-7]。國(guó)內(nèi)生產(chǎn)企業(yè)A 廠生產(chǎn)注射用伏立康唑的過(guò)程中要接觸不銹鋼、陶瓷泵、硅膠管道、墊片等工藝組件。硅膠管道、墊片通常以高分子材料為主體,配合其他添加劑經(jīng)過(guò)一系列工藝制成。在與工藝組件和工藝液體的接觸過(guò)程中,這些添加劑往往容易形成單體或者降解產(chǎn)物,這些產(chǎn)物均有可能浸出到工藝液體中,影響工藝液體的質(zhì)量,或者最終進(jìn)入藥品對(duì)患者直接產(chǎn)生安全隱患。經(jīng)對(duì)國(guó)內(nèi)生產(chǎn)企業(yè)A 廠的一批工藝組件(硅膠管道和墊片)進(jìn)行提取研究后,在4 種提取溶劑(酸性水相溶液、堿性水相溶液、藥液模擬液和乙醇水溶液)中,均發(fā)現(xiàn)2,5-二甲基-2,5-己二醇、4-甲基-3-戊烯酸、六甲基環(huán)三硅氧烷類似物等半揮發(fā)性有機(jī)物,檢出結(jié)果超過(guò)分析評(píng)價(jià)閾值(AET,analytical evaluation threshold)[8]。因2,5-二甲基-2,5-己二醇在所有超出AET 的化合物中安全邊界(MOS,margin of safety)值最小,相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)最大,故選取其作為目標(biāo)物進(jìn)行浸出物方法學(xué)研究。

    2,5-二甲基-2,5-己二醇(2,5-Dimethyl-2,5-hexanediol,DHD)極性強(qiáng),沒有紫外吸收基團(tuán),不適合液相分析。目前,關(guān)于DHD 檢測(cè)的相關(guān)研究未見報(bào)道。本文通過(guò)探索研究,采用超高液相色譜-電噴霧電離源-三重四極桿質(zhì)譜法(UPLCESI-MS/MS),優(yōu)化前處理方法及定量方法后,建立了測(cè)定注射用伏立康唑產(chǎn)品工藝組件中DHD浸出量的方法。

    1 儀器與試藥

    1.1 儀器

    ACQUITY I CLASS&QTRAP 6500 超高效液相色譜三重四級(jí)桿質(zhì)譜聯(lián)用儀,含有超高效液相色譜儀(Waters 公司)、大氣壓化學(xué)電離源和三重四級(jí)桿質(zhì)量分析器(AB SCIEX 公司);XW-80A旋渦混合器(常州阿米勒儀器科技有限公司);XPR206DR/A 型十萬(wàn)分之一電子天平(METTLER TOLEDO 公司);Direct 8 超純水儀(密理博公司)。

    1.2 試劑和試藥

    2,5-二甲基-2,5-己二醇對(duì)照品(批號(hào)T3924),購(gòu)自Adamas-beta,含量為99.00%;2-甲基-2,4-戊二醇對(duì)照品(批號(hào)L0130005),購(gòu)自CNW,含量為99.9%;甲醇和乙腈,購(gòu)自SIGMAALDRICH,均為色譜純;氨水,購(gòu)自CNW,質(zhì)譜純;甲酸銨,購(gòu)自羅恩試劑,色譜純;氯化鈉,購(gòu)自GENERAL-REAGENT,分析純;水為Direct 8 超純水儀制備的超純水。注射用伏立康唑樣品(批號(hào)為2006051、2006052、2006053),來(lái)自于國(guó)內(nèi)生產(chǎn)企業(yè)A。

    2 方法與結(jié)果

    2.1 色譜-質(zhì)譜條件

    2.1.1 色譜條件

    色譜柱:ACQUITY UPLC BEH PHENYL(2.1 mm×50 mm,1.7 μm);流動(dòng)相:甲醇(A),氨水-純化水(0.1:100)(B)。梯度洗脫程序見表1,流速:0.3 mL/min,柱溫:35 ℃,樣品室溫度:15 ℃,進(jìn)樣量:10 μL。

    表1 梯度洗脫程序Tab.1 Gradient elution procedure

    2.1.2 質(zhì)譜條件

    離子源:ESI(電噴霧電離源);離子模式:負(fù)離子模式;氣簾氣(CUR):276 kPa;碰撞氣(CAD):Medium;離子噴霧電壓(IS):-4500 V;霧化溫度(TEM):500 ℃;霧化氣(GS1):345 kPa;輔助加熱氣(GS2):345 kPa。掃描方式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式(MRM),監(jiān)測(cè)離子參數(shù)見表2。

    表2 2,5-二甲基-2,5-己二醇(DHD)和2-甲基戊烷-2,4-二醇(MPD)的質(zhì)譜參數(shù)Tab.2 Mass spectrometric parameters for 2,5-dimethyl-2,5-hexanediol (DHD) and 2-methylpentane-2,4-diol (MPD)

    2.2 溶液的制備

    2.2.1 對(duì)照品溶液

    稱取DHD 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)31.710 mg 置于10 mL量瓶中,用乙腈溶解后稀釋至刻度,搖勻;量取該溶液32.0 μL 置于10 mL 量瓶中,用乙腈稀釋至刻度,搖勻,得到濃度為10.0 μg·mL-1的DHD 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液A。

    稱取MPD 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)40.105 mg 置于10 mL量瓶中,用乙腈溶解后稀釋至刻度,搖勻;量取上述溶液25.0 μL 置于10 mL 量瓶中,用乙腈稀釋至刻度,搖勻,得到濃度為10.0 μg·mL-1的MPD標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液B。

    量取DHD 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液A 和MPD 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液B 各170 μL,置于10 mL 量瓶中,即得對(duì)照品溶液(DHD:34.0 μg·L-1,MPD:34.0 μg·L-1)。

    2.2.2 樣品溶液

    樣品母液:取注射用伏立康唑樣品1 瓶,加入純化水19.00 mL 復(fù)溶。

    樣品溶液:量取樣品母液5.000mL 置于20mL 樣品瓶中,加入內(nèi)標(biāo)MPD 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液B 170.0 μL和萃取劑乙腈2.500 mL,再加入氯化鈉搖動(dòng),直至瓶底出現(xiàn)流沙狀,渦旋0.5 min,靜置10 min,量取上層清液1.000 mL 置于10 mL 量瓶中,用純化水稀釋至刻度,搖勻。平行制備2 份溶液,依次得到樣品溶液1 和樣品溶液2。

    2.3 線性關(guān)系考察

    分別量取純化水5.000 mL 置于若干20 mL樣品瓶中,依次加入DHD 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液A 50 μL、100 μL、170 μL、255 μL、340 μL 以及內(nèi)標(biāo)MPD標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液B 170 μL,各加入萃取劑乙腈2.500 mL,再加入氯化鈉搖動(dòng),直至瓶底出現(xiàn)流沙狀,渦旋0.5 min,靜置10 min,量取上層清液1.000 mL 置于10 mL 量瓶中,用純化水稀釋至刻度,搖勻,配制成一系列梯度濃度的標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液,具體質(zhì)量濃度分別為:DHD:10.0 μg·L-1、20.0 μg·L-1、34.0 μg·L-1、51.0 μg·L-1、68.0 μg·L-1;MPD:34.0 μg·L-1。分別精密吸取系列標(biāo)準(zhǔn)曲線溶液10 μL,按2.1 項(xiàng)下試驗(yàn)條件測(cè)定,以DHD與內(nèi)標(biāo)物MPD 的峰面積比值Y 為縱坐標(biāo),以DHD 與內(nèi)標(biāo)物MPD 標(biāo)準(zhǔn)曲線的質(zhì)量濃度比值X為橫坐標(biāo),得回歸方程:Y=0.0626X+0.0749,r=0.9990,表明DHD 在10.0~68.0 μg·L-1的范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(見圖1)。

    圖1 DHD/MPD 線性關(guān)系圖譜Fig.1 Linear graph for DHD/MPD

    2.4 定量限和檢測(cè)限測(cè)定

    將對(duì)照品溶液按照2.3 項(xiàng)下的方法逐級(jí)稀釋制備,按2.1 項(xiàng)下試驗(yàn)條件測(cè)定,以信噪比(S/N)確定DHD 的檢測(cè)下限為3.0 μg·L-1(S/N≈3),定量下限為10.0 μg·L-1(S/N≈10)。

    2.5 重復(fù)性試驗(yàn)

    量取樣品母液5.000 mL 置于20 mL 樣品瓶中,分別加入DHD 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液A 170.0 μL 以及MPD 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液B 170.0 μL,加入萃取劑乙腈2.500 mL,再加入氯化鈉搖動(dòng),直至瓶底出現(xiàn)流沙狀,渦旋0.5 min,靜置10 min,量取上層清液1.000 mL 置于10 mL 量瓶中,用純化水稀釋至刻度,搖勻。平行制備6 份,按內(nèi)標(biāo)法定量,計(jì)算6份重復(fù)性溶液DHD 的平均含量,RSD 為1%,表明本方法的重復(fù)性良好。重復(fù)性溶液定量離子譜圖見圖2。

    圖2 DHD/MPD 重復(fù)性圖譜Fig.2 Repeatability graph for DHD/MPD

    2.6 穩(wěn)定性試驗(yàn)

    取2.5 中的1 份重復(fù)性溶液,分別在室溫下放置0 h、6 h、12 h、18 h、24 h 時(shí),按2.1 項(xiàng)下試驗(yàn)條件測(cè)定,按內(nèi)標(biāo)法定量。結(jié)果:各穩(wěn)定性考察點(diǎn)結(jié)果與0 點(diǎn)的峰面積RSD 小于8%,供試品溶液在24 h 內(nèi)穩(wěn)定。

    2.7 回收率試驗(yàn)

    按照2.4 項(xiàng)下的方法,分別加入DHD 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)溶液A 50.0 μL、170 μL 及255 μL,各加入內(nèi)標(biāo)MPD 170.0 μL,平行制備3 份低濃度水平、3 份中濃度水平、3 份高濃度水平供試品溶液。按2.1 項(xiàng)下試驗(yàn)條件測(cè)定,按內(nèi)標(biāo)法定量?;厥章式Y(jié)果見表3。

    表3 加標(biāo)回收率試驗(yàn)結(jié)果(n=9)Tab.3 Results of recovery tests (n=9)

    2.8 樣品檢測(cè)

    取國(guó)內(nèi)生產(chǎn)企業(yè)A 廠的三批注射用伏立康唑樣品(批號(hào)為2006051、2006052、2006053),每批取1 瓶,按2.2.2 項(xiàng)方法制備樣品溶液,取10 μL 注入超高效液相-串聯(lián)質(zhì)譜儀,記錄質(zhì)譜峰峰面積,內(nèi)標(biāo)法計(jì)算DHD 濃度,結(jié)合工藝液體信息,計(jì)算出每平方厘米工藝組件中DHD 的浸出量,計(jì)算公式見式(1),測(cè)定結(jié)果見表4。

    表4 三批注射用伏立康唑產(chǎn)品工藝組件中DHD浸出量Tab.4 Extraction amount of DHD in voriconazole for injection in process components

    3 討論

    3.1 DHD 浸出量的安全性評(píng)估

    通過(guò)查閱文獻(xiàn)及毒性數(shù)據(jù)庫(kù)的相關(guān)資料,DHD 被歸類為Cramer III 類物質(zhì)[9]。根據(jù)對(duì)Cramer III 類物質(zhì)的重新評(píng)估得到的毒理學(xué)關(guān)注閾值(threshold of toxicological concern,TTC)表明,可以將非有機(jī)磷酸酯、非氨基甲酸酯或非有機(jī)鹵素化合物的閾值調(diào)整至4 μg/(kg·d)[10],按成年人50 kg/人計(jì)算[11],每日允許最大暴露量(permitted daily exposure,PDE)為200 μg/d。由于TTC 閾值是通過(guò)口服給藥數(shù)據(jù)而不是腸道給藥數(shù)據(jù)獲得的,因此,根據(jù)歐洲化學(xué)品局ECHA 關(guān)于化學(xué)安全性評(píng)估的指南[12]以及FDA 文件,口服至腸道外途徑的轉(zhuǎn)換因子設(shè)為10[13],因此該DHD 的PDE 確定為20 μg/d。由藥品說(shuō)明書可知,注射用伏立康唑每日最大使用量(acceptable daily intake,ADI)為120 mL(6 瓶,19 mL/瓶),根據(jù)樣品中檢出濃度,結(jié)合工藝液體信息計(jì)算出工藝組件每平方厘米可能遷移入藥品的量,將其與限值進(jìn)行比較,以評(píng)估遷移入藥品的DHD 是否會(huì)為患者帶來(lái)安全性風(fēng)險(xiǎn)。

    式(2)中:PDE 為20 μg/d;ADI 為6 瓶/d;實(shí)際灌裝成品數(shù)量為2000 瓶;總接觸面積為4008 cm2。由此計(jì)算得到限值為1.6 μg/cm2。

    表4 中DHD 的浸出量均低于其限值,表明注射用伏立康唑由工藝組件(硅膠管道、墊片)中DHD 遷移帶來(lái)的安全風(fēng)險(xiǎn)較低。但不同工藝組件(硅膠管道、墊片)廠家的生產(chǎn)工藝不一樣,仍需注意DHD 在工藝組件中的浸出量。

    3.2 儀器的選擇

    因DHD 極性強(qiáng)、沒有紫外吸收基團(tuán),不適合液相分析,故最初嘗試用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行分析方法開發(fā)。但試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)氣質(zhì)聯(lián)用法在稀釋劑乙腈、甲醇、乙酸乙酯、正己烷等多種溶劑中均檢出DHD,干擾較大,無(wú)法進(jìn)行方法學(xué)開發(fā)。嘗試以超高效液相-串聯(lián)質(zhì)譜法進(jìn)行方法開發(fā)后,發(fā)現(xiàn)空白稀釋劑(水)及過(guò)程空白無(wú)干擾,故最終確定以超高效液相-串聯(lián)質(zhì)譜法作為試驗(yàn)方法。

    3.3 色譜柱的選擇

    用BEH C18 色譜柱分離時(shí),發(fā)現(xiàn)供試品加標(biāo)溶液中目標(biāo)物DHD 附近有干擾峰,不能完全分離??紤]到伏立康唑帶有氟苯基基團(tuán),該雜質(zhì)干擾峰可能由伏立康唑的工藝雜質(zhì)引入,也可能具有類似苯環(huán)結(jié)構(gòu),故將色譜柱更換為Phenyl 柱以增加該雜質(zhì)在色譜柱中的保留。結(jié)果表明,在BEH Phenyl 柱上,該雜質(zhì)干擾峰保留確實(shí)得到了加強(qiáng),出峰時(shí)間由DHD 延至DHD 出峰后(見圖2中RT=3.42 min 的雜質(zhì)峰),與DHD 間分離度大大提高。故選用BEH Phenyl 柱為分析柱。

    3.4 流動(dòng)相的選擇

    實(shí)驗(yàn)過(guò)程中,分別考察了甲醇-0.05%氨水體系、甲醇-0.1%氨水體系、甲醇-0.1%甲酸銨水體系,發(fā)現(xiàn)甲醇-0.1%氨水體系能得到良好的峰形及更高的峰響應(yīng)值。故選擇甲醇-0.1%氨水體系作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫。

    3.5 外標(biāo)、內(nèi)標(biāo)定量方法的選擇

    嘗試多種前處理方式:采用直接用水稀釋后進(jìn)樣,外標(biāo)法測(cè)定,回收率小于50%;改用乙腈萃取后進(jìn)樣,外標(biāo)法測(cè)定回收率有所改善,但仍偏低,約在60%~70%之間。查詢?cè)撋a(chǎn)企業(yè)A 廠注射用伏立康唑的工藝液體配方,其中含有較大濃度的倍他環(huán)糊精鈉為輔料以增加藥物的溶解性[14-15],懷疑倍他環(huán)糊精鈉基質(zhì)干擾回收率。為抵消樣品基質(zhì)的影響,選擇另一二醇類化合物2-甲基戊烷-2,4-二醇(MPD)為內(nèi)標(biāo),DHD 回收率顯著改善。故選用內(nèi)標(biāo)法為定量方法。

    3.6 質(zhì)譜參數(shù)的考察

    對(duì)質(zhì)量濃度為1 mg·L-1的DHD 和MPD 在電噴霧離子源(ESI)+/-和大氣壓化學(xué)電離源(APCI)+/-的4 種方式下進(jìn)行一級(jí)質(zhì)譜母離子掃描。結(jié)果表明,在ESI 負(fù)離子模式下DHD 和MPD中目標(biāo)物有更好的響應(yīng),基峰均為[M-H]-。選定[M-H]-為母離子后,進(jìn)行二級(jí)質(zhì)譜掃描,尋找子離子碎片,確定豐度最高的子離子為定量離子(碎片圖見圖3 和圖4),最終確定響應(yīng)豐度最高的70.9 為DHD 定量離子,57.0 為MPD 的定量離子。確定定量離子之后,繼續(xù)在多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式(MRM)下優(yōu)化最佳去簇電壓(DP)和最佳碰撞能量(CE),以達(dá)到最佳的檢測(cè)靈敏度。

    圖3 DHD 二級(jí)離子圖Fig.3 Secondary Ion Mass Spectrogram of DHD

    圖4 MPD 二級(jí)離子圖Fig.4 Secondary Ion Mass Spectrogram of MPD

    4 結(jié)論

    本文建立了用超高效液相-串聯(lián)質(zhì)譜法(UPLC-MS/MS)內(nèi)標(biāo)法測(cè)定注射用伏立康唑產(chǎn)品工藝組件中2,5-二甲基-2,5-己二醇的方法,對(duì)檢測(cè)器、色譜柱、流動(dòng)相、定量方法、離子對(duì)等進(jìn)行了研究,最終確立的方法具有專屬性強(qiáng)、靈敏度高、準(zhǔn)確度高、抗干擾能力強(qiáng)的特點(diǎn),可用于注射用伏立康唑中2,5-二甲基-2,5-己二醇的風(fēng)險(xiǎn)監(jiān)測(cè),也可為其他類產(chǎn)品中DHD 的檢測(cè)提供參考。

    猜你喜歡
    伏立康注射用內(nèi)標(biāo)
    成人患者體內(nèi)伏立康唑代謝的影響因素分析 Δ
    樂坦?注射用紅花黃色素
    氣相色譜內(nèi)標(biāo)法測(cè)洗滌劑中的甲醇
    有機(jī)熱載體熱穩(wěn)定性測(cè)定內(nèi)標(biāo)法的研究
    注射用五水頭孢唑林鈉與注射用美洛西林鈉在化膿性扁桃體炎療效對(duì)比
    基于伏立康唑血藥濃度監(jiān)測(cè)的藥物相互作用研究
    GC內(nèi)標(biāo)法同時(shí)測(cè)定青刺果油中4種脂肪酸
    中成藥(2018年6期)2018-07-11 03:01:32
    核磁共振磷譜內(nèi)標(biāo)法測(cè)定磷脂酰膽堿的含量
    伏立康唑與氟康唑治療肝移植患者術(shù)后真菌感染的安全性比較
    注射用曲札芪苷與常用輸液配伍穩(wěn)定性研究
    成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 水蜜桃什么品种好| 色婷婷av一区二区三区视频| 久久久久久久精品吃奶| 99国产精品免费福利视频| 久热这里只有精品99| 午夜福利乱码中文字幕| 欧美 日韩 精品 国产| 九色亚洲精品在线播放| 精品久久久精品久久久| 12—13女人毛片做爰片一| 亚洲色图综合在线观看| 国精品久久久久久国模美| 黑人欧美特级aaaaaa片| 性少妇av在线| 欧美日韩视频精品一区| 99国产精品一区二区蜜桃av | 亚洲人成77777在线视频| 久久中文看片网| 无遮挡黄片免费观看| 18禁观看日本| 动漫黄色视频在线观看| 超碰成人久久| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 久久青草综合色| 免费在线观看日本一区| 精品第一国产精品| 国产人伦9x9x在线观看| 国产亚洲欧美精品永久| av福利片在线| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 电影成人av| cao死你这个sao货| 亚洲av欧美aⅴ国产| 色94色欧美一区二区| 岛国毛片在线播放| 国产欧美日韩一区二区三| 久久久国产欧美日韩av| 亚洲国产欧美日韩在线播放| 亚洲国产精品合色在线| 啦啦啦视频在线资源免费观看| 久久午夜综合久久蜜桃| 91大片在线观看| 久久久久久亚洲精品国产蜜桃av| 精品熟女少妇八av免费久了| 在线观看免费日韩欧美大片| 色精品久久人妻99蜜桃| 久久久国产精品麻豆| 国产精品一区二区在线观看99| 人妻一区二区av| 亚洲精品久久成人aⅴ小说| 精品亚洲成国产av| 悠悠久久av| 水蜜桃什么品种好| 免费日韩欧美在线观看| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 狂野欧美激情性xxxx| 亚洲欧美激情综合另类| 18禁裸乳无遮挡免费网站照片 | www日本在线高清视频| 一级,二级,三级黄色视频| 国产午夜精品久久久久久| 国产又色又爽无遮挡免费看| 999久久久国产精品视频| 热re99久久精品国产66热6| 一边摸一边抽搐一进一出视频| 精品久久久精品久久久| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 欧美日韩国产mv在线观看视频| 国产99久久九九免费精品| 欧美丝袜亚洲另类 | 日日夜夜操网爽| 久久国产精品人妻蜜桃| 成人18禁在线播放| 欧美国产精品一级二级三级| 首页视频小说图片口味搜索| 在线免费观看的www视频| 波多野结衣av一区二区av| 亚洲欧美激情在线| 在线观看www视频免费| 精品卡一卡二卡四卡免费| 久久国产亚洲av麻豆专区| 久久草成人影院| 亚洲熟女精品中文字幕| 国产伦人伦偷精品视频| 亚洲熟妇熟女久久| 精品人妻1区二区| 日韩欧美国产一区二区入口| 国产精品综合久久久久久久免费 | 啦啦啦 在线观看视频| 国产一区二区三区综合在线观看| 亚洲,欧美精品.| 午夜福利一区二区在线看| 亚洲第一av免费看| 免费少妇av软件| 天天影视国产精品| 一a级毛片在线观看| av欧美777| 午夜福利欧美成人| 国产精品久久久人人做人人爽| 精品视频人人做人人爽| 涩涩av久久男人的天堂| 在线观看一区二区三区激情| 极品少妇高潮喷水抽搐| 午夜福利欧美成人| 在线观看免费视频网站a站| 国产主播在线观看一区二区| 久久精品aⅴ一区二区三区四区| 免费在线观看完整版高清| 久久久久久久午夜电影 | 欧美老熟妇乱子伦牲交| 在线天堂中文资源库| 亚洲av成人av| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 757午夜福利合集在线观看| 又紧又爽又黄一区二区| 嫩草影视91久久| 亚洲少妇的诱惑av| 精品一品国产午夜福利视频| 99在线人妻在线中文字幕 | 9色porny在线观看| 国产精品久久电影中文字幕 | 久久久久久免费高清国产稀缺| 18禁观看日本| 色在线成人网| 在线免费观看的www视频| 岛国毛片在线播放| 亚洲中文av在线| 午夜亚洲福利在线播放| 制服诱惑二区| av片东京热男人的天堂| 午夜成年电影在线免费观看| 人人妻人人添人人爽欧美一区卜| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 两性午夜刺激爽爽歪歪视频在线观看 | 91在线观看av| 免费日韩欧美在线观看| 色婷婷久久久亚洲欧美| 中文亚洲av片在线观看爽 | 久久久国产成人免费| 在线观看日韩欧美| 黄色片一级片一级黄色片| 少妇的丰满在线观看| 日韩欧美在线二视频 | 亚洲美女黄片视频| 国产不卡一卡二| 国产成人免费观看mmmm| 亚洲五月婷婷丁香| 母亲3免费完整高清在线观看| 久久亚洲真实| 在线观看免费日韩欧美大片| 午夜老司机福利片| 一级片'在线观看视频| 国产高清videossex| 亚洲在线自拍视频| 99国产精品99久久久久| 亚洲专区字幕在线| 久热爱精品视频在线9| 亚洲专区中文字幕在线| 成年动漫av网址| 日韩欧美三级三区| 18禁国产床啪视频网站| 亚洲精品国产精品久久久不卡| videosex国产| 免费人成视频x8x8入口观看| 69av精品久久久久久| 99riav亚洲国产免费| 视频区图区小说| 欧美日韩亚洲国产一区二区在线观看 | 亚洲国产毛片av蜜桃av| 天堂俺去俺来也www色官网| tube8黄色片| 丁香六月欧美| 成人精品一区二区免费| 午夜91福利影院| 亚洲 国产 在线| 国产av一区二区精品久久| 欧美日韩中文字幕国产精品一区二区三区 | 18禁观看日本| 丁香欧美五月| 国产91精品成人一区二区三区| 女人久久www免费人成看片| 日本a在线网址| 国产av又大| aaaaa片日本免费| 成人18禁高潮啪啪吃奶动态图| 精品卡一卡二卡四卡免费| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 久9热在线精品视频| 精品国产一区二区久久| 中出人妻视频一区二区| 久久青草综合色| 色老头精品视频在线观看| 999久久久国产精品视频| 午夜免费成人在线视频| 99热只有精品国产| 黄色视频,在线免费观看| 亚洲精品自拍成人| 操美女的视频在线观看| 久久国产精品人妻蜜桃| www.熟女人妻精品国产| 777米奇影视久久| 久久精品国产99精品国产亚洲性色 | 免费在线观看视频国产中文字幕亚洲| 在线播放国产精品三级| 很黄的视频免费| 99riav亚洲国产免费| 男女之事视频高清在线观看| 亚洲精品粉嫩美女一区| 国产高清激情床上av| 亚洲伊人色综图| 久久久久久久国产电影| 一级a爱视频在线免费观看| 精品久久久精品久久久| 精品第一国产精品| 久久久久国产一级毛片高清牌| 男人的好看免费观看在线视频 | 老司机亚洲免费影院| 在线观看免费视频日本深夜| 免费在线观看影片大全网站| 国产精品香港三级国产av潘金莲| 精品乱码久久久久久99久播| 精品国产一区二区三区久久久樱花| 黄片大片在线免费观看| 欧美乱妇无乱码| 成熟少妇高潮喷水视频| 欧美精品av麻豆av| 91精品国产国语对白视频| 精品福利观看| 欧美亚洲日本最大视频资源| 婷婷精品国产亚洲av在线 | 国产亚洲欧美98| 脱女人内裤的视频| 下体分泌物呈黄色| 大型黄色视频在线免费观看| 少妇被粗大的猛进出69影院| 19禁男女啪啪无遮挡网站| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 欧美成人免费av一区二区三区 | a级毛片黄视频| 国产一区二区三区视频了| 99re在线观看精品视频| 岛国毛片在线播放| 免费人成视频x8x8入口观看| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 国产又爽黄色视频| 麻豆乱淫一区二区| 国产精品98久久久久久宅男小说| 色播在线永久视频| 精品久久蜜臀av无| x7x7x7水蜜桃| 欧美日韩视频精品一区| 久久精品91无色码中文字幕| 精品福利永久在线观看| 亚洲九九香蕉| 亚洲av电影在线进入| 免费高清在线观看日韩| 深夜精品福利| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| tube8黄色片| 国产成人精品在线电影| 别揉我奶头~嗯~啊~动态视频| 午夜久久久在线观看| 美国免费a级毛片| 大型黄色视频在线免费观看| 国产91精品成人一区二区三区| 久久中文字幕人妻熟女| 国产熟女午夜一区二区三区| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 美国免费a级毛片| 大型黄色视频在线免费观看| 十八禁网站免费在线| 嫁个100分男人电影在线观看| 在线av久久热| 看片在线看免费视频| 国产亚洲精品久久久久久毛片 | 色精品久久人妻99蜜桃| 色婷婷av一区二区三区视频| 久久人人爽av亚洲精品天堂| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 精品国产亚洲在线| 亚洲国产毛片av蜜桃av| 99精国产麻豆久久婷婷| 亚洲一卡2卡3卡4卡5卡精品中文| 欧美中文综合在线视频| 老司机亚洲免费影院| 久久精品国产a三级三级三级| 人妻 亚洲 视频| 性色av乱码一区二区三区2| 国产极品粉嫩免费观看在线| 正在播放国产对白刺激| 岛国在线观看网站| 女人高潮潮喷娇喘18禁视频| 亚洲成av片中文字幕在线观看| 亚洲五月天丁香| 夜夜夜夜夜久久久久| 看黄色毛片网站| 999久久久国产精品视频| 国产三级黄色录像| 99精品久久久久人妻精品| 夫妻午夜视频| 美国免费a级毛片| 99久久人妻综合| 亚洲中文av在线| 黄片大片在线免费观看| av网站在线播放免费| 亚洲自偷自拍图片 自拍| 亚洲第一av免费看| 久久国产精品大桥未久av| 国产欧美日韩一区二区精品| www.熟女人妻精品国产| 欧美日韩av久久| 成人特级黄色片久久久久久久| 午夜福利乱码中文字幕| 亚洲欧美一区二区三区黑人| 精品一区二区三区四区五区乱码| 热re99久久国产66热| 久久久久久久国产电影| 天堂动漫精品| 欧美乱妇无乱码| 精品第一国产精品| 欧美日韩黄片免| 国产一区二区三区综合在线观看| 99riav亚洲国产免费| 中文字幕最新亚洲高清| 欧美人与性动交α欧美软件| 无遮挡黄片免费观看| 免费观看人在逋| aaaaa片日本免费| 99国产精品99久久久久| 欧美+亚洲+日韩+国产| 亚洲av美国av| 免费观看a级毛片全部| 亚洲情色 制服丝袜| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 成年女人毛片免费观看观看9 | 新久久久久国产一级毛片| 美女高潮到喷水免费观看| 在线观看日韩欧美| 国产精品一区二区在线不卡| 亚洲色图av天堂| 一a级毛片在线观看| 啪啪无遮挡十八禁网站| 丰满人妻熟妇乱又伦精品不卡| 黑人巨大精品欧美一区二区mp4| 黄色女人牲交| 丝袜人妻中文字幕| 又大又爽又粗| 夜夜夜夜夜久久久久| 50天的宝宝边吃奶边哭怎么回事| 亚洲欧美激情在线| 黄片小视频在线播放| 青草久久国产| 国产成人av激情在线播放| 身体一侧抽搐| 亚洲av成人av| 久99久视频精品免费| 精品久久久久久久久久免费视频 | 可以免费在线观看a视频的电影网站| 9191精品国产免费久久| 午夜免费成人在线视频| 人人妻人人澡人人爽人人夜夜| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国产男靠女视频免费网站| 俄罗斯特黄特色一大片| 成年女人毛片免费观看观看9 | 国产在线一区二区三区精| 天天添夜夜摸| 99久久精品国产亚洲精品| 免费日韩欧美在线观看| 久久久国产欧美日韩av| 欧美日韩亚洲综合一区二区三区_| 夜夜夜夜夜久久久久| 国产成+人综合+亚洲专区| 天天影视国产精品| 久久久久久久精品吃奶| xxx96com| 免费在线观看影片大全网站| 国产免费现黄频在线看| 久99久视频精品免费| 精品久久久精品久久久| 美女午夜性视频免费| 一边摸一边抽搐一进一小说 | 亚洲第一青青草原| 在线观看免费午夜福利视频| 一本综合久久免费| 国产主播在线观看一区二区| 一区在线观看完整版| 精品卡一卡二卡四卡免费| 久久精品熟女亚洲av麻豆精品| 两性夫妻黄色片| 亚洲色图综合在线观看| 国产野战对白在线观看| 久久天躁狠狠躁夜夜2o2o| 美女福利国产在线| 久久狼人影院| 精品熟女少妇八av免费久了| 不卡av一区二区三区| 深夜精品福利| 99热网站在线观看| a级毛片黄视频| 日韩欧美一区二区三区在线观看 | 丰满迷人的少妇在线观看| 纯流量卡能插随身wifi吗| 久久中文字幕人妻熟女| 欧洲精品卡2卡3卡4卡5卡区| 亚洲精品在线美女| 久久精品人人爽人人爽视色| 成年女人毛片免费观看观看9 | 国产一卡二卡三卡精品| 免费观看a级毛片全部| 无限看片的www在线观看| 少妇被粗大的猛进出69影院| 在线观看免费午夜福利视频| 欧美不卡视频在线免费观看 | 真人做人爱边吃奶动态| av线在线观看网站| 久久精品国产亚洲av高清一级| 怎么达到女性高潮| 欧美精品高潮呻吟av久久| 国产成人精品无人区| 欧美大码av| 日韩欧美国产一区二区入口| a级毛片在线看网站| 人妻丰满熟妇av一区二区三区 | 国产精品九九99| 亚洲欧美激情综合另类| 精品少妇一区二区三区视频日本电影| 久久久久久久午夜电影 | 法律面前人人平等表现在哪些方面| 激情视频va一区二区三区| 亚洲九九香蕉| 淫妇啪啪啪对白视频| 九色亚洲精品在线播放| 成人免费观看视频高清| 日韩欧美在线二视频 | 嫁个100分男人电影在线观看| 怎么达到女性高潮| 亚洲片人在线观看| 精品一区二区三区四区五区乱码| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 国产三级黄色录像| 高清在线国产一区| 亚洲 国产 在线| 欧美精品一区二区免费开放| 黄色怎么调成土黄色| 午夜福利欧美成人| 在线观看免费午夜福利视频| 侵犯人妻中文字幕一二三四区| 日本黄色日本黄色录像| 午夜久久久在线观看| 久久久久久免费高清国产稀缺| 国产精品欧美亚洲77777| 久久久久久久久久久久大奶| 亚洲成人手机| 一进一出好大好爽视频| 极品人妻少妇av视频| 成人特级黄色片久久久久久久| 51午夜福利影视在线观看| 国精品久久久久久国模美| 另类亚洲欧美激情| 欧美丝袜亚洲另类 | 搡老熟女国产l中国老女人| 黄片小视频在线播放| 操出白浆在线播放| 国产精品久久久久久精品古装| a级毛片在线看网站| 午夜福利影视在线免费观看| 啦啦啦 在线观看视频| 黄色丝袜av网址大全| 精品国产一区二区三区四区第35| 精品无人区乱码1区二区| ponron亚洲| 久久性视频一级片| 精品福利观看| 欧美日韩乱码在线| 国产成人精品久久二区二区免费| 精品乱码久久久久久99久播| 国产精品免费大片| 欧美av亚洲av综合av国产av| av福利片在线| 中文亚洲av片在线观看爽 | 久久精品亚洲精品国产色婷小说| www.999成人在线观看| 成人18禁在线播放| 精品视频人人做人人爽| 女人被狂操c到高潮| 天天躁夜夜躁狠狠躁躁| 超色免费av| 香蕉国产在线看| 久久久久精品国产欧美久久久| 欧美av亚洲av综合av国产av| 国产97色在线日韩免费| 人人妻,人人澡人人爽秒播| 国产精品美女特级片免费视频播放器 | 我的亚洲天堂| 精品视频人人做人人爽| 久久久久视频综合| av中文乱码字幕在线| 久99久视频精品免费| 久久久精品区二区三区| a级毛片在线看网站| 成年版毛片免费区| 亚洲国产欧美一区二区综合| 又黄又粗又硬又大视频| 国产成人精品在线电影| 黄色毛片三级朝国网站| 美女高潮到喷水免费观看| 亚洲色图综合在线观看| 天堂√8在线中文| xxxhd国产人妻xxx| 亚洲精品美女久久av网站| 正在播放国产对白刺激| 在线永久观看黄色视频| √禁漫天堂资源中文www| 亚洲国产看品久久| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91| 国产日韩欧美亚洲二区| 免费在线观看亚洲国产| av线在线观看网站| 99热网站在线观看| av线在线观看网站| 热99re8久久精品国产| 亚洲精品国产区一区二| 国产欧美日韩一区二区精品| 激情视频va一区二区三区| 桃红色精品国产亚洲av| 在线观看www视频免费| 久久九九热精品免费| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产精品久久视频播放| 久久久久国产精品人妻aⅴ院 | 美女视频免费永久观看网站| 午夜福利免费观看在线| 欧美精品av麻豆av| 国产免费男女视频| 免费观看人在逋| 香蕉久久夜色| 国内毛片毛片毛片毛片毛片| 午夜日韩欧美国产| 90打野战视频偷拍视频| netflix在线观看网站| 极品教师在线免费播放| 美国免费a级毛片| 一夜夜www| 黄色毛片三级朝国网站| 热99久久久久精品小说推荐| 久9热在线精品视频| 变态另类成人亚洲欧美熟女 | 国产精品电影一区二区三区 | 精品少妇久久久久久888优播| 国产野战对白在线观看| 女人被狂操c到高潮| 国产又爽黄色视频| 亚洲精品乱久久久久久| 国产高清视频在线播放一区| 如日韩欧美国产精品一区二区三区| 99国产精品一区二区三区| 国产亚洲精品久久久久5区| 怎么达到女性高潮| 涩涩av久久男人的天堂| 成年人黄色毛片网站| 搡老熟女国产l中国老女人| 成在线人永久免费视频| 国产精品一区二区在线不卡| 久久久久久免费高清国产稀缺| 桃红色精品国产亚洲av| 国产精品久久久久成人av| 人妻 亚洲 视频| 国产成人一区二区三区免费视频网站| 亚洲欧美精品综合一区二区三区| 夜夜爽天天搞| 久久午夜综合久久蜜桃| 天天躁狠狠躁夜夜躁狠狠躁| 日韩一卡2卡3卡4卡2021年| 热99国产精品久久久久久7| 午夜亚洲福利在线播放| xxxhd国产人妻xxx| 成年人免费黄色播放视频| 亚洲精品乱久久久久久| 国产xxxxx性猛交| 最新的欧美精品一区二区| 日韩中文字幕欧美一区二区| 国产色视频综合| 手机成人av网站| 午夜福利一区二区在线看| 男人的好看免费观看在线视频 | 日本黄色视频三级网站网址 | 成熟少妇高潮喷水视频| av免费在线观看网站| 日韩欧美免费精品| 韩国av一区二区三区四区| 宅男免费午夜| 美女 人体艺术 gogo| 日本五十路高清| 午夜精品久久久久久毛片777| 婷婷成人精品国产| 亚洲aⅴ乱码一区二区在线播放 | 精品国产亚洲在线| 美女高潮到喷水免费观看| 中文字幕av电影在线播放| 色在线成人网| av福利片在线| 亚洲精品在线观看二区| 欧美日韩一级在线毛片| 欧美日韩亚洲高清精品| av网站免费在线观看视频| 色综合婷婷激情| 国产精品自产拍在线观看55亚洲 | 久久香蕉精品热| 性色av乱码一区二区三区2| 亚洲午夜精品一区,二区,三区| 视频区欧美日本亚洲|