三種根尖倒充填材料的封閉性能研究

尹香男 馮 瑤

根尖倒充填術(shù)是無(wú)法用常規(guī)根管治療術(shù)時(shí)應(yīng)用的一種治療術(shù)。根尖倒充填材料的理化及生物性能是評(píng)價(jià)根尖倒充填術(shù)成功的主要因素。理化性能中封閉性則是評(píng)價(jià)根尖倒充填材料的關(guān)鍵因素之一。本實(shí)驗(yàn)用葡萄糖定量法[1]檢測(cè)iRoot BP Plus、MTA、玻璃離子水門(mén)汀三種根尖倒充填材料的封閉性能。

1.材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象 因牙周病及正畸治療拔除的新鮮無(wú)齲壞、牙根無(wú)彎曲且無(wú)裂痕、根管暢通無(wú)鈣化、根尖發(fā)育完全的單根管前牙及前磨牙共32 顆浸泡于10%的福爾馬林溶液中備用。

1.2 實(shí)驗(yàn)材料與設(shè)備 MTA(登士柏公司，美國(guó))、iRoot BP Plus(Innovative Bio Ceramix，加拿大)、FujiⅡ玻璃離子水門(mén)汀(GC 公司，日本)、AH Plus 根管充填材料(登士柏公司，美國(guó))、碧潤(rùn)糊劑型牙科17%EDTA 根管潤(rùn)滑/ 清洗劑(日進(jìn)齒科材料有限公司，日本)、牙膠尖(登士柏公司，美國(guó))；熱牙膠充填系統(tǒng)(B&L 公司，韓國(guó))、全自動(dòng)多功能酶標(biāo)儀(伯騰儀器有限公司，美國(guó))等。

1.3 實(shí)驗(yàn)牙準(zhǔn)備 浸泡貯存于10%福爾馬林溶液的32 顆離體牙經(jīng)流水沖洗后沿釉牙骨質(zhì)界處截冠，根管測(cè)量尺測(cè)量根管長(zhǎng)度，10 號(hào)K 銼疏通根管，M3-Pro 機(jī)用鎳鈦銼蘸少許17%EDTA 預(yù)備根管至06/ 25，每更換一次根管銼用5.25%次氯酸鈉溶液與生理鹽水進(jìn)行交替沖洗根管，最后用無(wú)菌紙尖擦拭根管使其完全干燥。1∶1 比例調(diào)和的AH Plus 根管充填糊劑與牙膠尖充填根管后用熱牙膠充填系統(tǒng)與垂直加壓器進(jìn)行嚴(yán)密的根管充填。最后用氧化鋅充填根管口并拍X 線片確認(rèn)充填情況(如圖1)。

圖1 根管充填后X 線片

1.4 實(shí)驗(yàn)牙分組 進(jìn)行根管充填的32 顆離體牙隨機(jī)分為三個(gè)實(shí)驗(yàn)組與一個(gè)陰性對(duì)照組，每組8顆離體牙，三個(gè)實(shí)驗(yàn)組分別為、iRoot BP Plus 組、MTA 組、玻璃離子水門(mén)汀組。

1.5 實(shí)驗(yàn)牙根管倒充填術(shù) 以上三個(gè)實(shí)驗(yàn)組離體牙沿根尖3mm 處截根[2]，用BR-45 號(hào)金剛砂高速車(chē)針沿根管方向進(jìn)行倒預(yù)備至3mm 處，直徑為1mm。在顯微鏡下，分別用iRoot BP Plus、MTA、玻璃離子水門(mén)汀進(jìn)行倒充填。陰性對(duì)照組亦在根尖3mm 處進(jìn)行截根，但不進(jìn)行倒預(yù)備及倒充填。完成倒充填術(shù)后的實(shí)驗(yàn)牙及對(duì)照牙置100%濕度、37℃的恒溫水浴箱內(nèi)7 天，待其完全固化后將根管內(nèi)牙膠尖與AH Plus 根管充填糊劑用GG 鉆去凈，保留根尖倒充填材料并拍攝X 線片確定其充填情況(如圖2)，陰性對(duì)照組保留根尖3mm的牙膠尖與AH Plus 根管充填材料。三個(gè)實(shí)驗(yàn)組除根尖切除斷面外均涂抹2 層指甲油，陰性對(duì)照組包括根尖切除斷面處亦涂抹2 層指甲油。

圖2 倒充填及去除牙膠后X 線片

1.6 檢測(cè)微滲漏 所有樣本離體牙連接于改良的葡萄糖微滲漏模型(如圖3)，下端無(wú)菌玻璃瓶?jī)?nèi)裝入1ml 無(wú)菌蒸餾水，上端塑料滅菌吸管內(nèi)裝入1mol/ L(含0.2%疊氨鈉)葡萄糖溶液，高度為15cm。分別1、4、7、14、20、30 天用移液器取出玻璃瓶?jī)?nèi)液體20ul 后在全自動(dòng)多功能酶標(biāo)儀上檢測(cè)滲漏葡萄糖的光密度值并按廠家給出的換算公式換算成相應(yīng)濃度值。每從玻璃瓶?jī)?nèi)取出20ul 液體時(shí)均用無(wú)菌蒸餾水補(bǔ)足至1ml，且每周替換玻璃瓶瓶體。吸管內(nèi)葡萄糖液體高度若發(fā)現(xiàn)未達(dá)15cm時(shí)，應(yīng)及時(shí)補(bǔ)足至15cm。

圖3 葡萄糖微滲漏模型

1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 用SPSS18.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量數(shù)據(jù)以()形式記錄，對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行重復(fù)測(cè)量方差分析，實(shí)驗(yàn)組各時(shí)間點(diǎn)葡萄糖濃度采用LSD 法檢驗(yàn)進(jìn)行組內(nèi)多重比較，不同實(shí)驗(yàn)組各時(shí)間點(diǎn)葡萄糖濃度采用單因素方差分析法分析進(jìn)行組間總體比較，后采用LSD 法進(jìn)行組間多重比較，按0.05 檢驗(yàn)水準(zhǔn)，P＜0.05 則差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2.結(jié)果

陰性對(duì)照組在以上六個(gè)時(shí)間點(diǎn)內(nèi)均未檢測(cè)出葡萄糖，則表明本實(shí)驗(yàn)建模成功，三個(gè)實(shí)驗(yàn)組組間組內(nèi)比較的統(tǒng)計(jì)結(jié)果，各時(shí)間點(diǎn)三組總體比較均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。進(jìn)一步兩兩多重比較的結(jié)果，組間iRoot BP Plus 組與MTA 組之間并無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但分別與玻璃離子水門(mén)汀之間具有顯著的統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。即iRoot BP Plus 組與MTA 組滲漏的葡萄糖濃度顯著低于玻璃離子水門(mén)汀組。組內(nèi)MTA 組除第4 天及第7 天經(jīng)比較未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異外，三個(gè)實(shí)驗(yàn)組分別在六個(gè)時(shí)間點(diǎn)內(nèi)均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，即隨著時(shí)間推移，滲漏濃度越來(lái)越高(表1)。與根管壁之間粘接方式等因素有關(guān)。

表1 三種根尖倒充填材料葡萄糖微滲漏情況(,mmol/ L)

表1 三種根尖倒充填材料葡萄糖微滲漏情況(,mmol/ L)

注：*表示與玻璃離子水門(mén)汀組比較，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；#表示與iRoot BP Plus 組比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；&表示MTA 組比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；a 表示與時(shí)間點(diǎn)1d 比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；b 表示與時(shí)間點(diǎn)4d 比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；c 表示與時(shí)間點(diǎn)7d 比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；d 表示與時(shí)間點(diǎn)14d 比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；e 表示與時(shí)間點(diǎn)20d 比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；f 表示與時(shí)間點(diǎn)30d 比較，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

自文獻(xiàn)上報(bào)道MTA 以來(lái)，它是評(píng)價(jià)其他口腔材料的金標(biāo)準(zhǔn)。它的主要成分為硅酸三鈣、硅酸二鈣、鋁酸三鈣、鋁酸四鈣、氧化硅及少量無(wú)機(jī)氧化物等[8]。MTA 具有良好的生物相容性及持久的封閉性。有研究表明[9]MTA 中的水硫酸鈣成分在根管內(nèi)固化時(shí)發(fā)生的膨脹現(xiàn)象可增加MTA與根管壁之間的邊緣封閉性。但Davis 等[10]認(rèn)為MTA 在固化前出現(xiàn)的一個(gè)早期流失現(xiàn)象，可能是導(dǎo)致其發(fā)生微滲漏的原因之一。同時(shí)，調(diào)和MTA 材料的粉液比例精準(zhǔn)度及充填時(shí)操作時(shí)間等問(wèn)題亦是發(fā)生微滲漏的原因之一。

3.討論

根尖倒充填術(shù)后發(fā)生微滲漏的因素很多[3]。所選的根尖倒充填材料對(duì)根尖發(fā)生微滲漏現(xiàn)象起著非常重要的作用。一款理想的根尖倒充填材料應(yīng)具有：良好的封閉性及生物相容性、無(wú)細(xì)胞毒性及致癌性、良好的X 線阻射性及抗菌性且易于操作和價(jià)格低廉等特性[4]。近幾年，由于各種根尖倒充填材料的問(wèn)世及推廣，由于實(shí)驗(yàn)方法、實(shí)驗(yàn)條件及檢測(cè)時(shí)間等因素得到的研究結(jié)果都不盡相同[5-7]，關(guān)于本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的根尖倒充填材料間的封閉性能到目前為止研究甚少。

本實(shí)驗(yàn)過(guò)程均由一人按標(biāo)準(zhǔn)化實(shí)驗(yàn)方法獨(dú)立操作完成且使用相同器械及儀器，以最大限度減少實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的誤差值。

本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的iRoot BP Plus、MTA 和玻璃離子水門(mén)汀材料均為臨床上使用的根尖倒充填材料。檢測(cè)期間，三種材料的整體微滲漏濃度均很少，說(shuō)明其封閉性能良好。隨著時(shí)間的推移，三種材料出現(xiàn)了各不相同的滲漏濃度。這可能與材料的成分，

近幾年問(wèn)世的iRoot BP Plus 是由加拿大研制的一種新型生物陶瓷納米材料，其主要成分有氧化鋯、硅酸鈣、氫氧化鈣、填料和增稠劑等[11]。與MTA 不同的是iRoot BP Plus 為膏體，無(wú)需調(diào)拌、可直接實(shí)用，操作簡(jiǎn)便。iRoot BP Plus 在固化時(shí)產(chǎn)生磷灰石并發(fā)生體積膨脹現(xiàn)象，以此增加其邊緣封閉性。但對(duì)其有關(guān)膨脹率方面的研究尚不確定，因此若過(guò)度膨脹可能會(huì)出現(xiàn)根裂及微滲漏現(xiàn)象[12]。

iRoot BP Plus 中含有的氧化鉭和氧化鋯成分不僅具有高阻射性，且與MTA 中的三氧化二鉍相比具有不易引起牙冠變色等優(yōu)點(diǎn)[6]。

玻璃離子水門(mén)汀自最早應(yīng)用的銀汞合金后繼用于根尖外科手術(shù)中的根尖倒充填材料。與iRoot BP Plus、MTA 不同的是玻璃離子水門(mén)汀與根管壁之間的粘接則是通過(guò)化學(xué)鍵進(jìn)行牢固結(jié)合。材料調(diào)拌要求高、凝固時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，在潮濕環(huán)境中不易凝固等原因或是發(fā)生微滲漏現(xiàn)象的原因之一[13]。

以往用于檢測(cè)根尖倒充填材料封閉性能的方法較常見(jiàn)為染料滲入法和細(xì)菌滲漏法。Barthel 等[14]認(rèn)為亞甲藍(lán)等低分子染料可滲透到根管內(nèi)普遍存在的細(xì)菌及蛋白質(zhì)分子無(wú)法滲透到的部位，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn)較大差異。細(xì)菌滲漏法中一般用到的示蹤物菌群比較單一，無(wú)法達(dá)到根管內(nèi)的真實(shí)菌群環(huán)境，且細(xì)菌在根管內(nèi)代謝的產(chǎn)物也是導(dǎo)致根尖周病變的因素之一。因此，對(duì)根管內(nèi)示蹤物濃度不能進(jìn)行準(zhǔn)確的定量[15]。

本實(shí)驗(yàn)采用的葡萄糖滲漏法是通過(guò)用一定濃度的葡萄糖溶液檢測(cè)經(jīng)根管滲透到根尖倒充填材料的葡萄糖濃度，反應(yīng)根尖倒充填材料的封閉性能。此模型建模簡(jiǎn)單、干擾因素少、應(yīng)用方便等優(yōu)點(diǎn)。葡萄糖分子量大小為180，與根管內(nèi)產(chǎn)生的細(xì)菌及蛋白質(zhì)分子大小相近，且不存在因示蹤物代謝導(dǎo)致不能準(zhǔn)確定量等問(wèn)題[16]。

本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)得出iRoot BP Plus與MTA 兩者之間的微滲漏濃度統(tǒng)計(jì)學(xué)上并無(wú)存在較大差異。而iRoot BP Plus 較MTA 操作簡(jiǎn)便、耗時(shí)短的優(yōu)點(diǎn)。這與有學(xué)者通過(guò)流體動(dòng)力學(xué)實(shí)驗(yàn)檢測(cè)iRoot與MTA根尖微滲漏，得出的結(jié)果一致[17]。王萌萌等[18]對(duì)患有根尖周疾病的患者分別用iRoot BP Plus 和MTA進(jìn)行了根尖手術(shù)后發(fā)現(xiàn)，iRoot BP Plus 組臨床操作根管下段時(shí)間明顯短于MTA 組，具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。而玻璃離子水門(mén)汀的微滲漏濃度較iRoot BP Plus與MTA 具有顯著增多，有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

本實(shí)驗(yàn)檢測(cè)時(shí)間較短且為體外實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)條件與人體內(nèi)環(huán)境存在差異，其遠(yuǎn)期效果和臨床應(yīng)用還需進(jìn)一步研究證實(shí)。同時(shí)，應(yīng)與材料的各項(xiàng)其他理化性能及生物性能相結(jié)合，以供臨床選擇使用。