毛郁金質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究

熊 敏，龍 瀅，楊 鑫

(貴州省黔東南州食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心，貴州 黔東南州 556000)

本品為姜科姜黃屬植物毛郁金(Curcumaaromaticaalisb.，CAS)的干燥根莖，主要分布在廣西、廣東等地，是廣西主要特色中草藥之一。其氣香、味辛、性溫、微苦，常被用作藥用植物和香料；除此之外，其根莖入藥可具有痛經(jīng)止痛、行氣解郁、涼血破瘀等功效，壯醫(yī)常用其治療阿悶(心絞痛)、臘胴尹(腹痛)、京瑟(閉經(jīng))等病，已被收錄于2011版《廣西壯族自治區(qū)壯藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》第二卷。毛郁金化學(xué)成分類(lèi)型主要有姜黃素類(lèi)、倍半萜類(lèi)、二芳基庚烷類(lèi)以及三萜類(lèi)，其中活性成分主要包括揮發(fā)油和姜黃素等?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，其具有抗炎、抗菌、抗癌、抗氧化、改變血液流變學(xué)等作用。此外，研究表明，姜黃素具有減少I(mǎi)/R誘導(dǎo)的心肌損傷，對(duì)去甲腎上腺素誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞死亡具有保護(hù)作用，抑制氧化應(yīng)激和線粒體功能障礙，減弱阿霉素誘導(dǎo)的心臟毒性等心血管疾病方面的作用[1-3]。

冬季莖葉枯萎時(shí)采挖，除去雜質(zhì)，洗凈，于鮮時(shí)切成縱片，干燥；或取干藥材悶潤(rùn)，切成厚片，干燥，即得。本品收載于貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)2003年版[4](標(biāo)準(zhǔn)編號(hào) DB52/YC090—2003)，毛郁金與溫郁金有較密切的親緣關(guān)系，但一直未能收載入中國(guó)藥典，作為片姜黃、郁金和莪術(shù)的來(lái)源，在貴州中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)(1988年版)[5]中曾作為姜黃(片姜黃)的植物來(lái)源收載入標(biāo)準(zhǔn)，作為貴州地區(qū)習(xí)用品種一直在使用中。毛郁金根莖中和其他姜黃屬植物的根莖和塊根一樣主要含揮發(fā)油類(lèi)和姜黃素類(lèi)成分，此外還有樹(shù)脂類(lèi)、糖類(lèi)、甾醇類(lèi)、脂肪酸、多肽類(lèi)、生物堿及微量元素[6]。毛郁金作為地方民間用藥研究甚少，尤其對(duì)于其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，缺少相關(guān)科學(xué)文獻(xiàn)。

1 儀器和試藥

儀器：500克搖擺式高速中藥粉碎機(jī)(型號(hào)：DFY-500，廠家：溫嶺市林大機(jī)械有限公司)；電子天平(量程：萬(wàn)分之一和十萬(wàn)分之一兩檔，型號(hào)：AE240，廠家：梅特勒-托利多上海有限公司)；低溫恒溫恒濕試驗(yàn)箱(型號(hào)：DHS-100，廠家：北京中科環(huán)試儀器有限公司)；雙槽展開(kāi)缸；暗箱式三用紫外分析儀(型號(hào)：WFH-203B，廠家：上海精科實(shí)業(yè)有限公司)；電熱恒溫干燥箱(型號(hào)：202-1AB，廠家：天津市泰斯特儀器有限公司)；電熱恒溫水浴鍋(型號(hào)：HH-S4，廠家：北京科偉永興儀器有限公司)；電熱恒溫干燥箱(型號(hào)：202-1AB，廠家：天津市泰斯特儀器有限公司)；調(diào)溫型電熱套(型號(hào)：MH-1000，廠家：北京科偉永興儀器有限公司)；電爐；箱式實(shí)驗(yàn)電阻爐(型號(hào)：KSW-4D-11，廠家：中國(guó)·沈陽(yáng)市節(jié)能電爐廠)；萊卡DM2500顯微鏡；LAS V3.8顯像系統(tǒng)。

試劑：乙醇(分析純，國(guó)藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司)；硫酸(色譜純，重慶川東化工(集團(tuán))有限公司)；二氯甲烷(分析純，天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司)；甲醇(分析純，重慶川東化工(集團(tuán))有限公司)；甲酸(分析純，天津市東麗區(qū)天大化學(xué)試劑廠)；甲苯(分析純，西隴化工股份有限公司)；水為去離子水；載玻片、蓋玻片、鑷子、水合氯醛、稀甘油、蒸餾水。

藥材：原植物及樣品均由貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院生藥實(shí)驗(yàn)室的孫慶文教授鑒定為姜科植物毛郁金CuracumaaromaticaSalisb，憑證標(biāo)本存放于黔東南州食品藥品檢驗(yàn)檢測(cè)中心。

按都勻、凱里、盤(pán)縣3地采集的樣品進(jìn)行描述(對(duì)口樣品采集的臘葉標(biāo)本由貴陽(yáng)中醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院生藥實(shí)驗(yàn)室的孫慶文教授鑒定)姜黃素(中國(guó)食品藥品檢定研究院，純度98.8%，批號(hào)110823-201004)；毛郁金藥材收集自貴州省都勻市、凱里市、盤(pán)縣，見(jiàn)表1。

表1 藥材收集信息Tab.1 Information of the medicinal materials

2 方法與結(jié)果

2.1 鑒別

《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》2003年版僅收錄了毛郁金藥材的理化鑒別，為提升毛郁金的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及藥材鑒別的專(zhuān)屬性，參照《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》2003年版、《中國(guó)藥典》2015年版和《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及起草說(shuō)明編寫(xiě)技術(shù)要求》相關(guān)內(nèi)容，新制定了毛郁金的根橫切面特征、粉末顯微鑒別和薄層色譜鑒別方法。

2.1.1 毛郁金原植物性狀鑒別

植物高0.8～1.0 m，根莖肉質(zhì)，肥大，橢圓形或長(zhǎng)橢圓形，多有分枝，黃色，芳香；根端膨大呈紡錘狀葉。葉基生，葉片長(zhǎng)圓形，長(zhǎng)30～60 cm，頂端具細(xì)尾尖，基部漸狹，葉面無(wú)毛，葉背被短柔毛；葉柄約與葉片等長(zhǎng)。花葶單獨(dú)由根莖抽出，與葉同時(shí)發(fā)出或先葉而出，穗狀花序圓柱形，長(zhǎng)約15 cm，直徑約8 cm，有花的苞片淡綠色，卵形，長(zhǎng)4～5 cm，上部無(wú)花的苞片較狹，長(zhǎng)圓形，白色而染淡紅，頂端常具小尖頭，被毛；花萼被疏柔毛，長(zhǎng)0.8～1.5 cm，頂端3裂；花冠管漏斗形，長(zhǎng)2.3～2.5 cm，喉部被毛，裂片長(zhǎng)圓形，長(zhǎng)1.5 cm，白色而帶紫紅，后方的一片較大，頂端具小尖頭，被毛；側(cè)生退化雄蕊淡黃色，倒卵狀長(zhǎng)圓形，長(zhǎng)約1.5 cm；唇瓣黃色，倒卵形，長(zhǎng)2.5 cm，頂微2裂；子房被長(zhǎng)柔毛?；ㄆ冢?月至5月，見(jiàn)圖1。

圖1 毛郁金原植物圖Fig.1 Original plant of Radix Curcumae

將野外采集的3個(gè)藥材洗凈，切縱片，曬干，按照《中藥鑒定學(xué)》和《藥用植物學(xué)》的性狀鑒定方法，對(duì)藥材樣品的大小、形狀、顏色、質(zhì)地、斷面等特征進(jìn)行對(duì)比觀察和描述。發(fā)現(xiàn)不同產(chǎn)地的藥材除了在大小方面稍有差異，其他特征相對(duì)比較穩(wěn)定。該藥材的性狀鑒別特征歸納總結(jié)如下。

本品根呈近圓柱形或紡錘形，多有分枝，表面深黃色，粗糙，斷面灰白色至淡棕黃色。切片呈條片狀，長(zhǎng)3～10 cm，厚0.2～0.5 cm。切面不平整，邊緣皺縮，有時(shí)附須根殘基。質(zhì)脆，易折斷，氣香，味辛、苦。見(jiàn)圖2。

圖2 毛郁金藥材性狀圖Fig.2 Characters of Radix Curcumae

2.1.2 顯微鑒別

2.1.2.1 毛郁金根橫切面

表皮細(xì)胞為一列，壁略厚。表皮下為8～10列木栓細(xì)胞，扁平，皮層寬廣，有葉跡維管束10～14個(gè)，外韌型，斷續(xù)排列成環(huán)；內(nèi)皮層細(xì)胞凱氏點(diǎn)增厚明顯，中柱鞘為一列薄壁細(xì)胞，中柱散列有多數(shù)外韌型維管束，薄壁細(xì)胞含有油滴、淀粉粒及黃色色素。見(jiàn)圖3。

圖3 橫切面特征圖Fig.3 Crosssectionof Radix Curcumae

2.1.2.2 毛郁金粉末顯微鑒別

本品粉末性狀的顯微鑒別所用樣本來(lái)自于貴州凱里、盤(pán)縣、都勻3地采集的藥材樣品。3個(gè)藥材樣品進(jìn)行常規(guī)粉末制片，應(yīng)用光學(xué)顯微鏡對(duì)其組織結(jié)構(gòu)、細(xì)胞形態(tài)、后含物等進(jìn)行觀察、測(cè)量和描述，并對(duì)具有代表性的特征進(jìn)行拍照和繪圖。研究其共性總結(jié)歸納得出該藥材顯微鑒別特征，其顯微鑒別特征總結(jié)如下：本品粉末黃色。主要為梯紋導(dǎo)管，環(huán)紋及網(wǎng)紋導(dǎo)管。木栓細(xì)胞呈多角形或不規(guī)則形。淀粉粒多單個(gè)散在，可見(jiàn)層紋。非腺毛偶見(jiàn)，單細(xì)胞，多碎斷?？梢?jiàn)油滴。結(jié)果見(jiàn)圖4。

圖4 毛郁金粉末顯微鑒別Fig.4 Microscopic identification of Radix Curcumae powder

2.1.3 理化定性鑒別

經(jīng)對(duì)3批毛郁金按照《貴州省中藥材、民族藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》2003年版鑒別項(xiàng)下(1)(2)進(jìn)行鑒別，結(jié)果見(jiàn)圖5、圖6，與原標(biāo)準(zhǔn)一致，但是此兩個(gè)鑒別試驗(yàn)專(zhuān)屬性不強(qiáng)，建議不列為正文。

圖5 毛郁金理化定性鑒別反應(yīng)圖(1)Fig.5 Physicochemical qualitative identification ofRadix Curcumae(1)

圖6 毛郁金理化定性鑒別反應(yīng)圖(2)Fig.6 Physicochemical qualitative identification ofRadix Curcumae(2)

2.1.4 薄層鑒別

取本品粉末0.2 g，加乙醇20 mL，振搖，超聲15 min，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖? mL使溶解，作為供試品溶液。另取姜黃素對(duì)照品，加乙醇制成每1 mL含0.5 mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(通則0502)試驗(yàn)，吸取上述供試品溶液1 μL，對(duì)照品溶液1 μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以二氯甲烷-甲醇-甲酸(5∶0.4∶0.05)為展開(kāi)劑，取出，晾干，分別置日光和紫外光燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，分別顯相同顏色的斑點(diǎn)和熒光斑點(diǎn)。

圖7 3個(gè)批次毛郁金藥材的薄層色譜圖Fig.7 TLC of three batches of Radix Curcumae

2.2 檢查

2.2.1 水分

原《貴州省中藥、民族藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》2003年版未收錄毛郁金的水分檢查，為控制本品質(zhì)量，對(duì)本品水分進(jìn)行研究。取本品粉末10～15 g，精密稱(chēng)定，照《中國(guó)藥典》2015年版通則0832水分測(cè)定法(第四法甲苯法)測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 毛郁金的水分測(cè)定結(jié)果(單位：%)Tab.2 Moisture measurement results of Radix Curcumae

結(jié)果顯示，3批毛郁金水分在7.98%～8.61%，平均為8.29%，因?yàn)樗质墉h(huán)境溫濕度影響較大，參照藥典，規(guī)定本品水分不得超過(guò)13.0%。

2.2.2 總灰分

原《貴州省中藥、民族藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》2003年版未收錄毛郁金的總灰分，為控制本品質(zhì)量，對(duì)本品總灰分進(jìn)行研究。取本品粉末2 g(過(guò)二號(hào)篩)，置熾灼至恒重的坩堝中，稱(chēng)定重量(準(zhǔn)確0.01 g)，照《中國(guó)藥典》2015年版通則2302灰分測(cè)定法測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 毛郁金的總灰分測(cè)定結(jié)果(單位：%)Tab.3 Total ash measurement results of Radix Curcumae

結(jié)果顯示，3批毛郁金藥材中總灰分為5.50%～5.93%，平均值為5.73%，規(guī)定本品總灰分不得過(guò)7.0%。

2.2.3 浸出物

原《貴州省中藥、民族藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)》2003年版未收錄毛郁金的浸出物測(cè)定。分別用乙醇、50%乙醇、水作溶劑，冷浸及熱浸法測(cè)定MYJYC01毛郁金浸出物含量，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表4。根據(jù)測(cè)定結(jié)果，取本品粉末(過(guò)二號(hào)篩)2 g，精密稱(chēng)定，加水100 mL，照《中國(guó)藥典》2015年版四部通則2201浸出物測(cè)定法中水溶性浸出物測(cè)定法熱浸法測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表5。

表4 毛郁金藥材浸出物條件考察測(cè)定結(jié)果(單位：%)Tab.4 Extraction conditions and measurement results ofRadix Curcumae

表5 毛郁金的水溶性浸出物測(cè)定結(jié)果(單位：%)Tab.5 Water-soluble extract measurement results of Radix Curcumae

結(jié)果顯示，3批次毛郁金水溶性浸出物為16.59%～17.59%，平均值17.03%，規(guī)定本品以干燥品計(jì)算水溶性浸出物不得少于13.0%。

3 討論

參照薄層色譜法試驗(yàn)(《中國(guó)藥典》2015年版四部通則0502)方法學(xué)考察，對(duì)毛郁金的薄層色譜鑒別考察了提取方法、提取溶劑、展開(kāi)劑、點(diǎn)樣體積、顯色等條件；不同溫濕度、不同廠家薄層板，穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明，正文的方法為最佳方法，該方法色譜清晰，專(zhuān)屬性強(qiáng)。該文章還研究毛郁金原植物性狀和理化定性鑒別；毛郁金根橫切面的顯微鑒別；毛郁金粉末特征顯微鑒別。

本實(shí)驗(yàn)參照《中國(guó)藥典2015年版》(四部)(通則0832第二法、通則2302、通則2201)分別對(duì)毛郁金的水分、總灰分、浸出物進(jìn)行檢查，3批次毛郁金藥材水分測(cè)定平均為8.29%，因?yàn)樗质墉h(huán)境溫濕度影響較大，參照藥典，初步擬定本品水分不得超過(guò)13.0%；總灰分為5.50%～5.93%，平均值為5.73%，初步擬定本品總灰分不得超過(guò)7.0%；浸出物測(cè)定平均值為17.03%，初步擬定本品以干燥品計(jì)算水溶性浸出物不得少于13.0%。該研究制定的方法操作簡(jiǎn)便，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，可有效控制毛郁金質(zhì)量，該方法將為黔產(chǎn)毛郁金載入地方標(biāo)準(zhǔn)提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)和科學(xué)依據(jù)。