1例膠體硒法HIV快速檢測試劑“漏檢”案例分析

李 霞，孫婷彥，周宗良，周宗俞

重慶市永川區(qū)疾病預防控制中心，重慶永川 402160

隨著時代的發(fā)展和科學技術的進步，艾滋病病毒抗體篩查技術日臻完善，如快速檢測法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)法、化學發(fā)光(CIA)法等。快速檢測法由于操作簡單、出結果所需時間短，且不需要特殊儀器等優(yōu)勢被我國疾病預防控制中心和醫(yī)療機構廣泛應用[1]。在實際工作中仍發(fā)現(xiàn)快速檢測法有新的問題出現(xiàn)，需要認真對待和解決，現(xiàn)將永川區(qū)疾病預防控制中心艾滋病確證實驗室遇到的1例特殊案例報道如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料 李某，女，69歲，漢族，農(nóng)民，已婚，初中文憑。因病到某區(qū)人民醫(yī)院住院進行術前檢查時篩查出人類免疫缺陷病毒(HIV)抗體有反應性，二次血樣被送到本中心進行確證實驗，初篩檢測結果見表1。

1.2確證實驗室所用試劑和儀器 HIV1+2抗體確證試劑盒(條帶免疫法)MIKROGEN，批號LHI061901，有效期至2021年5月；HIV P24抗原及抗體檢測試劑盒(膠體硒法) Alere HIV Combo (雅培公司)，批號06685K200C，有效期至20211005;HIV1/2抗體檢測試劑(乳膠法，博拓生物)， 批號 HIV19070010，有效期至2021年4月。Western blot實驗儀器為上海迅達XD236蛋白印跡儀。實驗室溫度為21 ℃，濕度61%，所有試劑從冰箱取出均在室溫條件下進行了平衡，并嚴格按照試劑說明書操作。加樣器按期進行校準，恒溫箱性能穩(wěn)定。

表1 HIV初篩結果

2 確證實驗室檢測情況

2020年11月19日，艾滋病確證實驗室人員對該周渝西片區(qū)所有篩查實驗室送檢的HIV抗體初篩有反應性標本進行確證實驗。在對確證標本進行結果判定時，為了保證結果及送檢標本的準確性，會用快速檢測試劑對所有確證標本再進行一次復核，觀察結果能不能相互吻合[2]。此次筆者發(fā)現(xiàn)1例確證為陽性的標本用膠體硒法做出來為陰性，而用博拓生物的快速檢測試劑檢測顯示為有反應性。為什么膠體硒法的結果與醫(yī)院的幾次篩查結果、本中心的確證結果不一致，筆者首先考慮是不是送錯樣了，于是通知送檢醫(yī)院對患者進行重新抽血，并在溯源中發(fā)現(xiàn)李某2014年已在本中心艾滋病確證實驗室做過確證實驗并出具了HIV-1抗體陽性的報告，期間有服藥，并有CD4和病毒載量檢測結果。2020年11月26日，筆者對重新送檢的李某血樣和2020年11月19日的血樣再次進行了確證實驗，實驗結果與2020年11月19日實驗條帶一致，仍判讀為HIV-1抗體陽性，膠體硒法檢測同樣是陰性，博拓生物的快檢檢測條帶為有反應性。這個結果值得深思，確證陽性的標本為什么膠體硒法為陰性？試劑過期了？查看試劑包裝顯示在效期內。操作錯誤？為了驗證是否存在操作錯誤，從以往確證為陽性的標本里隨機篩選了30個標本，在同樣的溫濕度條件和操作臺上，新開封一袋同一批號膠體硒試劑進行檢測，同時也檢測了李某的標本，20～40 min內多次讀取結果，室溫條件下隨機篩選的30個陽性標本均顯示為有反應性，李某的標本依然是陰性，證明筆者沒有操作失誤，只能考慮試劑“漏檢”。立即向Alere試劑廠家反映具體情況，廠家建議重新再做檢測，并把試劑條置于37 ℃的恒溫箱等待20～40 min后觀察結果，30 min后觀測到試劑條顯示為有反應性，證明試劑沒有漏檢，只是需要特殊處理，這種情況在以前實驗過程中沒有遇到過。出現(xiàn)這種特殊情況，究其原因，查閱Alere膠體硒產(chǎn)品說明書時發(fā)現(xiàn)有一條檢驗方法局限性的說明，即一些服用抗反轉錄病毒藥物的已知HIV感染患者，使用快速檢測試劑盒進行檢測時出現(xiàn)了假陰性的結果[3-5]。李某的標本需要特殊處理才能顯示出陽性帶，可能與患者本身在服藥有關，這方面的研究由于本中心實驗室條件及筆者自身能力有限不做討論。

3 討 論

如果初篩時像李某這種特殊的標本最先用Alere膠體硒法檢測，而大部分實驗室使用快速檢測試劑條都沒有放恒溫箱的習慣，那么肯定存在漏檢。HIV初篩實驗的干擾條件越來越多，初篩實驗室一定要注意，避免患者在同一時段輾轉不同的醫(yī)療機構看病時由于各個醫(yī)療機構使用的HIV抗體初篩方法的不同而造成定性結果不同引起糾紛。且很多HIV感染者由于自身對HIV認知有限，即使在服藥也不會告知醫(yī)生，如果因服藥造成HIV抗體篩查時出現(xiàn)假陰性，那么醫(yī)院的醫(yī)生護士在對這部分患者進行治療時就存在很高的暴露風險。因此，在HIV抗體篩查過程中，為了盡可能避免漏檢，建議最好使用2種HIV抗體篩查法同時進行檢測[6]。