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    藍莓多糖提取與工藝優(yōu)化的研究

    2021-08-27 04:36陳雪
    中國食品 2021年15期
    關(guān)鍵詞:溶劑乙醇多糖

    藍莓多糖是藍莓中主要的功能物質(zhì)之一,經(jīng)研究表明其具有強抗氧化性、抗疲勞性、抑制有害菌生長等多種生物活性。本文主要研究水浸提法提取藍莓多糖,通過單因素實驗和正交實驗研究溶劑體積、提取溫度、提取時間、乙醇比例四個條件對藍莓多糖得率的影響,得出最佳提取工藝條件,為之后藍莓多糖的開發(fā)研究提供條件。本文以藍莓為原料,優(yōu)化了藍莓多糖水浸提法的提取工藝,考察溶劑體積、提取溫度、提取時間、乙醇比例四個條件對藍莓多糖得率的影響趨勢,到最佳提取工藝條件組合為:提取溫度90℃、提取時間60min、乙醇比例80%,此條件下藍莓多糖得率為3.98%。

    一、實驗原料

    新鮮藍莓:市售,產(chǎn)自浙江金華。

    二、實驗方法

    1.藍莓多糖的提取。稱取預(yù)處理得到的藍莓粉末1g,加入純水,在特定溫度下浸泡一段時間,經(jīng)高速冷凍離心機離心后取上清液,條件為4℃、3800r/min、15min。在上清液中加入一定比例的無水乙醇,攪拌均勻后于冰箱中保存,時間≥10h。將放置過夜的混合液體再次經(jīng)高速冷凍離心機離心取沉淀,條件為4℃、3800r/min、15min。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀對沉淀進行濃縮后,在50℃條件下干燥得到藍莓多糖。

    2.藍莓多糖測定。本實驗采用硫酸- 苯酚法測定藍莓多糖含量。(1)標準曲線的繪制。取8支試管,依次加入0mL、0.1mL、0.2mL、0.3mL、0.4mL、0.5mL、0.6mL、0.7mL的葡萄糖溶液,與純水混合均勻后置于冰水中,加入1mL苯酚溶液,在冰浴環(huán)境中震蕩;加入5mL濃硫酸搖勻,轉(zhuǎn)移至沸水浴中放置18min,待反應(yīng)完全后取出,在冷水中降至室溫,于490nm處測定吸光值,繪制葡萄糖濃度標準曲線圖,如圖1所示。

    (2)藍莓多糖含量的測定。取從藍莓粉末中提取的藍莓多糖0.1g,溶解于100mL純水中,再取藍莓多糖溶液1mL于試管中。用上述方法測定并對照標準曲線圖得出藍莓多糖質(zhì)量,然后按照如下公式計算多糖得率。

    三、結(jié)果與分析

    1.藍莓多糖提取單因素試驗。(1)提取溶劑體積對藍莓多糖得率的影響。在提取溫度70℃、提取時間60min、無水乙醇比例70%的條件下,不同提取溶劑體積的藍莓多糖得率如圖2所示。隨著提取溶劑體積的增加,藍莓多糖得率隨之增加,這是因為溶劑越多,則多糖在水中的溶液率越大,得到的多糖就越多;當溶劑體積達到50mL時,隨著體積增大,多糖得率增長緩慢且趨于平穩(wěn)。綜合考慮,溶劑體積選為150mL為宜。

    (2)提取溫度對藍莓多糖得率的影響。在提取溶劑體積150mL、提取時間60min、無水乙醇比例70%的條件下,不同提取溫度的藍莓多糖得率如圖3所示。在60℃-90℃范圍內(nèi),藍莓多糖得率隨著提取溫度的升高而顯著增加;當溫度達到90℃時,多糖得率達到最大值;超過90℃后,隨著溫度增加,多糖得率反而下降,這可能是由于過高的溫度會使藍莓多糖中一些熱不穩(wěn)定組分的結(jié)構(gòu)分解,從而使多糖含量減少。

    (3)不同提取時間對藍莓多糖得率的影響。在提取溶劑體積150mL、提取溫度80℃、無水乙醇比例70%的條件下,不同提取時間的藍莓多糖得率如圖4所示。在15min- 60min范圍內(nèi),藍莓多糖得率隨著時間的增加而增大,并在60min時達到最大值;當時間超過60min后,隨著時間的推移,多糖得率略有下降。這可能是由于隨著時間的延長,在高溫條件下藍莓多糖中某些不耐熱的多糖成分分解,從而造成多糖含量下降。

    (4)乙醇比例對藍莓多糖得率的影響。在提取時間60min、提取溶劑體積150mL、提取溫度80℃的條件下,不同比例乙醇提取的藍莓多糖得率如圖5所示。當乙醇比例為50%-70%,藍莓多糖得率隨著乙醇濃度增加有小范圍升高,但變化不大;當乙醇比例為70%-80%,藍莓多糖得率隨著乙醇濃度的增加而迅速升高;當乙醇比例達到80%時,藍莓多糖得率達到最大值,而后趨于平穩(wěn)。

    2.正交試驗。根據(jù)單因素實驗結(jié)果可知,對藍莓多糖提取效果影響較大的三個因素是提取時間、提取溫度、乙醇比例,以這三個因素設(shè)計L9(34)正交實驗并對其實驗結(jié)果進行極差分析,確定最優(yōu)提取條件。采用提取溫度、提取時間、乙醇比例作為三個影響因素,各自選取三個水平進行實驗,詳見表1。

    由正交實驗極差分析結(jié)果可知,水溶劑浸提法提取藍莓多糖的最優(yōu)工藝組合為:提取溫度90℃,提取時間60min,乙醇比例80%。在此工藝條件下,藍莓多糖得率最高,為3.98%。另外,從R值可以看出,提取溫度對實驗的影響最大,而乙醇比例對實驗的影響最小。

    作者簡介:陳雪(1988-),女,漢族,浙江金華人,助理實驗師,碩士,研究方向為食品安全。

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