6種活性多糖的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)及其抗氧化活性的比較研究

王帥，趙冬雪，韓成鳳，王曉麗，李健，張樂(lè)樂(lè)，陳旎，韓培培

（省部共建食品營(yíng)養(yǎng)與安全國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，天津科技大學(xué)生物工程學(xué)院，天津 300457）

多糖是由多個(gè)單糖分子失水縮合后，經(jīng)過(guò)特定糖苷鍵依照一定順序連接而成的線(xiàn)性或分支的聚合物，是一類(lèi)分子結(jié)構(gòu)復(fù)雜的生物大分子[1]。通常將可以調(diào)節(jié)人體生理功能的特異性多糖稱(chēng)為活性多糖，通常具有抗氧化、抗輻射、免疫調(diào)節(jié)和抗腫瘤等多種生物活性[2-3]?；钚远嗵菑V泛存在于植物和大型真菌中。真菌多糖具有消耗資源量相對(duì)較小的特點(diǎn)，在國(guó)際上具有很大的影響力。另外，我國(guó)藻類(lèi)植物的資源十分豐富，利用藻類(lèi)多糖可生產(chǎn)出許多高價(jià)值的產(chǎn)品。為研究多糖的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)對(duì)其抗氧化活性的影響，本文選取了4種藻類(lèi)和2種真菌進(jìn)行了研究，分別為地木耳（Nostoc commune）、葛仙米（Nostoc Sphaeroids）、發(fā)菜（Nostoc flagelliforme）、螺旋藻（Spirulina）、香菇（Lentinus edodes）和茯苓（Poria cocos），并對(duì)其進(jìn)行了多糖的提取純化。

地木耳、葛仙米、發(fā)菜3種植物同屬藍(lán)藻門(mén)（Cyanophyta），念珠藻科（Nostocaceae），念珠藻屬（Nostoc Vanch）。螺旋藻屬于藍(lán)藻門(mén)（Cyanophyta），藍(lán)藻綱（Cyanophyceae），顫藻科（Oscillatoriaceae），螺旋藻屬（Spirulina）。香菇又稱(chēng)香覃、花菇、椎耳、冬蒸、香信、厚菇，屬于擔(dān)子菌綱（Basidaiomycetes），傘菌目（Agaricales），口蘑科（Tricholomatacete），香菇屬（Lentinus）。茯苓分為菌絲體和菌核兩大類(lèi)，它和香菇多糖同屬于擔(dān)子菌綱（Basidiomycetes）。它是非褶菌目（Aphyllophorales），多孔菌科（Polyporaceae）的一種真菌。研究發(fā)現(xiàn)，地木耳多糖具有一定的體外抗氧化活性[4]。葛仙米多糖對(duì)超氧陰離子自由基和羥基自由基具有很強(qiáng)的清除作用，且呈量效關(guān)系[5]。發(fā)菜多糖具有抗氧化、抗腫瘤以及提高免疫等生物功能，有相當(dāng)可觀的藥用價(jià)值。在魚(yú)漢堡中添加螺旋藻多糖可以改善其營(yíng)養(yǎng)成分組成[6]。香菇多糖在提高免疫力、抗腫瘤、抗病毒、抗肝炎、抗氧化方面均具有很好的藥理作用[7]。茯苓多糖具有抗氧化、抗凝血、抗病毒、降血壓、降血脂等多重藥理作用。

本研究選用4種藻類(lèi)多糖（發(fā)菜多糖、地木耳多糖、葛仙米多糖和螺旋藻多糖）和2種真菌多糖（香菇多糖和茯苓多糖）作為研究對(duì)象，通過(guò)對(duì)比分析研究多糖的黏度、分子量、單糖組成等結(jié)構(gòu)、性質(zhì)對(duì)其抗氧化活性的影響，為多糖抗氧化活性的目的性篩選提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 材料

發(fā)菜細(xì)胞（TCCC11757）：天津科技大學(xué)生化工程研究室；螺旋藻多糖：江西新大澤螺旋藻實(shí)業(yè)公司。葛仙米多糖、地木耳多糖：寧夏香草生物技術(shù)有限公司；香菇多糖、茯苓多糖：上海源葉生物科技有限公司。

1.1.2 試劑

濃硫酸、氫氧化鈉、剛果紅、甲醇、正丁醇、氯仿、無(wú)水乙醇、氯化鈉、重蒸酚（均為分析純）：天津市北方天醫(yī)化學(xué)試劑廠(chǎng)；氘標(biāo)記琥珀酸、吡啶、甲氧基銨鹽酸鹽（均為色譜純）：日本富士通有限公司；DEAE-650M、葡聚糖凝膠G-100樹(shù)脂、AB-8大孔吸附樹(shù)脂：日本TOSOH公司；T系列多糖標(biāo)準(zhǔn)品：北京索萊寶科技有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

Size 75烏氏粘度計(jì)：美國(guó)Cannon Instrument公司。UV-mini1246紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)：日本島津公司；Infinite M200 Pro多功能酶標(biāo)儀：瑞士Tecan公司；F-7000熒光分光光度計(jì)：日本日立公司；1200高效液相色譜儀：德國(guó)安捷倫公司；7000B氣質(zhì)聯(lián)用儀：美國(guó)安捷倫公司；IS50傅立葉紅外光譜儀：美國(guó)尼高利公司；SU1510掃描電子顯微鏡：日本電子公司。

1.3 試驗(yàn)方法

1.3.1 多糖提取測(cè)定與純化

1）提?。翰捎盟岽汲练╗8]進(jìn)行提取。2）含量測(cè)定：采用苯酚-硫酸法測(cè)定[9]。3）分離純化：采用Sevage法脫蛋白；AB-8大孔吸附樹(shù)脂脫色；DEAE-650M離子交換柱層析純化，葡聚糖凝膠G-100柱層析純化[10]。

1.3.2 多糖的分子量測(cè)定

采用高效凝膠滲透色譜法（high performance gel permeation chromatography，HPGPC）檢測(cè)。

1.3.2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制作

將己知分子量的T系列多糖標(biāo)準(zhǔn)品，分別用流動(dòng)相配制成1 mg/mL的溶液，進(jìn)樣量20 μL，記錄各自保留時(shí)間，用Excel軟件對(duì)葡聚糖相對(duì)分子質(zhì)量的對(duì)數(shù)lgMw（y）對(duì)保留時(shí)間tR（x）作圖，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)為 y=-0.269 1x+8.822 1，R2=0.999。

1.3.2.2 樣品的測(cè)定

稱(chēng)取多糖樣品，用流動(dòng)相溶解配成濃度為1 mg/mL的溶液，離心取上清液，進(jìn)樣量為20 μL，記錄多糖出峰時(shí)間，對(duì)照標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，根據(jù)回歸方程計(jì)算多糖樣品的分子量。

1.3.2.3 色譜條件

采用TSK-GEL G4000 PW XL凝膠柱（7.8 mm×30.0 cm），檢測(cè)器為RI-101示差折光檢測(cè)器，流動(dòng)相為超純水，流速設(shè)定為0.5 mL/min，柱溫設(shè)定為35℃，進(jìn)樣量為 20 μL。

1.3.3 特性黏度測(cè)定

特性黏度采用烏式粘度計(jì)[11]測(cè)定。

1.3.4 單糖組成的測(cè)定

單糖組成參考文獻(xiàn)[12-13]的方法。

1.3.5 電鏡掃描

取少量多糖樣品固定到導(dǎo)電膠上，對(duì)其進(jìn)行噴金處理，最后進(jìn)行掃描觀察。

1.3.6 三股螺旋結(jié)構(gòu)的測(cè)定

采用剛果紅實(shí)驗(yàn)[14]法測(cè)定三股螺旋結(jié)構(gòu)。

1.3.7 紅外光譜分析

稱(chēng)取干燥的多糖樣品1mg，與適量（100mg～200mg）干燥的溴化鉀粉末在瑪瑙研缽中快速且輕輕地研磨直至均勻，利用壓片機(jī)將其制成均勻透明的薄片，然后用IS50型傅立葉紅外光譜儀在4 000 cm-1～400 cm-1區(qū)間掃描。

1.3.8 多糖抗氧化活性的測(cè)定

DPPH自由基清除能力測(cè)定：參考Fan等[15]的方法。

ABTS+自由基清除能力、還原能力測(cè)定：參考Shimada[16]等的方法。

1.4 數(shù)據(jù)分析

利用SICMA-P對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行多元統(tǒng)計(jì)分析，其中差異權(quán)重貢獻(xiàn)值（variable importance plot，VIP）圖閾值＞0.5，尋找顯著影響多糖生物活性的相關(guān)因素。

2 結(jié)果與討論

2.1 多糖的分離純化

采用水提醇沉法提取多糖、Sevage法脫蛋白、AB-8大孔吸附樹(shù)脂脫色、DEAE-650M離子交換柱和葡聚糖凝膠G-100柱層析法對(duì)發(fā)菜多糖、地木耳多糖、葛仙米多糖、螺旋藻多糖進(jìn)行分離純化。粗多糖的洗脫曲線(xiàn)見(jiàn)圖1。

圖1 4種粗多糖的DEAE-650M離子交換柱層析洗脫曲線(xiàn)Fig.1 DEAE-650M ion exchange column chromatography elution curve of four crude polysaccharides

由圖1可知，地木耳多糖、發(fā)菜多糖、葛仙米多糖以中性多糖為主，螺旋藻多糖以酸性多糖為主，分別收集洗脫峰較大的組分。采用凝膠柱層析進(jìn)一步將上述初步純化的多糖進(jìn)行分離，其洗脫曲線(xiàn)如圖2所示。

圖2 多糖葡聚糖凝膠G-100柱層析洗脫曲線(xiàn)Fig.2 Elution curve of polysaccharides on Sephadex G-100 chromatography column

由圖2可知，6種多糖樣品經(jīng)純化后均得到一種單一組分，收集相應(yīng)組分，濃縮之后進(jìn)行透析，最后真空冷凍干燥。將獲得的發(fā)菜多糖、地木耳多糖、葛仙米多糖、螺旋藻多糖-1、螺旋藻多糖-2、螺旋藻多糖-3分別命名為 FC、DZT、GZT、LXZ-1、LXZ-2、LXZ-3。采用透析法對(duì)高純度的香菇多糖和茯苓多糖進(jìn)行簡(jiǎn)單純化，各得到1種純化多糖，將香菇多糖和茯苓多糖分別命名為XG和FL。

2.2 多糖結(jié)構(gòu)與性質(zhì)

2.2.1 多糖分子量

在多糖結(jié)構(gòu)和活性的研究中，多糖的分子量大小非常重要。利用HPGPC法測(cè)定8種純化多糖的分子量，結(jié)果如表1所示。

表1 8種純化多糖分子量Table 1 Molecular weight of eight kinds of purified polysaccharides

由表1可知，8種多糖中DZT的分子量最大，XG的分子量最小。

2.2.2 特性黏度

8 種多糖 FC、XG、FL、GZT、DZT、LXZ-1、LXZ-2、LXZ-3在水溶液中的特性黏度見(jiàn)圖3。

圖3 8種純化多糖溶液的特性黏度Fig.3 The intrinsic viscosity of eight kinds of purified polysaccharides

由圖 3 可知，8 種多糖 FC、XG、FL、GZT、DZT、LXZ-1、LXZ-2、LXZ-3在水溶液中的特性黏度分別為20.42、7.00、7.94、36.60、48.53、19.41、12.00、16.98 dL/g。DZT、GZT、FC這3種純化多糖在水溶液中的特性黏度明顯高于其他5種多糖。結(jié)合多糖的分子量測(cè)定結(jié)果，8種多糖中DZT的分子量和特性黏度最大，XG最小，且LXZ-1、LXZ-3、LXZ-2這3種多糖的特性黏度和分子量都越來(lái)越小。有研究發(fā)現(xiàn)，多糖溶液特性黏度與分子量大小有關(guān)[17]，由特性黏度和分子量的結(jié)果也表明，多糖的特性黏度隨分子量的增大而增大。

2.2.3 單糖組成

采用氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀（Gas Chromatographic Mass Spectrometer，GC-MS）對(duì)8種純化多糖的單糖組成摩爾百分比的分析結(jié)果見(jiàn)表2。

表2 8種純化多糖的單糖組成摩爾百分比Table 2 The mole percent of monosaccharide composition of eight kinds of purified polysaccharides %

由表2可知，F(xiàn)C由木糖、核糖、半乳糖、葡萄糖和葡萄糖醛酸5種單糖組成，各單糖的摩爾比是0.78∶0.28∶1.00∶2.44∶0.35；XG 由木糖、鼠李糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸6種單糖組成，各單糖的摩爾比是 0.57∶1.09∶0.55∶0.82∶1.00∶66.08；FL 由半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸3種單糖組成，各單糖的摩爾比是1.00∶244.02∶0.85；GZT 由木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖4 種單糖組成，各單糖的摩爾比是 2.22∶1.06∶1.00∶0.74；DZT由木糖、鼠李糖、果糖、巖藻糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖和葡萄糖醛酸8種單糖組成，各單糖的摩爾比是0.73∶0.27∶0.29∶0.18∶0.40∶1.00∶5.13∶1.04；LXZ-1、LXZ-2、LXZ-3的單糖組成比較相近，均由木糖、阿拉伯糖、核糖、鼠李糖、果糖、巖藻糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖和葡萄糖醛酸這10種單糖構(gòu)成，但其單糖比例不同，LXZ-1中上述10種單糖的單糖摩爾比是0.14∶0.01∶0.01∶0.02∶0.04∶0.01∶0.01∶1.00∶0.27∶0.01，LXZ-2 中上述 10 種單糖的單糖摩爾比是 0.14∶0.01∶0.01∶0.02∶0.05∶0.01∶0.01∶1.00∶0.27∶0.01，LXZ-3 中上述 10 種單糖的單糖摩爾比是 0.04∶0.01∶0.01∶0.03∶0.02∶0.01∶0.01∶1.00∶0.11∶0.01。此外，F(xiàn)C、XG、FL、GZT、DZT、LXZ-1、LXZ-2 和 LXZ-3 的單糖組成中都有半乳糖和葡萄糖，半乳糖和葡萄糖摩爾比分別是 1.00∶2.44、1.00∶66.08、1.00∶244.02、1.00∶0.74、1.00∶5.13、1.00∶0.27、1.00∶0.27、1.00∶0.11。

2.2.4 掃描電子顯微鏡（scanning electron microscope，SEM）觀察

8種多糖的掃描電子顯微鏡觀察結(jié)果見(jiàn)圖4。

圖4 多糖的掃描電子顯微鏡觀察圖Fig.4 SEM observation of polysaccharides

由圖4可知，觀察8種純化多糖的電鏡圖發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)C的表面是不規(guī)則的小球狀結(jié)構(gòu)，直觀地說(shuō)明了發(fā)菜多糖為無(wú)定形結(jié)構(gòu)；XG、FL、GZT、LXZ-1、LXZ-3 都是表面具有孔狀的疏松片狀結(jié)構(gòu)，LXZ-2是有規(guī)則性小球狀和塊狀的結(jié)構(gòu)，DZT是表面褶皺的片狀結(jié)構(gòu)。這些差異可能與其理化性質(zhì)、分子量及結(jié)構(gòu)有關(guān)。

2.2.5 紅外光譜分析

8種多糖的紅外光譜圖見(jiàn)圖5。

圖5 多糖的紅外光譜圖Fig.5 IR spectra of polysaccharides

由圖5可知，8種多糖存在相近的多糖特征峰。8種多糖樣品在3 420 cm-1附近均具有強(qiáng)且寬的特征吸收峰，表明多糖存在分子間和分子內(nèi)氫鍵，這個(gè)吸收峰是由糖類(lèi)-OH官能團(tuán)的伸縮振動(dòng)引起的[18]；在2 927 cm-1、2 854 cm-1處的吸收峰是糖類(lèi)物質(zhì)的特征吸收峰，表明多糖存在C-H伸縮振動(dòng)；1 650 cm-1附近的吸收峰是C=O的伸縮振動(dòng)；1 035 cm-1是葡萄糖的特征吸收峰，說(shuō)明多糖含有葡萄糖，這與多糖的單糖組成結(jié)果相符合。FC、XG、FL、GZT、DZT、LXZ-1、LXZ-2和LXZ-3這8種純多糖均有上述區(qū)域的特征吸收峰。GZT、DZT在1 730 cm-1附近的吸收峰是羧基（COO-）的伸縮振動(dòng)特征峰。XG、FL、FC和GZT在1 153 cm-1附近的吸收峰是環(huán)上碳-氧（C-O）吸收峰。XG、FL、FC在865 cm-1附近的特征吸收峰，是由β-D-吡喃糖C-H的變角振動(dòng)所引起的，這說(shuō)明這3種多糖中均含有β-D-吡喃葡萄糖環(huán)，分子以β-糖苷鍵連接為主[19]。

2.2.6 三股螺旋結(jié)構(gòu)的測(cè)定

8種純化多糖與剛果紅形成的絡(luò)合物的最大吸收波長(zhǎng)隨NaOH溶液濃度的變化如圖6所示。

圖6 不同NaOH濃度時(shí)剛果紅試劑與8種純化多糖最大吸收波長(zhǎng)變化情況Fig.6 Changes in maximum absorption wavelength of mixture of Congo red and eight kinds of purified polysaccharides at different concentration of NaOH

由圖6可知，隨著NaOH濃度增大，LXZ-1與剛果紅形成的絡(luò)合物的最大吸收波長(zhǎng)沒(méi)有明顯變化。DZT、GZT、XG與剛果紅形成的絡(luò)合物均發(fā)生一定程度的紅移，當(dāng)NaOH濃度為0.3 mol/L時(shí)最大吸收波長(zhǎng)最大，隨濃度的繼續(xù)增加吸收呈現(xiàn)下降趨勢(shì)。而FL、FC、LXZ-2、LXZ-3隨NaOH濃度的增加吸收發(fā)生急劇下降，說(shuō)明DZT、GZT、LXZ-1、XG這4種純化多糖在水溶液中不具有三股螺旋結(jié)構(gòu)構(gòu)象，推測(cè)這些多糖中的糖苷鍵具有很高的柔順性，從而使得多糖分子整體不具剛性，導(dǎo)致它們不能形成螺旋結(jié)構(gòu)和多股螺旋鏈構(gòu)象，在水溶液中呈無(wú)規(guī)線(xiàn)團(tuán)鏈構(gòu)象。FC、LXZ-2、LXZ-3、FL這4種純化多糖具有三股螺旋結(jié)構(gòu)構(gòu)象，說(shuō)明其有很高的剛性，在水溶液里有較規(guī)則有序的構(gòu)象。

2.2.7 多糖抗氧化能力的測(cè)定

8種多糖的DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率和還原能力測(cè)定結(jié)果見(jiàn)圖7。

圖7 8種多糖抗氧化能力測(cè)定Fig.7 Determination of the antioxidant capacity of eight kinds of purified polysaccharides

由圖 7（a）可知，當(dāng)樣品濃度為 5 mg/mL 時(shí)，F(xiàn)C、XG、FL、GZT、DZT、LXZ-1、LXZ-2 和 LXZ-3 多 糖對(duì)DPPH自由基清除率分別為42.66%、97.06%、23.10%、29.95%、46.54%、20.26%、31.63%、21.06%。由圖 7（b）可知，在多糖的濃度是 2.5 mg/mL 時(shí)，F(xiàn)C、XG、FL、GZT、DZT、LXZ-1、LXZ-2 和 LXZ-3 多糖對(duì) ABTS+自由基清除率分別為26.03%、99.53%、17.05%、49.59%、51.69%、16.43%、31.26%、35.18%；在 0.5 mg/mL～2.5 mg/mL范圍內(nèi)，隨著濃度的增加，XG對(duì)ABTS+自由基的清除率逐漸增強(qiáng)，且其對(duì)ABTS+自由基清除能力逐漸接近VC，其余7種多糖對(duì)ABTS+自由基的清除率明顯低于XG。由圖 7（c）可以看出，F(xiàn)C、XG、FL、GZT、DZT、LXZ-1、LXZ-2和LXZ-3多糖均具有一定的還原能力。相比VC來(lái)說(shuō)，8種純化多糖的還原力明顯低于同濃度VC的還原力。8種多糖中，香菇多糖對(duì)DPPH自由基清除率、ABTS+自由基清除率和還原能力明顯高于其他7種多糖。

2.3 多糖構(gòu)效關(guān)系分析

采用偏最小二乘回歸（partial least-squares regression，PLS）模型對(duì)8種純化多糖的理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)特征與多糖生物活性之間的構(gòu)效關(guān)系進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。其中分子量、特性黏度、多糖的單糖組成（葡萄糖、阿拉伯糖、核糖、鼠李糖、半乳糖、巖藻糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、木糖）為X矩陣，多糖對(duì)DPPH和ABTS+自由基的清除率和多糖的還原力為Y矩陣，結(jié)果如圖8所示。

圖8 發(fā)菜多糖抗氧化活性的PLS分析Fig.8 PLS of antioxidant activity of polysaccharides

多糖構(gòu)效關(guān)系的PLS模型擬合性與預(yù)測(cè)性較好（R2Xcum=0.935，R2Ycum=0.852，Q2cum=0.842）。圖 8（a）為8種多糖組分構(gòu)效關(guān)系的PLS得分圖，第一主成分的累計(jì)貢獻(xiàn)率在95%以上。圖8（b）為8種多糖組分構(gòu)效關(guān)系的PLS載荷圖，從載荷圖可以看出，葡萄糖醛酸這個(gè)點(diǎn)距離原點(diǎn)最遠(yuǎn)，結(jié)果表明對(duì)多糖抗氧化活性貢獻(xiàn)最大的單糖為葡萄糖醛酸。圖8（c）為PLS模型下的VIP分析。通過(guò)VIP結(jié)果分析可以看出，VIP＞0.5的變量由大到小依次為葡萄糖醛酸、半乳糖、葡萄糖和分子量。說(shuō)明對(duì)多糖體外抗氧化生物活性影響較大的結(jié)構(gòu)特征為：?jiǎn)翁墙M成（葡萄糖醛酸、半乳糖和葡萄糖）和分子量。已有研究報(bào)道，分子量高的多糖，生物活性往往較高[20]。酸性多糖中糖醛酸含量與抗氧化活性呈正相關(guān)，糖醛酸含量越高，抗氧化活性越強(qiáng)[21]，這與本試驗(yàn)結(jié)果相吻合。

3 結(jié)論

本研究通過(guò)對(duì)發(fā)菜、地木耳、葛仙米、螺旋藻、香菇和茯苓進(jìn)行多糖的提取和分離純化，得到8種純化多糖。通過(guò)測(cè)定其特性黏度和分子量，結(jié)果表明，多糖溶液的特性黏度與分子量大小有關(guān)。采用GC-MS對(duì)8種純化多糖的單糖組成進(jìn)行了分析，結(jié)果表明，8種多糖都含有半乳糖和葡萄糖。由紅外光譜分析可知，香菇多糖、茯苓多糖、發(fā)菜多糖分子以β-糖苷鍵連接為主。剛果紅試驗(yàn)結(jié)果顯示，地木耳多糖、葛仙米多糖、螺旋藻-1多糖、香菇多糖這4種純化多糖在水溶液中不具有三股螺旋結(jié)構(gòu)構(gòu)象，發(fā)菜多糖、螺旋藻-2多糖、螺旋藻-3多糖、茯苓多糖這4種純化多糖具有三股螺旋結(jié)構(gòu)構(gòu)象。體外抗氧化能力結(jié)果表明，在試驗(yàn)濃度范圍內(nèi)，發(fā)菜多糖、香菇多糖、茯苓多糖、葛仙米多糖、地木耳多糖、螺旋藻多糖-1、螺旋藻多糖-2、螺旋藻多糖-3對(duì)DPPH自由基的清除率最高分別可達(dá)到42.66%、97.06%、48.27%、29.95%、46.54%、21.43%、31.63%和52.75%，對(duì)ABTS+自由基清除率最高分別為26.03%、99.53%、17.05%、49.59%、51.69%、16.43%、31.26%、35.18%。其中香菇多糖對(duì)DPPH自由基的清除作用、ABTS+自由基的清除能力和還原能力最強(qiáng)。PLS模型對(duì)8種純化多糖的理化性質(zhì)、結(jié)構(gòu)特征與多糖生物活性之間的構(gòu)效關(guān)系進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，結(jié)果表明，單糖組成（葡萄糖醛酸、半乳糖和葡萄糖）和分子量對(duì)多糖體外抗氧化生物活性影響較大。本研究為藻類(lèi)多糖和真菌多糖的具體結(jié)構(gòu)和抗氧化活性的進(jìn)一步研究和開(kāi)發(fā)利用提供參考依據(jù)。